全 文 :厚荚相思组培育苗试验
张月娇
(福建省林业科技试验中心 ,福建 南靖 363600)
摘要:以引种的厚荚相思优树萌芽条为材料进行组织培养快速繁殖试验 ,结果表明:适合厚荚相思外殖体诱导的培养基为
改良 MS+BA0.3~ 0.5mg·L -1+KT0.1~ 0.5mg·L -1 , 适合继代增殖培养基为改良 MS+BA1.0~ 1.5mg·L-1+KT1.0 ~
1.5mg·L-1 ,生根培养基为改良 1/2MS+NAA0.5mg·L-1 , 试管苗的生根率达 95%以上。
关键词:厚荚相思;组织培养;培养基;快速繁殖
中图分类号:S792.99 文献标识码:A 文章编号:1002-7351(2003)04-0072-03
The Tissue Culture Seedling-raising Experiment of Acacia crassicapa
ZHANG Yue-jiao
(The Experiment Center of Forestry Science and Technique of Fujian Province , Nanjing 363600 , China)
Abstract:The results showed that the culture medium suitable fo r Acacia crassicapa explant induction was the improved MS+
BA0.3~ 0.5mg·L-1+KT0.1 ~ 0.5mg·L-1 , the one suitable for generation-continuing multiplica tion was the improved MS+
BA1.0 ~ 1.5mg·L-1+KT1.0 ~ 1.5mg·L-1 , the roo ting culture medium was the improved 1/ 2MS+NAA0.5mg·L-1 , the roo t-
ing ra te of tube plantlet reached 95% and more.
Key words:Acacia crassicapa;tissue culture;culture medium;rapid propagation
厚荚相思(Acacia crssicapa A.cunn.ex Benth.)系含羞草科常绿乔木 ,原产澳大利亚 ,喜阳树种 ,适生
于热带 、亚热带气候 ,土壤适应性强 ,在滨海风沙土上生长良好 ,能够耐地表 50℃高温 ,耐干旱 、耐雨季地
表积水。根系发达 ,具根瘤 ,有改良土壤的作用 ,萌生力强 ,砍伐后能萌蘖。在相思类树种中生长最快 ,极
耐瘠薄 ,是木麻黄二代更新的理想替代树种。目前因种子紧缺 ,常规无性繁殖又较为困难 ,极大地限制了
厚荚相思在营林生产实践中的推广和应用。笔者采用组织培养技术 ,探讨其苗木的快速扩大繁育技术获
得成功 ,现将试验结果总结如下。
1 试验材料
取自福建省林业科技试验中心基地引种的 5年生厚荚相思优良单株的基部萌芽条。
2 试验方法
2.1 无菌物的建立
将选好的厚荚相思萌芽条剪除叶片 ,用洗衣粉水轻刷枝条表面后 ,清水冲漂 2h ,用 75%酒精表面消毒
处理 30s ,无菌水冲洗 1遍 ,转入 1g·L-1的灭菌净溶液浸泡 10min ,再用无菌水冲洗 3遍 ,然后在超净台上
进行以下的操作:消毒用 0.1%的升汞溶液浸泡 3min ,用无菌水冲洗 5次以上 ,将消毒好的材料切成约
1cm 长带 1 ~ 2个腋芽的茎段或茎尖 ,接种于无激素培养基上。
2.2 培养条件
接种材料在 25±5℃的培养室中培养 ,每天光照 10h左右 ,光照强度约 2 000Lx(以下的培养条件与此
相同)。培养基 pH 值为 5.8 ,诱导和继代培养基中的蔗糖为 30g·L-1 ,生根培养基中的蔗糖为 20g·L-1 。
2.3 诱导培养基
