全 文 ：5)[ 17] 。
2.2.3　腺苷 高效液相色谱法:板蓝根甲醇提取液采用高效液
相色谱测定 , 色谱柱为 DiamonsilC18(5 μm, 250 mm×4.6 mm),
流动相为甲醇 -水(10∶90), 流速为 1.0 ml· min-1 , 检测波长
260nm, 柱温 45℃。腺苷在 0.188 ～ 0.940 μg范围内线性关系良
好 (r=0.999 8), 平 均加样回收率 为 96.45%, RSD=
3.05%(n=5)[ 18] 。
2.2.4　有机酸
毛细管电泳法:板蓝根水提液浓缩后经石油醚萃取 , 然后用
毛细管电泳法测定。含有 15mmol· L-1的 β -环糊精的硼砂缓
冲液(50mmol· L-1 , pH10.5)-甲醇(20∶5)作为电泳缓冲液分
离 , 以肉桂酸为内标 , 202 nm为测定波长 , 运行电压 20 kV, 柱温
25℃。邻氨基苯甲酸 、苯甲酸 、水杨酸与丁香酸在 10 min内完全
分离且呈良好的线性关系 , 平均回收率分别为 100.1%, 97.9%,
99.8%, 99.1%(n=6)[ 19] 。
电位滴定法:样品甲醇提取液采用反滴定法测定总有机酸含
量 , 重现性良好 , RSD为 1.001%,平均回收率为 96.08% [ 20] 。
3　结语
板蓝根化学成分复杂 ,在 《中国药典 》 2005年版 Ⅰ部项下尚
无含量测定方法。大多数文献记载 , 板蓝根主要有效成分为靛
蓝 、靛玉红 ,二者常作为板蓝根的质量控制指标。靛蓝 、靛玉红均
为脂溶性成分 , 作为板蓝根药材的质量控制指标较为理想 , 可采
用高效液相色谱法或薄层扫描法进行质量控制。 方法简便 , 准
确 , 重现性好 , 但我国传统用药板蓝根多以水煎方式入药 , 靛蓝 、
靛玉红在水为溶剂的提取工艺中溶出极少 ,二者能否作为板蓝根
制剂的质量控制指标有待进一步研究 ,建议采用高效液相色谱法
对精氨酸的含量进行测定 ,以更好地控制制剂质量。
参考文献:
[ 1] 　江苏新医学院.中药大辞典 , 上册 [ M] .上海:上海科技出版社 ,
1997:1250.
[ 2] 　罗巍伟 ,贺英菊 ,王　凌 ,等.HPLC测定板蓝根提取物中靛蓝和靛
玉红的含量 [ J].华西药学杂志 , 2004, 19(6):455.
[ 3 ] 　李彬 ,陈万生 ,郑水庆 ,等.四倍体板蓝根中的两个新生物碱 [ J].药
学学报 , 2000, 35(7):508.
[ 4 ] 　李　彬 ,陈万生 ,张汉明 ,等.四倍体板蓝根中的一个新生物碱 [ J] .
药学学报 , 2003, 38(6):430.
[ 5 ] 　刘云海 ,吴晓云 ,方建国 ,等.板蓝根化学成分研究(Ⅴ)[ J] .中南
药学 , 2003, 1(5):302.
[ 6 ] 　梁永红 , 侯新华 , 黎丹戎 , 等.板蓝根二酮 B体外抗癌活性研究
[ J] .中草药 , 2000, 31(7):531.
[ 7 ] 　徐　晗 ,方建国 ,王少兵 ,等.板蓝根化学成分研究 [ J] .中国药学杂
志 , 2003, 38(6):418.
[ 8 ] 　刘海利 ,吴立军 ,李　华 ,等.板蓝根的化学成分研究 [ J] .沈阳药科
大学学报 , 2002, 19(2):93.
[ 9 ] 　张永文 ,俞敏倩 ,陈玉武 ,等.板蓝根中的木脂素双葡萄糖苷 [ J].中
国中药杂志 , 2005, 30(5):395.
[ 10]　王福男 ,张荣林 ,吴立军.板蓝根中的一个新异香豆素 [ J] .沈阳药
科大学学报 , 2005, 22(3):187.
[ 11]　李　彬 ,陈万生 ,赵　阳 ,等.四倍体板蓝根中的苯丙素类成分 [ J] .
中草药 , 2005, 36(3):326.
[ 12]　方建国 ,王少兵 ,徐　晗 ,等.板蓝根化学成分研究(Ⅰ )[ J] .中草
药 , 2004, 35(8):845.
[ 13]　何　轶 ,鲁　静 ,林瑞超.板蓝根化学成分研究 [ J] .中草药 , 2003,
34(9):377.
[ 14]　国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005:142.
[ 15]　程力惠 ,余颐麟.板蓝根中靛玉红含量测定方法的研究 [ J] .亚热带
植物科学 , 2005, 34(3):43.
