全 文 ：第３３卷第５期
２０１５年１０月
上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版）
ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＳＨＡＮＧＨＡＩ　ＪＩＡＯＴＯＮＧ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（ＡＧＲＩＣＵＬＴＵＲＡＬ　ＳＣＩＥＮＣＥ）
Ｖｏｌ．３３Ｎｏ．５
　 Ｏｃｔ．２０１５
文章编号：１６７１－９９６４（２０１５）０５－０００６－０５　 ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．１６７１－９９６４．２０１５．０５．００２
收稿日期：２０１４－１０－１６
作者简介：周麟笔（１９９０－），硕士，研究方向：大豆遗传育种，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｌｂｘｊｙｌ＠１６３．ｃｏｍ；
曹越平（１９６７－），为本文通讯作者，教授，研究方向：大豆遗传育种，Ｅ－ｍａｉｌ：ｙｕｅｐｉｎｇｃａｏ＠ｓｊｔｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
明日叶快速繁殖体系的优化
周麟笔，许　樱，薄路花，曹越平
（上海交通大学 农业与生物学院，上海２００２４０）
摘　要：研究以明日叶幼苗叶片与叶柄为外植体进行组织培养，在 ＭＳ基本培养基中添加不同浓
度的萘乙酸（ＮＡＡ）与玉米素（ＺＴ）、ＮＡＡ与６－苄氨基腺嘌呤（６－ＢＡ）联合处理，比较不同处理下叶
片、叶柄的愈伤组织诱导率与不定芽分化率。结果表明 ＮＡＡ与ＺＴ联合添加的培养基比较适合
明日叶愈伤组织的诱导与不定芽分化，效果优于ＮＡＡ与６－ＢＡ联合处理。最适合叶片培养的培养
基是 ＭＳ＋１ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋３ｍｇ／Ｌ　ＺＴ，最适合叶柄培养的是 ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ ＋０．５ｍｇ／Ｌ
ＺＴ。本研究建立的明日叶快速繁殖体系，获得再生植株周期只需３０～４０ｄ，大大缩短了明日叶繁
殖周期。
关键词：明日叶；组织培养；快速繁殖
中图分类号：Ｓ５６７．２３９　　　　文献标识码：Ａ
Ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ　Ｓｙｓｔｅｍ　ｆｏｒ　Ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｋｅｉｓｋｅｉ
ＺＨＯＵ　Ｌｉｎ－ｂｉ，ＸＵ　Ｙｉｎｇ，ＢＯ　Ｌｕ－ｈｕａ，ＣＡＯ　Ｙｕｅ－ｐｉｎｇ
（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｊｉａｏｔｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２００２４０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ，ｔｈｅ　ｔｅｎｄｅｒ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ｐｅｔｉｏｌｅｓ　ｏｆ　Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｋｅｉｓｋｅ　ｉｎ　ｓｅｅｄｌｉｎｇ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｅｘｐｌａｎｔｓ
ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａｎ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｓｙｓｔｅｍ．Ｉｎ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｐｅｒｉｏｄ，ｅｘｐｌａｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ
ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　１－Ｎａｐｈｔｈａｌｅｎｅａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ（ＮＡＡ）ａｎｄ　ｚｅａｔｉｎ（ＺＴ），ＮＡＡ　ａｎｄ
６－Ｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｏｐｕｒｉｎｅ（６－ＢＡ）．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｋｅｉｓｋｅｉ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｏｎ　ＭＳ　ｍｅｄｉｕｍ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ
ｚｅａｔｉｎ（ＺＴ）ｗｅｒｅ　ｂｅｔｔｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｎ　ＭＳ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　６－ＢＡ．ＭＳ ＋ １ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ ＋ ３ｍｇ／Ｌ　ＺＴ　ｗａｓ
ｏｐｔｉｍｕｍ　ｆｏｒ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ　ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ　ＺＴ　ｆｏｒ　ｐｅｔｉｏｌｅｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｐｌａｎｔｓ　ｃｏｕｌｄ
ｂｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｗｉｔｈｉｎ　３０～４０ｄａｙｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｋｅｉｓｋｅｉ；ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ；ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
　　明日叶（Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｋｅｉｓｋｅｉ），原产自日本八丈
岛，系伞形科当归属多年生草本植物，因今日摘取叶
片，明日即可展露新叶而得名。据日本出版的《综舆
新语》中曾有记载：“秦始皇以至尊之身命徐福赴海
外采长生不老药即八丈岛的明日叶。此外日本《重
订本草纲目启蒙》（１８４４）和《大和本草》等文献也记
载，明日叶是一种具有长寿功能植物，因此又名长寿
菜。经研究发现，明日叶主要成分为特种查尔酮和
有机锗，此外还含有人体所需的１６种氨基酸、黄酮、
胡萝卜素、食物纤维以及多种矿物质等，具有增强免
疫力、抗过敏、降血压、抗癌、降血脂、抗衰老等功能，
是一种具有极高营养价值的植物［１］，具有巨大的开
第４期 周麟笔，等：明日叶快速繁殖体系的优化
发前景和研究价值。然而，明日叶是多年生植物，２
～３年才能开花结实，因此利用种子繁殖进行育种
及资源研究非常困难，如何快速获得大量明日叶植
株就成为一个亟待解决的问题。
２０世纪植物组织培养技术的广泛应用［２］，较传
统育种大大缩短了育种周期，这项技术也被应用到
明日叶快速繁殖中，有关明日叶的组织培养有过一
些报道，Ｆｕｒｕｙａ　Ｈ等［３］在 ＭＳ培养基中添加细胞分
裂素６－苄氨基腺嘌呤（６－ＢＡ）、２，４－二氯苯氧乙酸
（２，４－Ｄ）进行组织培养４５ｄ以上获得明日叶再生植
株，郭治友等在 ＭＳ培养基中添加萘乙酸（ＮＡＡ）与
６－ＢＡ进行明日叶组培６０ｄ左右也获得了再生植
株［４］，薄路花在明日叶快繁相关专利中提到关于玉
米素（ＺＴ）在明日叶组织培养上的应用［５］，本试验旨
在前人研究的基础上优化明日叶快速繁殖体系，探
究以 ＭＳ为基础培养基，添加不同浓度的 ＮＡＡ和
玉米素（ＺＴ）、ＮＡＡ和６－ＢＡ，对于明日叶组织培养
的影响，筛选更加适合明日叶生长的培养基激素配
比组合，为快速繁殖明日叶提供了一种有效的方法。
１　材料与方法
１．１　试验材料
以经过炼苗阶段后在自然状态下生长至展开两
片真叶的明日叶实生幼苗作为试材，２０１３年４月取
材于学院试验基地。
１．２　试验方法
１．２．１　灭菌与消毒
将明日叶幼苗经流水冲洗１ｈ后滤纸吸干，在
