全 文 ：析法难以鉴别，但是由于牡蛎化学成分中含有少量氨基酸，钟乳
石并没含有氨基酸，前期课题研究发现可采用 Ninhydrin 反应使
用茚三酮溶液进行氨基酸检识，从而将两者区分开。
以上研究结果表明，珍珠母、石决明、珍珠的 DTA图相似，难
以鉴别，石决明和珍珠母样品 ZZM － 3 均在 490℃左右出现第 2
个放热峰，根据文献［8］，可判断该放热峰是碳酸钙晶型的转变
而产生的热效应，课题前期对药材进行了 X －衍射研究发现石决
明、珍珠母及珍珠均有文石型碳酸钙，但是由于药材在粉碎过程
中可能发生晶型转变，碳酸钙已经由斜方晶系的文石转变为结构
稳定的三方晶系方解石。
课题组将在以后的研究中采用差热分析法结合其他鉴别方
法将龙骨、花蕊石、石决明、珍珠、珍珠母、牡蛎、钟乳石 7 种易混
淆的碳酸钙矿物药依次鉴别，建立一套符合碳酸钙矿物药特点的
鉴别体系，保证临床用药安全有效。
参考文献:
［1］ 程存归，刘幸海． 差热分析法鉴定贝母类中药材的研究［J］． 中草
药，2004，35(2):210．
［2］ 孙雪妹，林锦明，张 磊．虎杖及其伪品博落回根的差热分析法鉴
别［J］．中成药，2008，30(10):附 12．
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社，2009:1062．
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大学学报，2012，12(4):83．
［8］ 文红梅，练鸿振，吴德康，等．皱纹盘鲍与白鲍贝壳的成分研究［J］．
中国药学杂志，1999，34(2):85．
收稿日期:2013-12-13; 修订日期:2014-05-22
基金项目:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目
( 黔科合中药字［2010］5028 号)
作者简介:冯 华( 1977-) ，男( 土家族) ，贵州沿河人，贵州省遵义市食品
药品检验所主管药师，硕士学位，主要从事药品检验及新药研究工作．
* 通讯作者简介:王祥培( 1975-) ，男( 侗族) ，贵州天柱人，贵阳中医学院
教授，硕士研究生导师，博士学位，主要从事新药及药物鉴定研究工作．
酢浆草高效液相色谱指纹图谱的鉴别研究
冯 华1，邓丽娟2，吴林菁2，吴红梅2，杨 烨2，王祥培2*
(1．贵州省遵义市食品药品检验所 563002; 2．贵阳中医学院，贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 建立酢浆草药材的高效液相色谱指纹图谱的鉴别方法。方法 采用高效液相色谱法，Diamonsil TM C18 ( 250
mm ×4． 6 mm，5 μm) 为色谱柱。以乙腈 － 0． 1%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱。流速为 0． 7 ml /min;柱温为 25℃ ;检测
波长为 280 nm，建立酢浆草药材 HPLC指纹图谱共有模式，并对不同产地的酢浆草及其混淆品药材进行相似度比较。结
果 酢浆草药材 HPLC指纹图谱标定为 20 个共有峰，不同产地的酢浆草相似度大于 0． 85，而与红花酢浆草的相似度在
0． 70以下。结论 建立的指纹图谱检测方法简便、快捷、可靠，为评价酢浆草质量提供了有效的实验依据，可用于酢浆草
药材的鉴别。
关键词:酢浆草; 高效液相色谱; 指纹图谱; 鉴别
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2014． 10． 042
中图分类号:Ｒ282． 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2014) 10-2414-02
酢浆草又名酸浆草、酸味草、斑鸠酸、三叶酸等。为酢浆草科
植物酢浆草 Oxalis comieulata L．的干燥或新鲜全草，具清热利湿、
解毒消肿、凉血散淤等功效［1］。以酢浆草为主要原料的产品有
骨康胶囊、泌林颗粒、妇炎消胶囊等［1］，其市场需求量大，出现了
酢浆草的混淆品，其在植物形态、药材性状等方面具有较大的相
似性。课题组曾对酢浆草显微鉴别的专属性进行了研究，发现鲜
