全 文 :·论著·
维药刺山柑水提物的降血糖作用研究 ①
朱晓薇1 张银玲 2 江发寿 3 陈 文 3
(1.石河子大学药学院药理学 2008级硕士研究生 ,新疆石河子 , 832002;
2.昌吉卫生学校药学教研组 ,新疆昌吉 , 831100;3.石河子大学药学院新疆特种植物
药资源省部共建教育部重点实验室 ,新疆石河子 , 832002)
【摘要】目的:研究刺山柑水提物的降血糖作用。方法:采用煎煮法得刺山柑的水提取物 ,将得到的提取物以链
脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠为模型 ,以体重 、血糖 、糖耐量为指标研究刺山柑提取物抗高血糖作用的药理活
性。结果:刺山柑水提物对正常小鼠的体重和血糖无显著作用 , 能明显降低糖尿病小鼠血糖水平 , 但不能使糖尿病
小鼠的体重增加;对正常小鼠的糖耐量无影响 , 而对糖尿病小鼠糖耐量有明显改善。 结论:刺山柑果实具有降低血
糖的作用。
【关键词】刺山柑;水提物;降血糖
中图分类号:R285.5 文献标识码:A
TheHypoglycemicEffectsofTheAqueousExtractofCapparisspinosaL.Fruits
ZHUXiao-wei1 , ZHANGYin-ling2 , JIANGFa-shou1 , CHENWen1
(1.ColegeofPharmacyShiheziUniversity/ KeyLaboratoryofPhytomedicineResources
ModernizationofTCM, ShiheziUniversity, XinjiangShihezi, 832002;
2.ChangjiHealthschoolpharmaceuticalresearchgroup, XinjiangChangji, 831100)
【Abstract】Objective:TostudythehypoglycemiceffectsoftheaqueousextractofCapparisspinosa.L.Methods:Pol-
ysaccharidesextractwaspreparedbythewaterextract.TheeffectoftheaqueousextractofCapparisspinosaonSTZ-indu-
cingdiabetesmelitusmodelwasinvestigatedbybodyweight, bloodglucoseandglucosetolerancetest.Results:Theaque-
ousextactscannotdecreasethebodyweightandthebloodglucoseinnormalmice.IthashypoglycaemiaefectinSTZdia-
beticmice, butitcannotimprovethebodyweightofdiabeticmice.Besidestherehasnomarkedchangesoftheglucosetol-
eranceinnormalmice, whereare, thediabeticmicehas.Conclusion:Capparisspinosa.L.fruithasprovedhypoglycemic
actionthusitisapotentialancillarydrugfordiabetes.
【Keywords】Capparisspinosa.L;aqueousextract;hypoglycemicefect
刺山柑(Capparisspinosa.L)为白花菜科山柑属
植物 ,具有舒张血管 、止血及抑制布氏杆菌和结核菌
等作用 。外用患处可治疗风湿类关节炎 [ 1] 、肩周炎
和疮毒。在世界其他国家刺山柑还有治疗肝硬
化 [ 2] 、抗氧化 [ 3、4] 、抑菌 [ 5] 、抗炎 [ 6] 等作用。近年
来 ,国外的一些研究发现 ,刺山柑还具有一定的降血
糖和降血脂功效 [ 7、 8] 。
本试验建立了链脲佐菌素糖尿病小鼠模型 ,观
察刺山柑果实水提取物对正常小鼠和糖尿病小鼠血
糖 、体重及糖耐量的影响 。
1 材料和方法
1.1 仪器及试药
酶标仪(美国 Thermo3001);高速离心机(上海
冠戈实业有限公司);UV755B型紫外分光光度计;
BS-110型万分之一电子天平(北京赛多利斯天平
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第 32卷 第 3期
农 垦 医 学
JournalofNongkenMedicine
Jun.2010
Vol.32 No.3
① 基金项目:科技支疆专项计划(2008ZJ14);科技人员服务企业行动项目(SQ2009GJG4101543)
通讯作者:陈 文 ,药剂学教授 , 从事新药及新制剂开发方向研究。
有限公司);水浴锅((北京长安科学仪器厂)。刺山
