全 文 ：2013年 7月 第 37卷第 4期
茶藨子叶状层菌 Phylloporia ribis（Schumach．：
Fr．） Ryvarden 是来源于忍冬科金银花植株上的一
种真菌［1-2］。 该菌主产于山东平邑［3-4］，寄生于忍冬植
株老干或裸露的根部，其子实体被称为“银花莪子”，
当地人习惯炒后代茶饮，可清咽利喉［5］。 茶藨子叶状
层菌经过菌种分离纯化和液体深层发酵培养生产出
的菌丝，白色或灰白色，味鲜美，无毒 ［6-7］，已被卫生
部批准为新资源食品（关于批准茶树花等 7 种新资
源食品的公告 2013 年［1］号文），其应用价值备受关
注。 本文对该菌发酵菌丝营养成分进行了系统测试
分析，为该菌发酵菌丝的质量标准研究奠定基础，并
为其进一步开发利用提供科学依据。
1 材料与方法
1．1 材料与试剂 茶藨子叶状层菌发酵菌丝（本课
题组分离、纯化并培养，委托山东隆大生物科技有限
公司发酵生产，样品批号 20101201），茶藨子叶状层
菌子实体采于平邑金银花种植基地；混合氨基酸标
准液，茚三酮溶液，热稳定 α-淀粉酶液，蛋白酶，淀
粉葡萄糖苷酶液，pH2．2 缓冲液，混合酶溶液，VitB2，
甲醇为色谱纯，其余试剂为分析纯。
1．2 仪器与设备 1765 型定氮蒸馏装置，上海上博
玻璃仪器有限公司，Kjeltec 8200型自动凯氏定氮仪
福斯华（北京）科贸有限公司，SXT-02 型索氏抽提器
上海洪纪仪器设备有限公司，L-8900 型氨基酸自动
分析仪，日立公司，TAS-986 火焰原子吸收分光光度
计，北京普析通用仪器公司，Waters-2693高效液相色
谱仪，美国沃特斯公司。
1．3 方法
1．3．1 蛋白质含量测定［8］
1．3．1．1 样品处理 称取样品 2．000 g，移入干燥的
100 mL 定氮瓶中，加入 0．2 g 硫酸铜、6 g 硫酸钾及
20 mL 硫酸，加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停
止后，保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透
明后，继续加热 0．5～1 h。 取下冷却，加水 20 mL。 冷
却后移入 100 mL 容量瓶中，水洗定氮瓶，洗液并入
容量瓶中，定容。 同时做试剂空白试验。
茶藨子叶状层菌发酵菌丝营养成分分析
邹昀员 1，卢连华 2，李凤华 2，徐凌川 3
（1．山东中医药大学 2010 年级硕士研究生，山东 济南 250355； 2．山东省疾病预防控制中心，山东 济南 250014；
3．山东中医药大学药学院，山东 济南 250355）
［摘要］ 目的：研究茶藨子叶状层菌发酵菌丝的营养成分。 方法：以国家膳食营养素检测标准为依据，采用国家标准规定的
多种方法，对茶藨子叶状层菌发酵菌丝进行了全成分分析检测。 结果：茶藨子叶状层菌发酵菌丝蛋白质含量高达 35．2%，脂肪含
量 7．2%，碳水化合物含量 48．7%，膳食纤维含量 19．9%，维生素 B2含量 0．014 mg/g，含有天门冬氨酸、谷氨酸和赖氨酸等 17 种氨
基酸，总量为 33．2%，并含有 Zn、Fe、Mg、K、Ca 等多种矿质元素。 结论：茶藨子叶状层菌发酵菌丝具有较高的综合利用价值。
［关键词］ 茶藨子叶状层菌；发酵菌丝；营养成分；分析
［中图分类号］ R284．2 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007-659X（2013）04-0333-04
Analysis on the nutrient ingredients of the fermentative hyphae of Phylloporia ribis（Schumach．：Fr．） Ryvarden ZOU Yun-
yuan1，LU Lian-hua2，LI Feng-hua2，XU Ling-chuan3（1．Grade 2010 Master Degree Cadidate，Shandong University of Traditional
Chinese Medicine，Jinan 250355，China；2．Center for Disease Control and Prevention of Shandong Province，Jinan 250014，China；
