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罗曼竹芋的组培快繁技术研究



全 文 :罗曼竹芋的组培快繁技术研究
张志勇1 , 胡相伟1, 2 , 张守琪1 , 王 吉1 , 李 毅2
( 1.甘肃省兰州市林木种苗繁育中心 , 甘肃 兰州  730085; 2.甘肃农业大学林学院 , 甘肃 兰州  730070)
  摘要: 以罗曼竹芋茎段作为外植体 ,进行了各个阶段的培养基筛选试验 ,结果表明 , M S+ 6. 0 mg / L 6-BA+
0. 5 mg /L N AA培养基诱导茎节芽萌发的效果最好 ,芽萌发率为 90. 9% ;继代培养基以 M S+ 10. 0 mg /L 6-BA最
为适宜 ;生根培养基以 1 /2 M S+ 1. 0 mg / L NAA效果最好 ,生根率为 92. 9%。
  关键词: 罗曼竹芋 ; 组织培养 ; 快繁
  中图分类号: S682. 161  文献标识码: A  文章编号: 1001-1463( 2007) 08-0005-03
Study on Techniques of Tissue Culture and Rapid Propagation of
Calathea Leopard ina
ZHANG Zhi-yong
1 , HU Xiang-w ei
1, 2 , ZHANG Shou-qi
1 , WANG Ji
1 , L I Yi
2
( 1. Lanzhou Center fo r Fo rest Plantlet Propaga tion, Lanzhou Gansu 730085, China; 2. Colleg e of Fo r esty, Gansu
Ag ricultural Unive rsity , Lanzhou Gansu 730070, China )
   Abstract: The la teral stem culture o f Calathea Leopardina w ere used as explant, the experiments was car ried and
media fo r v arious culture stag es w ere selec ted. The results show ed that the optima l media we re MS+ 6. 0 mg / L 6. 0-BA+ 0. 5
mg / L N AA fo r buds inducing , the boureon ra te of buds was 90. 9% ; M S+ 10. 0 mg /L 6-BA fo r propagation and 1 /2 M S+
1. 0 mg /L N AA for inducing ro ots fo rma tion r espectiv ely, th e roo ting ra te was 92. 9% .
  Key words: Calathea Leopardina; Tissue cultur e; Rapid propagation
  罗曼竹芋 (Calathea Leopardina )属竹芋科肖竹
芋属植物 [1 ] ,主脉有绿色斑纹 ,叶柄较长 ,叶型优美 ,
适宜于盆内栽培观赏。罗曼竹芋通常靠分株繁殖 ,但
繁殖系数低。为此我们于 2005年 5月在兰州市林木
种苗繁育中心开展了组织培养快速繁殖试验 ,旨在
保持优良性状 ,探索试管苗快繁技术 ,以便为生产快
速提供大量优质罗曼竹芋种苗 [ 2]。
1 材料与方法
1. 1 外植体的制备
取当年生罗曼竹芋茎段 ,除去根状物 ,用自来水
冲洗表面 20 min,然后将茎段切成约 2 cm长的小
段 ,每段带 1个隐芽 ,在超净工作台上用 75%酒精
浸泡 30 s,再置于 0. 1%升汞溶液 (加 1~ 2滴土温
80)中消毒 10 min,然后用无菌水冲洗 5次 ,用消毒
滤纸吸干表面水分 ,用手术刀片切除被消毒液损伤
的两端茎部。
1. 2 初代培养
将灭菌处理好的茎段分别接入以下培养基 [3~ 6 ]
中: ① MS+ 2. 0 mg /L 6-BA+ 0. 5 mg /L N AA;②
MS+ 4. 0 mg / L 6-BA+ 0. 5 mg / L N AA;③ MS+
收稿日期: 2007-02-05
基金项目: 兰州市科学技术局科技发展规划项目 ( 04-2-16)的部分内容
作者简介: 张志勇 ( 1963- ) ,男 ,甘肃白银人 ,工程师 ,主要从事林业生产管理工作。 联系电话: ( 0931) 6262129。
育、进行胚挽救的一种有效方法。
3. 3 小麦 D0代幼胚离体培养成苗的途径一是愈伤
组织诱导 ,二是直接诱导幼胚成苗。愈伤组织诱导途
径在愈伤组织形成 ,尤其是继代培养中 ,培养物易发
生核型变异和突变 ,并与外源 DNA导入产生的变
异相混淆 ,给后代遗传分析带来困难 ,使后代遗传分
析可信度降低的问题 ;而直接诱导幼胚成苗途径 ,虽
然一个幼胚只能得 1个幼苗 ,但可以避免变异干扰 ,
因此也是一个较好的成苗方式。
参考文献:
[1 ] 周光宇 .农业分子育种—授粉后外源 DNA导入植物
的技术 [ J].中国农业科学 , 1988, 21( 3): 1-6.
