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海南砂仁的离体快繁



全 文 :!!!!海南砂仁 !!#$ %#&’(%()$%*+, # $#
%&’! 别名海南壳砂仁 壳砂! 为姜科豆寇
属多年生草本植物! 喜高温 荫湿 多雾的
气候#$# 砂仁系海南 $四大南药%%砂仁& 槟榔&
益智 & 巴戟&之一# 海南为砂仁的主要产地#
海南砂仁多为野生! 从 ’( 世纪 )(年代起逐
步开展了人工栽培! 种植面积逐渐扩大! 产
量也逐年增长’$# 但是砂仁至今仍是非常紧
缺的中药材! 目前海南的种植面积只有大约
*+(!,-’! 总产量 *((!.! 而全国年需求量达
/0(((!.# 砂仁易种易管! 一般 *!1 后便可有
收获! 可连续收获 2(01 以上# 利用组织培
养技术可快速大量地生产优质种苗! 姜科其
它植物如大肉姜& 圆瓣姜花& 姜黄花& 春砂
仁& 花叶良姜& 花叶艳山姜等都已有过组织
培养成功的报道*34$! 但国内尚未见海南砂
仁组织培养的相关报道# 本试验旨在建立海
南砂仁的离体快繁技术体系! 为工厂化育苗
提供技术支持#
!材料和方法
!#!00材料
由农学院教学基地提供的海南砂仁笋芽
作为外植体# 按常规方法进行外植体表面消
毒#
!$%00试验方法
!$%$!00再生培养阶段
再生培养阶段中所使用的各种培养基的
配方列于表 2# 培养温度 ’56’407! 光照
时间 2(82’0,9:! 光照度 20(((;205((0<=#
( 芽的诱导分化培养# 培养基分 * 种
%即设 * 个处理! 其配方见表 2>! 每种培养基接种
/(瓶%重复>! 每瓶%小区>接种 ’个外植体#
) 芽的增殖培养# 培养基分 5 种%其配方
见表 2>! 每种培养基接种 2( 瓶! 每瓶接种 *
个芽丛#
* 生根壮苗培养# 培养基分 * 种%其配方
见表 2>! 每种培养基接种 ’(瓶! 每瓶植入芽
长 %?’0@-的单芽 *个#
!$%$%00炼苗阶段
000000000000000000000000000000
A 收稿日期B0’((*C()C’D
000责任编辑90郑里程
000000
海南砂仁的离体快繁 !
莫 饶 朱文丽 吴繁花 戚春霖 黄贵修
+华南热带农业大学农学院 海南儋州 ,-.-/-’
摘 要 研究了以笋芽作外植体的海南砂仁%-#$ %#&)(%()$%*+, 0 $0 %&>的快繁技术# 试验
结果表明’ EFGHI0*J(0-KLMNOII0(J(50-K9M 的培养基有利于芽的诱导培养( 增殖培养基可采用
EFPHI04J(0-K9MQOII0(J(50-K9M( 在 29’0EFROII02J(0-K9M 的培养基上进行生根壮苗培养的效果
最佳( 炼苗 2/0: 的效果较 +0: 的佳! 移栽成活率可达 2((S#
关键词 组织培养 1 笋芽培养 1 海南砂仁
中图法分类号 T42*J2’01 F5)+JD
热 带 农 业 科 学’((*年 4 月 第 ’* 卷第 / 期
!#$%&% ’()*$+, (- .*(/#!+, +0*#!),.)*%(122 3445 6789:5; $793
2C C
!#年 $ 月 第 !# 卷第 % 期热带农业科学
&&&&单芽经生根培养 #&’ 后! 转移到荫棚
中炼苗 炼苗时间设 (# )%&’&!个处理
!#$&&移栽阶段
炼苗结束后! 取出小苗! 用清水洗净附
着在根系上的培养基! 然后栽植在营养杯中
*营养土由表土# 河砂# 椰糠# 腐熟牛粪混合配成+! 置
于荫棚下 按常规育苗技术进行水肥管理
!$,&观察项目与方法
!$!&&萌发率
诱导培养 #&’ 后! 观察记录已萌发的
外植体的数量! 计算笋芽萌发率
萌发率-已萌发的外植体数.接种的外植体总数
!$#,,增殖芽数
增殖培养前及接种培养 #,’ 后! 分别
记录每一芽丛的芽数! 计算增殖芽数
增殖芽数/培养后芽数0培养前的芽数
!$$,,生根培养! 移栽效果
接种前测量单芽重量# 高度! 培养后定
期观察再生植株的生长情况! 炼苗结束时计
算生根数量# 平均根长# 植株增重# 植株增
高$ 试管苗在营养杯中生长稳定后! 统计移
栽成活率
!%,,数据处理
试验观察数据采用国际标准统计软件
121*3,45)!+进行方差分析
#&&结果与分析
#!,,激素配比对芽诱导培养的影响
诱导培养 )%6)7&’ 后! 各处理的笋芽
开始萌动$ !8&’时各处理的笋芽基部都有明
显的膨大$ 接种 #&’ 后笋芽萌发及笋芽基
部膨大情况如表 ! 由表 ! 可见! 芽9号处
理的外植体萌发率为 445#:! 组织膨大约 %
倍! 诱导效果最好
##&&激素配比对芽增殖培养的影响
试验结果表明% 增;# 增<# 增=号处
理之间无极显著差异$ 增>号处理与增?#
增@号处理间有极显著差异 虽然增A# 增
B# 增C号处理的增殖芽数均D#E个F丛 +!
