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花叶良姜组织培养影响因素分析



全 文 :农 业 研 究 与 应 用
随着人们物质生活水平的提高,人们对精神生
活的需求也越来越高,用花卉美化环境、装点生活,
创造出美观、舒适的氛围,已成为一种时尚。姜科
花卉株型美观、花色鲜艳、结构奇特,在世界观赏
花卉中占有一席之地[1]。
花叶良姜(Alpinia zerumbet‘Variegata’)又称
彩叶姜、花叶艳山姜、斑纹月桃等,是姜目姜科山姜
属多年生草本观叶植物, 为艳山姜的园艺栽培种 [2],
原产于东南亚热带亚热带地区,目前,我国广东、海
南、福建等地均有栽培。喜高温高湿、有耐荫性;
生长最适温为 15~30℃[3],其叶革质,矩圆状披针
形,深绿色有金黄色纵斑纹;圆锥花序下垂,苞片
白色,边缘黄色,顶端及基部粉红色,花萼近钟形,
花冠白色,6~7月开花,是观赏价值极高的观叶、
观花植物[4]。
花叶良姜主要通过其地下块茎进行分株繁殖,
繁殖系数低,且生长期较长[5-7],不能满足市场的需
要,常出现供不应求的情况 [8]。目前的植物组织培
养技术依据其繁殖速度快、繁殖系数大、繁殖方式
多、繁殖后代整齐一致,能保持原有品种的优良性
状、可获得无毒苗、可进行周年工厂化生产、经济
效益高等优点,可解决上述供不应求的现象。目前,
虽有花叶良姜组织培养方面的少量报道,但主要集
中在培养基的选择研究方面,本文从培养基的配制、
外植体的选取、激素的比例、消毒、温度、pH、光
照等多方面分析影响花叶良姜组织培养的因素。
1 培养基的选择
植物组织培养常用培养基主要有 MS 培养基、
B5 培养基、N6 培养基、White 培养基、改良
White培养基、MT培养基、WPM培养基等。培养
基的选择是植物细胞组织培养成功的关键,目前,
花叶良姜丛生芽的诱导和继代培养基主要使用 MS
培养基,生根培养基主要使用 1/2 MS培养基,然后
加入适量的激素、蔗糖和琼脂,都取得了良好的效
果[3-4,8]。
2 激素的配比
在组织培养中,外源激素的浓度及其不同激素
之间的配比对培养物的影响非常大。常用的植物激
素主要有 6-BA、NAA、IBA、2,4-D、GA3、KT、
ZT、IAA 等,在诱导花叶良姜的丛生芽时主要用
花叶良姜组织培养影响因素分析
林 茂 1 孙利娜 1 李进华 1 蒋济刚 2 钟 程 2
(1广西壮族自治区林业科学研究院,南宁 530002;2南宁市三塘十里长廊园林花木专业合作社)
摘 要:从培养基、外植体、激素、消毒、温度、pH、光照等多方面分析了影响花叶良姜组织
培养的因素,为今后花叶良姜的组培快繁提供了参考依据,同时为大规模生产花叶良姜苗提供技术
支撑。
关键词:花叶良姜 组织培养 外植体 激素 培养基
基金项目:南宁市兴宁区科学研究与技术开发项目(2014005)。
作者简介:林茂,男,壮族,广西忻城人,硕士,工程师,主要从事园林花卉栽培、育种工作。
收稿日期:2016-07-07
农 业 研 究 与 应 用
AGRICULTURAL RESEARCH AND APPLICATION
2016年第 5期(总第 166期)
(General Serial No.166)No.5 Sept.201616
农 业 研 究 与 应 用
6-BA、NAA、IBA、IAA,不同的研究者采用的浓
度有所差别,但均能诱导出丛生芽,6-BA的适宜浓
度为 2.0~3.5 mg/L,NAA、 IBA、 IAA 的浓度为
0.1~0.25 mg/L;增殖培养选用的激素种类同初代培
养大致相同,主要有 6-BA、NAA、 IBA、 IAA、
KT,但浓度配比有所不同,6-BA的适宜浓度为 2.0
~2.5 mg/L,NAA、IBA、IAA、KT的适宜浓度范
围同初代培养;生根培养基选用的激素种类主要有
NAA和 IBA,NAA的用量较前 2种培养基的用量
大,适宜浓度范围在 1.0~1.5 mg/L之间,IBA浓度
为 0.1~0.5 mg/ L[3-4,8-9]。
3 外植体的选取
外植体可分为带芽外植体和分化组织构成的外
植体 2种类型,带芽外植体包括茎尖、侧芽、原球
茎、鳞芽等,分化组织构成的外植体包括茎段、叶、
根、花茎、花瓣、花萼、花粉、胚珠、果实等。在
选择外植体时又受外植体的部位、取材季节、器官
的生育状态、发育年龄和外植体大小等的影响。花
叶良姜生长快,具有非常强的分蘖能力,生产上常
用分株方法繁殖,因此在进行组织培养时,首选的
外植体是生长健壮、无病虫害的 1年生花叶良姜的
块茎,取材季节主要集中在 4~10月。块茎作为外
植体在消毒时比较麻烦,有时脱毒不彻底,因为病
毒在植物体内分布不均匀,茎尖等生长点因为无维
管束,病毒只能通过胞间连丝传递,赶不上细胞分
裂和生长的速度,所以茎尖几乎不含病毒。此外,
茎尖培养效果好,后代稳定,目前在花叶良姜组培
过程中已被广泛应用。在试验中,也有用种子作为