[ 16]　韩　光.板蓝根含片中靛玉红的含量测定 [ J] .中国药学杂志 ,
2001, 36(6):419.
[ 17]　赵宇新 ,李曼玲.高效液相色谱 -蒸发光散射检测法测定中药板蓝
根中的精氨酸的含量 [ J].中国实验方剂学杂志 , 2004, 10(1):8.
[ 18]　许润春 ,杨　明 ,苏艳桃.HPLC测定板蓝根中腺苷含量 [ J] .中成
药 , 2005, 27(6):742.
[ 19]　李　霞 ,卢宏波 ,刘爱芳 ,等.毛细管电泳法分离测定板蓝根中的活
性有机酸 [ J] .华西药学杂志 , 2004, 19(2):114.
[ 20]　金　薇 ,尤献民 ,张曦弘.电位滴定法测定复方板蓝根冲剂中总有
机酸的含量研究 [ J] .中医药学刊 , 2004, 22(3):574.
收稿日期:2005-10-31;　修订日期:2006-04-26
作者简介:宗永立(1976-),男(汉族),河南周口人,现任中南大学生物科学与技
术学院医师 ,硕士学位,主要从事细胞周期和细胞凋亡方面的研究工作.
＊通讯作者简介:刘艳平(1955-),女(汉族),湖南长沙人 ,现任中南大学生物科学
与技术学院教授,硕士学位 ,主要从事细胞周期与凋亡的研究工作.
白屈菜红碱诱导细胞凋亡的机理综述
宗永立 ,刘艳平＊
(中南大学生物科学与技术学院 ,湖南 长沙　410013)
摘要:笔者回顾了 10多年来白屈菜红碱诱导细胞凋亡的细胞和分子机理的研究 , 总结这些机制包括白屈菜红碱对
BclXL(Bcl-2家族的抗凋亡成员)和 PKC的复杂作用 ,促进 Cytc的释放和 ROS的产生以及对微管蛋白的抑制作用;同时
简要地介绍了相关的实验。
关键词:白屈菜红碱;　细胞凋亡
中图分类号:R979.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)10-2068-04
ReviewontheMechanismofApoptosisInducedbyChelerythrine
ZONGYong-li,LIUYan-ping＊
(ColegeofBiologicalScienceandTechnology, ZhongnanUniversity, Changsha, Hunan410013, China)
Abstract:Thisarticlereviewsrecenttenyearsinvestigationsinthemolecularandcellularmechanismsofactionsbywhichchel-
erythrineinducescelsapoptosis, summarizesthemechanismsincludingcomplexfunctionsofchelerythrineonBclXL(ananti-
apoptosismemberofBcl-2 family)andPKC, promotionsCytCreleaseandROSgenerationandinhibitionontubulinpolymeriza-
tion.Italsobrieflyintroducestherelativetests.
Keywords:Chelerythrine;　Celsapoptosis
　　白屈菜红碱属于苯并菲啶类碱 , 其氯化物分子分子式是 C
21
H
18
NO
4
Cl, 分子量是 383.84, 能溶解于水和 DMSO。对它的药理
作用的研究由来已久。 Steven等 [ 1 ～7]在体外实验中证实白屈菜
红碱对 9种肿瘤细胞(HT29, MCF7, MCF7ADR, DaOY, SQ20B,
SCC61, JSQ3, SCC35, LnCaP)表现细胞毒性。细胞通过不同浓度
的白屈菜红碱处理在 37°C下孵育 4 h, 其 ED
50
的范围是 2 ～ 5
μm[ 8] 。对化学和放射耐受的肿瘤细胞株包括 SQ-20B, JSQ-3,
·2068·
时珍国医国药 2006年第 17卷第 10期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.10　
SCC-35(都是 p53突变型)和对放射敏感的 SCC61表现了与其它
相同的剂量 -效应曲线。值得好奇的是在对SQ-20B细胞产生相
同的作用时 , 白屈菜红碱和顺铂的药物剂量相当 [ 9 ～ 10] 。在体内 ,
对 SQ-20B大鼠移植 HNSCC肿瘤模型导致肿瘤生长抑制 ,接受药
物处理组大鼠 <10%的体重的降低和白屈菜红碱表现微小的全
身毒性提示它可能是一个有用的抗肿瘤剂。众所周知 ,抗肿瘤作
