全 文 ：南方 园 艺Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｈｏｒｔｉｃｕｌ ｔｕｒｅ 2 0 1 5 ， 2 6 （ 2 ） ： 4 1 － 4 2ｎｆｙｙｂｊｂ＠  1 6 3 ．ｃｏｍ
锦叶榄仁的离体组织培养与快速繁殖
武爱龙
（湛江师范 学院基础教育学 院 ， 广东 湛江 5 2 4 0 3 7 ）
摘要 ： 针对錦叶榄仁的 离体组织培养条件进行探索 ， 以期建立和完善其 离体快速繁殖体系 ，为 实现规模化生产锦叶
榄仁种苗奠定基础 。锦叶榄仁的 离体组织培养与快速繁殖结果表明 ， 以叶片 、嫩枝为外植体 ， ＭＳ＋ 3 ． 0 ｍｇ／Ｌ 6－ＢＡ＋ 0 ． 4 ｍｇ／
Ｌ 2 ． 4 －Ｄ＋0 ． 3 ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ为愈伤组织诱导培养基 ， ＭＳ＋ 3 ． 0ｍｇ／Ｌ 6 －ＢＡ＋ 0 ． 4ｍｇ／ＬＮＡＡ为不定 芽诱导分化培养基 ， 1 ／ 2 ＭＳ＋
2 ％￣ 3％戾糖＋0 ． 8％￣ 1 ． 0％琼脂为 生根培养基 ， 泥炭土 ：珍珠岩＝ 5 ： 1 的配方基质为 育苗基质 ，最终离体快速繁殖获得的錦叶
揽仁植株成活率一般在 8 0％以上 。
关键词 ：锦叶榄仁 ； 组织培养 ； 快速繁殖
中图分类号 ： Ｓ 6 8 7文献标志码 ：Ａ文章编号 ： 1 6 7 4 － 5 8 6 8－ （ 2 0 1 5 ） 0 2－ 0 0 4 1 － 0 2
ｑ引会＊ ＮＡＡ （萘乙酸 ） ； （ 2 ）ＭＳ＋ 3 ． 0 ｍｇ／Ｌ 6 －ＢＡ＋ 0 ． 4 ｍｇ／Ｌ 2 ， 4－Ｄ ＋ 0 ． 3 ｍｇ／ＬＮＡＡ ；（ 3 ）ＭＳ＋ 3 ． 0ｍｇ／Ｌ 6 －ＢＡ ＋ 0 ． 1ｍｇ／Ｌ锦叶揽仁 （ Ｔｅｎｎｉｎａｉｉａｍａｎ ｔａｌｙＴｒｉｃ ｉｏｌｏｒ ）是小叶榄 2 ， 4 ＿Ｄ ＋ 0 ． 4 ｍｇ／ＬＮＡＡ 。 不定芽诱导分化培养基为 ：Ｉ的栽培变种 ［ 1 ’ 2 ］ ，株高可达  1 0 ｍ ’ ｆｔ｜枝轮生 ’ 呈水平
（ 4 ）ＭＳ ＋ 2 ． 0 ｍｇ／Ｌ 6 －ＢＡ ＋ 0 ． 4 ｍｇ／ＬＮＡＡ ； （ 5 ）ＭＳ ＋ 3 ． 0展开 ；且主干端直 ’树姿优美 ，层次分明 ’ 绿化 、美聽 ｍｇ／Ｌ  6 －ＢＡ＋ 0 ． 2ｍｇ／ＬＮＡＡ ；（ 6 ）ＭＳ＋ 3 ． 0 ｍｇ／Ｌ 6 －ＢＡ＋果 良好 ，非常适于庭园绿化 。近年来 ， 侧枝呈层状水平，ｔＮ ｉ ｌ ／ｒａ／ｉ
分布 、淡■賴±■ 白就黄―断榄仁
在华南地区绿化工程中备受青睐气 锦叶榄仁生长速
度慢 ， 需 4年 以上才能长至胸径 5 ￣ 6 ｃｍ ， 苗圃存量少 ， ？ ． 二士二曲如办
其价格 比树榄仁觸 1 0倍 ， 且仍有上觀势 。 断！ ｆ
榄仁喜欢高温多湿环境 ， 只适应在輔地区 ， 要求丨 ｎ 上将 叶片巧人 7 5％酒精 漂洗 （ 1ｓ以 内 ） ， 转入 0 ． 1 ％
