全 文 ：林业科技开发 2013 年第 27 卷第 3 期 123
易引起药害;花蕾露绿时，点放吡虫啉烟雾剂，防治蚜
虫;谢花后喷布 2 000 倍 10%吡虫啉 + 1 000 倍 70%
甲基托布津防治蚜虫和霉斑性穿孔病;硬核期喷布
65%代森锌 400倍液 +4 000倍 1． 8%阿维菌素防治叶
部病害和红蜘蛛;果实采收回缩后喷 800 倍 80%大生
M－45 + 3 000 倍 72%农用链霉素防治桃树流胶病。
参考文献
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( 责任编辑 田亚玲
櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒櫒
)
doi:10． 3969 / j． issn． 1000－8101． 2013． 03． 034
桤叶唐棣组培技术
王占龙，黄立华，龙忠伟
(辽宁省干旱地区造林研究所，辽宁 朝阳 122000)
摘 要:对桤叶唐棣进行组织培养研究，结果表明，诱导培养基配方为 MS + BA 0． 6 mg /L + NAA 0． 12 mg /L + IBA
0． 4 mg /L +蔗糖 35 g /L +琼脂 8 g /L，诱导率达到了 74% ; 增殖培养基配方为 MS + BA 1． 5 mg /L + IBA 1． 0 mg /L +
蔗糖 35 g /L +琼脂 8 g /L，增殖倍数达到 5． 56 倍;生根培养基配方为 1 /2MS + NAA 0． 05 mg /L + IBA 1． 0 mg /L +蔗
糖 35 g /L +琼脂 8 g /L，生根率达 91%。
关键词:桤叶唐棣; 组织培养;工厂化育苗
A tissue culture technique for Amelanchier alnifolia∥WANG Zhan-long，HUANG Li-hua，LONG Zhong-wei
Abstract:A research on tissue culture of Amelanchier alnifolia was summarized and the optimal mediums were proposed in
this paper． The medium of MS + BA 0． 6 mg /L + NAA 0． 12 mg /L + IBA 0． 4 mg /L + sucrose 35 g /L + agar 8 g /L was op-
timal for inducement，the inducement rate could be up to 74%;The medium of MS + BA 1． 5 mg /L + IBA 1． 0 mg /L + su-
crose 35 g /L + agar 8 g /L was optimal for subculture，and the number of proliferation was 5． 56;The medium of 1 /2MS +
NAA0． 05 mg /L + IBA 1． 0 mg /L + sucrose 35 g /L + agar 8 g /L was optimal for rooting，and the rooting rate was 91% ．
Key words:Amelanchier alanifolia Nutt;tissue culture;industrialization for raising tissure culture plant
Author’s address:Afforestation Research Institute of Liaoning Province in Arid Zones，Chaoyang 122000，Liaoning，China
收稿日期:2012－09－27 修回日期:2013－01－14
基金项目:国家林业局“948”项目“桤叶唐棣种质资源及果实加工技
术引进”(编号:99－4－08)。
作者简介:王占龙(1979 －) ，男，工程师，主要从事林木种苗组培快繁
研究工作。E-mail:wng2572@ 163． com
桤叶唐棣(Amelanchier alnifolia Nutt) ，属蔷薇科
唐棣属，落叶灌木或小乔木，高 1． 5 ～ 3． 0 m，果实为
小浆果，为北美洲重要的经济林树种，是国际新兴第
三代水果的代表［1］。目前世界上英国、俄罗斯、丹麦
等国家有引种栽培，适合我国长江以北至黑龙江地区
推广发展。桤叶唐棣果实营养丰富，果实含糖量达
11% ～ 19%，蛋白质 1． 9% ～ 9． 7%。鲜果含钙 88
mg /100 g，为百果之首，并且含镁 400 mg、钾 300 mg、
铁 79 mg、锌 3． 28 mg，还含钠、锰、胡萝卜素等微量元
素，富含 18 种氨基酸。果实除鲜食外，可用于酿酒、
制作食品、饮料和药品等。嫩叶可制茶或提取天然色
素。花色鲜艳美观，具有观赏价值，也是不可多得的
园林绿化树种［2］。
辽宁省干旱地区造林研究所自 1998 年开始从加
