全 文 ：大岩桐叶片离体再生培养研究
张艳萍 , 陈玉梁 , 张正英 , 厚毅清
(甘肃省农业科学院生物技术研究中心 , 甘肃 兰州　 730070)
　　摘要: 以大岩桐叶片为外植体进行组织培养的结果表明 ,叶片在适宜条件下可直接分化出幼苗 ,实验筛选出
适宜的分化培养基为 MS+ KT 1. 0 mg /L+ N AA 0. 1 mg / L,生根培养基为 M S+ IAA 0. 5 mg / L,移栽苗成活率达
75%以上。
　　关键词: 大岩桐 ; 组织培养 ; 研究
　　中图分类号: Q945　　文献标识码: A　　文章编号: 1001-1463( 2006) 09-0005-02
The Study on Leaves Reproduction of Sinningia Specios in vitro
ZHANG Yan-ping , CHEN Yu-liang , ZHANG Zheng-ying , HO U Yi-qin
( Center o f Bio technolog y , Gansu Academy o f Ag ricultural Sciences, Lanzhou Gansu 730070, China)
　　Abstract: The t ube propagation of Sinningia Specios was studied by using the leaves a s the explants. Th e results indi-
ca ted that the leaves could directly induce plantlet. The most appropria te media in culture stag es a re: M S+ KT 1. 0 mg / L+
N AA 0. 1 mg / L for replanting; M S+ IAA 0. 5 mg /L fo r r oo ting.　　Key words: Sinningia Specios; Tissue culture; Study
　　大岩桐 ( Sinningia speciasa )为苦苣苔属植物 ,
春末至秋初开花 ,原产于南美的巴西等国。大岩桐叶
茂翠绿 ,花朵姹紫嫣红 ,是著名的温室盆栽花卉。目
前生产上大岩桐采用播种、扦插、分割块茎等方法繁
殖 ,但不少园艺杂交品种结实率较低或种子后代会
发生变异 [1 ] ,为保持原有品种的优良性状 ,对大岩桐
进行了组织培养研究 ,以期通过试管繁殖克服以上
问题和获得其幼苗。近年来 ,对大岩桐的组培快繁已
收稿日期: 2006-06-23
基金项目: 甘肃省自然基金资助项目 ( ZS011-A25-039-N )
作者简介: 张艳萍 ( 1978-) ,女 , 甘肃武威人 ,研究实习员 ,主要从事生物育种工作。 联系电话: ( 0931) 7612683。
著 ,药后 9 d 3种硅源制剂之间的防效差异显著。
　　试验结果表明 , 3种硅源制剂对葡萄白粉病均
有明显的抑制作用 ,以硅酸钠防效最好。因此 ,在生
产上硅酸钠具有较好的应用前景。
3　讨论
Bow en等研究表明 [7 ] ,叶面喷施硅源制剂可减
轻葡萄白粉病发生程度。我们的试验结果也表明 3
种硅源制剂对葡萄白粉病具有明显的抑制作用 ,与
Bow en等的报道一致。
李华等报道 [10 ] ,用离体叶片接种法是一种快
速、简便鉴定材料的有效方法 ,我们的试验结果中离
体叶圆片法与盆栽法存在一定的差异 ,这与不同的
处理方法或不同硅形态对白粉菌的作用机理是否有
关 ,有待进一步研究。
参考文献:
[ 1 ]　 Germar , B. Some functions of silicic acid in cereals
with specia l reference to resistance to mildew ( in
German) [ J]. Z. Pflanzenemahr dung . Bodenk. 1934,
35: ( 3) 112～ 115.
[ 2]　 Menzies J G, D L Ehre t, A D M Glass et al. The in-
fluence o f silicon on cyto lo gica l inter action betw een
Spha ro theca fuliginea and cucumis sativus [ J]. Physi-
con. Mol. Plant Patho log y , 1991, 39( 5): 403～ 414.
[ 3]　梅丽艳 ,郭　梅 ,李志勇 .选择性植物营养制剂对玉米
茎基腐病影响的生物测定 [ J].黑龙江农业科学 , 2000,
( 5): 8～ 10.
