全 文 ：技术主题
Technology Feature
山竹组织培养技术
李艳霞 黄东梅 魏卿 李羽佳 林妃 许奕 李敬阳 *
中国热带农业科学院海口实验站,海南省香蕉遗传改良重点实验室,海口, 570102
*通讯作者, lijingyanglee@163.com
摘 要 本研究以山竹的合子胚为组织培养的外植体材料，研究不同激素浓度配比对山竹得出芽诱导 /增
殖诱导及生根诱导的影响，以获得一套山竹组织快繁技术，结果表明：GA3能有效提高山竹合子胚的出芽
率，最适的山竹合子胚组织培养的基本培养基为WPM；诱导芽的最适培养基为WPM+3.0 mg/L 6-BA+GA3
1.0 mg/L，增殖最适培养基为WPM+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA4+7。生根最适培养基为 1/2 WPM+1.0 mg/L
IBA+1.0 g/L AC。
关键词 山竹,组织培养,培养基
Tissue Culture Technology of Garcinia mangostana
Li Yanxia Huang Dongmei Wei Qing Li Yujia Lin Fei Xu Yi Li Jingyang *
Hainan Key Laboratory of Banana Genetic Improvement, Haikou Experimental Station, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou,
570102
* Corresponding author, lijingyanglee@163.com
DOI: 10.13417/j.gab.034.002785
Abstract Using the zygote embryo of Garcinia mangostana as explants, the effect of different hormone conc-
entration ratio on bud induction, multiplication and rooting were studied to obtain a set of rapid propagation
technology of Garcinia mangostana. Results showed that GA3 could improve seeds germination rate; the most
suitable basic medium for zygote embryo tissue culture was WPM, the best medium for bud induction was WPM+
3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA3; the optimal medium for multiplication was WPM+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA4+7,
and the most suitable medium for rooting was 1/2 WPM+IBA 1.0 mg/L+1.0 g/L AC.
Keywords Garcinia mangostana, Tissue culture, Culture medium
基金项目：本研究由科技支撑子课题(2014BAD16B00)资助
基因组学与应用生物学，2015年，第 34卷，第 12期，第 2785-2788页
Genomics and Applied Biology, 2015, Vol.34, No.12, 2785-2788
山竹是《中国植物志》收载的莽吉柿(Garcinia
mangostana L.)的俗名，又名山竺、山竹子、倒捻子。既
可以指植物山竹，也可以指这种植物的果实山竹。为
著名的热带水果，可生食或制果脯。原产于东南亚，一
般种植 10年才开始结果，对环境要求非常严格，与榴
莲齐名，号称“果中皇后”。小乔木，高 12~20 m，分枝
多而密集，交互对生。单叶对生，椭圆形或长卵椭圆
形，叶片厚革质，具光泽，椭圆形或椭圆状矩圆形。
一般单花顶生，有时可见 2~3朵花长在一起，
仅有雌花，无单性雄花，花开后 1~2 d脱落，花期
9~10月。浆果亚球形，直径 3.5~7 cm，山竹成熟时的
颜色为紫红色，带有黄褐色的斑块，表面光滑，内有
种子 4~5枚，假种皮为白色瓢状且多汁。果期在每年
的 11月到 12月。亚洲和非洲热带地区广泛栽培；我
国台湾、福建、广东和云南也有引种或试种。
山竹为藤黄科(Clusiaceae)藤黄属(Garcinia Linn)
目前中国有 21种，主要分布在我国南亚热带地区，主
要生长中海拔及以下的山林中。中国的两个可食用品
种为岭南竹和多花竹。山竹果肉酸甜软嫩且汁水丰富，
维他命、有机酸、植物蛋白及矿质元素等含量丰富(曹
利民等, 2013,中国南方果树, 42(4): 126-134)，因此受
到人们的青睐。但其性寒，有解热降火分解油脂、生津
健脾等作用，被广泛应用在医药上(彭文书等, 2011)。
所以山竹是兼具药用价值的经济作物。近年来，国内有
关山竹方面的研究报道多数都拘泥于营养天然产物
成分的分离提取方面，例如原花青素(杨青等, 2013)具
有挥发性的成分(余辅松等, 2013)、三萜类物质的成分
(王宁等, 2012)、多酚类的物质(李扬等, 2013)等。
1结果与分析
1.1不同浓度的 6-BA和 GA3的浓度对山竹胚诱导
将经过表面消毒的山竹合子胚接种在诱导培养
基上培养 20 d 后进行统计，由不同浓度 6-BA 和
GA3 (林妃等, 2015)对山竹合子胚诱导不定芽的影响
