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超声法提取砂仁有效成分醋酸龙脑酯的工艺研究



全 文 :4 讨论
随着现代医学和分子技术的发展 , 以及对中草药有效成分的
认识和全面深入的探讨 ,微量元素对中草药临床治疗效果的影响
越来越引起人们的重视 [ 10] 。实验研究证明 , 微量元素除了直接
补充和调节人体内的需要和参与机体各种生理生化过程 , 起到营
养及防治疾病的作用外 ,也常常与有机成分形成配合物产生协同
或拮抗作用 ,从而增强或降低药的疗效 [ 11] 。
Mg是一种人体内部结构的稳定剂和细胞内酶的辅因子 , 是
细胞内液第二重要离子 ,参与体内蛋白质的合成和肌肉收缩及体
温调节作用;Mn是多种酶的组成成分或激活剂 , 参与蛋白质的合
成 、遗传信息的传递及甲状腺和性腺的分泌。 Mn还调节钙 、磷代
谢平衡 ,锰离子进入血液中能提高血液的凝血性 , 减低血管通透
性 ,使炎症消失。人体缺 Mn会导致营养不良 , 生长迟缓 ,骨和软
骨异常 ,智力呆滞 , 脑机能减退 ,头发胡须脱色 ,心血管系统疾病 ,
性腺功能不全等症状 [ 12];钙在体内有降低血压和减少中风发病
的作用 , 脑血管病患者体内钙明显降低;Fe参与血红蛋白 、肌红
蛋白 、细胞色素 、细胞色素氧化酶 、过氧化氢酶的合成 ,在营养 、免
疫 、能量代谢方面起着重要作用。一旦缺铁 ,会引起贫血 、抵抗力
下降 ,影响细胞及机体的寿命;Cu是人体内一种特殊的催化剂 ,
参与各种生理过程和代谢活动 ,能促进骨骼 、血管和皮肤健康 , 维
护中枢神经系统的完整性 , 缺乏时会影响毛发颜色的深与浅和毛
发分布的密与疏 , 缺 Cu还是导致贫血的原因之一 , 影响铁的吸
收和利用;Zn是人体内一百多种酶的组成成分和许多酶的催化
剂 ,对核酸及蛋白质的合成 、细胞的分裂和增殖以及新陈代谢都
有直接作用 ,同时又参与机体的免疫过程 ,能增强防御功能 , 加速
生长发育 ,增强创伤组织的再生能力 ,缺乏时可影响味觉和食欲 ,
甚至发生异嗜症。
本文采用水煮法提取并用火焰原子吸收光谱法测定赣南野
生枫香树叶中 Mg, Mn, Ca, Fe, Cu, Zn的含量 ,所测结果 Mg, Mn,
Ca含量较高 ,分别为 125.17, 126.42, 82.28 μg/g;Fe, Cu, Zn的
含量较低 ,分别为 0.53, 0.21, 0.89μg/g;与谢跃生等 [ 5]报道较接
近;但与黄澜等 [ 13]报道差异较大。产生差异的原因可能是枫香
树叶中微量元素的含量与其产地 、采收季节 、提取方式等因素有
关。枫香树叶中微量元素是其重要组成分 , 其疗效不仅与有机成
分有关 ,还与其所含的微量元素的种类及含量有密切的关系 , 其
药性与微量元素的关系有待进一步研究。
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制剂与炮制
收稿日期:2009-08-24; 修订日期:2009-11-18
基金项目:四川省卫生厅科研项目(No.【2006】437);
泸州医学院重点科研资助项目(2004-10-86)
作者简介:黄群莲(1972-),女(汉族), 四川自贡人 ,现任泸州医学院附属
医院主管中药师,学士学位 ,主要从事临床中药学和质量标准研究工作.
*通讯作者简介:唐 灿(1967-),男(汉族),四川广安人 ,现任泸州医学
院药学院教授 ,硕士学位 ,主要从事中药制备工艺与质量标准研究工作.
