全 文 ：酢浆草提取物体外抗氧化活性研究
丁良，李静，杨慧
(河北大学医学部基础医学院，河北 保定 071000)
摘 要:目的:探讨酢浆草提取物体外抗氧化活性。方法:采用 DPPH 法、FRAP 法分别测定酢浆草水提取物清除
DPPH自由基和总的抗氧化能力。结果:在实验的测定浓度范围之内，随着提取物浓度的增加，其对 DPPH自由基的清除
能力逐渐增强。2mg /mL酢浆草水提物对 DPPH自由基的清除率达到 67． 144%。FRAP法测得 20mg /mL酢浆草水提取
液的总抗氧化能力为 1． 09mM。结论:酢浆草对 DPPH 自由基的清除效果良好，FRAP 法测得酢浆草有一定的抗氧化能
力，有进一步开发利用的价值。
关键词:酢浆草;自由基;DPPH;FRAP法;抗氧化活性
中图分类号:R284． 2 文献标识码:B 文章编号:1000 － 1719(2011)10 － 2055 － 03
Study on the Antioxidant Activity of Extracts from Oxalis corniculata L
DING Liang，LI Jing，YANG Hui
(Pharmacology，Medical Science Center of Hebei University，Baoding 071000，Hebei，China)
Abstract:Objective:To research the antioxidant Activity of Extracts from Oxalis corniculata L in vitro． Methods:The elimina-
ting capabilities on organic free radicals of the water extracts extracted from Oxalis corniculata L were determined by DPPH and
FRAP methods． Results:With the concentration of Extracts from Oxalis corniculata L increasing，the eliminating capability on DP-
PH free radicals is gradually enhanced ． The eliminating rate on DPPH free radicals of 2mg /mL water extracts extracted from Oxa-
lis corniculata L． The total antioxidant Activity of 20mg /mL water extracts from Oxalis corniculata L is 1． 09 mM by FRAP meth-
ods． Conclusion:Oxalis corniculata L has a good inhibitory effect on freeing radicals，so it is valuable to be further developed and
used．
Key words:Oxalis corniculata L ;Free radicals ;Antioxidant activities ;DPPH;FRAP method;Antioxidant activity
收稿日期:2011 － 02 － 20
作者简介:丁良(1961 －) ，女，教授，硕士研究生导师，博士，研究方向:
中草药中微量元素、有效成分的提取及分析。
酢浆草(Oxalis corniculata L)是酢浆草科酢浆草
属多年生宿根草本植物。全草均可入药，其性寒、味
酸，归肝、小肠经。具有清热解毒、平肝定惊、消炎止
痛、利湿消肿、凉血散瘀之功效。民间主要用于治疗扁
桃体炎、腮腺炎、急性肝炎等多种疾病。鄂西土家医常
用于内服治疗跌打青肿、咽喉肿痛、祛痰平喘、痢疾、黄
疸、尿路感染、结石、月经不调、淋浊、白带、小儿肝热、
惊风等;外用治跌打损伤、毒蛇咬伤、痈肿疮疖、脚癣、
湿疹等症［1 － 3］。酢浆草主要成分为黄酮、β －谷甾醇、
胡萝卜苷、草酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸等，且其干燥
草中的总黄酮含量高达 2. 22%［4 － 5］。具有较好的抗
炎、抗病毒和抑菌作用。而有关酢浆草抗氧化作用的
研究则鲜见报道。为充分利用其丰富的自然资源，扩
大应用范围，本实验采用 DPPH 法、FRAP 法检测酢浆
草水提取物对 DPPH自由基的清除能力和总的抗氧化
能力。
1 材料与方法
1. 1 实验材料
1. 1. 1 实验药材 酢浆草采自河北大学医学部校园
内。经本校崔桂花教授鉴定为酢浆草(Oxalis cornicu-
lata L)。
1. 1. 2 仪器、试剂 ZDHW 型调温电热套(北京中兴
伟业仪器有限公司)、AUY － 120 电子分析天平(岛津
国际贸易上海有限公司)、501A 型超级恒温器(上海
实验仪器厂有限公司)、UV － 2000 分光光度计［尤尼
柯(上海)仪器有限公司］、TU － 1901 可见紫外分光光
度计(北京普析通用仪器有限责任公司)、SK － 1 快速
混匀器(金坛市杰瑞尔电器有限公司)、ZHWY － 110X
往返式水浴恒温摇床(上海智城分析仪器制造有限公
司)、ELX － 800 全自动酶标仪(ELISA Reader) (美国
宝特有限公司)、2，2 －联苯基 － 1 －苦基肼基自由基
(2，2 － Diphenyl － 1 － picrylhydrazyl，DPPH) ，C18 H12