以改良 MS为基本培养基(降低总含盐量 ,增加维生素类含量和种类),分别附加 6-BA0.1mg·L-1 、
收稿日期:2003-03-27
作者简介:张月娇(1975-), 女 ,福建南靖人 , 福建省林业科技试验中心助理工程师 ,从事植物组培工作。
第 30 卷 第 4 期
2 0 0 3年 1 2月
福 建 林 业 科 技
Jour of Fujian Forestry Sci and Tech
Vol.30 No.4
Dec., 2 0 0 3
DOI :10.13428/j.cnki.f jlk.2003.04.021
0.3mg·L-1 、0.5mg·L-13个浓度水平与 KT0.1mg·L-1 、0.3mg·L-1 、0.5mg·L-13个浓度水平的组合 ,用
L9(34)正交表安排试验 ,每一组合接种 14个无菌材料。
2.4 增殖培养基筛选
以改良 MS 为基本培养基 , 附加 6 -BA0.3
mg·L-1 、1.0mg·L-1 、1.5mg·L-13 个浓度水平与
KT0.3mg·L-1 、1.0mg·L-1 、1.5mg·L -13个浓度
水平正交 ,形成 9个组合 ,每一组合接种 5瓶 ,每瓶
接入 2个嫩芽。
2.5 生根培养基筛选
以1/2 改良 MS 为基本培养基附加 NAA0.3
mg·L-1、0.5mg·L -1 、1.0mg·L-13个浓度水平 ,进
行试验观察发根情况 。
3 结果与分析
3.1 不同生长调节剂浓度对外殖体诱导的影响
无菌材料接种 10d后基部开始膨大 , 15 ~ 20d
后腋芽萌发 ,调查结果详见表 1。显然 ,不同浓度
的 BA和 KT 组合对外殖体的诱导均有效果 ,其中
诱导启动率最高的是 BA0.3mg ·L -1 +KT0.1
mg·L-1;进一步对表中不同生长调节剂浓度对外
殖体诱导启动率的差异状况进行方差分析 ,结果见
表 2 ,从表中可以看出:BA浓度水平对外殖体的诱
导启动率有显著影响 , KT 的浓度水平对外殖体诱
导启动率影响并不显著 。因此 ,外殖体诱导中 BA
与 KT 浓度以 BA0.3 ~ 0.5mg·L-1 +KT0.1 ~
0.5mg·L-1为佳。
3.2 继代增殖培养
待萌发后的新芽长至 1 ~ 1.5cm 时 ,即可切取
新梢转入继代培养基 ,若发现已长有芽丛的 ,可将
芽丛一并切取转入继代培养基 ,进行增殖培养 。新
芽经继代培养 7 ~ 10d后 ,基部膨大有芽点出现 ,新
芽茎尖生长较快 ,腋芽也有小芽分化 。20d 后 ,调
查有效芽数 ,具体见表 3 。从表中可见 ,在继代增
殖各激素组合中 ,均可分化出有效芽 ,当 BA 浓度
为1.0 ~ 1.5mg·L-1时 ,增殖效果较佳 ,每个嫩芽
可增殖有效芽条达 3个以上 ,同时 ,还形成许多不
定芽 。
对不同浓度 BA 与 KT 浓度组合的继代增殖
效果进行方差分析 ,结果见表 4 ,表明不同 BA浓度
水平对有效芽的形成有显著影响 ,不同 KT 的浓度
水平对有效芽形成的影响并不显著 。
3.3 不定根的诱导培养
切取继代培养中形成的有效芽条转接到生根
表 1 不同 BA与 KT 组合对外殖体诱导的影响
试验号 浓度/ mg·L
-1
BA KT
接种数/个 启动数/个 启动率/ %
1 0.1 0.1 14 2 14.28
2 0.1 0.3 14 4 28.57
3 0.1 0.5 14 3 21.42
4 0.3 0.1 14 13 92.85
5 0.3 0.3 14 12 85.71
6 0.3 0.5 14 10 71.42
7 0.5 0.1 14 10 71.42
8 0.5 0.3 14 5 35.71
9 0.5 0.5 14 7 50.00
K 1 64.27 178.55 ∑471.38
K 2 249.98 149.99
K 3 157.13 142.84
表 2 外殖体诱导方差分析表
变因 DF SS MS F Fα
BA 2 5748.04 2874.02 15.37* F0.05(2 , 4)=6.94