结果可以看出，在改良 MS+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L
GA3的培养基中，10 d后，胚芽的颜色开始逐渐发生
变化，表明：15 d后，胚芽开始萌动；25 d后，顶芽基
部有褐绿色的愈伤形成，芽体顶端伸出 1~2片幼叶。
在其它启动培养基上生长的胚芽比较缓慢，而且不
定芽的数量很少。因此，MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L
GA3的培养基为山竹芽诱导培养的培养基，详见表 1。
1.2增殖培养最适培养基的选择
30 d后，幼芽长度为 3~4 cm时，将芽体基部切
下，保留带顶芽的 2~3 cm的部分，接种到增殖培养
基中培养 40 d。由表 2 可以看出：增殖倍数随着
6-BA浓度呈现先增降低的趋势；在 6-BA的浓度为
3.0 mg/L时，增殖倍数平均约为 5.1倍；在 2.5 mg/L
时，平均增殖倍数约为 4.5倍。在 3.5 mg/L 6-BA条
件下增殖倍数为 4.3。因此最佳增殖培养基为：
WPM+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L GA4+7，详见表 2。
1.3 生根培养
将增殖芽接种于含有 IBA 的 1/2 改良 MS 培
养基上进行生根培养，并加入蔗糖 30 g/L卡拉胶
7.0 g/L，保持 pH为 5.8。每种培养基接种 30 瓶，
20 d 后统计结果。将长势健壮的组培苗接种在设
有 IBA浓度梯度的生根培养基上，每种培养基接
6-BA
(mg/L)
2.5
2.5
2.5
3.0
3.0
3.0
3.5
3.5
3.5
增殖倍数
Multiplication
3.3
3.5
3.7
4.9
5.5
5.3
4.2
4.3
4.5
生长情况
Growth situation
正常
Normal
正常
Normal
正常
Normal
正常
Normal
正常
Normal
正常
Normal
正常
Normal
少数玻璃化
A handful of
the vitrification
大多数玻璃化
Most of the
vitrification
平均增殖倍数
The average of
multiplication
4.5
5.1
4.3
6-BA
(mg/L)
2.5
2.5
2.5
3.0
3.0
3.0
3.5
3.5
3.5
GA3
(mg /L)
0.75
1.0
1.25
0.75
1.0
1.25
0.75
1.0
1.25
接种数
Vaccination
number
20
20
20
20
20
20
20
20
20
出芽数
Germination
number
0
4
3
6
18
7
10
8
5
出芽率(%)
Germination rate
(%)
0
2.0
15.0
30.0
90.0
35.0
50.0
40.0
0
表 1不同浓度培养基下诱导出芽情况
Table 1 Different concentrations of media to terminal bud induc-
tion of Garcinia mangostana
表 2不同浓度培养基下山竹增殖情况
Table 2 Proliferation results in different proliferation culture
30 个茎段，25 d 后观察结果。不同浓度的 IBA 对
根的质量和数量都有很显著的影响，IBA 的浓度
在 0.1~1.0 mg/L 之间时 ，生根率会随着 IBA 浓度
的增加而提高。在浓度为 0.1 mg/L的培养基上时，
平均生根率约为 64.0%；在 0.5 mg/L 的培养基上
时，生根率平均约为 83.0%；1.0 mg/L时，生根率平
均约为 94.0%，详见表 3。
2讨论
在山竹组织快繁的研究中，对外植体的消毒的
彻底程度直接影响组培苗的成活率。消毒不彻底将
使后续研究无法顺利开展，所以，在对外植体消毒
时，一定要严格控制 75%的酒精消毒时间为 30 s，5%
的次氯酸钠 15 min，0.1‰的升汞 10 min。
在山竹的芽诱导培养过程中，发现并不是 6-BA
的浓度越高出芽率越高，需要一个最适的浓度，高于
或低于这个浓度都会直接影响芽的诱导。且不同种
的植物或者同种植物的不同组织器官的快繁培养体
系所需的 6-BA浓度也不尽相同，所以，在进行芽诱
导的时期，细胞分裂素浓度非常关键。
山竹组织培养技术
Tissue Culture Technology of Garcinia mangostana 2786
基因组学与应用生物学
Genomics and Applied Biology
IBA (mg/L)
0.1
0.1
0.1
0.5
0.5
0.5
1.0
1.0
1.0
接种数
Vaccination number
30
30
30
30
30
30
30
30
30
生根茎段数
Rooting number
18
16
18
25
25
26
27
27
29
生根率(%)
Rooting (%)
60.0
53.3
60.0
83.3
83.3
86.7
90.0
90.0
96.7
平均生根率(%)
Average rooting rate (%)
64.0
83.0
94.0
表 3不同浓度 IBA对山竹组培苗生根的影响
Table 3 Different concentrations of the hormone effects on rooting medium of Garcinia mangostana
3材料与方法
3.1试验材料
选择新鲜山竹种胚获得的无菌苗为材料，山竹
种子取自新鲜、成熟的山竹。
3.2外植体消毒方法及培养条件
选取新鲜、成熟山竹果实，先用洗洁精进行表面
