全 文 ：— 27 —现代中药研究与实践2009年第23卷第4期Research and Practice of Chinese Medicines
毛黄堇系罂粟科植物毛黄堇Cordalis tomentella
Franch. 的全草，又名干岩矸（重庆南川）、岩黄连（湖
北巴东、陕西镇坪）[1]，为民间常用中草药，具有
抗菌、消炎、镇痛和安定作用，除此外还有抑制肿
瘤细胞作用。主治疮疖肿毒、肝炎、肝硬化等症。
毛黄堇植物分布局限于石灰岩山区，属石山特有种
[2-4]。由于生长环境特殊，自然繁殖率很低，种群发
展困难，资源蕴藏量十分匮乏。为此，本文利用组
织培养技术，对毛黄堇愈伤组织的诱导条件进行了
初步探索，选出合适的培养基，以期培育出完整植
株，为其引种驯化提供依据。
1 材料和方法
1.1 材料 来源于野生和盆栽的毛黄堇，经我所
刘正宇研究员鉴定为毛黄堇 Cordalis tomentella
Franch.。
1.2 方法 取健壮毛黄堇植株的幼根、叶柄、叶片
幼嫩组织，用饱和 NaOCl 溶液中浸泡 3~5 min，并
不断搅动，然后用流水冲洗 30 min，用 75% 酒精
浸泡 10 s，无菌水清洗 3~4 次，0.1% 升汞消毒 4~5
min，无菌水清洗 5~6 次，得到无菌材料，选择不
同的基本培养基，置于光照强度 1 500 Lx，光照时
间为 10 h/d，培养温度为 (25±2) ℃。
2 结果与分析
2.1 不同来源的外植体对消毒效果的影响 以野
外生长和室内盆栽生长一段时间后的幼嫩植株的
根为材料，观察不同来源的试验外植体经消毒处理
后的效果。结果表明 ：在条件相同的情况下，用
MS+2,4-D 1.0 mg•L-1 + 6-BA 0.2 mg•L-1 培养基培
养，来源于野外植株的外植体污染较严重，污染率
达 46.7%，可能是因为生长在野外自然环境，带有
的杂菌较多，而室内盆栽的污染率仅为 10%，这是
因为盆栽外植体生长环境由人为控制，感染杂菌的
几率较低，从而污染较少。 结果见表 1。
濒危植物毛黄堇愈伤组织诱导条件的初步研究
韩 凤， 刘 杰 ， 林茂祥 ， 李 娟 ， 黄 霖 ， 杨成前
（重庆市药物种植研究所， 重庆 南川 408435）
收稿日期：2008-11-03
关键词：毛黄堇；愈伤组织；诱导；培养条件
中图分类号：S322 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2009)04-00027-02
2.2 不同消毒处理对外植体消毒效果的影响 将采
集的植株茎用饱和 NaOCl 溶液清洗，然后用流水冲
洗 30 min。在超净工作台上用 75％酒精浸泡 10 s，
再用无菌水冲洗 3 次，洗净残留的酒精，用 2% 的
NaOCl 或 1%HgCl2 溶液分别浸泡，见表 2。浸泡期
间不时摇晃，使外植体与消毒剂充分接触。经上述
处理后，无菌水洗 5~6 次，无菌滤纸吸干外植体表
面的水分，将材料切成 0.5~1.0 cm 的小段，接种到
培养基上。
试验发现 ：用 2％的 NaOCl 处理，随着处理时
间的延长，污染率和褐化率都得到了有效控制，达
到了很好的灭菌效果 ；用 0.1％ HgCl2 灭菌，随着处
理时间的延长，污染率得到有效控制，褐化率却不
断增高。但在 2 组消毒处理中，用 2％ NaOCl 溶液
消毒污染率均较高，其中消毒 5.0 min 的污染率最
高为 33.3％ ；以 0.1％ HgCl2 消毒 4 min 效果较好，
污染率为 16.7％，褐化率仅为 10.0%。因此，在本
实验中，我们得出用 0.1％ HgCl2 消毒 4 min 是毛黄
堇外植体较适宜的消毒灭菌方法，可为下一步实验
奠定良好的基础。
2.3 不同毛黄堇外植体诱导愈伤组织的研究 取
毛黄堇植株的根、叶柄、叶片等幼嫩组织，用
表1 不同外植体来源对消毒效果的影响
Tab.1 Disinfection effi cacy of different explant source
外质体来源
野外
室内盆栽
接种数 (瓶)
30
30
污染数(瓶)
14
3
污染率(%)
46.7
10
表2 不同消毒处理对愈伤组织的影响
Tab.2 Effect of different disinfection treatment on callus
消毒剂
2%NaOCl
0.1%HgCl2
处理时间
3
4
5
3
4
5
污染率(%)
33.3
26.7
23.3
26.7
16.7
13.3
褐化率(%)
33.3
26.7
20.0
13.3
10.0
23.3
DOI:10.13728/j.1673-6427.2009.04.007
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MS+2,4-D1.0 mg•L-1 + 6-BA 0.2 mg•L-1 培 养 基 培
养，其生长情况见表 3。
从表 3 可以看出，叶柄为愈伤组织诱导培养的