外植体的,生根率和成活率都在 90 %以上,繁殖效
果理想[9]。
4 消毒处理
对外植体消毒常用的消毒剂主要有 70 %~75 %
的酒精、0.1 %~0.2 %的升汞、1 %~10 %的次氯酸
钠,对于不同的外植体,消毒剂的浓度和消毒时间
都有所不同。花叶良姜常用的外植体有块茎、茎尖
和种子,因为块茎从地下挖出,带有较多细菌,消
毒时间较长,一般先用 75 %酒精消毒 30 s至 1 min
或洗洁精、洗衣粉浸泡 10~15 min,然后无菌水冲
洗 4~5 次,其次再用 0.1%~0.15 %升汞浸泡 10
min,最后用无菌水冲洗 4~5次。茎尖较嫩,不宜
用酒精消毒时间太长,否则外植体会被杀死,所以,
一般用 75 %的酒精消毒 10 s,无菌水冲洗后再用
0.1 %的升汞浸泡 10~15 min[10]。种子消毒所用时间
更短,70 %酒精消毒 10 s,无菌水冲洗干净,再用
0.1 %升汞消毒 5 min。
5 温度、pH、光照
温度、pH、光照等环境因素对组织培养的影响
很大,外植体只有在适宜的环境范围内才能正常生
长。花叶良姜的 3种外植体需要的温度都在 25~30
℃,培养基酸碱度为 5.8左右,光照强度为 1500~
2000 Lx。不同的外植体需要的光照时间有所差异,
块茎需要光照时间约为 12 h/d,茎尖需要光照时间
8 h/d,种子需要光照时间 10 h/d。
6 展望
目前花叶良姜的组织培养主要是采取直接诱导
不定芽的方法,该方法的后代稳定,保持优良性状,
不易产生变异,是生产上常用和有效的方法,但是
存在增殖系数不够高的问题。未来应进一步研究花
叶良姜愈伤组织高频再生体系来提高增殖系数。此
外,还可以为遗传转化、基因工程和创造新的突变
体奠定基础。
参考文献
[1] 路国辉,王英强. 姜科植物花卉应用现状及开
发前景[J]. 北方园艺,2011(10):82-86.
[2] 鞠玉栋,吴维坚.花叶良姜的生物学特性及栽
培管理[J]. 中国园艺文摘,2010(1):88.
[3] 陈玉梅. 花叶良姜组培快繁体系建立的探讨
[J]. 中国科技信息,2014(12):51-52.
[4] 赵秀芳. 花叶艳山姜组培快繁技术的研究[J].
中国农学通报,2004,20(6):34-35,38.
[5] 郝静韦. 花叶良姜的栽培观赏[J]. 中国花卉
盆景,1996(6):24.
[6] 林瓞文. 珠三角畅销的绿化品种——花叶艳
山姜[J]. 中国花卉艺,2006(12):30-31.
[7] 曾宋君. 叶花俱美花叶艳山姜[J]. 园林,2001
(7):24.
[8] 秦丽凤,文清岚,宋西娟,等.花叶良姜组培生
17
农 业 研 究 与 应 用
产与栽培管理技术[J]. 南方园艺,2013,24
(5):51-53.
[9] 黄 赛,潘 梅,戚华沙,等. 花叶艳山姜试管苗
生产技术研究[J]. 林业科学,2013(19):
186-187.
[10] 潘梅,符瑞侃,王景飞,等.花叶艳山姜茎尖离
体快繁技术[J]. 热带生物学报,2012,3(3):
267-270.
Analysis of Influencing Factors of Tissue Culture in Alpinia
zerumbet ‘Variegata’
Lin Mao1,Sun Li-na1,Li Jin-hua1,Jiang Ji-gang2,Zhong Cheng2
(1Guangxi Zhuang Autonomous Region Forestry Research Institute,Nanning 530002, China;
2 Santang Shilichanglang Ornamental Flowers and Trees Cooperatives)
Abstract:This paper analyzes the factors including culture medium,explant,hormone,
sterilization, temperature, pH, light, etc. which influencing the tissue culture of Alpinia
zerumbet ‘Variegata’,so as to provide reference basis for the future tissue culture of Alpinia
zerumbet‘Variegata’, and offer technical support for the mass production of Alpinia zerum-
bet‘Variegata’seedlings.
Key words:Alpinia zerumbet ‘Variegata’; tissue culture;explant;hormone;culture
medium
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