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大岩桐组培育苗试验



全 文 :第 40 卷第 5 期 吉 林 林 业 科 技 Vol. 40 No. 5
2011 年 9 月 JOURNAL OF JILIN FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY Sep,2011
文章编号:1005 - 7129(2011)05 - 0011 - 03 中图分类号:S682. 1 文献标识码:A
大岩桐组培育苗试验
胡啸妍
(吉林市林业科学研究院,吉林 吉林 132013)
摘要:以大岩桐幼嫩叶片、老叶、带腋芽的茎段为外植体,进行试管诱导,并进行继代、生根、移栽试验。
结果表明:大岩桐诱导外植体以带腋芽的茎段效果最好;适宜的启动培养基、增殖培养基和生根培养基
分别为 MS + 6 - BA 1. 0 mg·L -1 + NAA 0. 2 mg·L -1、MS + 6 - BA 0. 5 mg·L -1 + NAA 0. 1 mg·L -1和
1 /2MS + NAA0. 5 mg·L -1;用珍珠岩做移栽基质,炼苗成活率可达 85%。
关键词:大岩桐;组织培养
The experiment on tissue culture seedling of Sinningia speciosa
HU Xiao - yan
(Forestry Science Institute of Jilin City,Jilin 132013,China)
Abstract:The test - tube induction,subculture,rooting and explants transplantation were conducted on ex-
plants of Sinningia speciosa including young leaves,adult leaves and stems with axillary bud. The results
showed that the stem with axillary bud was the best explant for tissue culture of S. speciosa. The suitable initial
medium,multiplication medium and root medium were MS + 6 - BA 1. 0 mg·L -1 + NAA 0. 2 mg·L -1,MS
+ 6 - BA 0. 5 mg·L -1 + NAA 0. 1 mg·L -1 and 1 /2MS + NAA0. 5 mg·L -1 in this experiment。The survival
rate of transplanting seedlings reached to 85% with perlite as transplanting medium.
Key words:Sinningia speciosa;tissue culture
收稿日期:2011 - 06 - 29
作者简介:胡啸妍(1979 -) ,女,吉林市人,工程师,主
要从事林木育种工作.
大岩桐(Sinningia speciosa Benth.) ,又名落
雪泥,苦苣苔科苦苣苔属,株高 12 ~ 25 cm,多
年生宿根草本,原产于南美巴西等国。叶茂翠
绿,叶片肉质而大,密生绒毛。花冠阔钟形,5
裂,花大而艳美,花瓣有丝绒质感,亦有重瓣品
种。花色丰富,花期持久,是良好的室内盆栽花
卉。大岩桐具有较高的观赏价值,可用来装饰
窗台、几案等。
大岩桐可以进行播种、扦插、分球繁殖。大
岩桐种子极小,约 2. 8 万粒·g -1,播种对土壤
要求高,播种产生的后代易发生性状分离;扦插
繁殖系数低,不能满足大批量生产的要求;分球
繁殖有株形不整齐的缺点。
要保持大岩桐优良性状、植株整齐一致,采
用组织培养快速繁殖技术是最有效的繁殖途
径。为此,作者对大岩桐进行了组织培养试验。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
选择市售红色重瓣盆栽大岩桐,分别取幼
嫩叶片、老叶和带腋芽的茎段为外植体。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 试验材料灭菌
切取盆栽大岩桐的幼嫩叶片(带叶柄切
—11—
DOI:10.16115/j.cnki.issn.1005-7129.2011.05.009
下)、老叶片和带腋芽的茎段,用 100 倍液的洗