无菌操作台上将叶片于７５％酒精中灭菌４５ｓ，无菌
水冲洗３～５次，滤纸吸干后置于１％次氯酸钠溶液
中消毒８～１０ｍｉｎ，最后用无菌水冲洗３～５次，置
于无菌滤纸上吸干，灭菌后切取其叶片和叶柄作为
外植体，叶片切成约０．５ｃｍ×０．５ｃｍ大小，叶柄切
成约０．５ｃｍ长度。
１．２．２　培养基配方与培养条件
培养基配方设计：愈伤组织诱导和不定芽分化
阶段，以 ＭＳ为基础培养基，添加不同浓度ＮＡＡ分
别与不同浓度细胞分裂素６－ＢＡ、玉米素（ＺＴ）的处
理组合，共２５个。各处理叶片、叶柄外植体各６０
个，重复３次；生根培养基为 ＭＳ基本培养基。
培养条件：各培养基ｐＨ均为５．８，培养温度２５
℃，光照时间１２ｈ／ｄ，光照强度８～１０ｍｏｌ／（ｍ２·ｓ）。
１．２．３　观察与统计
观察组培苗的生长情况，从接种外植体开始每
１５ｄ更换１次培养基并处理污染；统计愈伤组织诱
导率＝诱导出现愈伤组织的块数／供试外植体块数
×１００％，每个处理３次重复，统计结果取平均值；分
化率＝不定芽分化数／愈伤组织数×１００％。
２　结果与分析
２．１　愈伤组织诱导
外植体培养５ｄ后，叶片开始卷曲，其边缘开始
发白，少数叶片褐化、部分叶柄开始膨大，１０ｄ左
右，叶柄伤口开始产生嫩绿微透明的愈伤组织，叶柄
膨大程度更加明显。约１２ｄ之后愈伤组织开始从
叶片边缘产生愈伤组织，并逐渐向整个叶片诱导产
生愈伤组织团的。观察记录外植体培养２０ｄ后各
处理平均产生的外植体愈伤组织数，并计算愈伤组
织诱导率。统计结果见表１和表２。
分析叶片外植体愈伤组织分化情况发现，在添
加ＺＴ和ＮＡＡ的激素组合中（表１），诱导率最高的
是处理８，为４１．７％，与处理１、２、３、４、５、６、９、１０都
有显著差异，说明在这１０种培养基中处理８的激素
组合最适宜叶片外植体愈伤组织的生长。其次是处
理７，其为３５．０％，与除处理８之外的各处理之间也
呈显著差异，也比较适合叶片外植体的愈伤培养。
事实上，处理７和８添加的ＺＴ的浓度都是３ｍｇ／
Ｌ。而当ＺＴ浓度为４ｍｇ／Ｌ时，叶片外植体的愈伤
组织诱导率呈下降趋势，其中处理９为２６．７％，处理
１０为２０．０％，其余组合愈伤组织诱导率明显偏低。
当培养基中添加６－ＢＡ和ＮＡＡ的组合时（表２），处
理１的诱导率最高，为３１．７％，其诱导率与其余各
处理均有显著差异。说明，添加６－ＢＡ和 ＮＡＡ的
１５ 个 处 理 组 合 中，添 加 １．０ ｍｇ／Ｌ６ －ＢＡ＋
０．１ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ的激素配比最适宜叶片外植体愈
伤组织诱导的培养基。其次为处理１２，诱导率为
３０．０％，其诱导率与其他处理间呈显著差异。而且
当ＮＡＡ浓度为０．３ｍｇ／Ｌ时（处理２１～处理２５），
诱导率都显著降低，最高仅为８．３％。进一步比较
添加ＺＴ和ＮＡＡ组合与添加６－ＢＡ和ＮＡＡ组合的
诱导率，前者整体会高于后者，说明ＺＴ和ＮＡＡ的
激素组合更利于叶片外植体愈伤组织的形成，且最
佳配比为１．０ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋３．０ｍｇ／Ｌ　ＺＴ。
７
上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版） 第３３卷
表１　不同浓度ＮＡＡ、ＺＴ处理组合下外植体愈伤组织的诱导
Ｔａｂ．１　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＮＡＡ　ａｎｄ　ＺＴ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｕｓ
处理编号
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
ＮＡＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
ＺＴ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
叶片Ｌｅａｖｅｓ 叶柄Ｐｅｔｉｏｌｅｓ
愈伤组织数
Ｎｏ．ｏｆ　ｃａｌｕｓ
平均诱导率／％
Ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
愈伤组织数
Ｎｏ．ｏｆ　ｃａｌｕｓ
平均诱导率／％
Ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