[ 2 ] 任碧华 ,郑有良 ,周永红 ,等 . 四川小麦幼胚脱分化研
究 [ J].麦类作物学报 , 2001, 21( 2): 25-30.
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1994: 106-109.
[4 ] 裴新梧 ,周文麟 ,倪建福 ,等 .缺体小麦 /黑麦的 F0代幼
胚培养选育异代换系初报 [ J].甘肃农业科技 , 1991
( 7): 10-11.
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[ 7] 王睿辉 ,陈耀辉 ,梁 虹 .胚龄和基因型对小麦幼胚体
细胞胚性无性系的诱导 [ J].西北农林科技大学学报 ,
2002, 30( 4): 17-20.
(本文责编:张雪琴 )
5甘肃农业科技  2007年 第 8期    Gansu Agr. Sci . and Techn. No. 8  2007
6. 0 mg /L 6-BA+ 0. 5 mg /L N AA;④ MS+ 8. 0
mg /L 6-BA+ 0. 5 mg /L N AA;⑤ MS+ 10. 0 mg /L
6-BA + 0. 5 mg /L N AA;⑥ MS+ 6. 0 mg /L 6-
BA+ 1. 0 mg /L N AA;⑦ MS+ 6. 0 mg /L 6-BA+
2. 0 mg /L N AA;⑧ MS+ 6. 0 mg /L 6-BA+ 3. 0
mg / L N AA;⑨ MS+ 6. 0 mg /L 6-BA+ 4. 0 mg /L
N A A;○10 MS+ 6. 0 mg /L 6-BA+ 5. 0 mg /L N AA。
培养 30 d后统计萌发芽数。
1. 3 继代培养
将初代培养新诱导的芽转入以下继代培养基
中:① MS+ 6. 0 mg /L 6-BA;② MS+ 8. 0 mg /L 6-
BA;③ M S+ 10. 0 mg /L 6-BA;④ M S+ 10. 0 mg /L
6-BA+ 0. 5 mg /L N AA; ⑤ MS+ 10. 0 mg /L 6-
BA+ 1. 0 mg /L N AA;⑥ M S+ 10. 0 mg /L 6-BA+
2. 0 mg /L N AA。培养 60 d后统计分化芽数。
1. 4 生根培养
当嫩茎长至 3~ 5 cm时将其从基部切割 ,接入
生根培养基中进行培养 ,生根培养基分别为①
1 /2 M S+ 0. 5 mg /L N AA;② 1 /2 M S+ 1. 0 mg /L
N A A;③ 1 /2 M S+ 2. 0 mg /L N AA;④ 1 /2 M S+
0. 5 mg /L IBA;⑤ 1 /2 M S+ 1. 0 mg /L IBA;⑥ 1 /2
M S+ 2. 0 mg /L IBA。培养 30 d后观测记载生根情
况。
1. 5 培养条件
蔗糖用量初代和继代培养基均为 30 g /L、生根
培养基为 15 g /L,琼脂 5 g /L, pH 5. 8,培养温度
20~ 25℃ ,光照时间为 12 h /d,光照强度为 1 500~
3 000 Lx ,光周期 12 h /d[ 2]。
2 结果与分析
2. 1 初代培养
外植体接种到初代培养基上 10 d后 ,茎节上幼
芽开始萌动。初代培养 30 d后的结果 (表 1)表明 ,当
NAA用量一定时 ,随着 6-BA浓度的递增 ,幼芽萌
发率呈递增趋势 ,当用量达到 6. 0 mg /L N AA时 ,
幼芽萌发率最高 ,为 90. 9% ,此后又呈下降趋势 ;当
6-BA用量恒定为 6. 0 mg / L不变时 ,随着 NAA浓
表 1 罗曼竹芋外植体芽分化培养结果
培养基编号 茎尖茎段数(个 ) 萌发芽数(个 ) 萌芽率(% )
① 20 7 35. 0
② 18 12 66. 7
③ 22 20 90. 9