用的最重要的机制之一是凋亡的诱导 ,但是在国内的资料中很少
见到这方面的报道。本文回顾了近 10多年来白屈菜红碱诱导细
胞凋亡的细胞和分子机理的研究。
1　白屈菜红碱和 Bcl-2家族
1.1　白屈菜红碱抑制 BclXL-BH3的相互作用 已经证明 BAK和
BAD蛋白的 BH3区 必须结合到 BclXL才能发挥它们促凋亡的
作用 [ 11 ～ 13] ,进一步证明 BAKBH3缩氨酸单独就有诱导多种细胞
凋亡的作用 [ 14 ～ 17] ,暗示促凋亡蛋白的 BH3区和 Bcl-χl的相互作
用在促凋亡信号的调节中具有重要意义 , 因此能够抑制 BclXL-
BH3区相互作用的的小分子化合物能够潜在地充当凋亡调节
器。基于 FP(FluorescencePolarization荧光偏振)技术设计一个高
通量的筛子旨在鉴别能够阻断 BclXL和 BAK的 BH3区相互作
用的化合物 [ 18] ,总共 107 423种来自于植物 、放射菌类真菌类 、海
洋无脊椎动物 、海声细菌的提取物被筛选 [ 19] , 其中 12种提取物
被选取用来分离活性成分 ,而发现 4种植物提取物的有效成分都
是白屈菜红碱 , 白屈菜红碱在 IC
50
1.5 μM置换了重组体 GST-
BcLXL融合蛋白中荧光标记的 BH3区缩氨酸 [ 19] , 证明白屈菜红
碱是 BclXL-BH3的相互作用的抑制剂。
1.2　白屈菜红碱阻止了 BclXL和 BAX之间的相互结合 BclXL
与 BAX的结合是 BclXL发挥作用的前提 , 而当 BAX在细胞内超
表达 , 并形成同源二聚体时 , 细胞对死亡信号的反应增强。所以
BCL-2与 BAX的比例 , 即 BCL-2/BAX异源二聚体与 BAX/BAX
同源二聚体的比例 , 决定了细胞对凋亡信号的反应。白屈菜红碱
能够阻止 BAX与 Bcl-2的结合 , 白屈菜红碱对 BAX和 BclXL的
作用是特效的 , 有趣的是白阻止 BAX对 Bcl-2的结合呈剂量依赖
性 [ 19 ～ 25] 。
1.3　白屈菜红碱诱导 BclXL过表达细胞 SH-SY5YCells凋亡 过
表达 Bcl-2或者 BclXL能够阻止细胞多种形式的细胞死亡诱导
刺激 , 例如放射和很多生化药物 [ 26 , 27] ,限制浓度的内生因子所提
供的先于线粒体步骤的凋亡信号途径能够被 BclXL过表达所阻
止 [ 19]另一方面 ,如果一种化合物能够直接作用于 BclXL, 它就应
该能轻易地克服这种蛋白的作用 ,因为细胞蛋白的浓度 , 即使在
过表达的情况下相对于可以获取的小分子化合物也是有限的。
为了验证这个假设 , Mark等人制作了过表达 BclXL的 SH-SY5Y
细胞。在这种细胞里 BclXL的水平大大地被提高 , 然而其它的
Bcl-2家族成员例如 BAX, BAK, 和 BID相对保持在一个稳定的
适度下调的 B水平。在 2μmol/L以下的低浓度 ,过表达的 BclXL
能够产生对白屈菜红碱杀伤作用的抵抗。在高浓度(2 μmol/L
以上),白屈菜红碱越过 BclXL的保护作用而诱导这种细胞凋
亡 [ 19] 。这个数据显示白屈菜红碱诱导凋亡是直接抑制 BclXL/
Bcl-2。当前验证的 BclXL-BH3相互作用的抑制剂本质上都是促
凋亡剂。在延误肿瘤生长的实验中 , 证明白屈菜红碱是一种相对
毒性较小的抗肿瘤试剂 [ 28] 。值得一提的是 , Mark等在做这个实
验的时候 , 还同时发现在一定的条件下尽管鬼臼亚乙苷处理的
BclXL过表达细胞没有经历凋亡 , 却被各自阻止在 G
2
和 S期 ,这
个发现与当时的报道一致暗示出具遗传毒性的药物诱导的细胞
周期阻止不受 BclXL过表达的影响 [ 29 ～ 31] 。
2　白屈菜红碱处理的 SH-SY5Y细胞出现亚 G1期 DNA的和线
粒体膜电位的降低
Victor等 [ 32, 33]用 2.5 μmol/L和 5 μmol/L浓度白屈菜红碱
作用的 SH-SY5Y细胞诱导出一个实质性的线粒体膜电位的降
低 [ 19] ,这个可通过 JC-1绿色荧光的增加显现出来。白屈菜红碱
诱导线粒体膜电位的变化 , 部分地被广谱的 caspase抑制剂
ZVAD抑制。相似的报道表明 BAX诱导的线立体膜电位的变化
对 caspase的抑制敏感 [ 34, 35] 。白屈菜红碱处理的 SH-SY5Y细胞
导致亚 G1期 DNA的出现预示凋亡 ,亚 G1期 DNA的出现总体上
被 ZVAD阻止 , 这种白屈菜红碱作用后线粒体膜电位的变化和亚
G
1
期 DNA出现在其它的两种细胞也能看到:一个克隆癌细胞株