[4 ]　 Seebold K W, T A Kucharek , L E Datnoff et al. The
influence o f silicon on components o f r esistance to
bla st in susceptible , par tially resistant cultiv a rs o f rice
[ J]. Phy topatho lo gy , 2001, 91( 1): 63～ 69.
[ 5 ]　冯东昕 ,李宝栋 .可溶性硅在植物抵御病害中的作用
[ J].植物病理学报 , 1998, 28( 4): 293～ 297.
[ 6]　 Bichard R R , P A Bow en, D L Ehert et al. So luble sil-
icon its ro le in cr op and disea se management of g reen-
house crops [ J]. Plant Diease, 1995, 79( 4): 329～ 336.
[ 7 ]　 Bow en P A , J G Menzies, D Eher t. So luble Silicon
Sprays Inhibit Powdery Mildew Development on
Grape Leaves [ J]. J. Am. Soc. Ho r tScience, 1992, 117
( 6): 906～ 912.
[ 8]　王跃进 ,贺普超 ,张剑侠 .葡萄抗白粉病鉴定方法的研
究 [ J].西北农业大学学报 , 1999, 27( 5): 6～ 10.
[ 9]　李　华 .欧亚种葡萄品种对霜霉病感病性的研究 [ J].
园艺学报 , 1988, 15( 1): 23～ 26.
[10]　张振文 ,李　华 . 欧亚种葡萄白粉病抗性鉴定方法研
究 [ J]. 四川农业大学学报 , 1996, 14( 3): 331～ 334.
(本文责编:程亚军 )
5甘肃农业科技　 2006年　第 9期　　　 Gansu Agr. Sci . and Techn.　No. 9　 2006
有相关文献报道 [1～ 6 ] ,而利用叶片的报道较少。本实
验利用大岩桐的叶片为外植体进行离体再生研究 ,
可为大岩桐工厂化育苗提供技术依据。
1　材料与方法
1. 1　材料处理
供试材料为王后大岩桐 ( S. regina ) ,由甘肃省
农业科学院花卉中心提供。实验于 2002- 2003年在
甘肃省农业科学院生物技术中心组培实验室进行。
以大岩桐的叶片作为外植体 ,在无菌条件下先用自
来水冲洗叶片表面 12 h,然后用 75%酒精棉球擦拭
表面 ,再用 0. 1%的升汞溶液消毒 5 min,最后用无
菌水冲洗 4～ 5次。把经消毒灭菌的外植体切成 0. 5
cm× 1. 0 cm的小块 ,以每培养皿 (直径 9 cm ) 10个
外植体的密度接种于分化培养基上 ,每处理重复 3
次 ,于 25(± 2)℃ ,暗处培养 2 d后 ,放于 200μmo l /
( m2· s)光强下进行光培养 ,光周期 16 h /8 h。
1. 2　实验方法
1. 2. 1　分化培养基的选择实验　实验以 M S无机
盐、 B5维生素、蔗糖 30. 0 g /L和琼脂 7. 0 g /L为基
本培养基 ,附加不同的激素配比 , p H 5. 8,在 121℃
下高压灭菌 15 min,分化培养基具体如下。 A: M S+
BA 2. 0 mg /L+ N AA 0. 5 mg /L; B: M S+ BA 2. 0
mg /L+ IAA 0. 5 mg /L; C: M S+ BA 1. 0 mg /L+
N A A 0. 5 mg /L; D: M S+ KT 1. 0 mg /L+ IAA 0. 5
mg /L; E: M S+ BA 1. 0 mg /L+ N AA 0. 1 mg /L; F:
