全 文 ：  1
不同产地不同部位壮药大罗伞树定性和定量分析
张珍 1，李正文 1，黄瑞松 2*
（1.广西大学 农学院，南宁 530004；2.广西民族医药研究院，南宁 530001）
摘要: 通过对不同产地和不同部位壮药大罗伞树薄层色谱（TLC）鉴别和岩白菜素含量测定进行分
析，为壮药大罗伞树质量评价和质量标准的制定提供试验依据。方法采用 TLC 的方法，对不同产地
大罗伞树进行定性鉴别；采用 HPLC 对大罗伞树不同产地和不同部位的岩白菜素进行含量测定。色
谱条件：色谱柱为 SinoChrom ODS-BP C18（250 mm×4.6，5 μm），流动相为甲醇-水(23:77)，流速
1.0 mL·min-1，检测波长 275 nm。结果:10 批不同产地大罗伞树药材的 TLC 均可检出岩白菜素斑点；
10 批不同产地大罗伞树药材中岩白菜素平均含量为 1.67 %，但产地间含量差异较大，最高含量可达
2.58 %，最低含量 0.95 %；大罗伞树不同部位中岩白菜素含量有所差异，地下部分（根及根茎）含
量较高，平均值为 4.05 %，地上部分（茎枝和叶）含量较低，平均值为 1.21 %。建立的大罗伞树药
材 TLC 鉴别和岩白菜素含量测定方法操作简便、专属性强、重现性好、结果准确。该化学方法能准
确鉴别大罗伞树药材真伪，并测定药材中岩白菜素的含量。可为大罗伞树药材质量标准的建立提供
试验依据，对于控制壮药大罗伞树药材质量具有重要的意义。
关键词: 大罗伞树，岩白菜素，TLC，HPLC
DOI：10.11931/guihaia.gxzw201605002
Qualitative and quantitative analysis in zhuang medicine
Ardisia.quinquegona Blume from different habitats and parts
ZHANG Zhen1, LI Zheng-Wen1, HUANG Rui-Song2*
(1. College of Agricultural, Guangxi University,Nanning 530004,China;
2. Guangxi Academy of Minority Nationality Medicine and Pharmacology,Nanning 530001,China)
Abstract:
Through different regions and parts of the Ardisia.quinquegona Blume TLC identification and analyze
the containe of Bergenin to provide experimental basis for the zhuang medicine quality evaluation and
 
收稿日期：2016‐05‐03      修回日期：2016‐08‐17 
基金项目：  广西科技厅重大专项计划项目（桂科重 1355001‐4‐2）；广西壮药质量标准（第三卷）质量评价与标准
研究项目（GXZC2014‐G3‐1577‐YLZB‐B‐2）；广西卫生厅中医药民族医药科研课题（CZZC13‐13）[Supported by：Scientific 
research and technological development projects of Guangxi（NO 1355001‐4‐2）；Quality standards of Guangxi Zhuang 
medicine (Volume III) quality evaluation and standards research projects（GXZC2014‐G3‐1577‐YLZB‐B‐2）；Traditional 
Chinese Medicine National of Guangxi Health Department research projects（CZZC13‐13）] 
第一作者：  张珍（1988‐），女，河南省原阳县，在读硕士研究生，从事中草药化学分析及质量标准研究，（E‐mail）
1 443965159@qq.com 
*通讯作者：黄瑞松，主任药师，从事中草药化学分析和新药研究，（E‐mail）hrs.3130064@163.com. 
网络出版时间：2016-09-20 09:47:29
网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/45.1134.Q.20160920.0947.004.html
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standard.The different habitats of A.quinquegona Blume were identified by TLC.The content of bergenin in
different habitats and parts of A.quinquegona Blume determinated by HPLC. Using SinoChrom ODS-BP
C18 chromatographic column (250mm x 4.6, 5μm)with the detection wavelength of 275
nm,methanol-water (23:77) as mobile phase with the flow rate of 1.0mL min-1.Results The 10 batches
different eares of A.quinquegona Blume which contained bergenin by TLC.And the average contentant of
bergenin was 1.67 %,but it has big different among them,  the highest content of up to 2.58 %,the lowest
content of 0.95 %.The content of A.quinquegona Blume of different parts has different,the underground
part(root and rhizome) content higher,an average of 4.05 %,the groud part(stems and leaves) has lower,an
average of 1.21 %.The method of TLC identification method and determination of bergenin in
A.quinquegona Blume was simple, reproducibility ,and accuracy The chemical method can accurately
identify the authenticity of A.quinquegona Blume, and determination in Bergenin; It can provide
experimental basis for the establishment of A.quinquegona Blume medicinal Zhuang medicine quality
standards for the control of its quality is of great significance.
Key words: Ardisia.quinquegona Blume；Bergenin；TLC；HPLC.