3．College of Pharmacy，Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan 250355，China）
［Abstract］ Objective：To study the nutrient ingredients of the fermentative hyphae of phylloporia ribis（Schumach．：Fr） Ryvar-
den． Methods：Based on state dietary nutrients monitoring standards，many methods accorded with national standards were used
in this experiment，to analyse the nutrient ingredients of the fermentative hyphae of Phylloporia ribis（Schumach．：Fr．） Ryvar-
den． Results：The study showed that the protein content reached 35．2%，and the fat content was 7．2%，the carbohydrates content
was 48．7%，the dietary fiber content was 19．9%，VitB2 content was 0．014 mg/g． There are 17 kinds of amino acids，such as in
the fermentative hyphae of Phylloporia ribis（Schumach．：Fr．） Ryvarden． Total amino acids was 33．2%． The fermentative hyphae
also contains a number of mineral elements such as Zn、Fe、Mg、K、Ca and so on． Conclusion：The fermentative hyphae of Phyl-
loporia ribis（Schumach．：Fr．） Ryvarden has potential value of exploitation．
［Key words］ Phylloporia ribis（Schumach．：Fr．） Ryvarden；fermentative hyphae；nutrient ingredients；analysis
［收稿日期］ 2012-12-14
［基金项目］ 国家十五科技攻关计划——山东中药科技化产业基
地关键技术研究子课题（编号：2001BA701A23-07）
［通信作者］ 徐凌川，教授，主要从事药用真菌研究与应用、生药
中药质量控制、质量评价及资源开发研究 ，E-mail：xulingchuan518＠
sina．com，Tel：13791112331。
·中药研究·
第 37 卷 第 4 期 山东中医药大学学报 Vol．37，No．4
2013 年 7 月 JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY OF TCM Jul.2013
333
DOI:10.16294/j.cnki.1007-659x.2013.04.033
2013年 7月 山东中医药大学学报 第 37卷第 4期
1．3．1．2 含量测定 向定氮蒸馏装置水蒸气发生器
内装水至 2/3 处，加甲基红乙醇溶液数滴及数毫升
硫酸，加热煮沸。 向接收瓶内加入 10 mL 硼酸溶液
及 1～2 滴混合指示液，取 2～10 mL 样品处理液注
入反应室。 将 10 mL 氢氧化钠溶液流入反应室蒸馏
10 min 后再蒸馏 1 min。 以硫酸标准滴定溶液滴定
至终点，同时做试剂空白试验。
1．3．2 脂肪含量测定［9］
1．3．2．1 样品处理 称取 2～5 g 磨碎的样品，精确
到 0．001 g，105 ℃烘 30 min，趁热倒入研钵中，加入
约 2 g 脱脂细砂一同研磨至出油状后，转入底塞带
脱脂棉的滤纸筒内，用脱脂棉塞入上部压住样品。
1．3．2．2 含量测定 将装有样品的滤纸筒置于抽提
筒内，注入乙醚至虹吸管高度的 2/3 处，加热抽提。
加热温度以每分钟回流的乙醚在 120～150 滴，每小
