全 文 ：苯酚-硫酸法测定桃叶鸦葱根中多糖的含量
杨　辉　赵　媛
(河北北方学院基础医学院药学系 , 河北 张家口 075000)
【摘要】　目的:提取桃叶鸦葱根中多糖并测定多糖的含量。方法:采用煎煮法提取桃叶鸦葱根中多糖 ,采用苯
酚-硫酸法测定多糖的含量。结果:煎煮法提取桃叶鸦葱根中多糖的提取率为 13.9%。葡萄糖在所试浓度范
围(0.03～ 0.08mg ·mL-1)内线性关系良好 , r=0.999 2。平均回收率为 101.7%, RSD=0.61%。桃叶鸦葱
根中多糖平均含量 96.64 mg· g-1 , RSD=0.10%。 结论:苯酚-硫酸法测定桃叶鸦葱根中多糖含量方法稳定
可行 ,简便。
【关键词】　桃叶鸦葱;多糖类;分光光度法
【中图分类号】R282　　【文献标识码】　　A　　doi:10.3969/ j.issn.1673-1484.2010.05.006
Determination of Polysaccharides in Scorzonera Sinensis Lipsch ,
Et Krasch by Phenol-sulfuric Acid Method
YANG H ui , ZHAO Yuan
Pharmacy Dep.Hebei No rth Univer sity , Zhang jiakou , 075000 , Hebei , China
【ABSTRACT】　Objective:To extr act Poly saccharides from S corzonera sinensis Lipsch , Et K rasch and deter-
mine the content of polysaccharide s.Methods:To ex tract Po ly saccharides w ith decoction method.The contents
of the Po ly saccharides in S corzonera sinensis Lipsch , Et K rasch were determined by Pheno l-sulfurie acid meth-
od.Results:The extr action yield o f Poly saccharides w as 13.9%, and the standard curve was excellent liner in
the concentra tion range of 0.03 ～ 0.08 mg ·mL-1 with co rrelation coefficient of r=0.999 2.The recove ry ra tes
wa s 101.7%, RSD=0.61%.The content of poly sacha rides fr om Scorzonera sinensis Lipsch , Et K rasch was
96.64mg · g-1 , RSD=0.10%.Conclusion:The me thod is pro ved to be stable , feasible and sim ple.
【KEYWORDS】　Scorzonera sinensis , Po ly saccharides , Spect rophotome try
　　桃叶鸦葱是菊科植物桃叶鸦葱(S corzonera
sinensis Lipsch , Et Krasch)的干燥全草 。广泛分布于
河北 、内蒙 、山东等地 。民间有蜥蜴喂食烟袋油(主要
成分为烟碱)后 ,用桃叶鸦葱的乳汁可瞬间解毒的报
道。近来证实鸦葱属植物有保肝[ 1] 及抗肿瘤[ 2] 的作
用。文献报道其化学成分主要为苯丙素 、木脂素及其
苷 、倍半萜及其苷 、三萜及其苷和黄酮类化合物[ 3-6] 。作
者在前期研究发现 ,桃叶鸦葱中含有大量多糖类成分。
多糖广泛存在于生物体中 ,是维持生命活动正常
运转基本物质之一 。近年来 ,植物多糖在抗肿瘤 、抗衰
老 、抗病毒 、抗炎及提高免疫功能等方面的药理作用受
到了人们的高度关注[ 7-9] 。本试验采用水提醇析的方
法提取桃叶鸦葱中多糖 ,采用苯酚-浓硫酸法[ 10] 测定
桃叶鸦葱多糖的含量 ,为桃叶鸦葱的开发应用提供理
论依据 ,也为其药理作用的进一步研究提供物质基础 。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　仪器　UV-2100 紫外可见分光光度计(北京
莱伯泰科仪器有限公司);微量分析天平(TG-322A上
海天平仪器厂);CS66-2电热恒温干燥箱(上海神模电
器有限公司)。
1.1.2　药品 、试剂
葡萄糖对照品(中国药品生物制品检定所),桃叶
鸦葱(采自河北省赤城县),其他试剂均为国产分析纯 。
1.2　方法
1.2.1　多糖的提取
取适量桃叶鸦葱根粉碎 ,粉末经 95%乙醇浸提 3
次 ,药渣置室温干燥 。称取药渣 25g ,加入 250mL 的
蒸馏水 ,煎煮 2h ,滤过 ,加入 4倍体积的无水乙醇 ,搅
匀 ,静置过夜 ,抽滤 ,所得沉淀依次用适量无水乙醇 、丙
酮 、乙醚洗涤 ,置干燥箱中干燥 ,称重 ,计算提取率。
1.2.2　桃叶鸦葱中多糖含量的测定
1.2.2.1　葡萄糖标准溶液的配制
精密称取 105℃干燥至恒重的葡萄糖 100mg ,置
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第 27 卷第 5 期
