全 文 ：术 5( 2 ):2 2 一24 , 19 9 5
n o lo g y
大岩桐叶片培养再生植株的研究
刘本叶 张艳萍 张喜春 吴绛云 张丽梅 张建光
(东北农业大学生物工畏系 ,哈尔滨 )
以 大岩柄 ( S i n n i , 舒 a s P e c i o as eB n t h . e t H o o k )叶片为试材 ,接种于 M S 附加不
同激素组合的培养基上 ,成功地经愈伤组织 至球状体至 不定 芽途径形 成大童再生植
株并移栽成活 . 在各种细胞分裂素中 , 6一节基漂吟 ( B A )的 效果优于激动素 ( K T ) . 生
长素茶 C 酸 ( N A A )与 B A 及 K T 配合使用时愈伤组织诱导 、 球状体分化及 不定芽增
毯均有明显的增效作用 . 其泛适宜 的培养基组成为 : M S + B A : . 。、 / L , N A A o . : 、 I L 。 在
这个培养基上 , 愈伤组织诱导率为 94 % ,球状体分化率为 18 8 % , 不定 芽在四周内增
位 5 倍 。 最适宜的生根培养基为 : M S十 N A A o . 5叼 L , 生根率在 90 % 以上 , 试管苗移栽
成活率在 80 % 以上 .
关键词 : 大宕栩 ;愈伤组织 ; 球状体 ; 不定茅
大岩桐 ( 5 1 , , i , g i a s P e c i o as eB n t h . 。 t
H。 。 k )原产南美 巴西 , 是多年生草本球根花
卉 . 是一种观赏价值很高的夏季室内盆栽花
卉 lj[ . 常规的分球 、 扦播繁殖速度慢 ,繁殖率
低 ,满足不了生产需要 .播种繁殖不能保持种
性 . 因此用组织培养方法快速繁殖大岩桐优
良单株具有重大的实际意义 。
材料与方法
以哈尔滨市花圃一年生大岩桐为试材 ,
取植株中 上部 叶 片 、 常规 消毒后 剪成 s x
s m m 小块 ,接种于加不同激素组合的 M S 固
体 培 养 基 上 . 培 养 基 的 激 素 组 合 为 :
1
.
B A :
.吻儿 ; 2 . B A : . 。 uI 州 L 十 N A A .O 2叼 L ;
3
.
K T ` 、 叭 ; 4 . K T : . 。、 z L + N A A o . : 、 z L ; 5· CK 。
生根培养基为 : M S 十 N A A , 。。 以 L . 培养材料
每天光照 12 小时 ,光强 15 0 lu x . 培养室温
度 2 5士 1 ,C 。
生根苗经 3天锻炼后栽入不同基质中 ,
栽后 一 周 内罩塑 料布保湿 , 15 天后 统计成
活率 。
结果与讨论
一 、 愈伤组织诱导和球状体形成
接种于 1一 4 各组培养基上的叶片 ,培养
约一周切 口处开始膨大 ,二周后 出现淡绿色
领粒状愈伤组织 . 随着愈伤组织的生长 ,在其
表面陆续分化 出一些半透 明的球状体 (图版
1 )
。 在生长过程中 ,球状体表面不断变化 ,最
初顶端 凹 陷 , 随后凹 陷的边缘变成肥厚的鳞
片状结构 , 中间再次分化 出新的鳞片原基 。 在
不含植物激素的对照组中 ,外植体不能形成
愈伤组织 。
表 1 激素对愈伤组织诱导 、球状体分化
及不定芽增殖的影响
培养荃外植 愈伤组织 球状体 每外植 不定芽
体致 口奋 节少 ` 阮在四周内
增殖倍致块数瘫 (% )个数频率 (% ) 「1平 , 尸声弓个数
1 5 0 14 28 1 1 2 2 0
。
8 1
。
5
2 5 0 47 94 94 1 8 8 2
。
0 5
3 5 0 l 1 22 7 1 4 0
。
6 0
。
5
4 5 0 4 2 8 4 5 0 1 0 0 l
。
2 l
。
l
5 5 O 0 0 O O 0
由表 1 可以看出 , 植物激素对大岩桐叶
片愈伤组织诱导率和球状体分化率均有显著
DOI : 10. 16519 /j . cnki . 1004 -311x . 1995. 02. 007
刘本叶等: 大岩桐叶 片培养再生植株的研究
圈版 大岩桐叶片培养再生植株
1
