全 文 ：中药新药与临床药理 2012年 5月第 23卷第 3期
收稿日期：2011- 12- 05
作者简介：蔡金艳，女，讲师，研究方向：天然药物活性成分和创新药物研究。 Email：caijy928@yahoo.com.cn。
基金项目：国家自然科学基金（81001628）。
兰科 开唇兰属 有 40多种，分布于亚洲热带到
大洋洲，我国有 20个种属及 2个变种。金线莲为兰
科开唇兰属珍稀濒危药用植物，主产于我国福建、
台湾和云南等省[1-2]，民间素有“药王”、“金草”之
美誉，其味甘微苦，性平微寒，具有清热凉血、祛
风利湿、强心、固肾、利尿、平肝、降血压、解毒、
止痛、镇咳等功效，民间主要用于治疗高血压、糖
尿病、心脏病、肺炎、急慢性肝炎、肾炎等症[3]。云
南文山州地处云南省东南部，有 5 种开唇兰属植物：
花叶开唇兰 A. roxburghii、滇越金线兰 A. chapaensis、
齿唇兰 A. lanceolatus、艳丽齿唇兰 A. moulmeinensis
和西南齿唇兰 A. elwesii。作为药用金线莲的有：花
开唇兰属 3种植物提取物对大鼠高脂模型血脂及肾功能的影响
蔡金艳 1，2，朱 恩 1，王义娜 1，王成蹊 1，张德志 1，祝晨蔯 2（1. 广东药学院药科学院，广州 510006；2. 广州中
医药大学中药学院，广州 510006）
摘要：目的 研究开唇兰属植物齿唇兰 A. lanceolatus、 艳丽齿唇兰 A. moulmeinensis 和西南齿唇兰 A. elwesii
的总膏对高脂饮食联合链脲佐菌素（STZ）诱导的大鼠模型血脂四项和肾功能的影响。方法 高脂饮食联合 STZ
诱导的大鼠模型，分别灌胃给予 3种总膏，测定给药后大鼠血浆的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂
蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、肌酐（CRE）和尿素氮（BUN）。肾脏切片，进行病理学检
查。结果 与模型组比较，3种植物提取物中艳丽齿唇兰总膏对于改善血脂代谢和减少肌酐和尿素氮的综合影
响最有效，差异具有统计学意义（P < 0.05），其次是齿唇兰总膏。结论 艳丽齿唇兰总膏可能具有较好的降血
脂作用及改善糖尿病肾病并发症的作用。
关键词：齿唇兰；艳丽齿唇兰；西南齿唇兰；高脂饮食；链脲佐菌素；血脂；肾功能；大鼠
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1003-9783（2012）-03-0271-04
doi：10.3969/j.issn.1003-9783.2012.03.009
Effect of Extracts from Three Different Species of Anoectochilus on Blood Lipid and Renal Function in Dia－
betic Rats Induced by High Lipid Diet Plus STZ
CAI Jinyan1，2，ZHU En1，WANG Yina1，WANG Chengxi1，ZHANG Dezhi1，ZHU Chenchen2（1. School of Pharmacy，
Guangdong Pharmaceutical College，Guangzhou 510006，China；2. School of Chinese Materia Medica，Guangzhou
University of Chinese Medicine，Guangzhou 510006，China）
Abstract：Objective To investigate the effect of total extracts from three different species of Anoectiochilus on blood
lipid and renal function in diabetic rats induced by high lipid diet plus streptozocin（STZ）. Methods The total extracts
were prepared from A. lanceolatus，A. moulmeinensis and A. elweslii，respectively. The rat models were established
by high lipid diet plus STZ，and the model rats were given gastric gavage of three kinds of total extracts. Plsama lev－
els of total cholesterol（TC）， triglyceride（TG）， low density lipoprotein cholesterol（LDL-C），and high density
lipoprotein cholesterol（HDL-C），creatinine（CRE），blood usea nitrogen（BUN） in rats were assayed. Renal morpho－