拿大、美国等国引进桤叶唐棣优良品种 12 个，经过
多年的栽培，引种已获成功。该树种在我国北方地区
生长良好，经济性状明显，现正在我国北方地区进行
欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗 技术开发
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大面积推广，故急需大量的优质苗木，以满足市场的
需求。本研究主要以桤叶唐棣的腋芽为外植体进行
组织培养技术研究，目的在于寻求建立高效、稳定的
桤叶唐棣组培工厂化育苗技术体系，为该树种的大面
积推广提供苗木支撑。
1 材料与方法
1． 1 试验材料
取自辽宁省干旱地区造林研究所桤叶唐棣种质
资源圃的 1 年生桤叶唐棣带腋芽枝条。
1． 2 试验方法
1． 2． 1 无菌材料的建立
在连续几个晴天的下午，剪取生长健壮的 1 年生
枝条，在室内去除叶片后剪成 8 cm左右的茎段，用洗
涤灵水轻轻刷洗表面，注意不要破坏腋芽，刷洗完成
后置于流动水下冲洗 4 h左右，然后在无菌条件下进
行以下操作:(1)用 75%酒精浸泡 30 s，用无菌水冲
洗 2 遍;(2)用 0． 1%升汞加几滴吐温的溶液浸泡 8
min，用无菌水冲洗 3 遍后备用［3－4］。
1． 2． 2 培养条件
外植体的腋芽诱导、增殖培养和生根培养都在培
养室内进行，基本培养基均加入 35 g /L 蔗糖、8． 0 g /L
琼脂、pH值 5． 8。培养室温度控制在(23 ± 2)℃，光
照度为 1 500 ～ 2 000 lx，光照时间为 14 ～ 16 h /d。
1． 2． 3 诱导培养基的筛选
以 MS 为基本培养基，采用 L9(34)正交试验设
计［5］，分别添加 3 种激素成分 BA、NAA、IBA 为实验
因素，每个因素各设 3 个水平，即 BA(0． 2、0． 6、1． 0)
mg /L，NAA(0． 04、0． 08、0． 12)mg /L，IBA(0． 4、0． 8、
1． 2)mg /L。每个组合接种 50 瓶，每瓶 1 个外植体，
20 d后统计其诱导率。
1． 2． 4 增殖培养基的筛选
以 MS 为基本培养基，采用 L9(34)正交试验设
计，分别添加 3 种激素成分 BA、NAA、IBA 为实验因
素，每个因素各设 3 个水平，即 BA 为 0． 5、1． 0、1． 5
mg /L，NAA为 0、0． 05、0． 10 mg /L，IBA 为 0、0． 5、1． 0
mg /L。每个组合接种 10 瓶，每瓶 10 个嫩芽，40 d 后
统计其增殖率。
1． 2． 5 生根培养基的筛选
选择生长健壮，有一定木质化，长 2 ～ 3 cm，留 2
～ 3 片叶片的无菌苗作为实验材料，进行生根培养。
以 1 /2 MS 为基本培养基，按照表 1 进行配方设计。
每个处理接种 10 瓶，每瓶接种 10 株试管苗。接种
30 d后统计生根率。
表 1 生根培养基不同激素浓度配比表 /(mg·L －1)
编号 NAA IBA
1 0 1． 5
2 0． 05 1． 0
3 0． 10 0． 5
4 0． 15 0
2 结果与分析
2． 1 不同激素浓度对外植体诱导的影响
将消毒后的外植体切取腋芽，栽植于 MS 基本培
养基中，培养 7 d 左右，挑出污染的和消毒过程中杀
死的外植体，将获得的无菌材料转入诱导培养基上，
培养 20 d后调查诱导率，调查结果详见表 2。
表 2 不同诱导培养基组合对桤叶唐棣腋芽诱导的影响
试验号
激素浓度 /(mg·L －1)
BA NAA IBA
诱导率 /%
M1 0． 2 0． 04 0． 4 50． 0
M2 0． 2 0． 08 0． 8 52． 0
M3 0． 2 0． 12 1． 2 46． 0
M4 0． 6 0． 04 0． 8 60． 0
M5 0． 6 0． 08 1． 2 46． 0
M6 0． 6 0． 12 0． 4 74． 0
M7 1． 0 0． 04 1． 2 48． 0
M8 1． 0 0． 08 0． 4 64． 0
M9 1． 0 0． 12 0． 8 68． 0
K1 148． 00 158． 00 188． 00
K2 180． 00 162． 00 180． 00
K3 178． 00 188． 00 140． 00
k1 49． 33 52． 67 62． 67
k2 60． 00 54． 00 60． 00
k3 59． 33 62． 67 46． 67
R 10． 67 10． 00 16． 00
不同的培养基激素组合对外植体腋芽诱导的影
响较大。表 2 中因素主次是以极差值的大小来衡量
的，从表中数据发现，IBA的极差最大，表明 IBA对实
验结果影响最大，其次是 BA，再次是 NAA。从 K 值
看，BA浓度在 0． 6 mg /L 时最好，NAA 浓度在 0． 12
mg /L时最好，IBA浓度在 0． 4 mg /L时最好。由此可
知，桤叶唐棣诱导培养基的最优配方为 MS + BA 0． 6
mg /L + NAA 0． 12 mg /L + IBA 0． 4 mg /L。