极限最低温度不能低于 5 ＜£ ，无霜冻 。 此外 ， 经过多年 升亲溶液 中消毒 5 ｍ ｉｎ ，再用无菌水冲洗 3 ￣ 4次 ， 切去
观察均未发賴叶榄仁开花结果 ，Ｍ關了蘭种 種备用 。 同样 ， 在无菌餅下郷叶榄仁雜放入
的有性繁殖 ， 因此只能通过无性繁殖 （扦插 、嫁接和离 7 5％酒精 中浸泡 3 0 ￣ 6 0 ｓ ， 转入 0 ． 1％￣ 0 ． 2％升賴液 中
体组培快繁 ）进行育苗 。 目前 ，生产上一般是通过嫁接 消毒 6 ￣ 1 0 ｍｉｎ后 ， 无菌水 冲洗 3 ￣ 4次 ， 切去叶柄两端坏
方式生产锦叶榄仁苗 ，其方法原始费时费工 ， 且无法
实现规模化生产种苗ｗ 。 为此 ，本研究针对锦 叶榄仁 1 3 培养条件
的离体组织培养条件进行探索 ， 以期建立和完善其离 培养温度及光照条件 ：温度 2 1Ｔ ，光照强度 1 6 0 0 ｌｘ ，
体快速繁殖体系 ， 为实现规模化生产锦叶榄仁种苗奠光照时间 1 4 ｈ 。
定基础 。、 2 结果与分析
1 材 “料与方法 2 ． 1
1 ． 1 试验材料 将备用外植体切成 0 ． 1 ？ 0 ． 3ｃｍ的小块接种于愈伤
锦叶榄仁为湛江南国热带植物 园健壮植株 ，取植组织诱导培养基 （ 添加 0 ． 8％琼脂 、 3 ％蔗糖和 0 ． 1 ％活性
株刚展开的 叶片作外植体材料 。叶片愈伤组织诱导的炭 ）上培养 3 5ｄ后 ， 在根芽切 口 处可膨大形成愈伤组
培养基为 ： （ ｌ ） ＭＳ ＋ 2 ． 0 ｍｇ／Ｌ 6 － ＢＡ （ 6 －苄氨基腺嘌织 。 不同培养基的锦叶榄仁幼叶诱导效果不同 ，其 中
呤 ）＋ 0 ． 1 1 1 1 8／ 1 ＾ 2 ， 4－ 0 （ 2 ， 4 －二氯苯氧 乙酸 ） ＋ 0 ． 2  1 1 1 8 ／￡以培养基 （ 1 ） 的诱导率最低 ， 培养基 （ 2 ）和培养基 （ 3 ）
收稿 日 期 ： 2 0 1 5 － 0 3 － 1 0
作者简介 ：武爱龙 （ 1 9 7 8 － ） ，男 ，讲师 ， 主要从事植物组织培养及育种研究工作 ， Ｅ－ｍａｉ ｌ ：ｗｕａｉ ｌｏｎｇ 8 3 9 0 ＠ 1 2 6 ．ｃｏｍ
？ 4 2 ．

南方园艺

第 2 6 卷
的诱导率基本一致 ， 但培养基 （ 3 ）诱导获得的愈伤组即 同步性好 ； （ 3 ）在保存和繁育优 良突变体或优 良杂
织在后期现出棉花絮状的通明泡沫 ，未转变成浅绿色种一代方面也具有非常重要的 意义 ［ 5 ］ ；（ 4 ） 可迅速满
的愈伤组织 。 即培养基 （ 2 ）最适合用于锦叶榄仁愈伤足市场对锦叶榄仁种苗的需求 ，促进锦叶榄仁的大面积
组织诱导 。 推广种植 。 本研究结果表明 ，锦叶榄仁的离体组织培养
2 ． 2 愈伤组织分化效果与快速繁殖体系为 ： 以叶片 、 嫩枝为外植体 ， ＭＳ＋ 3 ． 0
将诱导获得的愈伤组织接种到诱芽培养基上 ， 培ｍｇ／Ｌ 6－ＢＡ＋ 0 ． 4 ｍｇ／Ｌ 2 ． 4 －Ｄ＋ 0 ． 3ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ为愈伤组