logical examination was performed. Results On the whole，the total extracts from A. moulmeinensis showed the best
effect on improving lipid metabolism and renal function， the differences being significant compared with the model
group（P<0.05）． Conclusion The total extract from A. moulmeinensis may be the active part for reducing blood lipid
and improving renal function．
Keywords：A. lanceolatus；A. moulmeinensis；A. elweslii；High Lipid diet； Streptozocin；Blood lipid；Renal
function；Rats
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Traditional Chinese Drug Research ＆ Clinical Pharmacology，2012 May，Vol．23 No．3
叶开唇兰和滇越金线兰，民间常把它们混为“金线
莲”，作同一药物使用 [4]。金线莲药材为无花全草干
品，难以从性状鉴别。齿唇兰、艳丽齿唇兰和西南
齿唇兰在民间也常用于治疗糖尿病、肾病等。目前
野生金线莲日渐匮乏，价格昂贵，且市场较为混乱，
急切需要科学的方法对金线莲相关品种进行药用研
究。近年对金线莲 [5-11]的化学成分和药理活性有较多
研究，但是齿唇兰、艳丽齿唇兰和西南齿唇兰的报
道仅限于物种鉴定 [4]、资源调查 [12]、组织培养 [13]等方
面，对其药理活性和化学成分研究笔者未见报道。
本研究采用高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素（STZ）诱
导的糖尿病模型， 探寻齿唇兰、艳丽齿唇兰和西南
齿唇兰 3种植物提取物对 II型糖尿病动物模型血脂
和肾功能的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物 健康的 4～5周雄性 SD大鼠 60只，体
质量 80～110 g，购于广东省医学实验动物中心，许可
证号： SCXK（粤）2008-0002。饲养在室温，18～25℃，
相对湿度 50 ％～80 ％的环境条件下，每笼 6 只，
共分 10 笼，自由采食、饮水，适应饲养 10 d。高
糖高脂饲料（配方：蛋黄 2.5 ％、蔗糖 20 ％、猪油
10 ％、基础饲料 67.5 ％）喂养 4周后，腹腔注射 STZ
（35 mg·kg-1）造模。基础料的营养成分符合国标《GB
1492413-2001实验动物小鼠大鼠配合饲料》的营养标
准。
1.2 试剂 链脲佐菌素（STZ），批号：S0130，美国
Sigma 公司，临用前用 0.1 mol·L-1柠檬酸盐缓冲液
（pH 4.4）配成浓度为 1 %的溶液（10 mg·mL-1）；甘油
三酯（TG，批号：20110413）、总胆固醇（TC，批号：
20110620）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL，批号：
20110425）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL，批号：
20110604）试剂盒，北京北化康泰临床试剂有限公
司；肌酐（CRE，批号：20110920）、尿素氮试剂盒
（BUN，批号：20110921），南京建成生物工程研究所。
1.3 供试药 25 kg 西南齿唇兰、19.75 kg 齿唇兰、
12.6 kg艳丽齿唇兰全草鲜品，购于云南文山。经广
东药学院中药学院马鸿雁老师鉴定分别为兰科开唇
兰属西南齿唇兰 A. elwesii、齿唇兰 A. lanceolatus和
艳丽齿唇兰 A. moulmeinensis。自然晾干，分别得 2.6
kg、2.25 kg和 1.5 kg干品，经剪碎后用 95 %乙醇加
热回流提取 4 次，每次 4 h，过滤，回收溶剂，得
493.8 g、622.6 g和 394.5 g总膏。
1.4 实验方法 各组大鼠高糖高脂饲料喂养 4 周，
禁食 12 h 后，将 STZ 用 0.1 mmol·L-1，pH 4.2 的无
菌柠檬酸缓冲液配制成 1 ％STZ 溶液，且避光、冰
浴、即用。按 35 mg·kg-1 腹腔注射 STZ造模，继续
高脂饮食，观察大鼠饮食、饮水量、尿量、毛色等情
况，2周后测随机血糖，选取血糖高于 11.1 mmol·L-1
者作为高血糖实验大鼠。
将高血糖模型大鼠随机分成 5组，模型对照组、
阳性药对照组、齿唇兰总膏、艳丽齿唇兰总膏和西
南齿唇兰总膏给药组，每组 8只，正常对照组 8只。
所有总膏给药剂量折算为生药材均为 4 g·kg-1，模型
对照组及正常对照组给予同体积生理盐水，阳性对
照组每日给予 60 mg·kg-1盐酸二甲双胍。连续灌胃
给药 14 d，每日观察记录体质量、饮食、饮水、垫