１　 ０．５　 ０．５　 １２．０　 ２０．０ｃｄ　 ４７．０　 ７８．３ａ
２　 １．０　 ０．５　 １０．０　 １６．７ｄ ３９．０　 ６５．０ａｂ
３　 ０．５　 １．０　 １５．０　 ２５．０ｃｄ　 ３５．０　 ５８．３ｂｃ
４　 １．０　 １．０　 ２．０　 ３．３ｅ ３７．０　 ６１．７ｂ
５　 ０．５　 ２．０　 １１．０　 １８．３ｃｄ　 ２５．０　 ４１．７ｃｄ
６　 １．０　 ２．０　 １１．０　 １８．３ｃｄ　 ３２．０　 ５３．３ｂｃ
７　 ０．５　 ３．０　 ２１．０　 ３５．０ａｂ　 ２５．０　 ４１．７ｃｄ
８　 １．０　 ３．０　 ２５．０　 ４１．７ａ １５．０　 ２５．０ｅ
９　 ０．５　 ４．０　 １６．０　 ２６．７ｂｃ　 ２２．０　 ３６．７ｄｅ
１０　 １．０　 ４．０　 １２．０　 ２０．０ｃｄ　 ２７．０　 ４５．０ｃｄ
　　注：表中不同字母表示处理间差异显著水平Ｐ＜０．０５。不同组合处理下叶片、叶柄诱导率的差异显著性分开比较。下表同
Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｌｅｔｔｅｒｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ａｔ　ｔｈｅ　０．０５ｌｅｖｅｌ　ａｍｏｎｇ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｌｅａｖｅｓ　ａｎｄ
ｐｅｔｉｏｌｅｓ　ａｒｅ　ａｓｓａｙｅｄ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｂｅｌｏｗ．
表２　不同浓度ＮＡＡ、６－ＢＡ处理组合下外植体愈伤组织的诱导
Ｔａｂ．２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＮＡＡ　ａｎｄ　６－ＢＡ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｌｕｓ
处理编号
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
ＮＡＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
６－ＢＡ／
（ｍｇ·Ｌ－１）
叶片Ｌｅａｖｅｓ 叶柄Ｐｅｔｉｏｌｅｓ
愈伤组织数
Ｎｏ．ｏｆ　ｃａｌｕｓ
诱导率／％
Ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
愈伤组织数
Ｎｏ．ｏｆ　ｃａｌｕｓ
诱导率／％
Ｃａｌｕｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
１１　 ０．１　 １．０　 １９．０　 ３１．７ａ １３．０　 ２１．７ｃｄ
１２　 ０．１　 １．５　 １８．０　 ３０．０ａ １６．０　 ２６．７ｂｃ
１３　 ０．１　 ２．０　 １５．０　 ２５．０ａｂ　 １２．０　 ２０．０ｄ
１４　 ０．１　 ２．５　 １７．０　 ２８．３ａｂ　 １７．０　 ２８．３ｂ
１５　 ０．１　 ３．０　 ０．０　 ０．０ｅ ０．０　 ０．０ｇ
１６　 ０．２　 １．０　 ４．０　 ６．７ｄｅ　 ８．０　 １３．３ｅ
１７　 ０．２　 １．５　 ３．０　 ５．０ｄｅ　 ０．０　 ０．０ｇ
１８　 ０．２　 ２．０　 ８．０　 １３．３ｃｄ　 １２．０　 ２０．０ｄ
１９　 ０．２　 ２．５　 １２．０　 ２０．０ｂｃ　 ６．０　 １０．０ｅ
２０　 ０．２　 ３．０　 １５．０　 ２５．０ａｂ　 ２８．０　 ４６．７ａ
２１　 ０．３　 １．０　 ３．０　 ５．０ｄｅ　 ６．０　 １０．０ｅ
２２　 ０．３　 １．５　 ４．０　 ６．７ｄｅ　 ７．０　 １１．７ｅ
２３　 ０．３　 ２．０　 １．０　 １．７ｅ ５．０　 ８．３ｆ
２４　 ０．３　 ２．５　 ５．０　 ８．３ｄｅ　 ２．０　 ３．３ｆｇ
２５　 ０．３　 ３．０　 ０．０　 ０．０ｅ １．０　 １．７ｇ
　　分析叶柄外植体的愈伤组织诱导情况，在添加
ＺＴ和ＮＡＡ的激素组合中（表１），诱导率最高的是
处理１，达到７８．３％，且处理１的诱导率与余下处理
具有显著差异，说明处理１的激素配比最适合叶柄
外植体愈伤组织的生长，与叶片外植体愈伤组织生
长的适宜激素配比不同。添加６－ＢＡ和 ＮＡＡ的组
８