清洗，然后放置流水中冲洗 1 h，接着转至超净工作台
用 70%酒精擦拭表面进行初步消毒，然后用经消毒
后的刀将其剖开，取出种子，小心将表面纤维包衣去
除，获得山竹种子。将山竹种子用 75%的乙醇消毒
30 s，然后用无菌水冲洗 3~4遍，用 5%的次氯酸钠消
毒 15 min，用无菌水冲洗 3~4遍，再用 0.1‰的升汞
消毒 10 min，再用无菌水冲洗 4~5遍。将消毒后山竹
的种子横向切开后接种在改良的 MS培养基上，含
3.0 mg/L 6-BA，1.0 mg/L GA3，30 g 蔗糖 /L，7.5 g 卡
拉胶 /L，pH 5.8放在暗培养室进行启动培养，30 d后
统计结果。
3.3基本培养基的选择
将获得的芽分别接种于含有 GA4+7 1.0 mg/L、
3.0 mg/L 6-BA 的改良 WPM、MS 培养基上进行增
值培养 30 g/L、卡拉胶 7.5 g/L，pH调至 5.8。每种培
养基接种 30瓶，20 d后统计结果。
3.4增殖培养最适培养基的选择
将丛生芽转接种到以 WPM为基本培养基，附
加 3 mg/L 6-BA、GA4+7 1.0 mg/L。
3.5生根培养
将增殖芽接种于含有 IBA和NAA的 1/2改良MS
培养基上进行生根培养，含蔗糖 30 g/L+琼脂 7.5 g/L，
pH 5.8。每种培养基接种 30瓶，30 d后统计结果。
作者贡献
李艳霞主要负责本实验的设计、实验材料的采
集、数据处理及最后论文的撰写；李敬阳负责指导
实验设计及实验方案的实施；黄东梅负责部分实验
的操作；魏卿、李羽佳、林妃和许奕协助部分实验材
料处理。
致谢
本研究由科技支撑子课题(2014BAD16B00)资助。
参考文献
Li Y., 2013, Study on the extraction technoloy of polyphenols
from mangosteen shell, Jilin Nongye Keji Xueyuan Xuebao
(Journal of Jilin Agricultural Science and Technology Uni-
versity), 22(1): 16-18 (李扬, 2013,山竹果壳中多酚提取工
艺的研究,吉林农业科技学院学报, 22(1): 16-18)
Lin F., Li J.Y., Huang D.M., Xu Y., Li Y.J., Li Y.X., Ding Z.L.,
and Tang F.L., 2015, Study of tissue culture and plant regen-
eration of Aquilaria sinensis, Jiyinzuxue Yu Yingyong Shen-
gwuxue (Genomics and Applied Biology), 34(6): 1296-1299
(林妃,李敬阳,黄东梅,许奕,李羽佳,李艳霞,丁哲利,唐
粉玲, 2015,白木香组织培养技术及植株再生的研究,基
因组学与应用生物学, 34(6): 1296-1299)
Peng W.S., Chen Y.J., Zhong W.W., Shi X., and Xiong Y., 2011,
Study pigment stability and antimicrobial activity from
Garcinia mangostana crust, Shipin Yanjiu Yu Kaifa (Food
Resecher And Development), 3(12): 55-60 (彭文书,陈毅坚,
钟文武,石雪,熊勇, 2011,山竹果壳色素的稳定性及抑菌
活性研究,食品研究与开发, 3(12): 55-60)
2787
山竹组织培养技术
Tissue Culture Technology of Garcinia mangostana
Wang N., Tang L.C., Yao H.P., Deng S.M., and Yang X.H.,
2012, Trierpenes from the leaves of Garcinia oblongifolia,
ShizhenGuoyi Guoxue (LishizhenMedicine andMateriaMe-
dica Research), 23(11): 2700-2701 (王宁,汤丽昌,姚海萍,
邓世明,杨先会, 2012,岭南山竹子叶三萜成分研究,时珍
国医国学, 23(11): 2700-2701)
Yang Q., He C.B., Wei H.C., Bai R.A., and Xiong H.J., 2013,
Purification by macroreticular resin of procyanidines from
mangosteen shell, Redai Zuowu Xuebao (Chinese Journal
of Tropical Crops), 34(3): 569-573 (杨青,何传波,魏好程,
白仁奥,熊何建, 2013,大孔树脂纯化山竹壳原花青素的
研究,热带作物学报, 34(3): 569-573)
Yu F.S., Yao H.P., Deng S.M., Liu C.Y., and Yang X.H., 2013,
Chemical composition volatile oil in the shem of oblongifoli-
a, Hainan Daxue Xuebao (Zirankexue Ban) (Natural Science
Journal of Hainan University), 31(2): 124-126 (余辅松,姚海
萍,邓世明,刘春宇,杨先会, 2013,岭南山竹子茎皮的挥发
性成分分析,海南大学学报(自然科学版), 31(2): 124-126)
2788