.球状体2 .不定芽 3.不定芽增殖 4 .生根试管苗5 、6 .栽到花盆中的小植株
影响 .在细胞分裂素中 , BA 优于 K T . 单独使
用细胞分裂素效果不好 ,生长素 N A A 与 B A
和 K T 配合使用明显地促进愈伤组织形成和
球状体分体 , 其 中以 B A t . 。十 N A A o . : 组 合为
最佳 , 愈伤组织诱导率达 94 % ,球状体分化
率达 18 8 % 。
二 、 不定芽分化与增殖
外植体培养四周左右 ,在球状体肥厚的
鳞片中间伸出肥厚的叶片尖端 ,继之发育成
绿色新叶 。随着叶片伸长 ,基部肥大的鳞片逐
渐变成膜质的鳞片 , 使小苗成为普通芽萌发
的状态 (图版 2) . 各培养基中的不定芽在生
长的同时 , 由基部可分化出多个新的不定芽
(图版 3 ) , 其中 2 号培养基中的不定芽在四
周内可增殖 5倍 。 这样高的增殖率完全可以
进行快速繁殖 。
生 物 技 术 5卷 2期
表 1中的结果表 明 , 植物激素对不定芽
的增殖也有 明显影 响 ,在细胞分裂素中 . B A
最有效 。 N A A 与 BA 配合使用效果最佳 ,增
殖率为 5倍 。
关于球状体的发生在球基及鳞基类植物
中是一种普遍现象 ,在大蒜 、 芦荟 、 百合等植
物中均有报导 .tz ’ · ` · 5〕 。 大岩桐是球根植物 ,其
叶片培养也产生了球状体 。对球状体的看法 ,
H a v r a n e k 等 ( 1 9 7 3 )认为 ,这种球状体是具有
分生能力 、 有结构的组织 , 但它们不能产生任
河茎或根的原基 , 最后停止发育 6[] 。 近几年
来 ,在大蒜 、 芦荟 、 置草上的结果已证明 , 由这
些培养物所产 生的球状体 , 不但可以产生根
或芽 , 而且可以进一步形成完整植株 。本试验
结果表明 , 由球状体可发育出不定芽进而再
生出完整植株 。
三 、 幼苗生根培养
劝苗长至 Zc m 左右高时 ,转入生根培养
基 中 , 二 周长出幼根 , 3 ~ 4 周长 出 3 ~ 7 条
比m 左右长的粗状的浅黄色根 (图版 生 ) ,平
均生根率在 90 %以上 。
生长素 N A A 对幼苗生根最有效 ,最适
浓度为 0 . SP pm . 有细胞分裂素存在时 ,幼苗
不能生根 . 在生根培养基中未生根的苗中 ,有
5 0 %的 苗本身弱 小 , 24 %基部带有丛生苗 ,
10 %基部有机械损伤 。 由此可见 ,无根苗自身
的状况对生根也有 明显影响 。
四 、植株移栽
试管苗根长至 I c m 时 ,开瓶炼苗 3 天后
栽入花盆中 (图版 5 、 6 ) 。 移栽成活率在 80 %
以上 。
培养土组成对移栽效果有很大影响 。 纯
沙栽培成活率可达 80 % ,纯土栽培成活率仅
60 %
,这两种基质栽培成活的植株瘦弱 ,生长
速度慢 ,用等量的沙 、 草炭土和马粪组成的培
养土栽培 , 幼苗移栽成活率可达 85 % , 且植
株生长快 ,健壮 .
移栽后浇水方式对移栽成活率亦有明显
影响 , 若从苗上方浇水 , 弄湿叶片 , 会使叶片
枯萎直至 整株死亡 , 成活 率下 降 至 50 %左
右 . 移栽后将花盆放在水池中 ,使水由花盆底
孔渗入土中 , 便可以解决这一问题 , 使移栽成
活率提高到 80 %以上 。
参考文献
卢聪 : 室内盆栽花卉 , 107 一 109 ,金盾出版社 , 1 9 , 1
周云罗娜 ,植物学报 , 2 2 : 4 0 2一 40 3 , 19 8 0
佳粗林等 :植物学报 , 30 : 3 38一 34 0 . 19 8 8
佳粗林等 : 植物学报 , 32 : 6 0 6一 6 10 一 9 , o
祖橄等 : 经济植物组织培养与快速萦殖 , 21 9一 23 5 ,农
业出版社 , 1 9 8 5
Ha , ar n e k P
. 已 t a l : 2
.
p f l a~
n p h” 一0 1 , 68 : 3 0 8一
3 1 8
,
19 7 3
(下转第 37 页 )
一IJó ..,J,l lJ1工口`几J4、t!