HCT116和一个乳癌细胞株 MCF7, 表明这种作用不局限在 SH-
SY5Y细胞 [ 19] 。
3　白屈菜红碱引起线粒体细胞色素 C(Cytc)的释放
许多死亡的刺激引起凋亡是通过线粒体的膜间间隙释放细
胞色素 C从而激活 Apaf-1(apoptosisproteaseactivatingfactor-1凋
亡蛋白酶激活因子)。 二者一起形成凋亡诱导复合物(Apopto-
someComplex),进而激活 caspase-9,引起细胞的凋亡 , 然而如果
白屈菜红碱是作用在线粒体的 BclXL或 Bcl-2,它应该能够引起
Cytc从分离的线粒体里直接释放如同从促凋亡的 Bcl-2家族成
员所观察到的 [ 36 ～ 39] 。为了研究这个 Antony等 [ 19]把线粒体从健
康的 SH-SY5Y细胞株分离出来 ,然后给予各种死亡的刺激 ,结果
白屈菜红碱从线粒体释放出 Cytc并且呈剂量依赖的特征。鬼臼
亚乙苷和其他的蛋白激酶 C抑制剂例如 H7和星行孢菌素即使
在超过了凋亡诱导所要求的浓度也不能产生这样的作用。有可
能 Cytc的释放对于白屈菜红碱对 BclXL/Bcl-2的功能表现一个
直接对抗的作用。
4　白屈菜红碱对 PKC作用
蛋白激酶(proteinkinaseC, 简称 PKC)是一种 Ca2+磷脂依
赖 , 需二乙酰甘油活化的激酶。现已证实它在多种生物活性物质
调节细胞生长和增殖反应的信号传导过程中起重要作用 ,且因其
为佛波酯类促癌物的主要作用受体或靶点而愈来愈引起人们的
重视。关于 PKC与凋亡的关系的研究目前还不是很明确 , 有些
研究发现 PKC可通过拓扑异构酶 Ⅱ的磷酸化而直接作用 DNA,
导致 DNA损伤和细胞凋亡 ,而白屈菜红碱通过 PKC诱导凋亡的
具体的机制也不是很清楚。
有研究认为白屈菜红碱抑制 PKC诱导凋亡是通过激活一种
不确定的神经磷脂酶 , 导致神经酰胺的堆积和神经鞘磷脂的去
除 , 即通过激活神经酰胺信号瀑布 [ 40, 41] 。白屈菜红碱对 PCK的
抑制作用呈剂量依赖性 , 它的抑制作用是通过与 PKC催化区的
直接结合。白屈菜红碱竞争 PKC的保守催化位点。与 H7和 星
行孢菌素不同 , 白屈菜红碱在诱导凋亡的剂量不抑制其它的激酶
也不激活磷脂酶 D[ 42～ 44] , 白屈菜红碱是最特效的 PKC抑制剂之
一。和星行孢菌素相比 , 白屈菜红碱对 PKC的选择性比对其它
的激酶(如 PKA, PKG)要高 100倍。白屈菜红碱对 PKC的这种
特异性促进了用它对细胞中 PKC的功能的研究。 Ralph等 [ 8]证
明白屈菜红碱对 PKC活性的抑制的方法是:细胞用逐渐增加的
白屈菜红碱处理 ,溶解 , 通过来自于神经纤维角质蛋白的缩胺酸
来化验 PKC磷酸转移酶的活性.反应在磷脂酰丝胺酸和 Ca2+存
在的情况下进行以保证 PKCA组和 B组的活性。 加白屈菜红碱
30 min(体外实验发现生长受到抑制的最短时间), PKC的活性降
低呈现剂量依赖的特征。在白屈菜红碱的浓度为 10μmol/L时 ,
PKC磷酸转移酶的活性消失 , 非放射性的蛋白激酶化验试剂盒
也能够用来证实这个结果。
有些研究认为白屈菜红碱对 PKC的抑制活性是不能确定
的。 John等 [ 45]在广泛系列的各种哺乳动物的不同的 PKC同工
酶的研究中发现白屈菜红碱对 PKC没有很有力的抑制活性 , 白
屈菜红碱在浓度达到 40 μg/ml时不能抑制 3H标记的佛波醇 12,
13-丁酸盐结合到 PKC的调节域 , 在培养的人类白血病 HL-60
细胞没发现 PKC-α, -β, 或 -γ明显的转位变化。 白屈菜红碱这
种对 PKC缺少抑制活性的现象在多种式样中发现 , 无论有没有
催化剂(PDBu或 二油精)的存在。实际上 , 相反 ,当用大 、小鼠胞
质片段进行分析时 , 发现白屈菜红碱提高了 PKC的活性。这个
反应活性与 Lombardini证实的白屈菜红碱刺激了小鼠视网膜线
粒体片段上一个 20-kDa的蛋白的磷酸化相一致 [ 46 , 47] 。而且 , 在
·2069·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.10 时珍国医国药 2006年第 17卷第 10期
未经处理的细胞 , Gopalakrishna等 [ 48]发现白屈菜红碱和血根碱
能够诱导胞液中膜迁移的初始活化作用 , 随后下调 PKC.这个反
应平行于促肿瘤物质如佛波酯 , 但不是 PKC抑制剂。沿着这个
思路 John等 [ 49]研究 angoline和白屈菜红碱在 HL-60细胞中促进