大罗伞树系紫金牛科紫金牛属植物海南罗伞树 Ardisia.quinquegona Blume，又名铁凉伞、大铁凉
山、高脚凉伞、筷子根。我国主要分布于广西、云南、海南岛、福建、台湾等省区，广西主要分布
于桂南和桂西南等地区。本品为壮医常用药材，以全株入药，壮医认为本品有调火路，清热毒，消
肿痛的作用，用于咽喉疼痛、牙痛和跌打损伤（黄瑞松等，2015）。文献记载，该属植物中主要含苯
醌类、苯酚类和香豆精类化合物（江香梅等，2003），现已从该属 6 种植物中获得了岩白菜素（矮地
茶素 Bergenin），含量在 0.52 %～1.80 %之间（刘姩等，1993） 。岩白菜素具有明显的止咳、抗炎、
抗心律失常、抗病毒、护肝等作用（夏从龙等，2006；王刚等，2002）。目前有关大罗伞树药材质量
评价方法及该植物不同产地、不同部位药材岩白菜素含量的研究未见有报道，致使该药材质量控制
欠缺，给临床用药和大罗伞树植物资源的开发利用造成技术“瓶颈”。为此，本文采集了广西 10 批
不同产地大罗伞树样品，采用 TLC 对不同产地大罗伞树进行鉴别实验，采用 HPLC 对不同产地全株
和同一植株的地下部分（根及根茎）、地上部分（茎枝及叶）样品进行岩白菜素含量测定，并进行质
量分析评价，为壮药大罗伞树质量标准的制订、临床用药和植物资源开发利用提供技术支撑。
1 仪器与材料
1.1 仪器
  3
LC—20AT 高效液相色谱仪（二极管阵列检测器，日本岛津公司），LC Solution 色谱工作站；
SG2200HDT 型超声波清洗器（功率 190 W，频率 39 kHz，上海冠特超声仪器有限公司）；XS205 1/105
电子天平（瑞士梅特勒公司）；EASYPURE II 超纯水器（美国热电公司）。
1.2 材料
共采集 10 批不同产地大罗伞树样品，详见表 1。药材采收后除去杂质，洗净，切段，晒干。
其中 1 号、2 号和 5 号对号腊叶标本分别经广西中医药研究院赖茂祥研究员、广西中医药大学韦松
基教授鉴定，均为紫金牛科植物海南罗伞树 A.quinquegona Blume。岩白菜素对照品，批号 111532
（中国食品药品检定研究院，供含量测定用，含量 94.4 %）；硅胶 G 薄层板（青岛海洋化工厂分厂，
批号 20120812；烟台市化工研究所，批号 20120524）；TLC 展开系统所用甲醇、乙醇、三氯甲烷、
二氯甲烷、乙酸乙酯、甲酸均为分析纯；HPLC 流动相所用甲醇为色谱纯（默克股份两合公司）；水
为自制超纯水。
表 1 大罗伞树样品来源
Table 1 Origin of A.quinquegona Blume
编号
No.
采集地点
Site
采集时间
Time
1 融水县融水镇 1
Rongshui Town，Rongshui Country 1
2014.01
2 宾阳县露圩镇
Luxu Town，Binyang Country
2014.08
3 融水县融水镇 2
Rongshui Town，Rongshui Country 2
2014.10
4 芩溪县波塘镇
Botang Town，Qinxi Country
2014.09
5 南宁市兴宁区
Xingning District，Nanning City
2014.12
6 钦州市钦北区
Qinbei District，Qinzhou City
2015.01
7 上思县十万大山森林公园 2015.01
  4
Hundreds of mountain forest park，Shangsi Town
8 横县灵竹镇
Lingzhu Town，Heng Country
2015.03
9 武鸣县两江镇
Liangjiang Town，Wuming Country
2015.06
10 上林县大丰镇
Dafeng Town，Shanglin Country
2015.08
2 方法与结果
2.1 TLC 鉴别
2.1.1 对照品和供试品溶液制备
对照品溶液制备：取岩白菜素对照品，加甲醇溶液制成每1mL含0.5 mg的溶液，摇匀即得。
供试品溶液制备：取大罗伞树样品粉末0.3 g于具塞锥形瓶中，加入甲醇5 mL，超声处理30 min，
放冷，滤过，取滤液，即得。
2.1.2 TLC试验
参照2015年版中国药典通则0502薄层色谱法方法进行试验，薄层板为硅胶G，点样量供试品溶
液1~2µl、对照品溶液1µl，展开剂为二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（4:1:0.7:0.5），展距8 cm，显色剂
为2%三氯化铁乙醇溶液-1%铁氰化钾溶液（1:1）混合溶液，在可见光下检视。结果：10批大罗伞树
供试品薄层色谱中，在与对照品色谱相应的位置上均显示灰蓝色斑点，且Rf值适中，斑点集中清晰，
重现性好。见图1。

