全 文 ：［收稿日期］ 20101013(002)
［基金项目］ 河南省科技厅科技攻关重点项目(102102310019)
［第一作者］ 邢煜君，讲 师，从 事 药 用 资 源 研 究，Tel:
13837860896
［通讯作者］ * 康文艺，教授，从事天然药物活性成分研究，E-
mail:kangweny@ hotmail. com
固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析贵州
产杏叶茴芹挥发性成分
邢煜君，常星，张倩，康文艺 *
(河南大学中药研究所，河南 开封 475004)
［摘要］ 目的:研究贵州产杏叶茴芹挥发性成分。方法:采用固相微萃取技术对杏叶茴芹挥发性成分进行提取，GC-MS
进行鉴定。结果:从杏叶茴芹挥发性成分中得到 28 个组分，鉴定了其中的 19 个化合物，占挥发性成分的 86. 23%。主要挥发
性成分为(S)-1-甲基-4-(5-甲基-1-甲基-4-己烯基)环己烯 (48. 83%)和 1-(1，5-二甲基-4-己烯基)-4-甲基苯 (6. 15%)。结
论:杏叶茴芹挥发性成分主要是萜烯类。
［关键词］ 杏叶茴芹;挥发性成分;固相微萃取技术
［中图分类号］ 284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)04-0093-03
Analysis of Volatile Compounds from Pimpinella candolleana in
Guizhou by SPME-GC-MS
XING Yu-jun，CHANG Xing，ZHANG Qian，KANG Wen-yi *
(Institute of Chinese Materia Medica，Henan University，Kaifeng 475004，China)
［Abstract］ Objective:The volatile compounds from Pimpinella candolleana were studied. Method:Solid-
phase micro-extraction (SPME)was used to extract the volatiles. The chemical constituents were analyzed by gas
chromatography-mass spectrometry (GC-MS)coupled with Kovats index. Result:Twenty-eight compounds were sep-
arated and 19 compounds were identified，representative of 86. 23% of total volatile compounds. The main com-
pounds were (S)-1-methyl-4-(5-methyl-1-methylene-4-hexenyl)-cyclohexene (48. 83%)and 1-(1，5-dimethyl-4-
hexenyl)-4-methyl-benzene (6. 15%). Conclusion:The main compounds in P. candolleana were terpenes.
［Key words］ Pimpinella candolleana;volatile compounds;SPME
杏叶茴芹 Pimpinella candolleana Wight et Arn 是
伞形科茴芹属植物，分布于西南及广西等地。味辛、
微苦，性温。全草供药用，具有温中散寒，行气止痛，
祛风活血，解毒消肿的功效。用于脘腹寒痛，消化不
良，痢疾，风寒感冒，跌打肿痛，痈肿疮毒，毒蛇咬伤
等病症［1］。杏叶茴芹为贵州民间常用草药，被载入
贵州药材地方标准。近年来该药已被研制成治疗肝
炎的复方制剂投放市场［2］。
危英等［3］用水蒸气蒸馏法提取挥发油，鉴定出
36 个化合物，但国内外未见用固相微萃取(SPME)
法分析杏叶茴芹挥发性成分。
1 材料
杏叶茴芹于 2007 年 8 月采集于贵州，由黔南州民
族师范学院郭治友副教授鉴定为伞形科茴芹属杏叶茴
芹 P. candolleana ，标本存于河南大学中药研究所。
美国安捷伦公司 GC 6890 N GC /5975 MS 气相
色谱-质谱联用仪，美国 Supelco 公司手动 SPME 装
置，萃取头为 65 μm 聚二甲基硅氧烷(PDMS-DVB)，
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第 17 卷第 4 期
2011 年 2 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 4
Feb.，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.04.034
C6-C26正构烷烃(alfa aesar)。
2 方法
使用前先将 SPME的萃取纤维头在气相色谱的进
样口老化 10 min，老化温度 250 ℃，载气体积流量 1. 0
mL·min － 1。取阴干杏叶茴芹地上部分 0. 7 g，置于5 mL
的样品瓶中，盖上盖子，插入 65 μm PDMS萃取纤维头，
于 80 ℃下顶空取样 30 min 后，立即取出，在气相色谱
仪进样口(250 ℃)，脱附 1 min。
2. 1 GC-MS 分析条件 色谱:HP-5 MS 石英弹性毛
细管柱(0. 25 μm × 250 μm × 30. 0 m);载气为高纯
氦气(99. 999%)，流速 1. 0 mL·min － 1;进样口温度
250 ℃;色谱柱初始温度 50 ℃(保持 1. 0 min)，以 3