衣粉溶液浸泡 20 min,用牙刷刷洗表面,在自来
水下冲洗 20 min,再用纯净水冲洗 3 遍,放入超
净工作台备用。将洗净的外植体先用 75%酒
精浸泡 20 s,立即倒出酒精,用无菌水冲洗 1
遍,再用 0. 1%的 HgCl2 消毒 3 ~ 5 min,并轻轻
摇动。取出后,用无菌水冲洗 5 ~ 6 遍,每次 1
~ 2 min,最后用无菌滤纸吸干表面水分。
1. 2. 2 培养基选择
诱导培养基选择 MS培养基,激素添加 6 -
BA0. 7 mg·L -1、NAA0. 1 mg·L -1;继代培养
基选择 MS培养基,激素添加 6 - BA 和 NAA ,
试验采用 7 个质量浓度,具体见表 1;生根培养
基选择 1 /2MS 培养基,激素只添加 NAA,试验
采用 3 个质量浓度,分别为 0. 2 mg· L -1、
0. 5 mg·L -1、0. 71 mg ·L -1。培养基均添加
7. 5 g ·L -1琼脂、20g· L -1蔗糖,pH5. 8。继代
培养基成分见表 1。
表 1 继代培养基成分
培养基
激素 /mg·L -1
6 - BA NAA
MS
0. 1 0. 1
0. 3 0. 1
0. 5 0. 1
0. 7 0. 1
1. 0 0. 1
1. 5 0. 1
2. 0 0. 1
1. 2. 3 试验材料的接种
在超净工作台上,将大岩桐幼嫩叶片和老
叶片在培养皿中切成 0. 5 cm × 0. 5 cm 的方形
小块,叶面朝上接于诱导培养基上;将带腋芽的
茎段切成 1. 0 ~ 1. 5 cm 的小段,斜插接于诱导
培养基上,进行培养。
1. 2. 4 培养条件
培养温度 22℃ ~ 25℃,光照强度 1 500 ~
2 000 Lx,光照时间为 10 h·d -1。
2 结果与分析
2. 1 诱导分化培养
试验表明,大岩桐可以通过叶片和带腋芽
的茎段诱导产生不定芽。其中叶片接种 7 d 后
开始膨大,15 d后叶片弯曲,继续膨大并增厚,
30 d后切口处有颗粒状愈伤组织出现,转瓶继
续培养可在愈伤组织表面产生大量芽眼,不断
伸长形成不定芽,见图 1。
图 1 幼嫩叶片诱导
带腋牙的茎段接种 8 ~ 10 d 后,腋芽开始
萌发,随着时间的延长,从腋芽基部诱导出不定
芽。带腋牙的茎段诱导不定芽与叶片诱导不定
芽相比较,产生的芽体虽少,但成芽时间短。综
合比较两种诱导途径,以腋芽诱导不定芽方式
简单易行、效果好。
不同外植体诱导不定芽统计结果见表 2。
表 2 不同外植体不定芽发生率
外植体 不定芽发生率 /%
幼嫩叶片 70
老叶片 10
带腋芽的茎段 90
2. 2 不定芽增殖培养
将诱导培养出的大岩桐不定芽单个剪下,
再剪成 1 cm 左右茎段后接种到继代增殖培养
基中培养,30 d后的继代结果见表 3。
图 2 大岩桐继代培养
—21—
表 3 不同激素质量能度对大岩桐不定芽增殖的影响
培养基
激素 /mg·L -1
6 - BA NAA
平均增殖系数 生长状况
MS 0. 1 0. 1 1. 6 增殖少,粗壮
MS 0. 3 0. 1 2. 8 增殖较少,粗壮
MS 0. 5 0. 1 4. 0 增殖中等,绿,芽粗壮
MS 0. 7 0. 1 4. 1 增殖多,颜色变浅,芽变弱
MS 1. 0 0. 1 4. 3 颜色浅绿,开始出现玻璃化
MS 1. 5 0. 1 4. 8 矮小瘦弱,颜色黄绿,30%玻璃化
MS 2. 0 0. 1 5. 2 矮小,玻璃化严重
表 4 不同激素质量浓度对大岩桐生根的影响
培养基 NAA/ mg·L -1 平均每株生根数 /条 平均根长 /cm 生长情况
1 /2MS 0. 2 3. 5 2. 35 根较细长
1 /2MS 0. 5 4. 8 2. 55 较粗壮
1 /2MS 0. 7 3. 0 2. 25 基部愈伤化
从表 3 可以看出,在大岩桐的继代培养中,
随着 6 - BA 质量浓度的增加大岩桐不定芽增
殖率有所提高,但长势不一,有玻璃化现象出
现。6 - BA质量浓度较低时,增殖系数虽较低,
但小苗粗壮。从整体效果来看,MS + 6 - BA
0. 5 mg·L -1 + NAA 0. 1 mg·L -1为继代培养
的适宜培养基,增殖系数为 4. 0,培养效果见图
2。
图 3 大岩桐炼苗
2. 3 生根培养
将高 1. 5 cm以上、带 4 ~ 6 片叶的小苗切
下接种在生根培养基上,8 d 后有根生成,15 d
后生成白色小根 4 ~ 5 条,20 d 后根长至 2. 0 ~
3. 5 cm,且有球根出现。不同质量浓度 NAA对
生根的影响见表 4。
由表 4 可以看出,1 /2MS + NAA0. 5 mg·
L -1培养基上生根数量最多,根相对较长,且根