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图 1    大罗伞树 TLC 图 
Fig.1 TLC diagram of A.quinquegona Blume
注：1~10. 为大罗伞树药材 11. 岩白菜素对照品 A. 特征斑点：蓝色
Note：1~10. A.quinquegona Blume medicinal material 11. Bergenin reference sample A Characteristic spots: blue
2.1.3 耐用性实验考察
（1）薄层板的考察：分别对青岛海洋化工厂（批号 20120812）和烟台市化工研究所（批号
20120524）两个厂家生产的预制板进行层析效果考察。
（2）展开温度的考察：分别对 8 ℃和 25 ℃两种不同展开温度进行层析效果考察。
（3）展开相对湿度的考察：分别对 65 %和 80 %两种不同展开相对湿度进行层析效果考察。
（4）不同点样方式的考察：分别对点状点样和条带状点样进行层析效果考察。
结果：上述各试验条件下大罗伞树的 TLC 效果均较好，表明本试验建立的大罗伞树 TLC 鉴别
方法的耐用性良好。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件
色谱柱为 SinoChrom ODS-BP C18（250 mm×4.6，5 μm），流动相为甲醇-水(23:77)，流速 1.0
mL·min-1，柱温 25 ℃，进样量为对照品和供试品溶液均 10 ul，检测波长为 275 nm。
2.2.2 对照品、供试品和阴性溶液制备
对照品溶液制备：精密称定岩白菜素对照品适量，加入甲醇溶液制成浓度约为 100 μg·mL-1 的溶
液，即得。
供试品溶液制备：取本样品粉末（过 4 号筛）约 0.2 g，精密称定，置 50 mL 具塞锥形瓶中，精
密加入 50 %乙醇溶液 25 mL，称定重量，超声处理 30 min，放冷，再称定重量，用 50 %乙醇补足减
失的重量，摇匀，滤过，取滤液，即得。
阴性对照溶液：50 %乙醇溶液。
2.2.3 专属性试验
精密吸取 2.2.2 项下的对照品、供试品和阴性对照溶液各 10 μL，按 2.2.1 项下的色谱条件进样测
定。结果：供试品溶液色谱图中有岩白菜素对照品吸收峰，阴性对照溶液则无此吸收峰。说明本方
法测定大罗伞树中岩白菜素含量专属性强，无阴性干扰。见图 2。


