全 文 :收稿日期:2004-09-06初稿;2004-12-31二改稿
作者简介:钱秀苇(1970-),女,大学本科 ,工程师 ,主要从事园林绿化新优品种的研究与开发 , 021-54354198(O)。
上海农业学报 2005 , 21(1):1~ 3
Acta Agriculturae Shanghai
文章编号:1000-3924(2005)01-01-03
组 织 培 养 法 快 速 繁 殖 袋 鼠 花
钱秀苇 , 朱 清 , 李蓓怡
(上海园林科学研究所 ,上海 200232)
摘 要:探讨了袋鼠花组织培养过程中的外植体生长诱导与增殖培养基的筛选;生根及驯化移栽等关键技
术环节;整理了一套适合袋鼠花属植物的组培快繁体系 ,使袋鼠花通过组培快繁实现大规模育苗成为可能。
关键词:袋鼠花;组织培养;快速繁殖
中图分类号:S668.9 文献标识码:A
袋鼠花(Anigozanthos)[ 1] 属 Haemodoraceae 科袋鼠花属 ,原产澳洲西部 , 多年生草本 ,株高 40 ~
120cm ,叶色暗绿 。总状花序 ,唇形花冠 ,因其酷似袋鼠爪而得名。袋鼠花花型独特而别致 ,花色有黄色 、
橙黄 、金黄 、粉红 、红色 、杏色 、绿色等 ,色彩艳丽 ,观赏价值很高 ,可直接进行切花生产或作为花坛植物 ,也
可水养或作干花使用[ 2] 。但是 ,由于种源有限 、种子寿命较短 、扦插繁殖系数不高 ,且易受季节等因素的影
响 ,不利于种苗的大规模繁殖 。因此 ,利用组织培养法可大大提高袋鼠花引种驯化的速度和进行大规模地
种苗生产 ,具有很好的生产与市场前景 ,李红等[ 3] 、刘春等[ 4]曾对袋鼠花组培快繁的技术进行了探讨 ,但未
形成一套完整的快繁体系 ,本项目将对袋鼠花组培过程中所涉及的外植体灭菌 、诱导分化 、生根 、练苗 、移
栽成活等关键技术环节进行研究 ,以建立适合袋鼠花属植物的组培快繁体系 ,也为优质种苗的大规模生产
和以后的脱毒研究工作打下基础。本文报道该项研究结果 。
1 材料 与方 法
1.1 材 料
从澳洲引进袋鼠花品种“Bush Devil” 、“Bush Emerald” ,取其茎尖 、幼嫩茎段进行试验。
1.2 外植体灭菌
外植体用“奥妙”洗衣粉水浸泡 10min 后 ,用自来水冲洗 30min ,冲洗干净后 ,放入超净工作台内 ,以
0.1%的升汞溶液灭菌茎尖 4 ~ 5min 、茎段 7 ~ 8min后取出 ,用无菌水漂洗 5次。
1.3 培养基组分
诱导培养基(1)MS +6-BA2.0mg·L-1(单位下同)+NAA0.2;增殖培养基(2)MS +0;(3)MS +6-
BA0.05;(4)MS+6-BA0.1;(5)MS+6-BA0.2;(6)MS+6-BA0.4;(7)MS+KT0.1+NAA0.1;(8)MS +
KT0.5+NAA0.1;(9)MS+KT1+NAA0.1;(10)MS +KT2+NAA0.1;(11)MS+KT3+NAA0.1;长根
培养基(12)MS+NAA0.1;(13)MS+NAA0.2;(14)MS+NAA0.5;(15)1 2MS+NAA0.1;(16)1 2MS +
NAA0.2;(17)1 2M S+NAA0.5;(18)MS+IBA0.1;(19)MS +IBA0.2;(20)MS +IBA0.5;(21)1 2MS +
IBA0.1;(22)1 2MS+IBA0.2;(23)1 2MS+IBA0.5;上述培养基均加入琼脂 0.6%,蔗糖 3%,pH5.8 。
1.4 培养条件
培养温度 23 ~ 25℃,光照度为 2000lx ,光照时间 10h·d-1 。
1.5 移 栽
作三种移栽介质比较 ,分别为(1)纯珍珠岩 、(2)V(珍珠岩)∶V(泥炭)=3∶1 、(3)V(珍珠岩)∶V(泥炭)∶
V(砻糠灰)=3∶1∶1。
2 结果 与分 析
2.1 诱导与增殖培养基的筛选
将外植体接种于培养基(1)上 , 30d后腋芽开始萌动 ,并有丛芽产生 。将丛生芽单个切下 ,接种于增殖
培养基(2)~ (11)上 ,20d后单个切芽的基部有少量愈伤组织形成并逐步形成芽丛 , 30d后统计增殖系数
(表 1)。
从表 1可以看出 ,在诱导增殖过程中 ,以培养基(4)、(8)、(9)的增殖效果较好 ,但以培养基(4)的增殖
效果最好 ,不定芽生长快 ,芽体正常 ,叶片舒展 ,茎节较长 ,增殖系数为 6.5倍以上且无玻璃苗出现 ,增殖苗
健壮 ,变异少;无论是何种激素 ,过高或过低的浓度都会影响袋鼠花的分化而降低它的增殖系数。
表 1 不同激素的不同浓度对袋鼠花增殖系数的影响
Table 1 The effects of hormones and their concentrations on the multipl ication of Anigozanthos
培养基代号
Medium No. 接种数Number of explants 增殖数Number of multiplicat ion 增殖系数Coefficient of multiplication 玻璃苗数Number of glassy seedlings
2 50 200 4.00 -
3 45 225 5.00 -
4 45 294 6.53 -
5 45 270 6.00 3
6 40 168 4.20 12
7 45 227 5.04 -
8 45 281 6.24 -
9 45 293 6.51 -
10 45 226 5.02 8
11 40 198 4.95 6
2.2 生 根
切取 2cm 长的单芽接种于培养基(12)~ (21)上 ,分别观察 10 、15 、18d后袋鼠花的长根情况 ,结果如
表 2所示 。不同培养基和激素浓度对袋鼠花生根的影响很大。比较这 12种生根培养基 ,基本培养基半量
的比全量的生根率明显提高 ,而以培养基(16)、(21)的效果最好 ,生根率达 100%而无丛芽发生。
表 2 不同培养基和激素浓度对袋鼠花生根的影响
Table 2 The effects of different media and hormone concentrations on rooting of Anigozanthos
培养基代号
Medium No.