PKC-α, -β, 和 -γ的置换的作用 , 但是没有发现明显的变化 。
但他们承认白屈菜红碱能够抑制 7, 12-二甲基苯蒽诱导的大约
60%肿瘤前损害。根据 Herbert等 [ 49]的报道 , 这种效果部分是由
于 PKC的抑制 ,所以 John等建议:在对白屈菜红碱及其相关复合
物的生物学作用的探索时 , 不依赖 PKC的作用途径应当考虑在
内 , 而应当从广泛地涉及白屈菜红碱功能的作用机理来说明。
无论怎样 , PKC抑制剂已经参与肿瘤的临床治疗研究 , 作为
白屈菜红碱的类似物 NK109在日本已经进入 II期实验 , 而白屈
菜红碱的另一个类似物 UCN-01也是 PKC抑制剂在美国进入 I
期实验 [ 8] 。
5　白屈菜红碱通过产生活性氧快速诱导细胞凋亡
ROS(reactiveoxygenspecies活性氧)引起细胞凋亡的机理
可能包括∶1)ROS导致 DNA损伤 , 诱导细胞调亡 [ 50];2)ROS活
化 NF-KB并使其表达导致凋亡 [ 51];3)ROS激活 SAPK通路介导
细胞调亡。活性氧在诱导肿瘤细胞凋亡的作用是得到肯定的。
Yamamoto等 [ 52]在实验中发现白屈菜红碱通过产生活性氧快速
诱导心肌细胞凋亡。白屈菜红碱快速诱导心肌细胞萎缩固缩和
随后死亡。白屈菜红碱诱导细胞死亡伴随核断裂和 caspase-3及
-9的激活 ,同时又被 XLAP(凋亡抑制基因)所阻滞 , 这表明细胞
死亡是由于细胞凋亡引起的。高浓度的白屈菜红碱导致细胞坏
死 , 没有观察到细胞的萎缩和 caspase的激活。静脉注射白屈菜
红碱(5 mg/kg)于成年小鼠心肌细胞也能增加凋亡。下调对佛
波醇 12-烷酯 13-醋酸盐(phorbol12-myristate13-acetatePMA)敏
感的 PKC不能影响白屈菜红碱诱导的凋亡 , 但是抗氧化剂包括
N-乙酰基半胱氨酸(N-acetyl-cysteineNAC)、谷胱甘肽能抑制它
的诱导凋亡的作用。提示是活性氧而不是对 PMA敏感的 PKC
导致了白屈菜红碱诱导的心肌细胞的凋亡。 Matsunaga等 [ 53]认
为神经酰胺能够刺激活性氧的产生 , 导致线粒体氧化损伤 , 引发
凋亡。如果白屈菜红碱抑制 PKC是通过激活神经酰胺信号瀑
布 [ 40 , 41] , 导致神经酰胺积累 , 后者刺激活性氧的产生 , 再引发
凋亡。
6　其他
白屈菜红碱抑制微管蛋白的聚合(影响有丝分裂和其它微
管有关的功能)。白屈菜红碱能够抑制紫衫醇介导的小鼠脑微
管蛋白的聚合 [ 54] , 阻止细胞有丝分裂的进行 , 同时促使细胞凋
亡。白屈菜红碱在 Ca2+信号传导方面的研究我们实验室还在进
行。总之 , 已经研究证明白屈菜红碱在诱导细胞凋亡的作用机制
是多方面的 , 涵概了凋亡诱导的大部分途径 , 白屈菜红碱是一种
很有开发前景的细胞凋亡诱导剂。
参考文献:
[ 1] 　BlagosklonnyM.V., SchulteT.W., NguyenP., MimnaughE.G.,
TrepelJ., NeckersL.Taxolinductionofp21WAF1andp53requiresc-
raf-1[ J] .CancerRes.1995, 55:4623.
[ 2] 　ShaoR.G., CaoC.X., ShimizuT., OConnorP.M., KohnK.
W., PommierY.AbrogationofanS-phasecheckpointandpotentiation
ofcamptothecincytotoxicityby7-hydroxystaurosporine(UCN-01)in
humancancercellines, possiblyinfluencedbyp53 function[ J].
CancerRes.1997, 57:4029.
[ 3] 　U, HS., Banaie, A., Rigby, L., andChen, J.Mutantp53mayse-
lectivelysuppressglialspecificproteinsinpluripotentialhumanneuro-
ectodermaltumorcels[ J] .Neurosci.Let.1998, 244:41.
[ 4] 　CarrolA.G., VoelerH.J., SugarsL., GelmannE.P.p53onco-
genemutationsinthreehumanprostatecancercellines[ J] .Prostate.
1993, 23:123.