.堵尸1tesJ户卜ó产IJ
胡永红等 :工, 6一二磷酸果糖产生菌的筛选及最佳培养条件的研究 37
参考文献
性存柔 : 徽 生物学 实脸 , 42 , 北京大学出版社 , 北京 ,
19 8 5
氏 r . m e v e r H U , M e t h od e n d er En 名 , m a r i cs h e n A n a l -
” e , V e ir a g C h . i e , W石 n比m Be r g s er . 1 2 83 . 19 7 0
〔3 ] L e iBOj a M . L i n kO M . P re p . 口加n a耐 p u行 if ca it on of
fru e t . e 一 l , 6一 d iP h.o P hat e . A ct a C h e m cS a n山 n a v i -
e a , 28 ( 5 )
:
5 5 5
,
19 7 4
,Jf
.`J,三n`尸L一二」
S e r e e n i n g S t r a i n s P r o d u e in g F D P
a n d S e l e e t i n g O P t im a l I n e u b a t i o n C o n d i t i o n s
H u Y o n g h o n g Y i n H a n扛e W a n H o n g g u i
H e Y o n g x i a n g O u y a n g P i n g k a i
(万口州二 众 : t “ 二“ of 以。 cat i 丁“ h 二南盯 , eD 户a材~ t of B iot “ h ,咖 。口 a 二 d B应配 ” 户二 。翻 , g , N 口幻泣口二 g )
F D P h a s b e e n e x t e n s iv e l y u s e d in t r e a t i n g e a r d i o v a s e u l a r d i e a s e
.
In t h i s p a p e r 份 e
s e r e e n e d F D P P r o d u e t i n g s t r a i n s a n d w e a l s o s t u d i e d t h e o P t im a l i n e u b a t i o n e o n d i t io n s
.
A
-
巴 o n y t h e s t r a 一n s t e s t e d , t h e b e s t o n e V犷 a s s t r a i n H Y Z w h o s e e n z y tn e a e r i v i t y 钾 a s a b o u t
1 6 0m g F D P / 9 w e r e e l l s
.
T h e o p r im a l in e u b a t i o n e o n d i t i o n s , e r e 巴 a l t e x汀 a e t m e d i u m 12
B r i x
,
pH 6
.
0~ 6
.
5
, c u l t u r a l t d e m P e r a r u r e 28 ,C a n d th e y i e ld o f s t r a i n : 。 5 b o u t 7% .
K e y W o r d s
:
Y e a s r F D P ; S t r a i n s ; S e l e e t i o n ; In e u b a t i o n e o n d i t io n
(上接第 23 页 )
S t u d i e s o n P l a n t l e t R e g e n e r a t i o n o f S i n n i n g i a
s P e c i o s a B e n t h
.
e t H o o k T h r o u g h L e a f C u l t u r e
L i u B e n y e Zh a n g Y a n p i n g Zh a n g X i e h u n
W
u Ji a n g y u n Zh a n g L im e i Zh a n g Ji a n g u o n g
(决加枷。 ` of iB嘟加南 gy , 刀分动 . “ A g 八 c心~ 才U耐~ 勺 , 月口州阮如)
L e a v e s o f S i n n i n g i a s eP e ioas B
e n t h
.
e r H o o k w e r e i n o e u l a t e d o n M S
s o l id m e d i a s u p p l i e d
倾 t h d i f f e r e n t e o m b i n a t i o n s o f p h y t o h o r m o n e , a n d a l a r g e a m o u n t o f p la n t l e t s w e r e r e g e n e r -
a t e d v i a
.
e a l lu s t o g lo b o id s t o a d v e n t i t io u s b u d a n d w e r e s u e e e s s f u l l y t r a n s p l a n t e d t o 5 0 11
.
T h e e f fe
e t s o f B A w a s s u P e r i o r t o t h a t o f K T a m o n g e y t o k i n i n s
.
C u ll u s i n d u e t io n
,
g l o b o id s
d i f e r e n t i a t io n a n d a d v e n t i t i o u s b u d m u l t iP li e a t i o n w e r e o b v io u s ly P r o m o t e d b y t h e e o m b i n a
-
t i o n o f B A
o r K T w i t h N A A ; T h e be s t m e d i u m w a s
:
M S + B A 2
.
o p p m + N A A 0
.
Zp P m
,
O n
t h i s m e d i n m
, t h e e u l l u s i n d u e t i o n r a t e w a s 94 %
,
t h e g l o b o id d i f f e r e n t ia t i o n r a t e w a s 1 8 8%
,
ht e a dv e n t i t i o u s b u d m u l t iP li e a t io n r a t e w a s 5 t im e s a t f o u r w e e k i n t e r v a l
.
T h e b e s t r o o t i n g
单 e d iu m wa s : M S+ N A A 0
.
s p p m
.
T h e r o o t i n g r a t e w a s a b o v e 90 %
.
T h e r a t e o f a li v e t r a n s
-
P l a n t e d P l a n t l e t s , a s a ob v e 8 0%
.
K e y W o dr s
:
S`” 九 i” g`a s Pe C i o s a eB n t h . e t H o o k ; C a l l u s ; G lo b o id ; dA v e n t i t i o u s b u d