最佳外植体，根次之。叶柄和根在相同的条件下诱
导率均较高，且诱导时间较短，组织疏松，生长良
好而且较快 ；幼根的诱导率为 63.3% ；叶柄的诱导
率为 86.7% ；叶片的诱导率仅为 6.7%，不宜作为愈
伤组织诱导培养的外植体。
相同的培养条件下，不同的外植体愈伤组织诱
导率不同。从实验结果看，按愈伤组织诱导率的大
小排序依次是 ：叶柄 > 幼根 > 叶片，说明同一植株
不同器官虽携带着相同的全套基因，但其组织培养
结果不一样，可能是与植物激素的分布有关，因植
物体内内源激素分布不均衡，导致基因表达不一致。
2.4 不同培养基对愈伤组织诱导效果的影响 为了
研究毛黄堇叶柄外质体脱分化生长所需最适营养条
件，选用 3 种具有一定代表性的培养基，即 MS、1
／ 2MS 、White 培养基，附加的外源激素相同，均
为 NAA 2.0 mg•L-1+BA 1.0 mg•L-1，结果见表 4。
从表 4 可知，MS 对诱导愈伤组织最为有利 ；
White 次之；1/2MS 诱导效果最差。试验结果表明：
在 1/2MS 培养基上外植体形成的愈伤组织较少，褐
化现象较严重，诱导率仅为 23.3％，因此 1/2MS 不
适合作为毛黄堇组培的基本培养基 ；在 White 培养
基上，外植体诱导率为 36.7％，生长状态较好，褐
变较轻，愈伤组织结构较紧密，生长较慢 ；培养效
果最佳的是 MS 培养基，诱导率达到了 76.7%，褐
变轻，愈伤组织大都呈淡黄色，结构疏松，生长旺盛。
因此，MS 培养基为毛黄堇组培的最适培养基。
3 结论
3.1 通过研究，运用组织培养技术选择毛黄堇叶
柄、幼根作为外植体培养获得试验的初步成功。
3.2 本次试验研究范围窄小、不全面，要获得毛黄
堇组织培养快繁的整套技术方案，要做的试验还很
多，有待进一步完善。
参考文献
[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第32卷)[M].北京:
科学出版社 ,1999:341,417~418,424.
[2] 秦松云 , 张天友 . 四川紫堇属药用植物的报告 [J]. 中国中药杂
志 ,1993,18(3):133~136.
[3] 吴 征 镒 , 苏 志 云 . 四 川 产 紫 堇 属 四 新 种 [J]. 云 南 植 物 研
究 ,1989,11(3):311~316.
[4] 苏志云.中国紫堇属新分类群[J].云南植物研究,1997,19(3):227~235.
表4 不同培养基对愈伤组织的诱导率比较
Tab.4 Comparison of callus induced by different media
培养基
MS
1/2 MS
White
激素配比 (mg•L-1)
NAA 2.0 + BA 1.0
NAA 2.0 + BA 1.0
NAA 2.0 + BA 1.0
接种数(瓶)
30
30
30
诱导率(%)
76.7
23.3
36.7
褐化率(%)
10.0
33.3
16.7
生长情况
快，疏松，淡黄色
缓慢，紧密，黄褐色
较慢，紧密，淡黄色
表3 不同外植体诱导愈伤组织比较
Tab.3 Comparison of callus induced by different explant
外植体
根
叶柄
叶片
接种数(瓶)
30
30
30
诱导率(%)
63.3
86.7
6.7
出愈时间(d)
11±1
10±1
13±1
生长情况
生长较好、较快
生长良好、快速
生长缓慢
山柰的组织培养及植株再生研究
谢 英 1，谢冰莹 2，廖莉莉 1，凌征柱 1，2*
（1. 广西大学，广西 南宁 530005; 2. 广西药用植物园，广西 南宁 530023)
收稿日期：2008-12-24
作者简介：谢 英（1983-），女，硕士研究生，主要从事药用植物组织培养研究，Email:yixionga11@163.com
*通讯作者：凌征柱，研究员，硕士生导师，Tel：0771-5602792
摘要 : 目的 对山柰进行组织培养研究，探讨快速繁殖山奈种苗技术。方法 用山柰带芽根茎作为外
植体，以 MS，White 和 B5 为基本培养基，附加不同浓度的植物生长调节剂进行培养。结果 芽的初代
诱导用 MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L 较好，诱导率 100% ；增殖继代用 MS+BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L
培养基，增殖系数达 3.96 ；诱导生根以 1/2MS+IBA2.0 mg/L+ NAA1.0 mg/L 为佳，根粗壮，生根率可达
100%。结论 本研究途径可为人工种植山柰提供优质种苗。
关键词：山柰 ; 组织培养 ; 再生植株
中图分类号：S322 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2009)03-0028-03