④ 25 13 52. 0
⑤ 21 13 47. 6
⑥ 25 13 52. 0
⑦ 25 10 40. 0
⑧ 19 7 36. 8
⑨ 25 9 36. 0
○10 25 8 32. 0
度的递增 ,萌芽率呈下降趋势。可见初代培养基以
MS+ 6. 0 mg /L 6-BA+ 0. 5 mg /L N AA最为适宜。
2. 2 继代培养
将初代培养新诱导的芽转接入继代培养基中 ,
约 20 d后 ,基部叶鞘部位有分化芽产生 , 40 d后 ,有
5~ 6个芽体产生 , 60 d后 ,逐渐生长为嫩茎 ,有的开
始展叶、少数开始生根。培养 60 d后的结果 (表 2)表
明 ,在不添加 NAA的 3种培养基中 ,随着 6-BA浓
度的升高分化倍数呈递增趋势 ,以 MS+ 10. 0 mg /L
6-BA增殖倍数最高 ,为 4. 5倍 ;但当 6-BA恒定为
10. 0 mg /L时 ,随着加入 NAA浓度的增大 ,芽分化
倍数有所下降。据观察 ,在只附加有 6-BA的继代培
养基上 ,分化苗则逐渐变得弱小 ,出现丛芽状 ,高生
长受到影响 ;随着 6-BA浓度的升高 ,在有 6-BA存
在 ,并加入 NAA时 ,试管苗生长粗壮 ,甚至有些试
管苗直接生根 ,形成一个完整的植株 ,可见添加
NAA有利于形成壮苗和生根苗 ,但不宜于接种芽
增殖分化。
表 2 罗曼竹芋接种芽分化结果
培养基编号 接种芽数
(个 )
分化芽数
(个 )
分化倍数
(倍 )
① 30 114 3. 8
② 26 105 4. 0
③ 27 121 4. 5
④ 25 107 4. 3
⑤ 34 119 3. 5
⑥ 32 105 3. 3
2. 3 生根培养
当继代培养出的嫩茎长至 3~ 5 cm时将其从基
部切割 ,接入生根培养基中进行培养 ,约 20 d长出
不定根 ,同时生长 2~ 3片小叶 ; 30 d后多数试管苗
长出 3~ 5条根。 从表 3可以看出 ,在基质中附加
NAA的培养基上容易产生不定根 ,即生根率均高
于附加 IBA的培养基 ,以 1 /2 M S+ 1. 0 mg /L N AA
的生根培养基效果最好 ,生根率最高 ,为 92. 9% 。
表 3 罗曼竹芋生根培养结果
培养基编号 接种芽数
(个 )
生根芽数
(个 )
生根率
(% )
① 28 25 89. 3
② 28 26 92. 9
③ 24 20 87. 0
④ 28 24 85. 7
⑤ 24 18 75. 0
⑥ 30 21 70. 0
2. 4 炼苗移栽
将株高 5 cm左右 ,有 3~ 5条约 2 cm长根的试
管苗 ,闭瓶逐步移到散射光的自然环境中炼苗 7 d
6 甘肃农业科技  2007年 第 8期   Gansu Agr . Sci .and Techn. No. 8  2007
陇东旱塬冬小麦模式化栽培技术研究
孙海涛 1 , 郭  2 , 杜灵福 1
( 1.甘肃省灵台县种子公司 , 甘肃 灵台  744400; 2.甘肃省平凉市农业科学研究所 , 甘肃 平凉  744000)
  摘要: 以陇东旱塬冬小麦播期、播量、施纯氮量、纯磷量、行距和氮肥底追比等 6项技术指标为决策变量 ,采
用回归设计和计算机技术进行了 3 a的系统研究 ,建立了 4个独效措施数学模型 , 7个不同水分状况下各级土壤的
数学栽培模型 ,并提出了相应的农艺方案 ,经示范反馈可信度高。
  关键词: 陇东 ; 旱塬 ; 冬小麦 ; 栽培 ; 数学模型
  中图分类号: S512. 1  文献标识码: A  文章编号: 1001-1463( 2007) 08-0007-05
Study on the Techniques of Standardized Cultivation for
Winter Wheat in Arid Plateau of Longdong
SUN Hai-tao
1 , GUO Wei
