全 文 ：　2008-06
44(3)　
北京师范大学学报(自然科学版)
Journal of Beijing No rmal Univer sity(Na tural Science)
　
263　
藏药甘肃蚤缀的化学成分研究 Ⅱ＊
雷　宁1 , 2) 　杜树山2)　欧阳捷3)　邓志威3)　张文生2)　王永炎2)
(1)中国人民解放军第二炮兵总医院药剂科 , 100088 , 北京;
2)北京师范大学教育部资源药物工程研究中心 , 100088 , 北京;
3)北京师范大学分析测试中心 , 100875 , 北京)
摘要　应用硅胶柱色谱 、Sephadex LH-20 凝胶柱色谱等色谱技术分离纯化藏药甘肃蚤缀(A renaria kansuensis
Max im.)的化学成分 , 通过理化方法和波谱数据确定化合物结构.最后从φ=70%的乙醇提取物与大孔吸附树脂 φ=
50%的乙醇洗脱物中分离并鉴定了 6 个化合物 , 均为首次从该植物中分离得到 , 为该药的进一步研究开发提供了信息.
关键词　藏药;甘肃蚤缀;化学成分;黄酮
＊国家“十五”科技攻关计划资助项目(2001BA701A08a)
通信作者
收稿日期:2008-01-17
　　甘肃蚤缀(Arenaria kansuensis Maxim .)系传统
藏药 ,主要分布于青海 、西藏 、甘肃 、四川以及云南等
地 ,其干燥全草味苦 、性寒 ,具清热利肺 、退热止咳之功
效.藏医常用其治疗各种肺病 、淋病 、淋巴结核 、子宫病
以及筋骨疼痛;亦可治疗感冒 、黄疸 、风湿 、肾结石等
症[ 1-3] .现代药理研究表明 ,甘肃蚤缀具有抗炎 、免疫调
节 、抗缺氧和肿瘤抑制等作用[ 4-6] ,但对其药效的物质
基础尚不明确 ,系统的化学成分研究甚少.
为进一步揭示藏药甘肃蚤缀药理活性的化学物质
基础 ,我们对其全草的化学成分进行了一系列研究 ,已
经从中分离得到 5 个黄酮类化合物[ 7] ,在此后的研究
中我们又从中分离得到 6个单体化合物 ,包括 3 个酚
酸类化合物和 3个黄酮类化合物:阿魏酸(Ⅰ)、咖啡酸
(Ⅱ)、对羟基肉桂酸(Ⅲ)、木犀草素(Ⅳ)、芹菜素(Ⅴ)、
白杨黄酮(Ⅵ).以上 6个化合物为首次从该植物中分
离得到.
1　实验部分
1.1　仪器与材料　核磁共振光谱用 Bruker Avance
500型核磁共振谱仪测定;UV 用 Shimadzu UV2450
紫外可见分光光度计测定;APEX Ⅱ型 FT-ICR质谱
仪.Sephadex LH-20 为 Pharmacia 公司产品 , MCI
GEL CHP 20P 为日本三菱 化学品 公司产品 ,
Toyopearl HW-40C 为日本 TOSOH 公司产品.柱色
谱硅胶(100 ～ 200目)和薄层色谱硅胶 G 均为青岛海
洋化工厂产品 ,柱色谱用聚酰胺(100 ～ 200目)和薄层
色谱聚酰胺薄膜均为台州市路桥四甲生化塑料厂产
品.试验所用试剂均为分析纯.
植物样品购自青海省西宁市药材市场 ,经中国科
学院西北高原生物研究所卢学峰博士鉴定为石竹科蚤
缀属植物甘肃蚤缀 A .kansuensis的干燥全草 ,标本现
保存于北京师范大学资源学院教育部资源药物工程研
究中心.
1.2　提取分离　甘肃蚤缀干燥全草粗粉 3.0 kg ,以 3
倍量体积分数 φ=70%的乙醇加热回流提取 3次 ,每
次 1.5 h ,提取液合并浓缩成浸膏 , 用水分散成混悬
液 ,经 AB-8型大孔吸附树脂吸附 ,分别用 φ为 10%、
30 %、50%、70%、95%的乙醇梯度洗脱 ,回收乙醇得各
部分浸膏.取 φ=50%乙醇洗脱部分的浸膏(约 68.37
g)经硅胶柱色谱分离 ,氯仿-甲醇梯度洗脱得到 A ～ L
的 12个部分 ,其中 B 部分用 MCI GEL 除去色素 ,然
后经反复 Sephadex LH-20凝胶柱色谱和聚酰胺柱色
谱分离 、纯化 ,得到化合物 Ⅰ (6 mg)、化合物 Ⅱ (6
mg)、化合物 Ⅲ (4.5 mg).C 部分经反复 Sephadex
LH-20凝胶柱色谱和反相 C18柱色谱的分离与纯化 ,
得到化合物Ⅳ (14 mg)、化合物Ⅴ (4.5 mg)、化合物
Ⅵ (7 mg).