时回流 7次以上为宜。 抽提至乙醚点滴实验无油迹
为止，取出滤纸筒，再加热使乙醚回流 2 次，回收
乙醚。 将抽提瓶于 105 ℃先烘 90 min，再烘 20 min，
烘至恒重为止。 抽提瓶增加的重量即为脂肪的重
量。
1．3．3 氨基酸含量测定
1．3．3．1 样品处理 称取样品 2．000 g 于水解管中，
加 6 mol/L 盐酸 10～15 mL、新蒸馏的苯酚 3～4 滴，
冷冻 3～5 min，抽真空，充入高纯氮气，重复 3 次后
封口。 将水解管置于（110±1）℃的恒温干燥箱内，水
解 22 h后取出冷却。 将水解液过滤后转移到 50 mL
容量瓶内定容。 吸取滤液 1 mL 于 5 mL 容量瓶内，
40～50 ℃干燥，残留物用 1～2 mL 水溶解，再干燥，
反复进行两次，蒸干，用 1 mL pH 2．2缓冲液溶解。
1．3．3．2 含量测定 吸取 0．200 mL 混合氨基酸标准
液，用 pH 2．2 缓冲液稀释到 5 mL，用氨基酸自动分
析仪以外标法测定样品测定液的氨基酸含量。
1．3．4 膳食纤维含量测定［10］
1．3．4．1 样品处理 称取双份粉碎过筛样品各 1 g，精
确到 0．1 mg，双份样品质量差≤0．005 g，置于 400 mL
高脚烧杯中，同时制备 2个空白样。 加入 0．05 mol/L
MES-TRIS 缓冲液 40 mL，用磁力搅拌至样品完全分
散。 加 50 μL 热稳定 α-淀粉酶液搅拌，置于 95～
100 ℃的恒温振荡水浴箱中反应 35 min。 冷却至
60 ℃，将烧杯内的环状物及胶状物刮下。 向每个烧
杯加入 100 μL 蛋白酶溶液，置于（60±1） ℃水浴
中反应 30 min，加入 5 mL 3 mol/L 乙酸溶液，调 pH
至 4．5±0．2。 加入 100 μL 淀粉葡萄糖苷酶液，反应
30 min。
1．3．4．2 含量测定 在每份样品酶解液中，按乙醇与
样液体积比 4∶1 加入预热至（60±1） ℃的 95%乙醇，
室温下沉淀 1 h，转移至已加硅藻土并干燥称重的坩
埚中过滤。 分别用 78%乙醇、95%乙醇和丙酮 15 mL
洗涤残渣各 2次，105 ℃烘干过夜，冷却 1 h，称重，精
确至 0．1 mg。减去坩埚和硅藻土的干重，计算残渣质
量。
1．3．5 维生素 B2含量测定［11］
1．3．5．1 样品处理 称取 5．00 g 样品于 100 mL 三
角瓶中，加 60 mL 0．1 mol/L 盐酸 ，封口 ，121 ℃灭
菌 30 min，40 ℃以下取出。 调 pH值至 4．0±0．2，加入
2．0 mL 混合酶溶液［称取 2．345 g 木瓜蛋白酶（活力
单位≥600 U/g）、1．175 g淀粉酶（活力单位≥4 000 U/g）
和 1．000 g 酸性磷酸酶（活力单位≥4 000 U/g），用水
定容至 50 mL］，置 37 ℃培养箱中过夜。 将酶解液转
移至 100 mL 容量瓶中定容，过滤，再经 0．45 μm 滤
膜过滤。
1．3．5．2 含量测定 用高效液相色谱法测定，色谱
柱：C18反相色谱柱（粒径 5 μm，250 mm×4．6 mm），
流动相：甲醇-0．05 mol/L 乙酸钠溶液（35∶65），流速：
1．0 mL/min，检测波长：激发波长 462 nm，发射波长
522 nm，柱温为室温，进样量：20 μL。
1．3．5．3 标准曲线 准确称取维生素 B2 对照品
0．1000 g，用水溶解并定容至 100 mL 作为储备液，此
时溶液浓度相当于 1 mg/mL，再配成 0～100 μg/mL
的标准系列。以浓度为横坐标，峰高或峰面积为纵坐
标，绘制标准曲线。
1．3．6 矿质元素含量测定 取样品 1．0000 g，加入
5 mL 硝酸，放置 30 min 后蒸干，500 ℃灰化 1 h，放
冷，再加入 1 mL硝酸，分 4 次溶解，移入 10 mL 容量
瓶中定容。 采用原子吸收分光光度法测定。
1．3．7 水分含量测定［12］ 将混合均匀样品磨细至颗
粒小于 2 mm，称取 2．5000 g 置于已称重的恒重称量
瓶中，101～105 ℃干燥 2～4 h 后，冷却 0．5 h 后称
量，再 101～105 ℃干燥 1 h左右，冷却 0．5 h后称量。
重复以上操作至前后两次质量差不超过 2 mg 为恒
重。
1．3．8 灰分含量测定［13］ 称取样品 3．5000 g 于已称
重的恒重坩埚中，沸水浴蒸干，用电热板充分炭化