N5O6，相对分子质量 394. 32，批号:K23U059［阿法埃
莎(天津)化学有限公司］、总抗氧化能力检测试剂盒
(FRAP法) (碧云天生物技术研究所)、其他试剂均为
国产 AR。
1. 2 实验方法
1. 2. 1 样品制备 将采集的酢浆草全草洗净阴干，粉
碎备用。准确称取酢浆草粗粉 25g 置烧杯中，加蒸馏
水 500mL浸泡 12h后，煎煮(90 ± 5)℃2 次，每次 1h，
趁热过滤。合并两次滤液后浓缩至生药含量为 0. 2g /
·5502·辽宁中医杂志 2011 年第 38 卷第 10 期
DOI：10.13192/j.ljtcm.2011.10.138.dingl.057
mL。
1. 2. 2 试剂配制 DPPH 溶液的配制:准确称取
19. 90 mg DPPH，用无水乙醇避光搅拌溶解后定容于
250mL 容量瓶中，DPPH 浓度为 2. 019 × 10 －4 mol /L，
4℃避光保存。FRAP 工作液的配制参考总抗氧化能
力检测试剂盒(FRAP 法)使用说明，配制后 37℃孵
育，并宜在 1 ～ 2h内使用完毕。
1. 2. 3 酢浆草水提取液清除 DPPH 自由基能力测定
参考赵骏等［6］实验方法并作适当改动，分别向各试
管中移取不同浓度样品提取液 2. 0mL，每支试管各加
入 2. 0 × 10 －4mol /L DPPH 溶液 2. 0mL，用漩涡混合器
混匀，在 28℃下避光静置 30 min后用无水乙醇作参比
测定其在 518nm处的吸光度 Ai，同时测定不同浓度样
品提取液 2. 0mL 与 2. 0mL DPPH 溶剂混合后的吸光
度 Aj，以及 2. 0 mL 样品溶剂与 2. 0mL DPPH 溶液混
合后的吸光度 Ac。各组分别做 3 次平行试验，取平均
值。DPPH·自由基清除率按下式计算:
清除率 K% =［1 －(Ai － Aj)/Ac］× 100%
式中:Ai—2. 0mL 样品溶液加 2. 0mLDPPH 溶液混合
后的吸光度;Aj—2. 0mL 样品溶液加 2. 0mLDPPH 溶
剂混 合 后 的 吸 光 度;Ac—2. 0mL 样 品 溶 剂 加
2. 0mLDPPH溶液混合后的吸光度。
1. 2. 4 FRAP法对酢浆草水提取物总的抗氧化能力
测定 按照总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP 法)使用
说明测定。总抗氧化能力用 FeSO4 标准溶液的浓度来
表示。
2 结 果
2. 1 酢浆草水提取液清除 DPPH·自由基能力测定
结果
DPPH法于 1950 年被提出，广泛用于定量测定生
物试样、酚类物质和食品的抗氧化能力。DPPH 是一
种很稳定的氮中心的自由基，它的稳定性主要来自共
振稳定作用及 3 个苯环的空间障碍，使夹在中间的氮
原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作
用。DPPH 法即是根据 DPPH 自由基有单电子，在
518nm处有一强吸收，其醇溶液呈紫色的特性。当有
自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使其吸
收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量
关系，因而可用分光光度计进行快速的定量分析。
酢浆草水提取液清除 DPPH·自由基能力测定结
果见表 1。
表 1 不同浓度的酢浆草水提取液对 DPPH·自由基的清除作用
样品 样品浓度(mg /mL) 清除率(%)
1 0. 25 13. 529
2 0. 5 17. 824
3 1 35. 004
4 2 67. 144
2. 2 FRAP 法对酢浆草水提取物总的抗氧化能力测
定结果
FRAP法是利用酸性条件下抗氧化物可还原 Fe3 +
－ TPTZ (Ferric － tripyridyltriazine)而产生蓝色的 Fe2 +
－ TPTZ，随后在 593nm 测定 Fe2 + － TPTZ 即可获得样
品中的总抗氧化能力。
参考总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP 法)使用说
明，实验测得 FeSO4 标准溶液线性回归方程为:y =
6. 8395x + 0. 063，R2 = 0. 998;阳性对照 Trolox 溶液线
性回归方程为:y = 3. 7418x + 0. 0135，R2 = 0. 9983。
20mg /mL 酢浆草水提取液获得的吸光度和 1. 09mM
FeSO4 标准溶液的吸光度相同，则该浓度样品的总抗
氧化能力为 1. 09mM。相同吸光度下阳性对照 Trolox
溶液浓度为 0. 58mM。
3 讨 论
自由基是生物机体生命活动过程中的中间产物，
在机体内具有双重作用。适当浓度的自由基对机体正
常生理功能的发挥必不可少，具有防御感染及细胞信
号传导等功能;高浓度自由基则会造成机体损伤［7 － 8］。
现代医学研究表明，体内过多的自由基会引发脂质过
氧化链式反应，造成细胞膜损伤，导致各种细胞功能的
改变，诱发衰老、炎症、心血管、肿瘤等疾病的发
生［9 － 10］。因此，清除体内过多的自由基有助于多种疾
病的预防和治疗。
DPPH是一种很稳定的以氮为中心的自由基，若受
试物能够清除它，则提示受试物具有降低羟基自由基、
烷基自由基或者过氧自由基的有效浓度和打断脂质过
氧化链反应的作用［11］。由表 1 可以看出酢浆草水提取
液具有清除 DPPH自由基的能力，在实验的测定浓度范
围之内，随着提取物浓度的增加，其对 DPPH 自由基的
清除能力逐渐增强，说明酢浆草水提取物对 DPPH自由