KT 2 238 119 0.64 F0.01(2 , 4)=18.00
e 4 747.96 186.99
T 8 6734.36
表 3 不同 BA与 KT 浓度组合的增殖效果
试验号 激素浓度/ mg·L
-1
BA KT
接种芽
数/个 有效芽数/个 平均有效芽数/个
1 0.3 0.3 10 15 1.5
2 0.3 1.0 10 22 2.2
3 0.3 1.5 10 18 1.8
4 1.0 0.3 10 35 3.5
5 1.0 1.0 10 46 4.6
6 1.0 1.5 10 42 4.2
7 1.5 0.3 10 37 3.7
8 1.5 1.0 10 26 2.6
9 1.5 1.5 10 30 3.0
K 1 5.5 8.7 ∑27.1
K 2 12.3 9.4
K 3 9.3 9.0
表 4 继代增殖效果方差分析表
变因 DF SS MS F Fα
BA 2 7.74 3.87 11.06* F0.05(2 , 4)=6.94
KT 2 0.08 0.04 0.11 F0.01(2 , 4)=18.00
e 4 1.41 0.35
T 8 9.23
·73·第 4 期 张月娇:厚荚相思组培育苗试验
培养基上 ,其余不定芽转接继代培养。有效芽转接
5 ~ 7d 后基部膨大 , 10 ~ 12d 可见白色根尖长出 ,
20d后调查诱导生根 ,结果见表 5。从表中可见 ,1/
2改良 MS+NAA0.5mg·L-1有较好的生根效果 ,
生根率达 95%,平均每株可达 3条以上。
3.4 炼苗与移栽
表 5 不同生长调节剂浓度水平对根诱导的影响
培养基 浓度水平/ mg·L-1 接种数/个 平均根数/条 生根率/ %
1/2MS+NAA 0.3 50 1.6 76
0.5 50 3.5 95
1.0 50 2.3 86
将生根试管苗(根长约 1.0cm左右)在较强自然散射光条件下炼苗 10 ~ 15d ,把试管苗取出 ,并用自来
水将基部的培养基冲洗干净 ,放入 0.1 ~ 0.5g·L-1的高锰酸钾溶液中浸泡 1 ~ 3min ,然后用自来水冲洗干
净 ,移栽于经高锰酸钾溶液消毒的 60%黄心土+40%河沙的基质中 ,淋透水并盖上塑料薄膜保湿 。7d后
可逐渐打开塑料薄膜 ,同时注意遮荫 ,其移栽成活率可达 90%以上 ,当小苗长到 15cm以上即可出圃。
4 结果与讨论
1)厚荚相思是福建新引种树种 ,生长迅速 ,适应性广 ,根部具根瘤 ,有利于立地的改善 ,适宜在闽东南
沿海地区大力推广种植。利用组培技术快速繁殖厚荚相思新品种 ,是解决厚荚相思种苗紧缺的有效途径 ,
在营林生产实践中值得推广应用。
2)厚荚相思属豆科木本植物 ,其组培技术比一般草本植物困难 ,不易获得有效芽 ,所以在继代培养中 ,
必须注意激素水平的控制和配比。研究结果表明:厚荚相思茎段和茎尖诱导适宜培养基为改良 MS +
BA0.3 ~ 0.5mg·L-1+K T0.3 ~ 0.5mg·L-1;继代增殖培养基为改良 MS+BA1.0 ~ 1.5mg·L-1 +KT1.0
~ 1.5mg·L-1;生根培养基为 1/2改良 MS+NAA0.5mg·L-1 。
3)厚荚相思试管苗在移栽过程中必须注意光 、温度 、湿度的控制 ,同时 ,必须洗净附着于试管苗基部的
培养基 ,以确保移栽的成活率 。
参考文献:
[ 1] 周丽华 , 张华通.互叶白千层工厂化育苗技术[ J].广东林业科技 , 2001 , 17(1):16-19.
[ 2] 容世清 , 曾少玲.马占相思工厂化组培育苗技术的研究[ J].热带林业 , 1997 , 25(2):55-58.
[ 3] 潘瑞炽.植物组织培养[ M] .广州:广东高等教育出版社 , 1989.
[ 4] 洪伟.林业试验设计技术与方法[ M] .北京:北京科学技术出版社 , 1993.148-172.
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