养基中加人 0 ． 8％琼脂 、 3％蔗糖和 0 ． 1 ％活性炭 ， 培养织诱导培养基 ， ＭＳ＋ 3 ． 0 ｍｇ／Ｌ 6 －ＢＡ ＋ 0 ． 4 ｍｇ／ＬＮＡＡ为
3 5 － 4 5 ｄ ， 能分化 出丛生锦叶榄仁苗 。 将带有粒状突起不定芽诱导分化培养基 ， ｌ ／ 2ＭＳ＋ 2 ％￣ 3 ％蔗糖＋ 0 ． 8％￣
的愈伤组织转入分化培养基 （ 4 ）￣ （ 7 ） 中进行不定芽分 1 ． 0％琼脂为生根培养基 ， 泥炭土 ：珍珠岩＝ 5 ： 1 的配方
化 ， 培养 2 0 ￣ 3 0 ｄ后 ， 绿色粒状突起 ， 即形成不定芽 ， 且基质为育苗基质 ，最终离体快速繁殖获得的锦叶榄仁
愈伤组织在不断扩大 。其中 ，分化培养基 （ 6 ）的愈伤组植株成活率一般在 8 0％以上 。
织分化率能够达到 8 0％ ， 远高于其他分化培养基 。本研究着眼于组培公司的实用化生产进行探索 ，
2 ． 3 生根培养效果在外植体取材方面使用的是来源广泛的 叶片 、 叶柄 ，
将分化获得的丛生锦叶榄仁苗分株 ， 转入生根培使用的培养基都是基本培养基 （ＭＳ ） ， 使用的激素均
养基中 ， 培养基 中加入 2％蔗糖和 0 ． 8％琼脂 ， 培养 2 0 ￣为市售产品 （如 6－ 8 么力人人 、 2 ， 4 － 0等 ） ，且具有培养诱
3 0 ｄ ， 小苗基部 出现白 色短根并长出完整根系 ，生根发时间短 、 出苗快 、增殖频率高 、 出苗齐 、 无需炼苗可
率达 8 6％ 。 直接移栽等优点 。 因此 ，本研究结果可直接用于开展
2 ． 4 移栽情况锦叶榄仁离体繁殖工作 ， 为其工厂化育苗提供新途径 。
移栽前须对育苗基质进行彻底消毒 ， 当瓶苗长出
3
￣
4条根 ， 即可出瓶移栽 。将完整小苗直接移栽至育苗参考文献 ：
基质 （泥炭 ：珍珠岩＝ 5 ： 1 ） ，无需炼苗 。 移栽后前 1 0 ｄ每 ［ 1 ］ 张坤洪 ， 周董 ’ 梁远楠 ． 园林绿化树种￣锦叶榄仁 ［Ｊ ］ ．
曰
之二量 ［ 2 ］ 的＝二 、叶榄仁⑴ ？ 南方次 ， 培养两个月 后 ， 即可用于上盆或营养袋移栽 。通过；ｆｃｌｋ ’ 2 0 1 Ｏ ， 4 （ 4 ） ： ｅ 8 ＿ｅ 9 ＿离 体快速繁殖获得 的 锦 叶榄仁植株成活率一般在 ［ 3 ］ 郭金凤 ． 华南锦叶榄仁行情看好 ［Ｎ ］ ． 中国花丼报 ， 2 0 0 7 －
8 0 ％以上 。 0 2 －2 7 （ 2 ） ．
3
［ 4 ］ 盛小林 ， 李晓斌 ， 林日 武 ． 小叶榄仁种苗培育试验初报
［ Ｊ ］ ． 热带林业 ， 2 0 1 3 ， 4 1 （ 2 ） ： 2 2－ 2 3 ．
利用组织培养进行锦叶榄仁离体快速繁殖具有［ 5 ］ 王清连 ． 植物组织培养 ［Ｍ ］ ． 北京 ： 中国农业出版社 ， 2 0 0 2 ．
以下重要意义 ： （ 1 ）繁殖速度快 ， 不受气候因素影响 ，
一年四季均可繁殖 ， 即启动快 ； （ 2 ）便于保持优良种性 ， （责任编辑 兰宗 宝 ）