柑果实 ,葡萄糖氧化酶法测定试剂盒 ,链尿佐菌素
(Streptozocin, 046K1206),钒酸钠(Sodiummetavana-
date),其它试剂均为分析纯。
1.2 动物
昆明种小鼠 ,雄性 ,体重 24 ~ 28g,石河子大学
实验动物中心提供;实验前于室温 22 ~ 25℃、自然
光照 、自由饮水 、常规饲养 。
1.3 实验方法
1.3.1 链脲佐菌素高血糖小鼠模型的建立 昆明
种小鼠 , 24 ~ 28g,雄性 ,禁食(同时更换垫料)过夜
后 ,腹腔注射(ip)链脲佐菌素溶液 ,注射量为 0.1
mL/10g体重 。注射后恢复正常饮食 , 72 h后 ,再禁
食(同时更换垫料)12 h,眼眶静脉丛采血 ,取血清 ,
葡萄糖氧化酶法测血糖。取血糖值大于 11 mmol/L
的小鼠作为高血糖模型小鼠。
1.3.2 刺山柑果实水提物的制备 刺山柑果实粗
粉 500g加 10倍蒸馏水浸泡 30 min,武火煮沸 ,文
火再煮 30 min,纱布过滤 ,滤渣再加 5倍量水同上法
再处理 2次 ,分别煮沸 30 min, 15 min,合并 3次滤
液 ,于 70 ℃水浴中浓缩得浸膏 ,将浸膏进行冷冻干
燥成粉末 ,使用前用蒸馏水稀释至适当比例。
1.3.3 刺山柑果实水提物对正常小鼠血糖和糖耐
量的影响 正常昆明种小鼠 ,随机分为 4组 ,每组
10只 。即:刺山柑水提物低剂量组 、刺山柑水提物
高剂量组 、阴性对照组和阳性对照组 。禁食过夜后 ,
灌胃(ig)给药 ,分别 30mg/kg刺山柑果实水提物 、
120mg/kg刺山柑果实水提物 、等容的蒸馏水 、20mg/
kg钒酸钠溶液。 ig容积为 0.2mL/10g体重。每日
1次 ,连续 14d,测给药 1d, 7d, 14d后的空腹血糖值 ,
分别于末次给药前禁食(不禁水)12h,称重给药后
2h眼眶静脉丛采血 ,取血清 ,测血糖 。第 14d给药
前禁食 12h,空腹眼眶采血作为糖耐量 0h基础血糖
值 ,然后给药并在给药后 0.5h给以葡萄糖 2.5g/kg
体重灌胃 ,在给葡萄糖后 0.5h、2h眼眶采血测血糖
含量 ,观察受试物对正常小鼠与糖尿病小鼠的糖耐
量(以给葡萄糖后各时间点血糖曲线下的面积表
示)的影响。
1.3.4 刺山柑果实水提物对链脲佐菌素糖尿病小
鼠血糖和糖耐量的影响 取 40只已经建好高血糖
模型的小鼠 ,随机分成糖尿病模型组 ,阳性药物对照
组 ,刺山柑果实水提物高 、低剂量组 ,每组 10只 。刺
山柑果实水提物每天按 30mg/kg, 120mg/kg体重灌
胃;钒酸钠 20mg/kg体重灌胃;模型组和空白组每
天分别灌胃等体积生理盐水 ,连续进行 14d,分别在
实验的第 7d、14d将小鼠禁食 12h,称重后采血 、分
离血清 ,测定血糖。
2 结果
2.1 刺山柑果实水提物对正常小鼠血糖的影响
正常小鼠血糖给予刺山柑果实水提物高低两个剂量
7d后 ,与空白对照组比较无显著性差异 , 14d后正
常小鼠空腹血糖有所降低 ,但与空白对照组比较 ,差
异无显著性 ,见表 1。
表 1 刺山柑果实水提物对正常小鼠血糖的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg)
血糖值(mmol· L-1)
0d 7d 14d
空白组 - 6.12±1.08 5.32±0.58 4.57±0.98
低剂量组 30 4.61±1.70 4.52±0.38 5.34±1.32
高剂量组 120 5.84±0.68 4.55±1.50 4.38±1.03
钒酸钠组 20 5.39±1.38 5.49±0.76 4.29±0.48
2.2 刺山柑果实水提物对正常小鼠体重的影响
刺山柑果实水提物高剂量组 、低剂量组和钒酸钠组
在持续给药 14d后 ,与空白对照组比较 , 各给药组
小鼠体重无显著性差异 ,表明刺山柑果实水提物对
正常小鼠体重没有影响 ,见表 2。
表 2 刺山柑果实水提物对正常小鼠体重的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg)
血糖值(mmol· L-1)
0d 7d 14d
空白组 - 20.14±1.64 20.69±1.47 22.35±3.90
低剂量组 30 22.07±1.14 20.36±2.00 21.85±2.75
高剂量组 120 19.97±1.45 19.98±2.03 21.50±3.37
钒酸钠组 20 20.22±1.66 21.05±1.80 22.05±3.90
2.3 刺山柑果实水提物对正常小鼠糖耐量的影响
刺山柑果实提取物高低两个剂量组和钒酸钠组的
血糖曲线下面积与空白对照组比较差异无统计学意
义(P>0.05),结果表明各给药组对正常小鼠的糖
耐量无显著改善作用 ,见表 3。
2.4 刺山柑果实水提物对糖尿病小鼠血糖的影响
糖尿病小鼠 ,从给药后第 7d到第 14d,刺山柑水
果实提物高剂量组能显著降低血糖水平 (P<0.