2． 2 不同激素浓度对增殖培养的影响
将丛生芽切开，挑选高度为 1 ～ 2 cm 的单株小
芽，转接入增殖培养基中。新芽经过 10 ～ 15 d 培养
后，底部愈伤组织开始有白色芽点出现，40 d 后，调
查有效芽数(表 3)。从表 3 可知，BA 的极差最大，
NAA次之，IBA 极差最小。从平均值看，BA 为 1． 5
mg /L时增殖倍数最高，NAA 为 0，IBA 为 1． 0 mg /L
时，增殖效果最好。因此，理论上增殖培养过程中最
佳培养基是 MS + BA 1． 5 mg /L + IBA 0． 5 mg /L。但
是在实际培养过程中，笔者发现当使用上述培养基
时，分化的不定芽开始出现玻璃化现象，我们认为是
技术开发 欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗
林业科技开发 2013 年第 27 卷第 3 期 125
因为分裂素 BA的浓度过高而生长素浓度过低所致。
因此在实际生产中我们一般采用 MS + BA 1． 5 mg /L
+ IBA 1． 0 mg /L，并严格控制培养室温度不高于23℃。
此状态下桤叶唐棣增殖芽多且生长健壮(图 1)。
表 3 不同增殖培养基对桤叶唐棣组培苗增殖的影响
试验号
激素浓度 /(mg·L －1)
BA NAA IBA
有效增殖倍数
M11 0． 5 0 0 2． 35
M12 0． 5 0． 05 0． 5 1． 66
M13 0． 5 0． 10 1． 0 1． 12
M14 1． 0 0 0． 5 4． 81
M15 1． 0 0． 05 1． 0 2． 74
M16 1． 0 0． 10 0 3． 23
M17 1． 5 0 1． 0 5． 56
M18 1． 5 0． 05 0 4． 92
M19 1． 5 0． 10 0． 5 4． 43
K1 5． 13 12． 72 10． 50
K2 10． 78 9． 32 10． 90
K3 14． 91 8． 78 9． 42
k1 1． 71 4． 24 3． 50
k2 3． 59 3． 11 3． 63
k3 4． 97 2． 93 3． 14
R 3． 26 1． 31 0． 49
图 1 桤叶唐棣增殖培养
2． 3 不同激素浓度对生根诱导的影响
切取增殖培养中高度在 1 cm 以上的增殖芽，转
接到生根培养基中进行生根培养。转接后 7 ～ 10 d
左右芽基部开始有白色根尖长出，30 d 后统计生根
率，结果见表 4。从表 4 可以看出，NAA 和 IBA 均可
以诱导桤叶唐棣组培苗生根，但两种激素配合使用生
根效果更好。因此桤叶唐棣最适生根培养基配方为
1 /2MS + NAA 0． 05 mg /L + IBA 1． 0 mg /L。
表 4 不同生长素配比对桤叶唐棣组培苗生根的影响
试验号 生长素配比 /(mg·L －1) 平均生根条数 生根率 /%
M21 IBA 1． 5 2． 6 77
M22 NAA 0． 05 + IBA 1． 0 3． 5 91
M23 NAA 0． 10 + IBA 0． 5 2． 1 84
M24 NAA 0． 15 1． 5 59
2． 4 移栽炼苗
将生根培养 30 d 左右，根长达到 1 cm以上的组
培苗转移到温室大棚内，进行炼苗移栽。温室内温度
应控制在 20 ～ 25℃，温度过低则苗生长缓慢，过高则
容易导致组培苗失水萎蔫，并且桤叶唐棣在过高的温
度下还会产生生理休眠，影响炼苗成活率。温室内光
照强度应该保持在 5 000 lx以下，光照过强的时候应
该上遮阴网。组培苗进入温室后，首先打开瓶口的封
口膜，让组培苗在温室内接受锻炼，炼苗过程中需定
期喷水，保持环境湿润［6］。
经过 7 d炼苗以后，将组培苗从瓶内取出，小心
地用自来水将苗根部的培养基洗净，置于 1%的多菌
灵溶液中浸泡 2 min 左右，移栽到消毒后的基质
中［7］。基质成分为 30%的沙子加 40%的熟表土和
30%的草炭土。移栽后需每隔 1 h 喷 1 次水，并注意
遮阴。一般 5 ～ 7 d 左右即可缓苗，15 d 后能够有新
叶长出。当小苗长到 20 cm 左右，根系发达、无病虫
害时即可移栽到苗圃了。
3 结 论
通过对桤叶唐棣组培快繁技术的研究，桤叶唐棣
组培苗外植体的诱导率达到了 74%，有效芽增殖倍
数可达到 5． 56 倍，生根率达到 91%以上。通过研究
找出了桤叶唐棣组培快繁工厂化育苗各个过程的适
宜配方，形成了较为成熟的组培工厂化育苗技术体
系，为桤叶唐棣的大规模推广奠定了技术基础。
在桤叶唐棣组培苗增殖阶段，当 BA 用量达到
1． 5 mg /L以上时，有时会发生组培苗玻璃化现象。
我们采取的办法是控制细胞分裂素的用量不超过1． 5
mg /L，降低培养室温度到不超过 23℃。此状态下桤
叶唐棣组培苗增殖数量多且生长健壮。
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( 责任编辑 田亚玲)
欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗欗 技术开发