料，隔日检测尿糖水平，每周检测血糖值（取尾静
脉血）。
给药 2周后，将所有 SD 大鼠禁食过夜，3 %
戊巴比妥（30 mg·kg-1）麻醉大鼠，将鼠仰卧固定于鼠
固定板上，剪去胸腹部位的被毛，用 75 %酒精消毒
皮肤，剪开腹腔，腹主动脉采血，血样置入肝素-锂
抗凝真空管中，3000 r·min-1 离心 10 min，分离血
浆。测定血浆肌酐、尿素氮、甘油三酯、总胆固醇、
高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量。
取肾脏，用 10 % 福尔马林浸泡，固定、染色、镜
检，HE染色观察病理组织学变化。
1.5 统计学处理方法 用 Spss11.0 软件进行统计学处
理，数据以均数±标准差（x± s）表示，组间分析的数
值变量采用成组设计的 t检验，对前后对照的数值变
量采用配对设计的 t 检验，P ＜ 0.05为差异有统计学
意义。
2 结果
2.1 血脂四项检测结果 造模后糖尿病大鼠逐渐出现
毛色灰暗、多饮、多食、多尿、消瘦等症状。如表 1
所示，与模型组相比，艳丽齿唇兰总膏给药组大鼠
的血甘油三酯含量降低。3种植物提取物给药组的总
胆固醇均低于模型组，差异有统计学意义（P < 0.05）。
3种植物提取物给药组大鼠的低密度脂蛋白胆固醇的
含量与模型组比较，差异均无统计学意义。齿唇兰
总膏给药组和艳丽齿唇兰总膏给药组大鼠的血浆高
密度脂蛋白含量明显升高（P < 0.05）。
2.2 血浆肌酐和尿素氮含量结果 3种植物提取物给
药组的肌酐值显著低于模型组，齿唇兰和艳丽齿唇
兰总膏给药组的尿素氮含量比模型对照组降低，差
异具有统计学意义（P < 0.05），提示供试样品对糖尿
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中药新药与临床药理 2012年 5月第 23卷第 3期
病肾损害可能有较好的保护作用。肾脏肥大指数（肾
质量/体质量比值）指标检测发现，阳性组和艳丽齿
唇兰总膏给药组与模型组相比显著降低。
表 2 开唇兰属 3种植物提取物对大鼠肾功能的影响（n=8，x±s）
Table 2 Effect of three extracts from Anoectochilus on renal func-
tion in diabetic rats
注：与模型对照组比较， *P < 0.05；与正常对照组比较，△P < 0.05。
2.3 肾脏病理学检查结果 见图 1。模型组血管充血
严重，可见广泛的小血管及静脉严重充血，部分小
血管破裂，集合管上皮广泛地坏死，脱落，管腔内
可见血细胞，管型尿，严重蛋白尿，血尿。西南齿
唇兰总膏、艳丽齿唇兰总膏和阳性药二甲双胍给药
组肾小管、肾小球形态和染色基本正常。肾小管管
腔较规则，核大、圆、染色深，胞浆丰富，个别区
域肾小管上皮细胞肿胀，出现部分核溶解。齿唇兰
给药组肾脏切片可见肾小管上皮细胞明显的水肿和
广泛的空泡变性。
3 讨论
糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病
常见的并发症，也是糖尿病患者的主要死亡原因之
一。糖尿病导致的肾脏损害几乎可累及肾脏的所有
结构，而且一旦出现肾功能损害，其进展速度亦远
快于非 DN患者。因此，预防和延缓 DN并发症的发
生和发展，对提高糖尿病患者的存活率，改善其生
活质量具有十分重要的意义。中医药在控制 DN病情
发展、调节代谢方面的作用已得到证实和肯定[14]。糖
尿病肾损伤的形态学变化过程的初期病理改变表现
为肾脏肥大，肾小球血流量增加，然后肾小球系膜
细胞增殖，系膜细胞外基质增加，肾小球基底膜增
厚，最后发展成为肾小球硬化。而肾脏肥大是出现
最早、最明显的肾脏病理改变，能否控制糖尿病肾
脏肥大，是治疗有无成效的标志之一。肾质量/体质
量比值是衡量肾脏肥大较客观的指标，可以排除因
体质量影响对肾重的观察及每个动物本身肾脏随月
龄增加而增长的因素，使表示肾重增长的参数更为
客观[15]。艳丽齿唇兰总膏给药组的肾肥大指数明显降
低，表明该植物对防止肾脏肥大相关的病理改变有
较好的预防作用。
本研究采用高糖、高脂膳食成功制备胰岛素抵
抗大鼠模型，腹腔注射 STZ 诱导 II 型糖尿病肾病
（DN）模型，肾脏随之而来的损害与时间成正比，且
病理生理比较符合人类 II 型糖尿病肾病的特点，适
合用于 DN早期防治措施的研究[16]。本实验采用此方
法制备的动物模型生化指标与正常对照组比较有明
显差异，但肾脏病理未见到肾小球弥漫性硬化及结
节性硬化的典型改变，而仅见轻度的病理损害，符
合 DN的早期研究。
血清中 TC、TG 和 LDL-C水平已成为动脉粥样
硬化病的重要危险因子，而 HDL-C 是冠心病的负危
险因素，其含量越低，则冠心病的发病率越高。本
研究结果表明，3种植物总膏对血脂四项的影响略有
不同，但总体上可看出艳丽齿唇兰总膏能降低血清
中 TC和 TG，升高 HDL-C，提示艳丽齿唇兰总膏具
有明显的降血脂功效，可能对高血脂有一定的预防
和治疗作用。本研究中，艳丽齿唇兰总膏给药组的
表 1 开唇兰属 3种植物提取物对大鼠血脂的影响（x±s，n=8）
Table 1 Effect of three extracts from Anoectochilus on blood lipids