第４期 周麟笔，等：明日叶快速繁殖体系的优化
合中（表２），诱导率最高的为处理２０，诱导率为
４６．７％，且与其他处理组合的诱导率差异显著，说明
处理２０的激素配比最适合叶柄外植体愈伤组织的
生长。综合分析表１、表２数据，发现处理１的诱导
率（７８．３％）明显比处理２０的诱导率（４６．７％）高，可
见ＺＴ与ＮＡＡ的激素组合更适合明日叶叶柄外植
体愈伤组织的形成，这与叶片外植体愈伤的情况相
一致，且最佳配比为０．５ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ ＋０．５ｍｇ／Ｌ
ＺＴ。培养２０ｄ左右，叶片和叶柄产生许多愈伤组
织团，部分愈伤组织开始发黄褐化，且有的已经开始
分化不定芽，少许培养基产生污染。因此培养１０～
１５ｄ左右要及时更换培养基，才有利于愈伤组织更
好的生长和分化。
２．２　不定芽的诱导
将各处理产生的愈伤组织转移到新鲜培养基
上，待愈伤组织团培养约７ｄ后，处理８培养基中最
先从叶柄边缘分化出不定芽（图１Ａ），统计培养基更
换培养１５ｄ后各处理从生芽分化数，计算分化率，
结果见表３。其中由于处理１５、１７、１９、２１、２２、２３、
２４、２５产生的愈伤组织较少且逐渐褐化，最终诱导
形成不定芽数较少或基本未诱导出不定芽，故未统
计入下表。从表３统计的数据来看，处理８不定芽
分化率最高，为４２．５％；其次是处理９，分化率为
３９．５％。结合之前诱导率数据分析得出，处理８无
论从诱导愈伤组织还是诱导不定芽的分化方面来
讲，都具有比较好的诱导率，因此 ＭＳ＋１ｍｇ／Ｌ
ＮＡＡ＋３ｍｇ／Ｌ　ＺＴ的培养基激素组合最适合明日
叶的组织培养。
２．３　试管苗的生根培养与移植
将分化良好的不定芽分割成单芽转移到 ＭＳ
生根培养基中（图１Ｂ），约７ｄ后陆续有新根产生
（图１Ｃ），逐渐发育为比较发达的根系（图１Ｄ），统
计处理１００个不定芽生根情况，均在转移至生根
培养基一周内陆续生根，生根率为１００％。此外，
在 ＭＳ培养基中不定芽生长迅速，有的不定芽植株
生长点多，可按生长点数分为几株进行生根培养。
当不定芽生根数达到３根左右便可移植到灭菌后
的基质中，基质配方为草炭土∶蛭石∶珍珠岩＝３∶１∶
１，种植明日叶的小盆上扣上一次性塑料杯子置于
光照培养箱中培养３～５ｄ后开盖炼苗２ｄ（图
１Ｅ）。当小苗长出新芽、叶片伸展长势强健时，在
温室继续炼苗２ｄ。待新芽展叶后约１～２ｄ便可
移植到试验基地遮阴栽培（图１Ｆ），移栽成活率约
为８５％。
表３　明日叶不定芽的诱导
Ｔａｂ．３　Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ　ｆｏｒ　Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｋｅｉｓｋｅｉ
处理编号
Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ
接种愈伤组织数
Ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｃａｌｕｓ
分化不定芽数
Ｎｏ．ｏｆ　ｂｕｄ
分化率／％
Ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｒａｔｅ
１　 ５９　 １３　 ２２．０
２　 ４９　 １０　 ２０．４
３　 ５０　 ４　 ８．０
４　 ３９　 ３　 ７．７
５　 ３６　 ５　 １３．９
６　 ４３　 ３　 ７．０
７　 ４６　 １　 ２．２
８　 ４０　 １７　 ４２．５
９　 ３８　 １５　 ３９．５
１０　 ３９　 ８　 ２０．５
１１　 ３２　 ３　 ９．４
１２　 ３４　 ４　 １１．８
１３　 ２７　 ３　 １１．１
１４　 ３４　 ６　 １７．６
１６　 １２　 ２　 １６．７
１８　 ２０　 ２　 １０．０
２０　 ４３　 ３　 ７．０
２２　 １１　 ２　 １８．２
图１　明日叶再生过程
Ａ．不定芽的分化；Ｂ．单芽转接至生根培养基；Ｃ．再生植株生
根；Ｄ．待移栽的试管苗；Ｅ．炼苗期幼苗；Ｆ．组培苗基地生长情况
Ｆｉｇ．１　Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｆ　Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｋｅｉｓｋｅｉ
Ａ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ；Ｂ．Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ
ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ；Ｃ．Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｆ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｐｌａｎｔｓ；Ｄ．
Ｔｅｓｔ－ｔｕｂｅ　ｓｅｅｄｌｉｎｇ；Ｅ．Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｐｌａｎｔ　ｉｎ　ｐｏｔ；Ｆ．Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
ｐｌａｎｔｓ　ｉｎ　ｆｉｅｌｄ
３　讨论
本试验共设置了２５个处理，对不同浓度的激素
配比进行筛选和优化，试验结果表明添加ＺＴ的培
９
上 海 交 通 大 学 学 报 （农 业 科 学 版） 第３３卷
养基比添加６－ＢＡ的培养基更适合明日叶愈伤组织
诱导与不定芽分化，其中筛选出适合明日叶叶片愈
伤组织形成和不定芽分化的最佳激素配比是 ＭＳ＋
１ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋３ｍｇ／Ｌ　ＺＴ，最适合叶柄培养的激
素配比是 ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ　ＺＴ。
从诱导愈伤到获得完整的植株只需要３０～４０ｄ，大
大缩短了获得再生植株的周期。用此方法得到的再
生苗根系发达、粗壮，生根率为１００％，移栽成活率
为８５％。不定芽诱导阶段培养２０ｄ左右，部分不定
芽出现生根现象，可能是培养基成分逐渐被吸收，
ＮＡＡ等激素浓度降低有利于不定芽生根的缘故，
刘拴成等在不同浓度的萘乙酸（ＮＡＡ）对９月菊插
条生根情况影响的研究中得到低浓度ＮＡＡ有助于
９月菊生根的结论与本研究结果一致［６］，周音等在
钩唇石斛离体快速繁殖技术体系研究中也得到类似
结论［７］。本研究建立的明日叶再生体系，优化了培
养基激素配比，使明日叶种子繁殖的２～３年一个周
期，缩短到２～３个月，为明日叶的育种及资源研究
提供了有效的方法。而且以此方法得到的组培苗根
系发达、健壮、成活率高，具有一定的推广应用价值
和发展前景。
参考文献：
［１］　刘畅，王正武，吴金鸿．药食兼用植物明日叶的研究进
展及应用［Ｊ］．食品与药品，２０１３，１５（３）：２０５－２０９．
［２］　梁一池，杨华．植物组织培养技术的研究进展［Ｊ］．福
建林学院学报，２００２，２２（１）：９３－９６．
［３］　Ｆｕｒｕｙａ　Ｈ，Ｈｏｓｏｋｉ　Ｔ．Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｓｈｏｏｔ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ，
ｓｏｍａｔｉｃ　ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｐｌａｎｔｌｅｔ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ
ｉｎ　ｖｉｔｒｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｒｏｏｔ　ｔｉｓｓｕｅ　ｏｆ　Ａｎｇｅｌｉｃａ　ｋｅｉｓｋｅｒｉ
（Ｍｉｑ．）Ｋｏｉｄｚ［Ｊ］．Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｊａｐａｎ），
２００４，３（４）：３６１－３６６．
［４］　郭治友，罗应，钱绍方．明日叶叶的愈伤组织诱导和快
速繁殖［Ｊ］．广东农业科学，２０１０，３７（７）：７０－７２．
［５］　薄路花．一种明日叶快速繁殖方法［Ｐ］．中国专利：
ＣＮ１０２６５７０８４Ａ，２０１２－０９－１２．
［６］　刘拴成，张翠英，穆俊祥，等．萘乙酸对九月菊扦插生
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１１２－１１４．
［７］　周音，殷丽青，汤桂钧，等．钩唇石斛离体快速繁殖技
术体系的建立［Ｊ］．上海交通大学学报（农业科学版），
２０１３，３０（６）：６２－６５．
０１