至无烟后置于马弗炉中，（550±25） ℃灼烧 4 h。 冷
却至 200 ℃左右，于干燥器中冷却 30 min。 待样品灰
化完全称量，重复灼烧至前后两次称量相差不超过
0．5 mg为恒重。
1．3．9 碳水化合物含量测定 碳水化合物的含量系
百分之百减去上述方法测得的蛋白质、脂肪、水分、
灰分的含量计算所得。
2 结果与分析
2．1 发酵菌丝营养成分含量分析 茶藨子叶状层菌
发酵菌丝中蛋白质含量高达 35．2%，脂肪含量 7．2%，
碳水化合物含量 48．7%，膳食纤维含量 19．9%，维生
素 B2 0．014 mg/g，Zn、Fe、Mg、K、Ca 等矿质元素含量
较高，说明茶藨子叶状层菌发酵菌丝具有良好的综
合利用价值。 发酵菌丝中主要营养成分含量测定结
果见表 1。
334
2013年 7月 第 37卷第 4期邹昀员等：茶藨子叶状层菌发酵菌丝营养成分分析
2．2 原子实体与发酵菌丝氨基酸含量分析 发酵
菌丝的氨基酸含量显著高于该菌子实体氨基酸含
量，发酵菌丝氨基酸总含量大约是子实体氨基酸总含
量的 4倍。 茶藨子叶状层菌发酵菌丝中氨基酸不仅
种类齐全，而且含量丰富。 所检测出的 17 种氨基酸
含量在 0．28%～3．90%，总氨基酸含量高达 33．2%，其
中天门冬氨酸 2．77%、谷氨酸 3．34%、精氨酸 1．78%、脯
氨酸 2．65%。 发酵菌丝中人体必需氨基酸含量，苏氨
酸 >赖氨酸 >亮氨酸 >缬氨酸 >苯丙氨酸 >异
亮氨酸>蛋氨酸（色氨酸因样品经酸水解处理破坏，
故未检出），这 7种必须氨基酸的含量达到总含量的
38%。 由此可见，其发酵菌丝中氨基酸构成比例基本
符合标准，有较高的营养价值。 茶藨子叶状层菌子
实体与发酵菌丝氨基酸含量分析结果见表 2。
3 讨论
实验结果表明，茶藨子叶状层菌发酵菌丝蛋白
质含量高，营养结构合理，而且蛋白比酵母、细菌的
单细胞蛋白味美，可作为蛋白添加剂使用。
茶藨子叶状层菌发酵菌丝中氨基酸种类齐全，
含量丰富，人体必需的 8 种氨基酸占总氨基酸含量
的 38%，接近食物或饲料必需氨基酸占总氨基酸含
量的合理比值 40%［14－15］，说明其有较高的营养价值。
据文献报道，谷氨酸不仅是一种调味剂，而且具有多
种重要的生理功能，参与多种生理活性物质的合成，
对传递神经冲动、维护脑及神经的正常功能发挥着
重要作用，还能促进消化液的分泌及胃肠运动，增加
食欲［16］。 发酵菌丝中谷氨酸含量高达 3．34%，因此，
其可作为人体补充营养的来源。 发酵菌丝中还富含
缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸 3 种支链氨基酸，这 3 种
支链氨基酸具有抗疲劳的作用，可用于缓解亚健康
状态的保健性食品中［17］。
同时，该发酵菌丝中膳食纤维的含量较高。 膳
食纤维不能被消化系统中酶分解和吸收，故可促进
肠蠕动，有利于改善消化不良及慢性便秘患者的症
状，降低结肠癌发病风险，尤其适合老人、孕妇及长
期卧床者食用，从而可以改善其生活质量［17］。
此外，该发酵菌丝中含有较高的人体必需矿质
元素 K、Fe、Mg、Zn、Ca等。 K为细胞内液的主要阳离
子，在细胞的新陈代谢、维持体内水分的平衡和心律
的正常、调节渗透压及酸碱平衡中发挥重要作用［18］。
Fe 主要参与血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素氧化酶
的合成，并参与许多酶的活化［19］。 Mg 离子是多种酶
的辅基和激活剂，缺 Mg 可引起动脉粥样硬化和心
率失常。 Zn 能促进生长发育、增进免疫功能、抗衰
老、促进食欲及增强创伤组织再生，Zn 在体内能阻
断自由基、抑制脂肪的过氧化反应、稳定细胞膜的结
构功能，使细胞对自由基具有较强的抵抗能力［20］。
综上所述，茶藨子叶状层菌发酵菌丝中含有大
量的营养成分，作为一种新资源食品值得进一步研
究和深入开发利用。
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表 1 茶藨子叶状层菌发酵菌丝中营养成分含量
种类 批次一 批次二 批次三
蛋白质（%） 35.4 35.2 35.1
脂肪（%） 7.23 7.24 7.20
碳水化合物（%） 48.6 48.7 48.9
膳食纤维（%） 20.0 19.9 19.9
维生素 B2（m/mg·g-1） 0.0150 0.0143 0.0134