2010 年 10 月 　　　　　　　　　　
(医学版)
Journal o f Hebei Nor th University(Medical Edition)　　　　　　　　　　
Vo l.27 No.5
Oct.2010
100mL 的容量瓶中 ,加水溶解定容 ,摇匀 ,配成含葡萄
糖 100mg ·mL-1的溶液备用 。
1.2.2.2　多糖供试品溶液的配制
精密称取桃叶鸦葱多糖样品 6.0mg ,置 100mL 容
量中 ,加水溶解定容 ,摇匀备用。
1.2.2.3　苯酚试液的配制
取苯酚 100g ,加热蒸馏 ,收集馏分。精密称取该
馏分 3g ,置 50mL 棕色容量瓶中 ,加水溶解定容 ,摇
匀 ,避光密封备用 。
1.2.2.4　检测波长的确定
精密吸取葡萄糖标准溶液 1.0mL ,置锥形瓶中 ,
加入 1.0mL 苯酚试液摇匀 ,迅速加入浓硫酸 5.0mL ,
立即摇匀 , 室温放置 30min , 平行空白 , 显色后 , 从
300nm 到 550nm 扫描 ,确定最大吸收波长 。
1.2.2.5　标准曲线的制备
精密量取葡萄糖标准溶液适量 ,分别加水稀释制
成 0.03mg · mL-1 、0.04mg · mL-1 、0.05mg · mL-1 、
0.06mg · mL-1 、0.07mg · mL-1 、0.08mg · mL-1的溶
液 ,摇匀 。分别精密吸取上述不同浓度溶液 1.0mL ,
置锥形瓶中 ,加入 1.0mL 苯酚溶液 ,摇匀 ,迅速加入浓
硫酸5.0mL ,立即摇匀 ,室温放置 30min ,平行空白 ,在
490nm 波长处测定吸光度 ,以吸光度为纵坐标 ,葡萄
糖的浓度为横坐标 ,绘制标准曲线 。
1.2.2.6　精密度试验
精密称取桃叶鸦葱多糖样品 6.0mg ,置 100mL 容
量中 ,加水溶解定容 ,摇匀 ,按“2.2.5 标准曲线”项下
操作 ,平行 5份 ,测定记录吸光度 A ,计算其 RSD。
1.2.2.7　稳定性试验
精密称取桃叶鸦葱多糖样品 6.0mg ,置 100mL 容
量中 ,加水溶解定容 ,摇匀 ,按“2.2.5 标准曲线”项下
操作 ,分别于 20 、40 、60 、80 、100 、120 、140 、160min测
定吸光度 ,计算其 RSD ,考察供试品稳定性 。
1.2.2.8　重现性试验
取同一批药材粉末 5份 ,分别按上述方法制备供
试液 ,按“2.2.5标准曲线”项下操作 ,测定吸光度(A),
计算其 RSD。
1.2.2.9　回收率试验
精密称取桃叶鸦葱多糖样品 5份各 6.0mg ,加水
溶解后 , 定容至 100mL 容量瓶中 , 摇匀 , 精密吸取
1mL ,分别精密加入葡萄糖标准品 0.2mg , 按“ 2.2.5
标准曲线”项下操作 ,测定吸光度 ,计算回收率。
1.2.2.10　含量分析
精密称取桃叶鸦葱多糖样品 3份各 6.0mg ,加水
溶解后 ,定容至 100mL 容量瓶中 ,摇匀精密吸取供试
品溶液 1mL ,置锥形瓶中 ,按“2.2.5标准曲线”项下操
作 ,根据标准曲线计算含量。
2　结果
2.1　多糖的提取 选定条件提取桃叶鸦葱多糖的得率
为 13.9%。
2.2　桃叶鸦葱中多糖含量的测定
2.2.1　检测波长的确定
由图 1可见葡萄糖标准溶液在 490nm 处有较大
吸收 ,故选定 490nm为检测波长 。
图 1　葡萄糖标准溶液紫外光谱
2.2.2　标准曲线的制备
在 490nm 波长下测定吸光度 ,标准曲线方程为 A
=9.957 1C+0.069 1 , r=0.999 2。结果表明 ,葡萄糖
标准溶液在 0.03 ～ 0.08mg ·mL-1范围内与吸光度值
呈良好的线性关系 。
2.2.3　精密度试验
实验结果平均吸光度为 0.520 0 , RSD=0.07%;
浓度的平均值为 0.045 3mg ·mL-1 , RSD=0.10%,表
明实验精密度良好 。
2.2.4　稳定性试验
实验结果平均吸光度为 0.517 8 , RSD=0.23%;
浓度的平均值为 0.045 1mg ·mL-1 , RSD=0.28%,表
明该供试液稳定性良好 。
2.2.5　重现性试验
实验结果平均吸光度为 0.515 2 , RSD=0.09%;
浓度的平均值为 0.044 8mg ·mL-1 , RSD=0.24%。
2.2.6　回收率试验
结果表明 ,此操作方法平均回收率为 101.7%,
RSD=0.61%,符合实验要求。
2.2.7　含量测定
实验结果表明桃叶鸦葱多糖供试液中以葡萄糖计
的多糖平均浓度为 0.045 3mg ·mL-1 ,桃叶鸦葱中多
糖的平均含量为 96.64mg · g-1 , RSD=0.10%。结果
见表 1。
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2010年 10月 河北北方学院学报(医学版) 第 5期
医院感染鲍氏不动杆菌耐药性分析
何晓峰
(河北北方学院附属第一医院感染管理处 ,河北 张家口 075000)
【摘要】　目的:了解医院感染鲍氏不动杆菌的耐药性 , 指导临床抗菌药物的合理应用。方法:分析 2008-05—
2010-02 月河北北方学院附属第一医院感染患者标本中分离的鲍氏不动杆菌药敏结果。结果:共分离到 67
株鲍氏不动杆菌 ,以 ICU 为主 ,占 44.8%(30/67),其次为神经内科 、脑外科。所检标本以痰标本为主 83.6%