M S+ KT 1. 0 mg /L+ N AA 0. 1 mg /L。
1. 2. 2　生根培养基的选择　将切下的长约 1～ 2
cm的丛生芽 ,接种到生根培养基中 ,生根培养基具
体如下。 a: M S+ N AA 0. 5 mg /L; b: M S+ IAA 0. 5
mg /L。
1. 2. 3　组培苗移栽　待芽苗的根系生长发达 ,茎叶
健壮 ,即可将培养瓶塞打开 ,在室温、自然光下炼苗
6～ 7 d,随后取出小苗 ,洗去根部培养基 ,移栽于等
量混合的蛭石、土中进行培养 ,适当遮荫 ,注意通风
保湿 ,温度保持在 25℃左右。
2　结果与分析
2. 1　不同分化培养基对大岩桐叶片不定芽的诱导
结果
6种激素组合的分化培养基诱导叶片分化和长
势的结果 (表 1)表明 ,以培养基 F: M S+ K T 1. 0
mg /L+ N AA 0. 1 mg /L分化率最高为 40%。 培养
基 E虽能使外植体分化出芽苗 ,但是分化率很低 ,
仅 7% 。培养基 A、 B、 C、 D均使外植体有不同程度的
褐化。
2. 2　不同生根培养基对大岩桐再生芽苗生根的影
响
实验结果 (表 2)表明 ,生根培养基 b中的芽苗
可生长出根 2～ 5条 ,再培养一段时间即可炼苗移
表 1　不同分化培养基对大岩桐叶片不定芽的诱导结果
培养基 外植体数
(个 )
再生外植体数
(个 )
芽再生率
(% )
A 30 褐化 0
B 30 褐化 0
C 30 褐化 0
D 30 褐化 0
E 30 2 7%
F 30 12 40%
表 2　激素对大岩桐再生芽苗生根的影响
培养
基
出根时间
( d)
每棵苗的根数
(条 ) 根的状态
a 10 20 无主根 ,气生根居多
b 8 2～ 5 根细而长 ,移栽成活率较高
栽。 生根培养基 a中的芽苗多在培养基表面形成许
多气生根 ,而无主根形成 ,不利于芽苗存活。
2. 3　组培苗移栽成活率
移栽的组培苗 15 d后 ,成活率达 83. 3% 。移入
温室栽培 ,大约 60～ 90 d后可以开花 ,最终成活率
达 75. 0%。
3　小结与讨论
3. 1　在实验设计的培养基配方中 ,初步确定适于大
岩桐叶片分化的培养基为 MS+ K T 1. 0 mg /L+
N AA 0. 1 mg /L,适于其生根的培养基为 MS+ IAA
0. 5 mg /L。本实验中外植体叶片是以直接方式不经
过愈伤组织阶段长出不定芽形成植株的。
3. 2　在组培过程中发现大岩桐有休眠现象 ,相同培
养基和培养条件的大岩桐不分化 ,但休眠期过后 ,开
始迅速分化增殖 ,这一现象也曾有文献报道 [7 ]。
3. 3　本实验中大岩桐叶片的分化率较低 ,提高其分
化率还有待进一步研究。
参考文献:
[ 1 ]　曹桂萍 ,王建美 .大岩桐的组织培养与快速繁殖研究
[ J].山东农业科学 , 2002, ( 5): 16～ 17.
[2 ]　王树耀 ,黄白红 .大岩桐的组培快繁技术研究 [ J].湖南
文理学院学报 , 2004, 16( 1): 43～ 44.
[ 3]　彭海凤 ,万开军 ,吕俊英 .大岩桐的组织培养 [ J].信阳
农业高等专科学校学报 , 2004, 14( 1): 29～ 30.
[ 4]　周　丽 .大岩桐快速繁殖的研究 [ J].黔西南民族师范
高等专科学校学报 , 2005, ( 3): 84～ 87.
[ 5]　李爱华 .大岩桐组培苗移栽技术研究初报 [ J].湖北林
业科技 , 2004, ( 2): 29～ 31.
[6 ]　唐伟斌 ,刘占牛 .大岩桐组织培养与快繁技术研究 [ J].
安徽农业科学 , 2005, 33( 8): 1418.
[ 7]　周根余 ,周卫华 ,程　磊 .大岩桐组培中休眠现象的初
步研究 (简报 ) [ J].上海农业学报 , 2000, 16( 2): 69～
72.
(本文责编:马丽荣 )
6 甘肃农业科技　 2006年　第 9期　　　Gansu Agr . Sci .and Techn.　No. 9　 2006