2 , DU Ling-fu
1
( 1. Ling tai Seed Company , Ling tai Gansu 744400, China; 2. Pingliang Institute of Ag ricultural Sciences, Ping liang Gansu
744000, China)
   Abstract: Sowing time, sowing no rm, quantity o f nitro g en and pho spho ric fe rtilizer used, row -width and ra te of
additional nitro g en w ere r egarded a s va riable. Sy stematic r esea rch w as ca rried out on 3 a using reg ression design and
computer techniques. Mathematic models fo r four sing le measur e, ma thematic cultiv ation models fo r diffe rent soil with
differ ent wa ter capacity w ere established. Th e respectiv e ag ronomic measur es were propo sed and demonstr ated.
Demonstration show ed they we re feasible.
  Key words: Longdong ; A rid plateau; W inter w hea t; Cultiva tion; Mathema tic model
  随着科学技术的进步和农业现代化的发展 ,特
别是精细农业和效益农业的提出 ,栽培管理技术将
日趋指标化、定量化、区域化、协调化 ,即农作物生产
的模式化 ,以充分发挥品种、资源和管理的潜力。 为
收稿日期: 2007-01-16
基金项目: 甘肃省灵台县科技局项目“旱塬冬小麦良种繁育体系建设及优质冬小麦产业化开发研究与推广”的部分内容
作者简介: 孙海涛 ( 1965- ) ,男 ,甘肃灵台人 ,农艺师 ,主要从事农作物种子管理和新品种引进工作。 联系电话: ( 0)
13321309542。
后 ,从瓶中取出 ,用 35℃以下温水洗净根部培养
基 [7~ 8 ] ,用 72穴育苗盘装德国 414基质进行移栽。
在智能温室中 ,将盛有移栽苗的育苗盘放在育苗床
上 ,相对湿度控制在 85% ,温度控制在 22℃进行培
养、炼苗 ,成活率可达 95%以上。
3 小结
以罗曼竹芋茎节为外植体 ,对初代培养、继代培
养和生根培养阶段的培养基进行筛选的试验结果表
明 ,适合罗曼竹芋的初代培养基配方为 MS+ 6. 0
mg /L 6-BA+ 0. 5 mg /L N AA;继代培养基为 MS+
10. 0 mg /L 6-BA;生根培养基为 1 /2 M S+ 1. 0 mg /
L N AA。
参考文献:
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出版社 , 2004: 27-49.
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版社 , 1995: 153-156.
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[8 ] 裘文达 . 园艺植物组织培养 [M ]. 上海: 上海科学技术
出版社 , 1984: 163.
(本文责编:张雪琴 )
7甘肃农业科技  2007年 第 8期    Gansu Agr. Sci . and Techn. No. 8  2007