锌（m/mg·kg-1） 25.6 25.5 25.1
铁（m/mg·kg-1） 125 127 122
镁（m/mg·100 g-1） 91.2 94.1 92.9
钾（m/mg·100 g-1） 510.7 534.1 513.1
钙（m/mg·g-1） 2.93 2.95 3.01
水分（%） 6.54 6.86 5.92
灰分（%） 3.61 3.50 3.71
表 2 茶藨子叶状层菌子实体
及发酵菌丝中氨基酸组成及含量
氨基酸 子实体质量分数 发酵菌丝质量分数
门冬氨酸 0.91 2.77
谷氨酸 1.11 3.34
丝氨酸 0.26 2.82
甘氨酸 0.49 1.34
组氨酸 0.11 0.83
精氨酸 0.49 1.78
苏氨酸 0.39 2.28
丙氨酸 0.52 2.31
脯氨酸 0.40 2.65
酪氨酸 0.22 1.01
缬氨酸 0.67 1.69
蛋氨酸 0.21 0.45
胱氨酸 0.19 0.28
异亮氨酸 0.40 1.32
亮氨酸 0.53 2.08
苯丙氨酸 0.38 3.90
赖氨酸 0.39 2.31
总氨基酸 7.67 33.2
335
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44-46．
凝胶膏剂（原名巴布剂）是以水溶性或亲水性高
分子材料为基质，与药物混合制成的贴膏剂。 凝胶
膏剂载药量大，非常适合中药多组分、大剂量的用药
特点，同时具有高舒适性、高渗透性、高安全性等优
点。 作为新型外用贴剂，目前在日本、韩国等地凝胶
膏剂已全面取代了橡胶膏剂等刺激性较大的外用制
剂。 但我国的凝胶膏剂却一直未能占据外用制剂的
主流市场，究其原因关键在于国内凝胶膏剂基质工
艺不过关，制备过程中涉及的基质复杂，影响因素较
多。 由此造成在不同品种中，所用辅料混乱，质量难
以保证，凝胶膏剂的优势和特色凸显不出来。 针对
目前中药凝胶膏剂普遍存在的膏体黏弹性不足 ［1］、
涂布困难、稳定性差等问题，本文以实验室前期制备
的多种凝胶膏剂为模型药物进行多指标评价，通过
对不同种类基质的选择，对基质中各组分的配比分
析研究，为凝胶膏剂复合型通用基质配制技术的建
立提供参考。
1 材料
1．1 药物 乳康凝胶膏剂、痹舒凝胶膏剂、骨平凝
胶膏剂、复方蟾酥镇痛凝胶膏剂、蟾酥凝胶膏剂中所
含药物为实验室自制。
1．2 仪器与试剂 日式 Algol指针式推拉力计（艾固
仪器股份有限公司），涂布器（自制）。 卡波姆 940（北
京国人逸康科技有限公司），聚丙烯酸钠（PAA-Na，常
州科益化工有限公司），羧甲基纤维素钠（CMC-Na，
天津科密欧化学试剂开发中心），甘油（天津大茂化
学试剂厂），丙二醇（山东省化工研究院），蓖麻油（天
津科密欧化学试剂开发中心），柠檬酸（青岛化学试
剂厂），氮酮（浦和浦西化工厂）。
2 方法
2．1 模型药物的制备和基质的选用 选择乳康凝
胶膏剂、痹舒凝胶膏剂、骨平凝胶膏剂、复方蟾酥镇
痛凝胶膏剂、蟾酥凝胶膏剂为模型药，按确定工艺对
所含药物进行制备，供成型工艺研究。 模型药物和
凝胶膏剂复合型基质的优选研究
盛华刚
（山东中医药大学，山东 济南 250355）
［摘要］ 目的：优选凝胶膏剂的复合型基质，建立基于复合型基质的复配工艺专有技术。 方法：以乳康凝胶膏剂、痹舒凝胶膏
剂、骨平凝胶膏剂、复方蟾酥镇痛凝胶膏剂、蟾酥凝胶膏剂为模型药物，以膏体均匀性、皮肤追随性、涂布性、剥离强度、反复揭
扯性能、膏体稳定性为指标，考察了不同种类及不同比例基质对膏体质量的影响。 结果：保湿剂∶水∶聚丙烯酸钠∶羧甲基纤维素钠
为（30～40）∶（20～45）∶（4～6）∶（1～3．5）可作为凝胶膏剂基质的基本配比。 结论：所确定基质基本配比和基质分析可为凝胶膏剂
复合型通用基质的建立提供依据。
［关键词］ 凝胶膏剂；基质；基本配比；优选研究
［中图分类号］ R283．6 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007-659X（2013）04-0336-03
［收稿日期］ 2012-11-22
［基金项目］ 山东省中医药科技计划发展项目（编号：2011-024）
［作者简介］ 盛华刚（1979-），男，山东荣成人，讲师，医学博士，主
要从事中药新制剂的研究。
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