℃·min － 1升温至 120 ℃(保持2 min)，最后以 4 ℃·
min － 1升温至 210 ℃(保持10 min)。不分流进样。
质谱:电离方式 EI 源，电离能量 70 eV;离子源
温度为 250 ℃;四极杆温度 150 ℃;传输线温度为
280 ℃;四级杆温度为 150 ℃;电子倍增器电压
1 765 V。质量扫描范围 m / z 30 ～ 440，谱图检索:采
用 RTLPEST3. L 和 NIST05. L 进行检索。
2. 2 保留指数测定 按照文献［4-6］进行 KI (Ko-
vats 保留指数)计算。
3 结果与讨论
从杏叶茴芹挥发油的 28 个组分中鉴定出 19 个
化合物，其相对含量占总挥发油组分峰面积的
86. 23%，主要含萜烯类、甘菊环类和萘类衍生物等
物质。其中(S)-1-甲基- 4-(5-甲基-1-甲基-4-己烯
基)环己烯 (48. 83%)含量最高，其次为 1-(1，5-二
甲基-4-己烯基)-4-甲基苯 (6. 15%)。见表 1。
表 1 杏叶茴芹挥发性化学成分和相对含量
No. 化合物
相对质量
分数 /%
KI
1 ［3R-(3. alpha.，3a. beta.，7. beta.，8a. alpha.)］-2，3，4，7，8，8a-hexahydro-3，6，8，8-tetramethyl-1H-3a，7-
methanoazulene［3R-(3α，3aβ，7β，7aα)］-2，3，4，7，8，8a-6 氢-3，6，8，8-四甲基-1H-3a，7-亚甲基甘菊环
0. 96 1 400. 86
2 caryophyllene 石竹烯 2. 36 1 405. 13
3 2，6-dimethyl-6-(4-methyl-3-pentenyl)-bicyclo［3. 1. 1］hept-2-ene α-香柠檬烯 3. 21 1 421. 94
4 Z，Z，Z-1，5，9，9-tetramethyl-1，4，7，-cycloundecatriene Z，Z，Z-1，5，9，9-四甲基-1，4，7，-环十一碳三烯 0. 92 1 440. 46
5 (1. alpha.，4a. alpha.，8a. alpha.)-1，2，3，4，4a，5，6，8a-octahydro-7-methyl-4-methylene-1-(1-methylethyl)-
naphthalene (1α，4aα，8aα)-(1α，4aα，8aα)-1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢-7-甲基-4-亚甲基-1-(1-甲基乙烯基)-萘
3. 97 1 445. 87
6 1-(1，5-dimethyl-4-hexenyl)-4-methyl-benzene 1-(1，5-二甲基-4-己烯基)-4-甲基苯 6. 15 1 472. 08
7 ［4aR-(4a. alpha.，7. alpha.，8a. beta.)］-decahydro-4a-methyl-1-methylene-7-(1-methylethenyl)-naphthalene
［4R-(4aα，7α，8aβ)］-十氢-4a-甲基-1-亚甲基-7-(1-甲基乙烯基)-萘
2. 76 1 473. 79
8 ［2R-(2. alpha.，4a. alpha.，8a. beta.)］-8-dimethyl-2-(1-methylethenyl)-1，2，3，4，4a，5，6，8a-octahydro-4a-
naphthalene［2R-(2α，4aα，8aβ)］-8-二甲基-2-(1-甲基乙烯基)-1，2，3，4，4a，5，6，8a-八氢-4a-萘
0. 93 1 481. 20
9 (R)-2，4a，5，6，7，8-hexahydro-3，5，5，9-tetramethyl-1H-benzocycloheptene (R)-2，4a，5，6，7，8-六氢-3，5，5，
9-四甲基-1H-苯并环庚烯
2. 49 1 485. 19
10 (S)-1-methyl-4-(5-methyl-1-methylene-4-hexenyl)-cyclohexene (S)-1-甲基-4 -(5-甲基-1-亚甲基-4-己烯
基)环己烯
48. 83 1 502. 40
11 (1S-cis)-1，2，3，5，6，8a-hexahydro-4，7-dimethyl-1-(1-methylethyl)-naphthalene δ-芘澄茄烯 1. 03 1 507. 49
12 1，2，3-trimethoxy-5-(2-propenyl)-benzene 1，2，3-三甲氧基-5-(2-丙烯基)苯 2. 26 1 542. 82
13 caryophyllene oxide 石竹烯氧化物 0. 85 1 564. 08
14 Z-. alpha. -trans-bergamotol Z-α-反式香柠檬醇 0. 62 1 598. 51
15 apiol 芹菜脑 2. 29 1 607. 08
16 ［1aR-(1a. alpha.，4. alpha.，4a. beta.，7b. alpha.)］-1a，2，3，4，4a，5，6，7b-octahydro-1，1，4，7-tetramethyl-
1H-cycloprop［e］azulene 1aR-(1aα，4aα，7β，7aβ，7bα)］-1a，2，3，4，4a，5，6，7b-十八氢-1，1，4，7-四甲基-4-亚
甲基-1H-环丙烷［e］苷菊环
1. 82 822. 43
17 6，10，14-trimethyl-2-pentadecanone 6，10，14-三甲基-2-十五烷酮 1. 87 1 834. 17
18 1，2-benzenedicarboxylic acid butyl 2-methylpropyl ester 邻苯二甲酸丁基二甲基酯 0. 72 1 938. 26