  6











*岩白菜素（bergenin）
图 2 岩白菜素对照品（A）、阴性对照液（B）、全株供试品（C）、地下部分供试品（D）和地上部
分供试品（E）色谱图
Fig.2 chromatogram of bergenin reference sample(A),negative control(B),substance(C),
underground part substance(D) and ground part substance(E)
2.2.4 仪器最低检测限和定量限
分别取岩白菜素甲醇溶液(约 0．5 μg·uL－1)进行稀释，以 S/N=3 时注入液相色谱仪的浓度作为检
测限，以 S/N=10 时注入仪器的浓度作为定量限。结果：岩白菜素的检测限为 1.6 ng，定量限为 11．2
ng.
2.2.5 方法学验证
岩白菜素线性关系考察：精密称取岩白菜素对照品适量，加甲醇制备成 0.531 mg·mL-1 的溶液，
备用。分别精密吸取上述对照品溶液 0.2、1.0、2.0、3.0、4.0 mL，各以甲醇定容至 5 mL，摇匀。
分别精密吸取上述对照品溶液各 10μL 进样测定，纵坐标（Y）为峰面积积分值，横坐标（X）
为进样量（μg），进行标准曲线绘制，计算回归方程。结果：回归方程为 Y＝1324645.67X+4961.78，
r＝0.9999。说明岩白菜素在 0.2122～5.3053 μg 范围内与峰面积呈良好线性关系。见图 3。

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图 3    岩白菜素进样量与峰面积标准曲线 
Fig.3 Bergenin sample volume and the peak area of the standard curve

精密度试验：（1）重复性试验：取同一供试品溶液（8 号样品），重复进样测定 5 次，测定峰
面积值。结果：5 次测定岩白菜素峰面积的平均值为 1916498，RSD 为 0.12 %。
（2）重现性试验：照 2.2.2 项方法，平行制备 6 份同一批样品（8 号样品）供试品溶液，分别
进样测定。结果：6 份供试品溶液岩白菜素平均含量为 1.98 %，RSD 为 1.19 %。
稳定性试验：取同一供试品溶液（8 号样品），分别于 0、2、4、6、8 和 24 h 时进样测定。结
果：24 h 内 6 次测得的岩白菜素峰面积的平均值为 1975312，RSD 为 0.60 %。
准确度试验：采用加样回收试验方法进行，分别取已知含量的同一批样品（8 号）制备供试品
溶液 6 份，制备方法参考 2.2.2 项中的“供试品溶液制备”，但样品取样量为 0.1 g，提取溶剂为含
岩白菜素的 50 %乙醇溶液（岩白菜素浓度为 72.2 µg·mL-1）；测定方法参照 2.2. 1 项。结果：岩白
菜素平均回收率为 101.08 %，RSD 为 1.69 %。见表 2。
表 2 加样回收率试验结果（n=6）
Table 2 Results of recovery test (n=6)
原含量
Original/mg
加入量
Added/mg
测定量
Detected/mg
回收率
Recovery/%
平均回收率
X /%
相对标准偏差
RSD/%
1.7992 1.8050 3.6211 100.94 101.08 1.69
1.7953 1.8050 3.5844 99.12
1.7913 1.8050 3.5817 99.19
1.7953 1.8050 3.6265 101.45
  8
1.8092 1.8050 3.6590 102.48
1.8151 1.8050 3.6801 103.32

注：含量以药材干燥品计算。
Note：Content was calculated by the dry medicinal products.
耐用性试验：（1）色谱柱的考察：在相同的色谱条件下，分别采用赛芬 Sapphire C18 柱、菲罗
门公司 Gemini C18 柱和依利特公司 SinoChrom ODS-BP C18 三根不同品牌的色谱柱（规格均为 5µm，
4.6mm×250mm），测定同一供试品溶液（8 号样品）岩白菜素含量。结果：三根色谱柱测定的岩白菜
素含量平均值为 1.99%，RSD=2.29%(n=3)。 
（2）色谱仪的考察：在相同的色谱条件下，分别采用岛津 LC-20AT 和 Waters 2695 两台不同
品牌的色谱仪，测定同一供试品溶液（8 号样品）岩白菜素含量。结果：两台色谱仪测定的岩白菜
素含量平均值为 1.93%，RSD=0.29%(n=2)。
结果表明，本实验建立的 HPLC 测定大罗伞树中岩白菜素含量的方法对上述不同的色谱柱和仪
器具有良好的耐用性。
2.2.6 样品测定
分别取岩白菜素对照品、10 批样品的全株、地下部分和地上部分，照 2.2.2 项方法制备对照品
和供试品溶液，照 2.1 项色谱条件测定岩白菜素含量。结果：10 批样品以药材干燥品计算，岩白菜
素含量全株为 0.95 %~2.58 %，平均含量为 1.67 %；地下部分为 2.23 %~6.29 %，平均含量为 4.05 %；
地上部分为 0.70 %~2.44 %，平均含量为 1.21 %。见表 3。
表 3 不同产地和不同部位大罗伞树中岩白菜素含量测定结果(n＝2)
Table 3 Bergenin content of Ardisia.quinquegona Blume from different habitats nd parts(n=2)
编号
No.
岩白菜素含量
Bergenin content / %
全株
Whole plant
地下部分
The underground parts
地上部分
The ground parts
1 1.85 3.74 1.22
2 1.18 2.23 0.80
3 2.41 6.29 1.19
4 2.58 6.09 2.44
5 1.19 2.35 0.70
  9
6 0.95 4.99 0.80
7 1.54 3.69 0.88
8 1.78 4.43 1.25
9 1.46 2.89 1.60
10 1.73 3.79 1.26
平均值 Average 1.67 4.05 1.21