基的清除能力与其浓度存在明显的剂量 －效应关系。
酢浆草水提取物具有清除 DPPH 自由基的能力可能与
其含有黄酮类化合物抗氧化活性成分有关。
DPPH法具有快速、简便、经济、反应液稳定、数据
重现性好等优点，易实现高通量筛选，且对自由基清除
剂有广谱性筛选效果，为近年来世界上应用较为广泛
的模型［12］。由 Benzie和 Strain建立的 FRAP法原理明
确，操作简便，容易标准化，而且不需要昂贵仪器，已被
广泛应用［13］。本实验采用 DPPH 法、FRAP 法检测酢
浆草水提取物对 DPPH自由基的清除能力和总的抗氧
化能力证实酢浆草具有一定的抗氧化作用。我国酢浆
草资源丰富，从中提取有效成分用于畜牧业生产和人
类疾病防治，必将产生良好的社会效益和经济效益，本
实验结果为酢浆草开发与应用提供了一定的参考依
据。
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收稿日期:2011 － 05 － 28
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·针灸与经络·
周围性面瘫针刺时机的选择
石景洋，李丽
(南阳理工学院张仲景国医学院，河南 南阳 473004)
摘 要:目的:观察针刺治疗周围性面瘫开始的时间与疗效的关系，寻找治疗面瘫的最佳治疗时机。方法:将 50 例
周围性面瘫患者按病程随机分为 2 组:发病至 1 周内急性期的患者为治疗组，发病 1 ～ 8 周内的恢复期患者及发病 8 周
以后的后遗症期为对照组，采用相同的穴位进行针刺治疗。结果:治疗组显愈率 92. 0%，对照组显愈率 68. 0%。两者经
χ2检验(χ2 = 20. 0，P ＜ 0. 05)。差异具有统计学意义，检验提示治疗组的显效率，均明显高于对照组。结论:在周围性面
瘫的急性期给予面神经良性刺激会显著提高治愈率，故本病快速完全恢复的关键时期为急性期。
关键词:面瘫;针刺疗法;时间因素
中图分类号:R246． 6 文献标识码:B 文章编号:1000 － 1719(2011)10 － 2057 － 03
Choice of the Right Time of Acupuncture Treatment for Peripheral Facial Paralysis
SHI Jing-yang，LI Li
(Zhangzhongjing Satate Medicine College of Nanyang Insitute of Fechnology Nanyang 473004，Henan，Chian)
Abstract:Objective:To observe time － effect relation of acupuncture treatment for peripheral facial paralysis (Bell＇s paralys-
is)． To approach to the best therapy for periph eral facial paralysis． Methods:Fifty cases of peripheral facial paralysis were divided
into two groups according to duration of illness． The patients at acute stage with durati on less than 7days were served as treatment
group and the patients at res ting stage and restoration stage with duration of more than 7 days as control group． Th ey were treated
with acupuncrure at same points． Results:The effective rate was 92% and 68 % in the treatment group and the control group re-
spectively，the treatment gro up was superior to the Control group． Conclusion:Acute stage is the best opportunity for acupuncture
treatment of peripheral facial paralysis．
Key words:Facial Paralysis;acupuncture the rapy;Time Factors
周围性面瘫在古代中医文献中称为“口僻”、“口
喎”、“口眼喎斜 ”等［1］。相当于现代医学的周围性面
神经麻痹，是以口眼喎斜为主要临床表现的一种疾病。
周围性面瘫的一般症状是:一侧表情肌瘫痪，不能蹙
额，眼睑不能闭合，或不能完全闭合，鼻唇沟变浅或消
失，口角下垂，露齿时口角歪向健侧为诊断要点［2］。笔
者为了探寻面瘫面神经功能的恢复情况与开始针刺治
疗的时机是否有关，而选择本病患者 50 例，随机分为
2 组，统一采用相同的针刺方法对照观察不同治疗效
果，具体如下。
1 临床资料
1. 1 一般资料 将患者随机分为治疗组 25 例和对照
组 25 例。治疗组中男 16 例，女 9 例;年龄最小 12 岁，
最大 72 岁;病程最短 4 天，最长 11 个月，病程≤3 个
月 37 例，病程 ＞ 3 个月 13 例。共观察病人 50 例，按
初诊次序随机分为急性期、恢复期、后遗症期 3 期，急
性期为治疗组，恢复期、后遗症期为对照组，组与组之
·7502·辽宁中医杂志 2011 年第 38 卷第 10 期