[ 5] 　JungM., NotarioV., DritschiloA.Mutationsinthep53geneinradi-
ation-sensitiveand-resistanthumansquamouscarcinomacels[ J] .
CancerRes.1992, 52:6390.
[ 6 ] 　 NagasawaH., KengP., MakiC., YuY., LittleJ.B.Absenceofa
radiation-inducedfirst-cycleG1-Sarestinp53+humantumorcels
synchronizedbymitoticselection[ J] .CancerRes.1998, 58:2036.
[ 7 ] 　RamsamoojP., KasidU., DritschiloA.Diferentialexpressionofpro-
teinsinradioresistantandradiosensitivehumansquamouscarcinoma
cels[ J] .J.Natl.CancerInst.1992, 84:622.
[ 8 ] 　Chmura, S.J., Dolan, M.E., Cha, A., Mauceri, H.J., Kufe,
D.W., andWeichselbaum, R.R.InVitroandinVivoActivityof
ProteinKinaseCInhibitorChelerythrineChlorideInducesTumorCel
ToxicityandGrowthDelayinVivo[ J] .Clin.CancerRes.2000,
6:737.
[ 9 ] 　HennequinC., GiocantiN., FavaudonV.Interactionofionizingradi-
ationwithpaclitaxel(Taxol)anddocetaxel(Taxotere)inHeLaand
SQ20Bcels[ J] .CancerRes.1996, 56:1842.
[ 10]　ZhangL., WanX.S., DonahueJ.J., WareJ.H., KennedyA.R.
EfectsoftheBowman-Birkinhibitoronclonogenicsurvivalandcispl-
atin-orradiation-inducedcytotoxicityinhumanbreast, cervical,
andheadandneckcancercells[ J].Nutr.Cancer.1999, 33:165.
[ 11]　Chitenden, T., Flemington, C., Houghton, A.B., Ebb, R.G.,
Galo, G.J., Elangovan, B., Chinnadurai, G., andLutz, R.J.A
conserveddomaininBak, distinctfromBH1andBH2, mediatescel
deathandproteinbindingfunction[ J] .EMBOJ.1995, 14:5589
[ 12] 　S.N.Wilis, L.Chen, G.Dewson, A.Wei, E.Naik, J.I.Fletch-
er, J.M.Adams, andD.C.S.HuangProapoptoticBakisseques-
teredbyMcl-1andBcl-xL, butnotBcl-2, untildisplacedbyBH3-only
proteins[J].Genes＆Dev.2005, 19(11):1294 .
[ 13]　L.D.Walensky, A.L.Kung, I.Escher, T.J.Malia, S.Barbuto,
R.D.Wright, G.Wagner, G.L.Verdine, andS.J.KorsmeyerAc-
tivationofApoptosisinVivobyaHydrocarbon-StapledBH3Helix[ J] .
Science.2004, 305(5689):1466.
[ 14]　Holinger, E.P., Chitenden, T., andLutz, R.J.BakBH3Peptides
AntagonizeBcl-xLFunctionandInduceApoptosisthroughCytochrome
c-independentActivationofCaspases[J] .J.Biol.Chem..1999, 274:
13298.
[ 15]　 J.C.ReedandM.PelecchiaApoptosis-basedtherapiesforhemato-
logicmalignanciesBlood[J] .2005, 106(2):408.
[ 16]　 FischerandK.Schulze-OsthofNewApproachesandTherapeuticsTar-
getingApoptosisinDiseasePharmacol[ J] .Rev.2005, 57(2):187.
[ 17]　 S.Shangary, C.L.Oliver, T.S.Tilman, M.Cascio, andD.E.
JohnsonSequenceandhelicityrequirementsfortheproapoptoticactivity
ofBaxBH3peptidesMol[ J] .CancerTher.2004, 3(11):1343.
[ 18]　Degterev, A., Lugovskoy, A., Cardone, M., Muley, B., Wagner,
G., Mitchison, T., andYuan, J.Identificationofsmal-moleculein-
hibitorsofinteractionbetweentheBH3domainandBcl-xL[ J] .Nat.
CellBiol.2001, 3:173.
[ 19]　 S.-L.Chan, M.C.Lee, K.O.Tan, L.-K.Yang, A.S.Y.Lee,
H.Flotow, N.Y.Fu, M.S.Butler, D.D.Soejarto, A.D.Buss,
andV.C.YuIdentificationofChelerythrineasanInhibitorofBclXL
[ J] .FunctionJ.Biol.Chem.2003, 278(23):20453.
[ 20]　Tan, K.M., Chan, S.L., Tan, K.O., andYu, V.C.TheCae-
norhabditiselegansSex-determiningProteinFEM-2 andItsHuman
Homologue, hFEM-2, AreCa2+/Calmodulin-dependentProteinKi-
nasePhosphatasesThatPromoteApoptosis[ J] .J.Biol.Chem.2001,
276:44193.