1.3　结构鉴定方法　本研究通过观察样品在提取 、分
离过程中的行为 ,测定化合物的相关理化性质并对照
文献 ,初步判断化合物的基本类型 ,利用 UV 、MS 和
NMR等现代光谱学技术测定化合物的光谱数据 ,经
过解析及官能团定性 、定量分析 ,将结果与已知化合物
进行比较 ,推断并确定化合物分子的平面结构.
2　结果与讨论
1)化合物Ⅰ :无色针状结晶(乙醇),易溶于乙醇
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和甲醇 , 在 UV 365 nm下显天蓝色荧光.EI-MS m/Z :
194[ M] + , 179[ M —CH3 ] + , 177 [ M —OH ] + , 123
[ M —CH CHCOOH ] + .1HNMR (CD 3OD , 500
MHz)δ:7.08(1H , d , J =7.1 Hz , H6), 6.82(1H ,
d , J =7.1 Hz , H5), 7.60(1H , d , J =16.0 Hz ,
H7), 6.34(1H , d , J =16.0 Hz , H8), 7.20(1H , s ,
H2), 3.91(3H , 3-OCH 3).13CNMR (CD3OD , 125
MHz)δ:126.5(C1), 110.2(C2), 149.0(C3), 148.0
(C4), 115.0(C5 , C8), 122.5(C6), 145.1(C7),
170.2(—COOH), 55.0(—OCH 3).以上数据与文献
[ 8]报道的阿魏酸数据基本一致.化合物Ⅰ与阿魏酸对
照品共薄层 , R f 值一致.
根据综上分析 ,确定化合物 Ⅰ为阿魏酸(Ferulic
acid).
2)化合物Ⅱ :淡黄色针状结晶(甲醇),易溶于丙
酮 、甲醇 , 在 UV 365 nm 下显天蓝色荧光.1HNMR
(CD3OD , 500 MHz)δ:7.09(1H , s , H2), 6.80(1H ,
d , J =7.8 Hz , H5), 6.98(1H , d , J =7.8 Hz ,
H6), 7.59(1H , d , J =15.5 Hz , H7), 6.29(1H , d ,
J =15.5 Hz , H8).13CNMR (CD3OD , 125 MHz)δ:
127.7(C1), 115.2(C2), 146.7(C3), 149.4(C4),
115.2(C5), 122.9(C6), 147.0(C7), 116.4(C8),
171.2(—COOH).
根据以上理化性质及光谱数据 ,对照文献[ 9] ,鉴
定该化合物为咖啡酸(Caffeic acid).
3)化合物Ⅲ :白色无定形粉末(甲醇),易溶于甲
醇.1HNM R (DMSO-d6 , 500 MHz)δ:7.64(2H , d ,
J =8.0 Hz , H2 , 6), 6.80(2H , d , J =8.0 Hz , H3 ,
5), 7.66(1H , d , J =15.5 Hz , H7), 6.31(1H , d ,
J =15.5 H , H8), 9.99(1H , s , 4-OH), 12.15(1H ,
s , —COOH).13 CNMR(DMSO-d6 , 125 MHz)δ:
125.4(C1), 130.2(C2 , 6), 115.9(C3 , 5), 159.7
(C4), 144.4(C7), 115.5(C8), 168.2(C9).
以上数据与文献[ 10-11]中的对羟基肉桂酸的光
谱数据一致 , 故鉴定化合物 Ⅲ为对羟基肉桂酸
(p-Hydroxycinnamic acid).
4)化合物Ⅳ:淡黄色粉末(甲醇),难溶于甲醇 ,易
溶于丙酮.聚酰胺薄层层析展开 , A lC l3-EtOH 溶液
(0.01 g·mL-1)显色 , UV 254 nm下为亮黄色荧光点.
1HNMR (DMSO-d6 , 500 MHz)δ:7.43(1H , dd ,
J =8.0 , 2.0 Hz , H6′), 7.41(1H , d , J =2.0 Hz ,
H2′), 6.89(1H , d , J =8.0 Hz , H5′), 6.68(1H , d ,
J =2.0 Hz , H8), 6.46(1H , s , H3), 6.20(1H , d ,
J =2.0 Hz , H6), 12.99(1H , s , 5-OH).13CNMR
(DMSO-d6 , 125 MHz)δ:164.4(C2), 103.3(C3),
182.1(C4), 157.7(C5), 99.3(C6), 164.6(C7),
94.3(C8), 161.9(C9), 104.1(C10), 119.4(C1′),
113.8(C2′), 146.2(C3′), 150.2(C4′), 116.5(C5′),
121.9(C6′).