品酢浆草的横切面显微鉴别特征专属性较强，可以作为鲜品酢浆
草的显微鉴别依据，但将酢浆草粉末显微特征作为鉴别依据值得
商榷［2］。而目前市场上销售的酢浆草药材以干燥为主，采用显
微识别酢浆草药材的方法具有较大的困难，而 HPLC具有分离效
能高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快、应用范围广、可以避
免传统方法的缺点等特点。目前，指纹图谱技术在中药真伪、近
缘药材及代用品鉴别等中药材领域方面展示了广阔的应用前
景［3 ～ 5］。为了全面控制酢浆草药材的质量，提高用药安全，本文
拟建立酢浆草药材的 HPLC指纹图谱，对药材及其混淆品进行鉴
别研究，以期为酢浆草药材的进一步开发利用其医用价值提供科
学依据。
1 仪器、试剂及药材
高效液相色谱仪(日本岛津 /LC － 20AT)，《中药色谱指纹图
谱相似度评价系统 A版》(国家药典委员会) ;干燥箱(上海跃进
医疗器械厂，GZX － DH － X);超声仪(HS10260T);摇摆式中药粉
碎机(DFY － 250);水浴锅(常州澳华仪器有限公司，HH － 4)。
乙腈(色谱纯);甲醇(分析纯);娃哈哈纯净水(20101226);其他
试剂均为分析纯。
酢浆草药材分别采集于贵州各地，经贵阳中医学院药学系王
祥培教授鉴定为酢浆草科植物酢浆草 Oxalis comieulata L．的干燥
全草;红花酢浆草经王祥培教授鉴定为酢浆草科植物红花酢浆草
Oxalis corymbosa DC．的干燥全草。具体来源见表 1。
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时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 10 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2014 VOL． 25 NO． 10
表 1 样品编号、产地及收集日期
编号 品种 产地 收集日期
S1 酢浆草 贵州省剑河县莱东镇 2010-02-01
S2 酢浆草 贵州省剑河县莱东镇 2010-02-07
S3 酢浆草 贵州省剑河县莱东镇 2010-02-16
S4 酢浆草 贵州省剑河县莱东镇 2010-02-16
S5 酢浆草 贵州省剑河县莱东镇 2010-02-16
S6 酢浆草 贵阳中医学院 2010-07-02
S7 酢浆草 贵阳甲秀楼 2010-07-16
S8 红花酢浆草 贵阳中医学院 2010-07-16
S9 红花酢浆草 贵阳中医学院 2010-07-28
S9 红花酢浆草 贵阳中医学院 2010-07-28
S10 酢浆草 贵阳甲秀楼 2010-08-10
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 色谱柱为 Dikma 公司 Diamonsil C18(250 mm ×
4． 6 mm，5 μm);流动相为乙腈(A)－ 0． 1%磷酸(B)进行线性梯
度洗脱，0 ～ 13 min，2%A ～ 16% A，13 ～ 55 min，16% A ～ 25% A，
55 ～ 60 min，25% A ～ 45% A，60 ～ 95 min，45% A ～ 75% A;95 ～
105 min，75%A ～100% A体积流量 0． 7 ml·min －1;柱温 25 ℃;
检测波长 280nm;运行时间 105 min;进样量 8 μl。所有组分在
105 min内出峰完毕。
2． 2 供试品制备 取酢浆草粗粉(过 3 号筛)1． 0 g，精密称定，置
圆底烧瓶中，用 70%甲醇 50 ml，加热回流 70 min，过滤，收集滤
液;滤渣加 70%甲醇 50 ml，加热回流 50 min，过滤，收集滤液，弃
滤渣，合并两次滤液。置蒸发皿中水浴挥干溶剂，残渣用 70%甲
醇溶解，定容于 10 ml量瓶容中，并稀释至刻度，摇匀，用 0． 45 μm
的微孔滤膜过滤，即得。
2． 3 方法学考察
2． 3． 1 精密度试验 取同一供试品溶液，按上述色谱条件连续进
样 6 次，测得各共有指纹峰相对保留时间的 ＲSD 均小于 3． 0%，
结果表明仪器精密度好。
2． 3． 2 重复性试验 取同一批样品 6 份，按“2． 2”项下方法制备