19 n-hexadecanoic acid 棕榈酸 2. 19 1 963. 64
与文献报道［4］的水蒸气蒸馏法 (SD)提取挥发
性成分相比，含有石竹烯、芘澄茄烯、α-香柠檬烯和
棕榈酸 4 种相同成分。其中甘菊环类 (2. 78%)和
萘类 (7. 66%)化合物的含量明显增加，但有 15 个
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2011 年 2 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 4
Feb.，2011
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
化学成分在水蒸气蒸馏法没有得到。甘菊环烷是生
药母菊的有效成分，可用于治疗胃炎、胃溃疡、阴道
炎、肌肉疼痛和痤疮等，这提示甘菊环类化合物可能
是温中散寒，行气止痛功效的活性成分。
文中提取的挥发油成分与文献报道的不同，即
使成分相同含量也有所不同，如石竹烯和芘澄茄烯
等，这可能与植物的生长环境、气候条件、采收时间
和炮制工艺有关，同时与所采用的样品前处理方法
和分析方法有关。
［参考文献］
［1］ 国家中医药管理局中华本草编委会 . 中华本草 . 第 15
卷［M］.上海:上海科学技术出版社，1999:5198.
［2］ 包骏 .贵州苗族医药研究与开发［M］. 贵阳:贵州科技
出版社，1999:200.
［3］ 危英，张旭，危莉，等 . 杏叶防风挥发油化学成分分析
［J］.贵阳中医学院学报，2005，27(4):56.
［4］ 康文艺，姬志强，王金梅 . 普通凤丫蕨叶挥发性成分分
析［J］.中成药，2009，31(3):439.
［5］ 康文艺，王金梅，姬志强 . 迎春挥发性成分 HS-SPME-
GC-MS 分析［J］. 天然产物研究与开发，2009，21(1):
84，121.
［6］ Kang W Y，Ji Z Q，Wang J M. Composition of the essen-
tial oil of Adiantum flabellulatum［J］. Chem Nat Compd，
2009，45(4):575.
［责任编辑 邹晓翠］
［收稿日期］ 20100929(006)
［基金项目］ 山东省科技发展计划项目(2007GG2NS02052)
［第一作者］ 宋艳梅，在读博士，讲师，研究方向:中药资源开发与质量控制研究，Tel:0531-89628172，E-mail:yanmeisong1@ yahoo. com. cn
［通讯作者］ * 李峰，医学博士，博士生导师，教授，从事中药质量控制研究，Tel:0531-89628172，E-mail:ly0123@ hotmail. com
瓜蒌种子蛋白质 6 种提取方法比较
宋艳梅，李峰 * ，周丽曼
(山东中医药大学药学院，济南 250355)
［摘要］ 目的:建立适合于瓜蒌种子的蛋白质提取方法。方法:比较水溶液直接提取法(3 种)、三氯乙酸(TCA)-丙酮法、
三羟甲基氨基甲烷(Tris)-丙酮法、蛋白质提取液提取法等 6 种蛋白质提取方法所获瓜蒌种子总蛋白含量、聚丙烯酰胺凝胶电
泳的谱带等方面的差异。结果:蛋白质提取液提取法、TCA-丙酮法提取蛋白含量较高，但杂质多，电泳谱带严重展宽而且明显
拖尾;Tris-丙酮法提出的蛋白质种类缺失严重;直接提取法提取蛋白含量少，但杂质少，电泳谱带清晰，离心 2 次谱带更加清
晰。结论:水溶液直接提取法最适合用于聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质提取液提取法提出蛋白质含量最多。
［关键词］ 瓜蒌;蛋白质;聚丙烯酰胺凝胶电泳
［中图分类号］ 284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)04-0095-03
Comparison of Protein Extraction Methods of Trichosanthis Fructus
SONG Yang-mei，LI Feng* ，ZHOU Li-man
(College of Pharmacy，Shandong University of Traditional Chinese Medicime，Jinan 250355，China)
［Abstract］ Objective:To determine the protein extraction method of Fructus Trichosanthis. Method:The
protein yield，protein purity and polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE)patterns were determined and analyzed.
Result:More proteins were extracted by the method of protein extracted liquid and trichloroacetic acid(TCA)-ace-
tone，but their bands were not clear and the resolution was low because of more impurities extracted. It waseasy to
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第 17 卷第 4 期
2011 年 2 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 4
Feb.，2011