05)。钒酸钠组在持续给药 14d时 ,血糖水平也显
著下降(P<0.01),差异有统计学意义(见表 4)。
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第 3期 农 垦 医 学 第 32卷
表 3 刺山柑果实水提物对正常小鼠糖耐量的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg) 给 GS前血糖值
给 GS后血糖值
0h 0.5h 2h 曲线下面积
空白组 - 4.57±0.98 4.57±0.98 9.07±1.69 5.27±0.77 14.17±3.41
低剂量组 30 5.34±1.32 5.34±1.32 10.24±3.71 6.01±1.04 16.08±4.82
高剂量组 120 4.38±1.03 4.38±1.03 9.41±2.21 4.98±0.93 14.24±3.17
钒酸钠组 20 4.29±0.48 4.29±0.48 8.33±3.53 5.17±0.96 13.28±4.37
表 4 刺山柑果实水提物对糖尿病小鼠血糖的影响( x±s, n=10)
组别 n 剂量(mg/kg)
血糖值(mmol· L-1)
0d 7d 14d
空白组 10 - 4.74±1.07 4.20±0.94 5.68±1.07
模型组 10 - 13.03±4.81 11.08±1.96 12.27±5.11
低剂量组 10 30 12.62±6.23 11.62±4.76 11.17±3.85
高剂量组 10 120 13.80±7.67 9.15±3.89* 8.81±3.06*
钒酸钠组 10 20 13.00±6.18 6.50±2.12** 6.32±1.97**
注:与模型对照组比较 , *P<0.05, **P<0.01
2.5 刺山柑果实水提物对糖尿病小鼠体重的影响
持续灌胃给药 14d,刺山柑高低两个剂量组的小鼠体
重与空白组比较 ,均显著下降 ,说明刺山柑水提物不
能纠正糖尿病时所有的物质代谢紊乱(见表 5)。
2.6 刺山柑果实水提物对糖尿病小鼠糖耐量的影
响 与模型对照组比较 ,刺山柑水提物高剂量组 、低
剂量组灌服葡萄糖后 2h的血糖曲线下面积降低 ,差
异有统计学意义(P<0.05),说明刺山柑果实水提
物对糖尿病小鼠葡萄糖耐受能力具有增强作用 ,能
够抑制餐后血糖的上升 , (见表 6)。
表 5 刺山柑果实水提物对糖尿病小鼠体重的影响( x±s, n=10)
组别 n 剂量(mg/kg)
血糖值(mmol· L-1)
0d 7d 14d
空白组 10 - 23.08±1.36 21.30±2.40 24.13±1.98
模型组 10 - 23.80±1.82 20.83±2.44* 18.30±2.36*
低剂量组 10 30 23.80±2.24 20.47±2.78 19.51±3.02*
高剂量组 10 120 24.77±2.74 22.30±2.74 19.65±2.82*
钒酸钠组 10 20 24.71±3.05 24.28±2.78 22.05±3.02*
注:与空白组比较 , *P<0.05。
表 6 刺山柑果实水提物对糖尿病小鼠糖耐量的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg) 给 GS前血糖值
给 GS糖值
0h 0.5h 2h 曲线下面积
模型组 - 12.28±2.79 12.28±2.79 39.88±14.08 16.79±6.33 55.54±9.52
低剂量组 30 10.12±2.09 10.12±2.09 30.72±4.16 15.26±6.13 44.6±9.28*
高剂量组 120 9.31±4.07 9.31±4.07 29.85±12.46 13.54±7.13 42.3±9.83*
钒酸钠组 20 6.32±2.27 6.32±2.27 18.75±11.19 8.33±4.83 26.58±8.83**
注:与模型对照组相比 , *P<0.05, **P<0.01
3 讨论
钒酸盐是一种酪氨酸磷酸酶抑制剂 ,在体内外
均有类似胰岛素的作用 ,可刺激脂肪和骨骼对葡萄
糖的吸收 ,糖原合成和葡萄糖的氧化酵解 ,钒酸钠具
有明显的胰岛素样降糖作用 ,能降低链脲佐菌素致
糖尿病动物的血糖水平 ,但对正常动物血糖水平作
用较弱 ,故为准确地探讨受试药品的药理作用 ,本实
验采用钒酸盐作为链脲佐菌素致糖尿病动物的阳性
对照药 。
本实验观察了刺山柑果实水提取物对正常小鼠
和糖尿病小鼠空腹血糖和糖耐量的影响 ,结果表明 ,
刺山柑果实水提取物对正常小鼠无降血糖作用 ,对
正常小鼠体重没有影响 ,亦不能增强正常小鼠的负
荷糖耐量 ,说明刺山柑果实的降血糖作用不是通过
刺激胰岛素分泌来实现的 。刺山柑果实水提取物可
降低实验性糖尿病小鼠的血糖 ,模型小鼠给刺山柑
果实水提物后与糖尿病模型组糖耐量有显著性差
异 ,但是试验中我们观察到刺山柑果实水提物未能
使小鼠体重快速增加 ,说明刺山柑果实水提物不能
完全纠正糖尿病时所有的物质代谢紊乱 ,可能与本