供试品溶液，按上述色谱条件分别进样，以 17 号峰为标准，测得
各共有特征峰相对保留时间的 ＲSD均小于 3． 0%，结果表明重复
性良好。
2． 3． 3 稳定性试验 取同一供试品溶液，按上述色谱条件分别在
0，2，4，6，8，12，24 h 进样，测得各共有特征峰相对保留时间的
ＲSD均小于 3． 0%，结果表明供试品溶液在 24 h内稳定。
2． 4 共有指纹峰的标定 根据 10 批酢浆草供试品溶液的 HPLC
法测定结果［25，26］，比较其色谱图(见图 1)，以 17 号峰作为参照峰
(S) ，以其保留时间为 1，以相对保留时间标定共有指纹峰 20 个
(表 2)。各共有指纹峰相对保留时间见表 2。结果表明 ＲSD 小
于 3． 0%，符合指纹图谱的要求。
2． 5 相似度计算 采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件 2004
年 A 版计算出 10 个批次的酢浆草药材 HPLC 指纹图谱的相似
度，与共有模式相比较。结果见表 3。
图 1 不同产地酢浆草 HPLC指纹图谱
表 2 10 批酢浆草药材的 HPLC共有指纹峰相对保留时间
峰号
相对保留时间
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
ＲSD(%)
1 0． 097 0． 097 0． 096 0． 097 0． 097 0． 097 0． 097 0． 096 0． 097 0． 096 0． 004995
2 0． 273 0． 273 0． 274 0． 273 0． 276 0． 272 0． 273 0． 272 0． 272 0． 273 0． 004383
3 0． 284 0． 288 0． 288 0． 287 0． 290 0． 288 0． 289 0． 288 0． 288 0． 288 0． 005382
4 0． 340 0． 341 0． 342 0． 340 0． 342 0． 340 0． 341 0． 341 0． 341 0． 341 0． 002165
5 0． 410 0． 412 0． 413 0． 411 0． 412 0． 411 0． 413 0． 414 0． 413 0． 410 0． 003326
6 0． 438 0． 439 0． 437 0． 439 0． 439 0． 440 0． 438 0． 439 0． 439 0． 437 0． 002217
7 0． 459 0． 461 0． 460 0． 460 0． 462 0． 461 0． 458 0． 460 0． 461 0． 456 0． 003808
8 0． 488 0． 489 0． 488 0． 488 0． 489 0． 489 0． 489 0． 489 0． 489 0． 487 0． 001447
9 0． 533 0． 534 0． 534 0． 534 0． 534 0． 534 0． 533 0． 535 0． 535 0． 533 0． 001382
10 0． 560 0． 560 0． 561 0． 560 0． 561 0． 561 0． 560 0． 560 0． 560 0． 560 0． 000862
11 0． 619 0． 619 0． 619 0． 618 0． 619 0． 619 0． 618 0． 618 0． 619 0． 619 0． 000781
12 0． 692 0． 692 0． 693 0． 692 0． 693 0． 693 0． 692 0． 692 0． 692 0． 693 0． 000745
13 0． 783 0． 782 0． 783 0． 784 0． 783 0． 783 0． 783 0． 790 0． 783 0． 785 0． 002912
14 0． 802 0． 802 0． 802 0． 803 0． 802 0． 803 0． 802 0． 802 0． 801 0． 804 0． 001026
15 0． 882 0． 882 0． 882 0． 882 0． 882 0． 883 0． 882 0． 881 0． 883 0． 882 0． 000644
