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西南齿唇兰的组织培养与快速繁殖



全 文 :第 23卷 第 1期 文山学院学报 Vol.23 No.1
2010年 3月 JOURNALOFWENSHANUNIVERSITY Mar.2010
西南齿唇兰的组织培养与快速繁殖
张 铁 1, 2 , 李洪超1, 2
(1.文山学院 生化系 , 云南 文山 663000;2.文山州生物资源开发研究中心 , 云南 文山 663000)
收稿日期: 2010-01-10
基金项目:文山师范高等专科学校基金项目 “文山金线莲资源调查及开发利用研究”(2003201)
作者简介:张 铁(1969-), 男 , 彝族 , 云南建水人 , 副教授 , 主要从事植物种质资源的研究与开发。
中图分类号:Q949.718.43 文献标识码:A 文章编号:1674-9200(2010)01-0143-02
1 植物名称
西南齿唇兰 [ Anoectochiluselwesi(Clarkeex
Hook.f.)KingetPantl] (图 1), 别名:西南开唇兰
(横断山区维管植物 、 中国兰花全书)、 锺氏齿唇兰
(台大实验林研究报告)、 锺氏金线莲 (台湾兰科植
物彩色图志)[ 1] 。
2 材料类别
种子。
3 培养条件
种子萌发培养基: (1)MS+100 mL·L-1椰汁;
(2)1/2MS+100mL· L-1椰汁。原球茎继代增殖培养
基: (3)MS+6 -BA1.0 mg· L-1 (单位下同)
+NAA0.5mg·L-1; (4)MS+6-BA0.5 mg· L-1
+NAA1.0。生根培养基: (5)1 /2MS+6-BA0.2
+NAA0.05+AC(活性碳)0.5 mg· L-1 +蛋白胨
2 g·L-1 +100mL·L-1香蕉汁 。以上培养基中均加
入 3%的蔗糖 、 5.5 g卡拉胶 , pH5.6 ~ 5.8。培养
温度 (25±2)℃, 光照每天 10 ~ 12 h。
4 生长与分化情况
4.1 材料的无菌处理
供试种子来源于移栽 1年的野生西南齿唇兰未
开裂的蒴果 。首先在超净工作台内将蒴果用 75%的
酒精处理 30 s, 无菌水冲洗 3 ~ 5次 , 将种子取出 ,
再用 0.1%的 HgCl2溶液浸泡 10 min, 无菌水冲洗 3
~ 5次 , 用无菌滤纸吸干种子表面水分 。用解剖刀
切开蒴果 , 将种子接种到培养基上。
4.2 种子萌发
将种子分别接种到萌发培养基 (1)和 (2)
上 , 暗培养 30d后 , 可见白色原球体出现 (图 2),
转入光下培养 , 1周后原球茎转绿 (图 3), 4周后
原球茎上长芽 。培养基 (1)的萌发率比较低 , 在
50%左右 , 且培养 1个月后发现部分原球茎死亡;
培养基 (2)上种子的萌发速度和生长速度更快 ,
约有 85%萌发 , 结果表明 1/2MS培养基较 MS培养
基更有利于西南齿唇兰种子萌发 。
4.3 原球茎继代增殖
将初代培养的原球茎和芽分别转接至培养基
(3)和 (4)上继代增殖培养 , 在培养基 (3)和
(4)上原球茎大多形成植株 , 但是在培养基 (4)
上原球茎增殖 、生长速度最快 (图 4), 约 50 ~ 60d
能继代增殖 1次。由此可见 , 生长素 NAA和细胞分
裂素 6-BA组合是原球茎继代增殖的主要因素 , 以
细胞分裂素与生长素浓度比为 1∶2时效果最佳 。
4.4 生根与移栽
将增殖瓶中 3 ~ 4 cm长的苗切下 , 接入培养基
(5)中进行根的诱导。 15 d开始生根 (图 5), 生
根率可达 98%, 待根长至 3 ~ 4 cm时 , 生长为高 3
~ 5cm的小苗 , 在室温下炼苗 1周 , 取出洗去根部
培养基 , 移栽至腐叶土∶锯木 (2∶1)的基质中 。管
理中保持适度温湿度 , 置于阴凉通风处栽培 , 期间
不要浇水 , 有利于新根生长和防止病害发生 , 4周
后可以进行正常水 、肥 、 药管理 , 成活率可达 90%
以上。
5 意义与进展
西南齿唇兰为兰科开唇兰属植物 , 为国家 II级
保护植物 (第二批), 西南齿唇兰主要靠有性繁殖
和无性繁殖两种方式繁衍种群 , 种子自然繁殖非常
困难 , 自然增殖率低 , 通过种子进行组织培养可以
解决这个问题 。同属的金线莲 、台湾金线莲和滇越
金线莲的组织培养已有报道 [ 2-5] , 但西南齿唇兰的
组织培养和快速繁殖尚未见报道。本文研究结果对
开齿唇兰属植物的保护与开发 , 有一定的参考价值 。
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第 23卷 文山学院学报 2010年 第 1期
参考文献:
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2002, (4):33-34.
[ 3]  段玉云 , 曾黎琼 ,程在全 .台湾金线莲的组织培养与快
速繁殖 [ J] .植物生理学通讯 , 2005, (4):194.
[ 4]  李秀军 , 陈穗云 , 王玉梅 , 陈永哲 .台湾金线莲(Aoec-
tochilusformosanus)的组培快繁研究 [ J] .青海师范大学
学报(自然科学版), 2004, (3):91-93.
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文山师范高等专科学校学报 , 2006, (3):110-114.
(责任编辑 刘常福)
(上接第 131页)
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[ 2]  莱斯利· P·斯特弗 ,杰里·盖尔 主编 .高文 ,徐斌艳 ,
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[ 3]  倪文锦 , 谢锡金.新编语文课程教学论 [ M] .上海:华东
师范大学出版社 , 2006.
[ 4]  董蓓菲 .语文教育心理学 [ M] .上海:华东师范大学出
版社 , 2006.
TheViewoftheNewCourseofChineseLanguagefromthePerspectiveof
ConstructivismPsychology
LICong-yu
(ChineseDepartment, WenshanUniversity, WenshanYunnan663000, China)
Abstract:ConstructivismPsychology, anewstreamineducationalpsychology, generatesuniqueideasinepiste-
mology, viewpointsaboutstudentandteaching, thusbeingsignificanttoeducationreformanddevelopmentindifer-
entnations.Thispaperexplorestheinfluenceofconstructivismoncuriculmseting, teachingdesign, classroom
teachingmodelandteachingasessmentofthecourseofChineselanguage.
Keywords:constructivism;psychology;thecourseofChineselanguage;influenceandenlightenment.
(责任编辑 查明华)
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