[ 21]　 Oyhenart, S.Benichou, andN.RaichPutativeHomeodomainTran-
scriptionFactor1 InteractswiththeFeminizationFactorHomolog
Fem1binMaleGermCels[J].BiolReprod.2005, 72(4):780.
[ 22]　S.Jager, H.T.Schwartz, H.R.Horvitz, andB.ConradtTheCae-
norhabditiselegansF-boxproteinSEL-10promotesfemaledevelopment
andmaytargetFEM-1 andFEM-3 fordegradationbytheproteasome
[ J] .PNAS.2004, 101(34):12549.
[ 23] 　 Petros, A.M., Medek, A., Netesheim, D.G., Kim, D.H.,
Yoon, H.S., Swift, K., Matayoshi, E.D., Oltersdorf, T., and
·2070·
时珍国医国药 2006年第 17卷第 10期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.10　
Fesik, S.W.Solutionstructureoftheantiapoptoticproteinbcl-2.
Proc[ J].Natl.Acad.Sci.U.S.A.2001.98:3012.
[ 24]　F.Hua, M.G.Cornejo, M.H.Cardone, C.L.Stokes, andD.A.
Laufenburger.EfectsofBcl-2 LevelsonFasSignaling-Induced
Caspase-3Activation:MolecularGeneticTestsofComputationalModel
Predictions[ J] .J.Immunol.2005, 175(2):985.
[ 25]　C.L.Day, L.Chen, S.J.Richardson, P.J.Harison, D.C.S.
Huang, andM.G.HindsSolutionStructureofProsurvivalMcl-1 and
CharacterizationofItsBindingbyProapoptoticBH3-onlyLigands[ J].
J.Biol.Chem.2005, 280(6):4738.
[ 26]　Cory, S., andAdams, J.M.THEBCL2FAMILY:REGULATORS
OFTHECELLULARLIFE-OR-DEATHSWITCH[ J].Nat.Rev.
Cancer.2002, 2:647.
[ 27]　Johnstone, R.W., Ruefli, A.A., andLowe, S.W.Apoptosis:a
linkbetweencancergeneticsandchemotherapy[ J] .Cel.2002,
108:153.
[ 28]　Chmura, S.J., Dolan, M.E., Cha, A., Mauceri, H.J., Kufe,
D.W., andWeichselbaum, R.R.InVitroandinVivoActivityof
ProteinKinaseCInhibitorChelerythrineChlorideInducesTumorCel
ToxicityandGrowthDelayinVivo[ J] .Clin.CancerRes.2000,
6:737.
[ 29]　Minn, A.J., Rudin, C.M., Boise, L.H., andThompson, C.B.
Expressionofbcl-xLcanconferamultidrugresistancephenotype[ J].
Blood.1995, 86:1903.
[ 30]　 G.F.WeberandA.S.MenkoTheCanonicalIntrinsicMitochondrial
DeathPathwayHasaNon-apoptoticRoleinSignalingLensCelDifer-
entiation[J].J.Biol.Chem.2005, 280(23):22135.
[ 31]　 A.R.Jazirehi, M.I.Vega, D.Chaterjee, L.Goodglick, andB.
BonavidaInhibitionoftheRaf-MEK1 /2-ERK1/2 SignalingPathway,
Bcl-xLDown-Regulation, andChemosensitizationofNon-Hodgkins
LymphomaBCellsbyRituximab[ J] .CancerRes.2004, 64(19):
7117.
[ 32]　Ronca, F., Chan, S.L., andYu, V.C.1-(5-Isoquinolinesulfo-
nyl)-2-methylpiperazineInducesApoptosisinHumanNeuroblastoma
Cels, SH-SY5Y, throughap53-dependentPathway[ J] .J.Biol.
Chem..1997, 272:4252.
[ 33]　 N.Hoti, J.Ma, S.Tabassum, Y.Wang, andM.WuTriphenylTin
Benzimidazolethiol, aNovelAntitumorAgent, InducesMitochondrial-
MediatedApoptosisinHumanCervicalCancerCelsviaSuppressionof
HPV-18 EncodedE6 [ J] .J.Biochem.(Tokyo).2003, 134(4):
521.
[ 34]　 Finucane, D.M., Bossy-Wetzel, E., Waterhouse, N.J., Coter,
T.G., andGreen, D.R.Bax-inducedCaspaseActivationandAp-
optosisviaCytochromecReleasefromMitochondriaIsInhibitableby
Bcl-xL[ J] .J.Biol.Chem..1999, 274:2225.
[ 35]　N.N.Boustany, Y.-C.Tsai, B.Pfister, W.M.Joiner, G.A.
Oyler, andN.V.Thakor.BCL-xL-DependentLightScateringbyAp-
optoticCells[ J].Biophys.J.2004, 87(6):4163.
[ 36]　 Cosulich, S.C., Woral, V., Hedge, P.J., Green, S., and
Clarke, P.R.RegulationofapoptosisbyBH3domainsinacel-free
system[J] .Curr.Biol.1997, 7:913.