超声法提取砂仁有效成分醋酸龙脑酯的工艺研究
黄群莲 1 , 王利国2 , 唐 灿 3* , 张彦燕3 , 王 谦 3 , 吴知桂1 , 赵 剑 2
(1.泸州医学院附属医院 ,四川 泸州 646000;
2.泸州医学院附属中医医院 ,四川 泸州 646000; 3.泸州医学院·药学院 ,四川 泸州 646000)
摘要:目的 优选超声提取砂仁醋酸龙脑酯的最佳工艺参数。方法 采用正交设计法 , 对超声提取温度 、提取强度(频
率)、每次提取时间 、提取次数等因素进行考察。通过气相色谱法测定各提取液中主要有效成分醋酸龙脑酯的含量 , 确定
其最佳工艺。结果 最佳成型工艺参数为:将砂仁粉碎为 100目细粉 ,每次加入砂仁量的 3倍量醋酸乙酯 , 提取温度恒定
在 55℃,提取强度为中等(40Hz),每次提取 2 h,提取 3次 , 醋酸龙脑酯的收率达到 11.52 mg/g砂仁 , RSD% =1.52, n=
6。结论 该工艺合理可行。
关键词:砂仁; 醋酸龙脑酯; 超声法提取; 气相色谱法
中图分类号:R284.1  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2010)06-1458-02
  根据超声对药材有效的空化 、加热效应 ,具有效率高 、方便快
捷 ,不破坏药材的有效成分等特点 , 本课题组拟采用超声法提取
砂仁主要有效成分醋酸龙脑酯。
1 器材
GX-300A氮 、氢 、空三气一体发生器(北京市中兴科技发展
有限公司), GC112A气相色谱仪(上海分析仪器厂)、AS701KDT
UltrasonicCleaner(天津自动化科学仪器有限公司)、双圈牌电子
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 6期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21 NO.6
分析天平(上海天平仪器厂), 10, 25 ml容量瓶 , 1 μl微量进样
器;砂仁药材购自泸州荷花中药饮片有限公司(采自广东省阳春
县), 经课题组鉴定为阳春砂。醋酸乙酯(分析纯)、醋酸龙脑酯
化学对照品(供含量测定用 , 759-200102, 0.2 ml), 中国药品生
物制品检定所提供。
2 方法与结果
2.1 考察因素水平 以醋酸龙脑酯收率为主要指标 ,总浸出物为
次要指标 ,考虑提取温度 、提取强度(频率)、每次提取时间 、提取
次数 4因素 3水平 , 见表 1。采用 L9(34)正交表优选超声提取砂
仁醋酸龙脑酯的最佳工艺参数。
2.2 工艺优选 精密称定砂仁药材粉末(过 6号筛 , 100目)约 10
g,具体情况见表 2。按照正交表安排进行超声提取。无论提取
几次 ,每个编号试验加入醋酸乙酯的总量均为 90 ml。若提取 1
次 ,则加入 90ml;若提取 2次 ,则每次加入 45ml;若提取 3次 ,则
每次加入 30 ml。目的是确保加入的溶媒量应一致才有可比性。
每个编号试验的提取液混匀后 , 用定量滤纸过滤后直接进样 , 每
次进样 1 μl。
表 1 考察因素和水平


A
提取温度 T/℃
B
提取强度f/Hz
C
每次提取时间 t/min
D
提取次数
1 45 20(弱) 30 1
2 55 40(中) 60 2
3 65 80(强) 120 3
表 2 超声提取法正交实验安排及结果
No. A B C D 砂仁量/g 积分面积
醋酸龙脑酯浓
度 C/μg·μl-1
醋酸龙脑
酯量 m/mg
醋酸龙脑酯
收率 C/mg· g-1
1 1 1 1 1 10.000 4 21 093.1 0.289 17.34 1.734
2 1 2 2 2 10.000 7 70 200.1 1.234 111.06 11.10
3 1 3 3 3 10.000 2 75 170.1 1.329 119.61 11.96
4 2 1 2 3 10.000 6 65 018.0 1.134 102.06 10.20
5 2 2 3 1 10.000 2 72 077.1 1.270 114.30 11.43
6 2 3 1 2 10.000 6 58 410.2 1.007 90.63 9.063
7 3 1 3 2 10.000 7 64 525.1 1.125 101.25 10.12
8 3 2 2 3 10.000 1 66 836.8 1.169 105.21 10.52
9 3 3 1 1 10.000 6 31 855.9 0.496 0 44.64 4.464
K1 24.794 22.054 15.260 17.628K2 30.692 33.050 31.820 30.282K3 25.104 25.486 33.510 32.680
Ⅰ 8.265 7.351 5.087 5.876
Ⅱ 10.231 11.017 10.607 10.094
Ⅲ 8.368 8.495 11.170 10.893
R 1.966 3.666 6.083 5.017
SS 0.4295 1.493 4.111 2.797
  直观分析与方差分析均得出超声法提取砂仁醋酸龙脑酯的
影响因素由大到小排列:C >D > B > A, 最佳工艺为
A2B2C3D3。见表 3。
表 3 超声提取法工艺方差分析
方差来源 方差 自由度 F值 P
A 0.4295 2 - -
B 1.493 2 3.476 >0.05
C 4.111 2 9.572 <0.05
D 2.797 2 6.512 <0.05
E 0.4295 8 - -
2.3 验证实验 按优选提取工艺 A2B2C3D3操作 ,重复提取 6次
砂仁醋酸龙脑酯 , 测定醋酸龙脑酯含量 , 醋酸龙脑酯的收率为
11.52 mg/g砂仁 , RSD% =1.52, n=6。 说明该工艺能够很好重
复并将醋酸龙脑酯提取达到较高水平。超声法提取最佳工艺参
数:将砂仁粉碎为 100目细粉 ,每次加入砂仁量的 3倍量醋酸乙
酯 ,提取温度恒定在 55℃, 提取强度为中等(40Hz), 每次提取 2
h, 提取 3次。
3 讨论
超声法提取砂仁醋酸龙脑酯的优点是:醋酸龙脑酯收率较
高 ,适合于大生产提取 , 耗时少 , 方便 , 耗水少 , 污染小 。缺点是:
大生产设备成本高 , 北京宏祥隆公司生产的中试水平的超声提取
成套设备大约在 50万元 , 大生产成套设备大约在 100万元以上;
砂仁醋酸龙脑酯与溶媒醋酸乙酯分离成本高;设备噪声较大;耗
电多。
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.6 时珍国医国药 2010年第 21卷第 6期