组 别
正常对照组
模型对照组
二甲双胍对照组
艳丽齿唇兰总膏给药组
西南齿唇兰总膏给药组
齿唇兰总膏给药组
剂量/mg·kg-1
-
-
60
4000
4000
4000
TG/ mg·dL-1
14.124±1.024
16.148±3.460
22.145±4.844△
13.979±1.903*
24.221±10.900△
18.858±6.488
TC/mg·dL-1
35.203±7.814
39.100±1.730△
46.194±1.644△
36.909±11.765*
36.332±7.958*
34.948±5.536*
HDL/ mmol·L-1
0.602±0.012
0.572±0.091△
0.504±0.068△
0.589±0.085*
0.572±0.068△
0.589±0.107*
LDL/ mmol·L-1
1.208±0.340
1.349±0.089△
1.195±0.398*
1.377±0.214△
1.423±0.299△
1.323±0.064
注：与模型对照组比较， *P < 0.05；与正常对照组比较，△P < 0.05。
组 别
正常对照组
模型对照组
二甲双胍对照组
艳丽齿唇兰总膏给药组
西南齿唇兰总膏给药组
齿唇兰总膏给药组
剂量/mg·kg-1
-
-
60
4000
4000
4000
肌酐/ μmol·L-1
56.374±4.560
100.833±9.886△
96.250±2.917△
77.917±10.747*△
80.463±6.453*△
88.611±13.433*△
尿素氮/ mmol·L-1
4.203±0.814
10.181±2.421△
11.017±0.855△
8.498±2.689*△
10.884±0.909△
6.137±0.024*
肾肥大指数
3.050±0.490
3.586±0.214△
3.109±0.213*
3.051±0.194*
3.535±0.360△
3.474±0.192△
图 1 大鼠肾脏病理学改变（HE染色，×40）
Figure 1 Morphological examination of the kidneys with HE stain-
ing（×40）
1. 齿唇兰总膏给药组 2. 西南齿唇兰总膏给药组 3. 艳丽齿唇兰总膏给药组
4. 二甲双胍给药组 5. 模型组Ⅰ 6. 模型组Ⅱ
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CRE和 BUN值显著低于模型组和其他给药组，且该
给药组大鼠的肾脏病理切片结果显示肾脏形态和结
构优于模型组，其次是西南齿唇兰总膏和齿唇兰总
膏。表明 3种植物对糖尿病肾病并发症可能有较好
的改善作用，尤其对血脂代谢和肾功能改善均有较
好效果的艳丽齿唇兰总膏，其化学成分未见研究报
道，值得进一步研究。
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（编辑：邓响潮）
收稿日期：2011- 10- 18
作者简介：冯静，女，硕士研究生，研究方向：动脉粥样硬化基础与临床。Email：459561117@qq.com。通讯作者：何艳，副教授，硕士生导师，
研究方向：动脉粥样硬化基础和临床。Email：physicianheyan@126.com。
基金项目：贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目（2005225）。
银杏黄酮苷元对兔颈动脉粥样硬化及 NOX2、NOX4表达的影响
冯 静 1，何 艳 2，吴立荣 2，刘兴德 2，陈 云 2，李安敏 2（1. 贵阳市第一人民医院，贵阳 550002；2. 贵阳医
学院附属医院心内科，贵阳 550004）
摘要：目的 探讨银杏黄酮苷元（GFA）对兔颈动脉粥样硬化及斑块处 NOX2、NOX4表达的影响。方法 24只
健康新西兰雄性大白兔随机分为对照组、假手术组、模型组、治疗组 4组。对照组予普通饲料，其余各组均予
高脂饲料，假手术组行颈外动脉结扎，模型组和治疗组行左颈总动脉内膜球囊损伤，治疗组每日予 GFA（25
mg·kg-1）干预 4周，检测血脂水平；HE染色观察左颈总动脉形态，测定损伤处内膜面积及内膜中膜面积比值；
免疫组化染色和实时荧光定量 PCR（Real-time PCR）检测颈动脉斑块处 NOX2、NOX4表达。结果 与模型组比
较，银杏黄酮苷元明显降低颈动脉内膜面积及内膜/中膜面积，下调斑块处 NOX2、NOX4蛋白和 mRNA表达（P
< 0.05）。结论 银杏黄酮苷元可干预动脉粥样硬化病变形成，其作用可能与抑制 NOX2、NOX4表达有关。
关键词：银杏黄酮苷元；动脉粥样硬化；尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶
中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1003- 9783（2012）-03-0274-05
doi：10.3969/j.issn.1003-9783.2012.03.010
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