[ 37]　MoreauC, CartronPF, HuntA, MeflahK, GreenDR, EvanG, Val-
leteFM, JuinP.MinimalBH3peptidespromoteceldeathbyantago-
nizinganti-apoptoticproteins[ J] . J BiolChem. 2003, 278
(21):19426.
[ 38]　 Narita, M., Shimizu, S., Ito, T., Chitenden, T., Lutz, R.J.,
Matsuda, H., andTsujimoto, Y.Baxinteractswiththepermeability
transitionporetoinducepermeabilitytransitionandcytochromecre-
leaseinisolatedmitochondria[ J] .Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.
1998, 95:14681.
[ 39]　LihuaHe, GuyA.Perkins, AnnT.Poblenz, JefreyB.Harris, Mi-
chaelHung, MarkH.Elisman, andDonaldA.Fox.Bcl-xLoverex-
pressionblocksbax-mediatedmitochondrialcontactsiteformationand
apoptosisinrodphotoreceptorsoflead-exposedmice[ J] .PNAS.2003,
100:1022.
[ 40]　ChmuraS.J., NodzenskiE., WeichselbaumR.R., QuintansJ.
ProteinkinaseCinhibitioninducesapoptosisandceramideproduction
throughactivationofaneutralsphingomyelinase[ J] .CancerRes.
1996, 56:2711.
[ 41]　ChmuraS.J., MauceriH.J., AdvaniS., HeimannR., BecketM.
A., NodzenskiE., QuintansJ., KufeD.W., WeichselbaumR.R.
Decreasingtheapoptoticthresholdoftumorcellsthroughproteinkinase
Cinhibitionandsphingomyelinaseactivationincreasestumorkilingby
ionizingradiation[ J] .CancerRes.1997, 57:4340.
[ 42]　HerbertJM, AugereauJM, GleyeJ, HafrandJP.Chelerythrineisa
potentandspecificinhibitorofproteinkinaseC[ J] .BiochemBiophys
ResCommun.1990, 172(3):93.
[ 43]　HuD.E., FanT.P.ProteinkinaseCinhibitorcalphostinCprevents
cytokine-inducedangiogenesisintherat[ J] .Inflammation.1995,
19:39.
[ 44]　RotenbergS.A., HuangM.H., ZhuJ., SuL., RiedelH.Deletion
analysisofproteinkinaseCinactivationbycalphostinC[ J] .Mol.Car-
cinog.1995, 12:42.
[ 45]　 LeeSK, QingWG, MarW, LuyengiL, MehtaRG, KawanishiK,
FongHH, BeecherCW, KinghornAD, PezzutoJM.Angolineand
chelerythrine, benzophenanthridinealkaloidsthatdonotinhibitprotein
kinaseC[J] .JBiolChem.1998, 273(31):19829.
[ 46] 　 Lombardini, J.B.Paradoxicalstimulatoryefectofthekinaseinhibitor
chelerythrineonthephosphorylationofaapproximately20KM(r)pro-
teinpresentinthemitochondrialfractionofratretina[ J].BrainRes.
1995, 673:194.
[ 47]　 Lombardini, J.B.Stimulationbychelerythrineofthephosphorylation
oftheaminoacidserineinanapproximately20 kDaproteinpresentin
themitochondrialfractionoftheratretina.Biochem[ J] .Pharmacol.
1996, 52:253.
[ 48] 　Gopalkrishna, R., Chen, Z., Youlee, K., andGundimeda, U.
Proc.Am.Assoc[ J] .CancerRes.1994, 35:615.
[ 49]　Herbert, J.M., Augereau, J.M., Gleye, J., andMafrand, J.P.
ChelerythrineisapotentandspecificinhibitorofproteinkinaseC.Bio-
chem[J] .Biophys.Res.Commun.1990, 172:993.
[ 50]　SchmitCA, LoweSW, (1999)Apoptosisandtherapy[ J] , Jpatho, ,
187:127.
[ 51]　高　颖 ,许彩民 ,杨　洋.氧化诱导K562细胞凋亡机制的初步探讨
[ J] .中国生物化学分子生物学学报 , 1998, 14(3):295.
[ 52]　ChelerythrineRapidlyInducesApoptosisthroughGenerationofReactive
OxygenSpeciesinCardiacMyocytes[ J].JournalofMolecularandCel-
lularCardiology(2001)33(10):1829.
[ 53]　 MatsunagaT, KotamrajuS, KalivendiSV, DhanasekaranA, Joseph
J, KalyanaramanB.Ceramide-inducedintracelularoxidantforma-
tion, ironsignaling, andapoptosisinendothelialcels:protectiverole
ofendogenousnitricoxide[ J] .JBiolChem.2004 , 279(27):28614.
[ 54]　WolfJ, KniplingL.Antimicrotubulepropertiesofbenzophenanthridine
alkaloids[J].Biochemistry.1993, 32(48):13334.
·2071·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.10 时珍国医国药 2006年第 17卷第 10期