注：含量以药材干燥品计算。
Note：Content was calculated by the dry medicinal products.
3 讨论
大罗伞树为壮族民间常用的壮药，来源于紫金牛科紫金牛属植物海南罗伞树 A.quinquegona
Blume。过去人们对紫金牛属药用植物的研究多集中在朱砂根、紫金牛、红凉伞、酸苔菜等药材上(李
萍萍等，2009)，对大罗伞树的研究则甚少，特别是对其药材的鉴别和有效成分的测定未见报道，致
使该药材质量缺乏评价和控制的指标，严重影响了该药材临床用药的安全有效和开发利用。过去的
研究表明，紫金牛属植物多含有岩白菜素，岩白菜素具有显著的药理活性，以其作为紫金牛属植物
的有效成分或特征成分进行测定分析具有重要的意义。
本文 TLC 鉴别方法中，我们对比甲醇和乙醇两种不同溶剂准备的供试品溶液进行了比较，结果
以甲醇作为溶剂较乙醇作为溶剂层析斑点清晰，因此选用甲醇为提取溶剂；曾对正丁醇-冰醋酸-水
（3:1:1）、二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（4:1:0.7:0.5）和三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（4:1:1:1.5）
等不同展开剂系统进行摸索，结果：前者展开效果欠佳，后两者展开效果较好，斑点集中，Rf 值适
中。但考虑到三氯甲烷毒性较大，故本试验选用二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（4:1:0.7:0.5）作为展
开剂。
经方法学验证，表明本试验建立的大罗伞树药材岩白菜素含量测定方法，专属性强，重现性高，
耐用性良好，且该方法操作简便，可作为壮药大罗伞树药材岩含量测定方法。
供试品溶液制备中，分别对不同溶剂（甲醇、50 %甲醇、乙醇、50 %乙醇）和不同提取方法（加
热回流和超声处理）进行考察。结果：以 50 %乙醇超声提取岩白菜素得率最高。故供试品溶液制备
方法初步确定采用 50 %乙醇超声处理。为此，进一步采用正交设计方法对提取方法条件进行优化，
对药材取样量、破碎度和超声提取时间三因素三水平进行考察。根据试验结果，最终确定本品供试
品溶液制备方法的条件为：药材取样量约 0.2g，药材破碎度为过四号药典筛的粉末，超声提取时间
为 30min。
由表 3 可知，不同产地大罗伞树药材岩白菜素含量有一定差异，其中含量最高的是采集于芩溪
县波塘镇的 4 号样品，岩白菜素含量达 2.58 %，含量最低的是采集于钦州市钦北区的 6 号样品，含
量为 0.95 %；同一个地区不同区域采集的样品含量也有所不同，如采集于融水县的 1 号样品含量为
  10
1.85 %，3 号样品则为 2.41 %。因此，对大罗伞树药材进行岩白菜素含量测定，对于控制该药材质量
显得尤为必要。建议有关部门尽早制订壮药大罗伞树质量标准，并将该药材岩白菜素含量测定项收
入标准。
壮族民间使用大罗伞树常以全株入药用。本文研究结果表明，该植物不同部位均含有岩白菜素，
其中全部样品含量均是地下部分（根及根茎）显著高于地上部分（茎枝及叶），平均含量前者是 4.05 %，
后者是 1.21 %，但从充分利用资源考虑，以全株入药具有一定的科学道理。

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