根据以上理化性质及光谱数据 ,对照文献[ 12] ,鉴
定该化合物为 5 , 7 , 3′, 4′-四羟基黄酮 ,即木犀草素
(Luteo lin)
5)化合物Ⅴ:淡黄色粉末(甲醇),难溶于甲醇.聚
酰胺薄层层析展开 ,AlCl3-EtOH 溶液(0.01 g·mL-1)
显色 , UV 254 nm下为亮黄色荧光点.1HNMR (DMSO-
d6 , 500 MHz)δ:7.90(2H , d , J =8.3 Hz , H2′,
6′), 6.90(2H , d , J =8.3 Hz , H3′, 5′), 6.78(1H ,
d , J =2.0 Hz , H8), 6.49(1H , s , H3), 6.20(1H ,
d , J =2.0 Hz , H6), 12.99(1H , s , 5-OH), 10.45
(1H , s , 7-OH).13CNMR(DMSO-d6 , 125 MHz)δ:
164.8(C2), 103.5(C3), 182.3(C4), 157.9(C5),
99.5(C6), 164.5(C7), 94.5(C8), 161.9(C9),
104.3(C10), 121.8(C1′), 129.0(C2′, 6′), 116.5
(C3′, 5′), 162.2(C4′).
根据以上理化性质及光谱数据 ,对照文献[ 12] ,鉴
定该化合物为 5 ,7 , 4′-四羟基黄酮(5 ,7 , 4′-t rihydroxy-
f lavone),即芹菜素(Apigenin).
6)化合物Ⅵ :淡黄色粉末(乙醇),溶于甲醇 ,不溶
于丙酮.经聚酰胺薄层层析 , AlCl3-EtO H 溶液(0.01
g·mL-1)显色 , UV 254 nm下为亮黄色荧光点.1HNMR
(DMSO-d6 , 500 MHz)δ:13.01(1H , brs , 5-OH),
7.54(2H , m , H2′, 6′), 6.93(1H , s , H5′), 6.82
(1H , s , H3), 6.49(1H , d , J =2.0 Hz , H8), 6.19
(1H , d , J =2.0 Hz , H6), 3.89(3H , s , 3′-OCH3).
13CNMR(DMSO-d6 , 125 MHz)δ:163.9(C2), 103.7
(C3), 181.6(C4), 157.3(C5), 98.5(C6), 164.1
(C7), 93.8(C8), 161.5(C9), 102.9(C10), 119.0
(C1′), 110.4 (C2′), 149.7 (C3′), 147.7 (C4′),
116.0(C5′), 121.5(C6′), 55.9(3′-OCH 3).
根据以上理化性质和波谱数据 ,与文献[ 13-14] 对
照 ,鉴定该化合物为 5 ,7 , 4′-三羟基-3′-甲氧基黄酮 ,即
白杨黄酮(Chry soeriol).
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CHEMICAL CONSTITUENTS OF
ARENARIA KANSUENSIS MAXIM.Ⅱ
LEI Ning
1 ,2)　DU Shushan 2)　OUYANG Jie3)　DENG Zhiwei3)
ZHANG Wensheng2)　WANG Yongy an2)
(1)Departmen t of Pharmacy , th e Second Artil lery General Hospi tal , PLA , 100088 , Beijing , China;
2)Cen ter for Natu ral Medicine Engineering , Minist ry of Educat ion , College of Resou rces S cien ce and Technology ,
Beijing Normal University , 100088 , Beijing , China;
3)Analyt ical and T es ting Center , Beijin g Normal University , 100875 , Beijing , China)
Abstract　In this w o rk six compounds w ere obtained w i th various chromatog raphic isolat ion techniques
f rom A .kansuensis Maxim.A combination of physico-chemical prope rties and spect roscopic analy sis w ere used
to identify st ructures of these constituents.Ferulic acid (Ⅰ), caffeic acid (Ⅱ), p-hydroxycinnamic acid (Ⅲ),
luteo lin (Ⅳ), apigenin (Ⅴ)and chry soeriol (Ⅵ), were repo rted f rom Arenaria kansuensis Max im.fo r the
fi rst time.
Key words　Tibetan medicine;Arenaria kansuensis;chemical consti tuents;f lav onoids