16 0． 954 0． 954 0． 954 0． 954 0． 954 0． 954 0． 954 0． 954 0． 954 0． 954 0． 000000
17 1． 000 1． 000 1． 000 1． 000 1． 000 1． 000 1． 000 1． 000 1． 000 1． 000 0． 000000
18 1． 502 1． 502 1． 502 1． 502 1． 501 1． 501 1． 501 1． 502 1． 503 1． 502 0． 000421
19 1． 647 1． 652 1． 654 1． 651 1． 654 1． 654 1． 649 1． 652 1． 653 1． 646 0． 001778
20 1． 850 1． 856 1． 862 1． 856 1． 860 1． 859 1． 853 1． 850 1． 850 1． 850 0． 002100
表 3 酢浆草 HPLC指纹图谱的相似度
批号
相似度
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
共有模式 Ｒ
S1 1 0 0． 875 0． 891 0． 922 0． 864 0． 85 0． 543 0． 464 0． 9 0． 91
S2 0． 759 1 0． 879 0． 92 0． 85 0． 921 0． 891 0． 502 0． 468 0． 747 0． 92
S3 0． 875 0． 879 1 0． 925 0． 91 0． 924 0． 868 0． 665 0． 602 0． 874 0． 971
S4 0． 891 0． 92 0． 925 1 0． 972 0． 983 0． 922 0． 542 0． 492 0． 836 0． 972
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2014 VOL． 25 NO． 10 时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 10 期
续表 3
批号
相似度
S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10
共有模式 Ｒ
S5 0． 922 0． 85 0． 91 0． 972 1 0． 962 0． 871 0． 574 0． 51 0． 825 0． 955
S6 0． 864 0． 921 0． 924 0． 983 0． 962 1 0． 909 0． 549 0． 491 0． 802 0． 965
S7 0． 85 0． 891 0． 868 0． 922 0． 871 0． 909 1 0． 483 0． 446 0． 881 0． 931
S8 0． 543 0． 502 0． 665 0． 542 0． 574 0． 549 0． 483 1 0． 958 0． 513 0． 675
S9 0． 464 0． 468 0． 602 0． 492 0． 51 0． 491 0． 446 0． 958 1 0． 466 0． 625
S10 0． 9 0． 747 0． 874 0． 836 0． 825 0． 802 0． 881 0． 513 0． 466 1 0． 887
共有模式 Ｒ 0． 91 0． 92 0． 971 0． 972 0． 955 0． 965 0． 931 0． 675 0． 625 0． 887 1
3 讨论
采用高效液相色谱仪的二极管阵列检测器对样品的吸收波
长在 270，275，280，285，290，300 nm 进行分析，结果在 280 nm 检
测波长下，基线较稳定，色谱峰较多，信息丰富，故选择 280 nm为
检测波长。
实验以尽可能多体现酢浆草主要成分为原则，设计样品溶液
制备方法。在考察的 70%甲醇加水超声提取、甲醇超声提取、
70%甲醇加水回流、甲醇回流这 4 种供试品溶液提取制备方法
中，从色谱图上看，用 70%甲醇加水回流提取法制备的供试品溶
液指纹图谱峰形较好，分离度较高，响应峰多，且样品各峰分离良
好。对测定结果综合考虑，选定 70%甲醇加水回流提取法制备
供试品溶液。
在对供试品溶液进行 HPLC 分析时，分别以甲醇 －水、乙腈
－水、甲醇 － 0． 1%磷酸水溶液、乙腈 － 0． 1%磷酸水溶液等系统