实验中链脲佐菌素所致糖尿病模型小鼠血糖过高 ,
胰岛 β细胞损伤较大有关。
多糖有广泛的生物学活性 ,很多天然药物中提
取得到的多糖均被证实有降血糖作用 ,对刺山柑果
实的化学成分进行了初步分析后发现 ,该果实含酚
类 、有机酸 、生物碱 、氨基酸 、多肽(或蛋白质)、皂
苷 、多糖(或苷类)、香豆素(或内酯类)化合物 、黄酮
(或苷类)、挥发油等成分。推测可能是这些成分中
的一种或是几种的相互作用对糖尿病小鼠有治疗作
用。因此 ,刺山柑果实水提物降糖活性的机制及其
有效成分有待进一步研究。
参考文献:
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2004, 94(3):143~ 148
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queousextractofCapparisspinosaL.innormalanddiabeticrats
[ J].JEthnopharmacol.2005, 98(3):345~ 350
[收稿日期:2010-06-07]
PTEN蛋白在人脑星形细胞肿瘤中的表达及其意义
吴永刚 吴红星 郑 勇 杨小朋
(新疆维吾尔自治区人民医院神经外科 ,新疆乌鲁木齐 , 830001)
【摘要】目的:探讨 PTEN蛋白在不同分化程度的星形细胞肿瘤组织中的表达。方法:应用 S-P免疫组化技术
检测 46例星形细胞肿瘤中 PTEN蛋白的表达。结果:脑星形细胞肿瘤组织中 PTEN蛋白的阳性表达率为 63.4% ,
低分化(Ⅲ ~ Ⅳ级)星形细胞肿瘤组织中 PTEN蛋白的阳性表达显著低于高分化(Ⅰ ~ Ⅱ级)星形细胞肿瘤(p<0.
01);且病理分级与 PTEN蛋白的阳性表达呈负相关(r=-0.612, p<0.01)。结论:PTEN基因表达缺失与脑星形
细胞肿瘤的分化程度与演进密切相关。
【关键词】PTEN蛋白;星形细胞肿瘤;免疫组化
中图分类号:R34 文献标识码:A
ExpressionandsignificanceofPTENproteininbrainastrocytoma
WUYong-gang, WUHong-xing, ZHENGYong, YANGXiao-peng
(DepartmentofNeurosurgery, People′sHospitalofXinjiangUygurAutonomousRegion, XinjingUrumqi, 830001)
【Abstract】Objective:ToinvestigatePTENproteinexpressioninbrainastrocytomawithvariousgrades.Methods:
ExpressionofPTENproteinwasstudiedbyimmunohistochemicalstainingin46casesofastrocytoma.Results:Thepositive
rateofPTENproteinwas63.4% inastrocytoma;Thepositiveratesdecreasedwithprogressionofpathologicalgrade(p<0.
01);ThepathologicalgradewasassociatedwithPTENproteinexpressioninastrocytoma(r=-0.612, p<0.01).Conclu-
sion:PTENgenemutationanddeletionplayakeyroleinastrocytomapathogenesisandprogression;PTENexpressionis
closelycorrelatedtotumordifferentiationinastrocytoma.
【Keywords】PTENprotein;astrocytoma;immunohistochemistry
PTEN(phosphataseandtensinhomologdeletedon
chromosometen)是 1997年发现的第一个具有磷酸
酶活性的抑癌基因 ,被认为是继 p53之后又一引人
注目的抑癌基因 。 PTEN的变异与多种肿瘤有关 ,
而脑胶质瘤是与 PTEN基因缺失及突变关系最为密
切的恶性肿瘤之一 [ 1] 。我们应用免疫组化方法检
测 46例人脑星形细胞肿瘤中 PTEN蛋白的表达 ,分
析其与肿瘤恶性程度关系及临床意义 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 病例 收集新疆维吾尔自治区人民医院
2006年 9月 ~ 2010年 3月手术切除的脑星形细胞
肿瘤标本 46例 。男性 26例 ,女性 20例。年龄 7岁
~ 72岁 ,平均 45.6岁。患者均为原发 ,术前均未接
受化疗放疗;按 WHO脑肿瘤分类 ,本组星形细胞肿
瘤Ⅰ级 11例 , Ⅱ级 13例 , Ⅲ级 12例 , Ⅳ级 10例。
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第 3期 农 垦 医 学 第 32卷