(56/ 67), 其次为伤口分泌物。分离的鲍氏不动杆菌对多种药物都产生了耐药 , 除左氧氟沙星耐药率最低为
32.8%,其它药物耐药率均>50%以上。结论:鲍氏不动杆菌引起的感染对抗菌药物耐药严重 ,呈多重耐药 ,
临床应按照药敏结果合理应用抗菌药物 , 并密切监测耐药谱变化。
【关键词】　鲍氏不动杆菌;交叉感染;抗菌药
【中图分类号】R378.99　　【文献标识码】　　B　　doi:10.3969/ j.issn.1673-1484.2010.05.007
Analysis on Drug Resistance of Nosocomial Acinetobacter baumannii Infection
HE Xiao-fe ng
The First A ffiliated Hospita l , Hebei Nor th Univ ersity , Zhangjiakou , 075000 , Hebei , China
【ABSTRACT】　Objective:To investig ate the drug resistance o f Acinetobacter baumannii infection and in-
struct usage o f antibac te rial medicine ra tionally.Methods:Making an assay on the antibio tic re sistance from all
the patients f rom 2008-05 to 2010-02.Results:67 str ains of Acinetobacter baumannii we re iso la ted.In the distri-
bution o f ho spital depa rtments intensive care unit(ICU)w as the highest , occupying 44.8%(30/67);The spu-
tum sample of patients w as most , occupy ing 83.6%(56/ 67).Conclusion:Acinetobacter baumannii show diversely
表 1　多糖的含量
编号 吸光度(A)
浓度
(mg·m L-1)
平均浓度
(mg· mL-1)
RSD
(%)
1 0.519 4 0.045 2 0.045 3 0.156
2 0.519 8 0.045 3
3 0.520 1 0.045 3
3　讨论
苯酚-硫酸法是多糖含量测定的常用方法之一 ,其
测定的原理是:先利用硫酸将多糖水解成单糖 ,并迅速
脱水生成糖醛 ,糖醛与苯酚缩合形成有色化合物 ,紫外
吸收值与糖含量呈线性关系 ,在 490nm 波长处有特征
吸收而测定的 。本方法操作简单 、显色稳定 、准确度
高 ,所需仪器和药品价格低廉 ,可作为桃叶鸦葱多糖的
常规检测方法 。
参 考 文 献
1　李泉妙.鸦葱中化学成分的研究及保肝药理活性的初探
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2　王斌 , 邱培菊 ,李国强 ,等.蒙古鸦葱抗肿瘤活性成分[ J] .中
国天然药物 , 2009 , 7(7):283-286.
3　宋桂全.桃叶鸦葱的栽培[ J] .特种经济动植物 , 2006 , 9(4):
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4　王斌 , 李国强 ,管华诗.蒙古鸦葱挥发油成分元素的 GC-MS
和 ICP[ J] .时珍国医国药 , 2007 , 18(10):2364-2365.
5　Parascho s S , Magiatis P , Kalpoutzakis E , et al.Three new
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6　Christian Z , Ernst PE , Sonja S , e t al.Ty ro lobibenzy ls E and
F f rom Sco rzonera humilis and distribution o f caffeic acid
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to chemist ry , 2003 , 63 , 61-67.
7　熊晨 , 王素敏 ,张然 ,等.植物多糖的一般研究[ J] .中国现代
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8　谭周进 , 谢达平.多糖的研究进展[ J] .食品科技 , 2004 , 15
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9　管军军 , 张春霞.多糖的研究[ J] .广东饲料 , 2003 , 12(3):
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10 谭晓虹 , 王治宝 ,李如章.北五味子中多糖含量的测定[ J] .
河北北方学院学报:医学版 , 2005 , 22(6):45-46.
(责任编辑:李蓟龙)
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