系粗壮。说明 1 /2MS + NAA0. 5 mg·L -1是大
岩桐生根培养的适宜培养基。
图 4 大岩桐成品苗
2. 4 炼苗移栽
将根长 2 ~ 3 cm 的大岩桐组培苗移到温
室,温度控制在 20℃左右,用遮阳网覆盖,炼苗
3 d后打开瓶盖,用小喷壶向瓶内喷雾保持瓶
内湿度,晚间整体覆塑料薄膜保温,继续炼苗 3
d后移栽。移栽时将大岩桐组培苗小心从瓶中
取出,用 20℃左右的清水洗净根上粘着的培养
基,将幼苗移栽到用 0. 5%的高锰酸钾灭过菌
的珍珠岩育苗盘中。用小喷壶浇透水,在育苗
盘上用塑料薄膜搭拱棚保温保湿,日照强时在
拱棚上覆遮阳网。5 d 后逐渐增加光照,通风
透气,每两周结合杀菌剂进行(下转第 45 页)
—31—
距挖穴,穴的规格根据苗根系大小和施肥要求
确定,一般穴径 50 cm、深 50 cm。挖穴时注意
表土、芯土要分开放置,结合整地可以在穴底施
入 3 ~ 5 kg 基肥,基肥应以经过充分腐熟的有
机肥为主。
4. 3 苗木选择
选择生长健康、根系发达、芽饱满、无病虫
害、无机械损伤的 1 ~ 2 a 生山杏苗。注意保
湿,严禁失水。
4. 4 栽植技术
山杏经济林造林密度要根据培育目的和立
地条件合理确定,一般株行距为 2 m × 3 m 或
2 m ×2 m。通常耕地采用密植,特殊地段具有
水土保持、防风固沙兼经济用途的林分,造林密
度不宜过密,一般株行距为 3 m ×4 m或 4 m ×
4 m。
造林时按设计的株行距挖好穴,用表土埋
根,提苗踩实,使根系舒展,埋土与地表相平,浇
水,水渗后覆一层土。造林时要确保苗木根系
舒展,切忌窝根。中部干旱地区可采用截干造
林,造林成活率 90%以上。
4. 5 抚育管理
在适宜密度的基础上应加强土壤管理和树
体管理,采用封育管护、扩穴松土、整形修剪、施
肥灌水、增施化肥、防治病虫害等综合措施。
4. 5. 1 土壤管理
定植后穴面铲抚每年 2 ~ 3 次;扩穴松土每
2 年 1 次,深度 10 ~ 15 cm,回填表土;全面割草
每年 1 ~ 2 次,也可用除草剂除草。
4. 5. 2 树体管理
整形修剪在每年的 3 月末以前进行,采取
疏枝、轻短截等措施剪除病残枝,改善树体的通
风、透光状况,保证结果枝组营养供应;夏季采
取除萌、重短截的办法除去竞争枝;对新梢进行
摘心,促进花芽分化,培养结果枝组。
4. 5. 3 施肥灌水
根据土壤分析、叶面分析结果和树体发育
阶段的不同,确定施肥种类、数量和时间。有条
件的地方,施肥应结合灌水进行。一般在开花
前喷施叶面肥可以促进花粉的萌发,在果实膨
大期喷施叶面肥可提高座果率;追肥在 4 月上
旬,追肥以复合肥或氮肥为主,结实期施肥以硝
态氮为主,在花芽分化期、幼果发育旺盛期和籽
粒饱满期进行施肥,施肥后用土盖严。当土壤
持水量低于最大持水量的 65%时进行灌水,花
芽分化期不灌溉,花孕育之前和种子发育期需
更多水分时,应保证有足够的水分供应。采用
滴灌式灌水,灌水量以浸润范围稍大于根系范
围为宜。
4. 5. 4 病虫害防治
山杏主要病虫害有杏星毛虫和球坚介壳
虫。对于杏星毛虫可在早春和夏季新幼虫孵化
期间,用森得保溶液喷雾;花谢后,摘除包叶消
灭幼虫。对于球坚介壳虫,在成虫形成介壳之
前使用 4%氧化乐果注干防治;结合修枝,剪去
有虫树枝烧毁
檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸檸

(上接第 13 页)一次叶面追肥,以 N 肥和 K 肥
为主。
育苗盘内培养 20 d后,80%的大岩桐组培
苗开始有高生长。当叶片长至 8 ~ 10 枚时便移
栽到小营养钵中继续培养。经统计,炼苗成活
率达 85%。育苗盘内培养见图 3,营养钵培养
见图 4。
3 小结
3. 1 用大岩桐幼嫩叶片、老叶、带腋芽的茎段为
外植体,进行诱导试验,综合试验结果,确定以
带腋芽的茎段诱导不定芽效果最好。
3. 2 对诱导出的不定芽进行继代、生根培养,综
合试验结果,确定适宜的继代培养基为 MS + 6
- BA 0. 5 mg·L -1 + NAA 0. 1 mg·L -1,增殖
系数为 4. 0,适宜的生根培养基为 1 /2MS +
NAA0. 5 mg·L -1。
3. 3 对组培苗进行炼苗移栽,用珍珠岩做移栽
基质,控制好温湿度,炼苗成活率可达 85%。
参考文献
[1]谭文澄,戴策刚. 观赏植物组织培养技术[M]. 北
京:中国林业出版社,1997.
[2]王海洪.大岩桐组织培养及其练苗移栽技术[J].北
方园艺,2008,(4) :232 - 233.
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