对色谱分离过程的影响，结果显示乙腈 － 0． 1%磷酸溶液系统的
分离度高，峰形对称，基线稳定。
通过建立该指纹图谱，对 10 批药材 HPLC图谱进行比较，结
果发现，S1 ～ S7、S10 这 8 批药材 HPLC 图谱的共有峰保留时间、
相对峰面积非常吻合，与共有模式 Ｒ比较，相似度除 S10 为0． 887
外，其余的均大于 0． 90;S8、S9 共有峰保留时间、相对峰面积一
致，与共有模式相比差异较大，其相似度均低于 0． 70。由此可以
确定 S1 ～ S7、S10 这 8 批药材质量较为一致，S8、S9 两种较为一
致;这与药材来源相吻合。该指纹图谱的建立为评价酢浆草质量
提供了有效的实验依据。
参考文献:
［1］ 贵州省药品监督管理局．贵州省中药材、民族药材质量标准［S］．贵
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纹图谱鉴别研究［J］．中成药，2010，32(2):173．
收稿日期:2013-11-25; 修订日期:2014-06-21
基金项目:贵州省科学技术基金( No．黔科合 J字［2011］2306 号) ;
贵州省科技计划项目( No．黔科合中药字［2011］LKZ7047 号)
作者简介:吴向莉( 1967-) ，女( 汉族) ，贵州贵阳人，贵阳中医学院药学院高
级实验师，学士学位，主要从事中药资源鉴定、教学及植物科学研究工作．
* 通讯作者简介:王祥培( 1975-) ，男(侗族) ，贵州天柱人，贵阳中医学院药
学院教授，博士学位，主要从事中药及民族药品质与资源开发研究工作．
雷公连与易混品穿心藤的显微鉴别研究
吴向莉，王祥培* ，吴红梅，徐 峰
(贵阳中医学院药学院，贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 对天南星科同属植物雷公连与穿心藤进行显微鉴别，为建立雷公连的质量标准和药用资源开发提供一定的
科学依据，同时有利于临床区别用药。方法 徒手切片法、粉末制片法。结果 雷公连根横切面的中心导管较穿心藤数量
少、口径小;雷公连藤茎最外方维管束排列紧密并连接成环，穿心藤藤茎最外方维管束排列疏松。结论 雷公连和穿心藤
在根、藤茎、粉末的显微结构上差异较大，可作为二者鉴别特征。
关键词:雷公连; 穿心藤; 显微; 鉴别
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2014． 10． 043
中图分类号:Ｒ282． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805( 2014) 10-2416-02
雷公连 Amydrium hainanense．(Engl．)． H ． Li．主要分布在海
拔 550 ～ 1100 m的地区，习见于常绿阔叶林中树干上或石崖上，
适应性强。主要分布在西南、华中地区，贵州省的黔南、黔东南亦
分布［1］。雷公连，别名大医药、化恩妈、大软筋藤、九龙上调、野
红苕、青藤、下山虎、雷公药、风湿药［2］，始载于《中华本草纲要》，
是我国特有的药材，雷公连有小毒，味辛、微苦、性凉，具有舒筋活
络，祛瘀止痛之功效，全草入药主要用于治疗风湿麻木、心绞痛、
骨折及跌打损伤等疾病。本课题组曾对雷公连进行显微鉴
别［3］，在研究中发现雷公连与同科同属植物穿心藤 Amydrium
hainanense (Ting et Wu ex H． Li et al．)H ． Li的外部形态特征极
为相似 。穿心藤又叫穿孔藤、九十九窿、穿心风，分布我国西南、
华中、东南。穿心藤味甘、涩，性平，具有清热解毒、消肿止痛、祛
风除湿的功效，全草入药可治疗胃炎、胃溃疡、胆囊炎、鹤膝风、骨
髓炎［4］等病。由此可见，雷公连和穿心藤在性味、功效及治疗病
证上差异很大，但由于二者外部形态特征相似，在临床运用时极
易混淆，导致中毒或延误病情，目前对于二者的鉴别未见研究报
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时珍国医国药 2014 年第 25 卷第 10 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2014 VOL． 25 NO． 10