接种数
Number of
explan ts
长根数(10d)
Number of
root s
长根数(15d)
Number of
roots
长根数(18d)
Number of
root s
生根率
Rooting
rate(%)
丛芽数
Num ber of
tuf ty buds
12 50 - 2 8 16 -
13 50 - 3 12 24 -
14 50 - 3 15 30 -
15 50 6 41 49 98 -
16 40 3 42 50 100 -
17 50 1 39 50 100 3
18 50 - 3 6 12 -
19 50 - 5 11 22 -
20 50 - 7 15 30 -
21 50 - 46 50 100 -
22 50 - 44 49 98 -
23 50 7 49 50 100 1
2.3 练苗移栽介质比较
三种移栽介质以介质(3)效果最好 ,长根瓶苗取出洗净移入消过毒的练苗介质中 ,适当遮荫保持湿度 ,
使苗逐步适应自然条件 , 20 d后瓶苗开始长出新根 , 30d后统计结果 ,介质(3)的成活率达 92%,介质(2)的
成活率为 75%,而纯珍珠岩的成活率仅为 50%。
2.4 袋鼠花组培快繁体系的建立
外植体选择当年生的幼嫩茎段 ,诱导培养基为 MS+6-BA2.0+NAA0.2 ,增殖培养基为 MS+6-BA0.1 ,
可达 6.5倍的增殖率 ,继代周期为 15 ~ 20d。生根培养基为 1 2MS+NAA0.2或 1 2MS+IBA0.1均可 ,生
2 上 海 农 业 学 报 21卷
根率可达 100%,练苗移栽介质为 V(珍珠岩)∶V(泥炭)∶V(砻糠灰)=3∶1∶1 ,成活率可达 90%以上 。
3 讨 论
3.1 袋鼠花在培养过程中其伤口分泌褐色物质 ,使培养基褐化 ,可采取加快转接频率 、添加活性炭或抗褐
化剂等方法进行抑制 。
3.2 在袋鼠花的生根试验中 , MS培养基中随着 NAA或 IBA浓度的增加 ,生根率也有所增加;但当培养
基中的盐浓度减半 ,即 MS减为 1 2MS 时 ,生根率达 98%以上 ,而激素的浓度变化对生根的影响不是很明
显 ,显然 ,袋鼠花的生根培养基以 1 2M S 优于 MS 。那么 ,是否可采用 1 3M S或 1 4MS ,或试用无机盐浓
度较低的培养基如 B5或改良过的White培养基进行生根培养 ,有待于进一步验证。
3.3 袋鼠花属多年生草本 ,花色多样 ,既可观花又可观叶 ,在澳洲是家喻户晓的花卉品种 ,但在中国品种
尚属贫乏 ,而上海目前还处于认识阶段 ,所以采用组培技术是扩大繁殖的有效途径之一 ,而建立一套适合
袋鼠花属植物的组培快繁体系是为了更好的开发和利用。
参 考 文 献
[ 1] 叶剑秋.来自澳洲的宠物袋鼠花[ J] .园林 , 2004 ,(4):33.
[ 2] Kangaroo Paw s.NAT IVES.Natural beauty , 2003 , 62~ 65.
[ 3] 李 红 , 李永文 , 李贺年 , 等.袋鼠花的组织培养和快速繁殖[ J] .植物生理学通讯 , 2003 , 39(4):340.
[ 4] 刘 春 , 穆 鼎.袋鼠花的组织培养[ J] .园艺学报 , 2003 , 30(1):113~ 114.
Rapid Propagation of Anigozanthos Seedlings by Tissue Culture
QIAN Xiu-wei , ZHU Qing , LI Bei-yi
(Shanghai Landscape Gardening Research Inst itute , Shanghai 200232)
Abstract:The key technologies of rapidly propagating Anigozanthos such as the induction of explants
and screening of enrichment media as w ell as rooting , acclimatizing and transplanting were studied , and a sys-
tem of rapidly propagating Anigozanthos through tissue culture w as set up , which made it possible extensively
g row ing Anigozanthos seedlings through tissue culture and rapid propagation.
Key words:Anigozanthos;Tissue culture;Rapid propagat ion
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31 期 钱秀苇等:组织培养法快速繁殖袋鼠花