但增G号处理培养基培养出来的芽壮实而均
表 !&&试验中所使用的培养基配方
表 #&&激素配比对芽诱导培养的影响
培养基种类 处理号 基础培养基
附加成分FEH&IJ)+ 激 素 FEKH&IJ)+
LM
蔗糖 卡拉胶 N2 O22 PQ
芽R S1 # 85$ )5 58 45
诱导培养基 芽T S1 # 85$ !5 58 45
芽U S1 # 85$ #5 58 45
增V S1 # 85$ #5 58 45
增W S1 # 85$ 85 58 45
增殖培养基 增X S1 # 85$ $5 58 45
增Y S1 # 85$ #5 %5 45
增Z S1 # 85$ #5 (5 45
根[ )F!&S1 # 85$ 5) )5 45
生根培养基 根\ )F!&S1 # 85$ )5 45
根] )F!&S1 # 85$ 5! 45
处理号 萌发率F: 组织膨大幅度
芽^ %#5$ 增大约 )倍
芽_ 8)5# 增大约 !倍
芽‘ 445# 增大约 %倍
!J J
莫 饶 等 海南砂仁的离体快繁
根!号处理的植株长势均不错! 但根号处
理的根数及侧根数较根#号处理多 就根长
而言! $个处理较为接近#
!#!%%对再生植株增重! 增高的影响
炼苗结束后的植株增重情况如表 &#
炼苗 ’%( 后! 各处理间的植株增重差异
达极显著水平# 其中! 根)号处理的植株增
重极显著大于根*号处理! 根+号处理与根
,号处理之间无极显著差异# 这说明! 在砂
仁的生根培养中 ! 附加高浓度 -./0%12345的
677! 对砂仁的植株生长均有较好的促进作
用#
炼苗 .8%( 后! 各处理间的差异均达到
极显著水平# 根9号处理极显著优越于根:
号与根;号处理! 根<号处理与根=号处理
之间无极显著差异# 这说明! 根>号培养基
对砂仁生根苗的增重效果最好#
另外! 对各处理植株增高数据的方差分
析结果表明! $ 个处理间无显著差异! 即激
素配比对再生植株高度的影响不大#
!$%%炼苗时间对再生植株生长的影响
由表 8$ 表 & 可看出! 在炼苗时间不同
的 ?个处理中! 炼苗 .8%( 的处理比 ’%( 的在
根数$ 根长和植株增重等方面有较明显的增
加# 观察还发现! 炼苗 .8%( 的再生植株!
叶片颜色较绿! 植株群体较均匀整齐#
移栽后! ? 种炼苗时间的试管苗成活率
均为 .00@! 且长势均正常! 但炼苗 .8%( 的
试管苗恢复生长较快! 植株较均匀整齐#
#%%结论与讨论
#&%%海南砂仁的离体快繁技术要点
以 笋 芽 为 外 植 体 ! 在 AB CD7%$/0%
1234E677%0/0&%1234 的培养基上进行芽的
诱导培养 用 ABFD7%G/0%1234H677%0/0&%
匀! 效果较好# 详见表 $# !#%%激素配比对生根培养效果的影响
芽长I?%J1 的单芽经生根培养 $0%( 后!
转移到荫棚中炼苗# 在炼苗的第 ’ 天和第
.8 天-即生根培养后的第 $’ 天和第 88 天5观察的再
生植株生长情况如表 8#
!#&%%对砂仁再生植株的生长情况及根数!
根长的影响
表 8 数据表明% 在 $ 个处理中! 根K$
表 #%%激素配比对增殖芽数量及长势的影响
表 $%%炼苗结束时再生植株的生长情况
表 ’%%激素配比对再生植株增重的影响
处理号
增殖芽数
3-个&丛L.5
邓肯测验
-!M0/0.5 芽丛长势
增N ./$ O 壮 实
增P $/8 7DQ 较壮实
增R $/’ 7%% 壮实$ 均匀
增S $/? 7D% 较壮实
增T ./U DO 壮 实
处理号
平 均 根 数 3条 平 均 根 长 3-J1&条L.5 再生植株生长情况
炼苗 ’%( 炼苗 .8%( 总平均 炼苗 ’%( 炼苗 .8%( 总平均 植株长势 叶色 根粗细
根V W/.? W/W? W/$’ W/$? W/88 W/$G 弱 小 黄绿 纤细
根X ’/?’ ’/G0 ’/&$ W/’? ’/?. W/U’ 粗 壮 绿 较粗
根Y 8/?W 8/$G 8/$? W/.$ W/’’ W/8& 较粗壮 浓绿 粗壮
处理号
炼苗 ’%(后 炼苗 .8%(后
植株平
均增重
3-2&株L.5
邓肯测验
-!Z0/0.5
植株平
均增重
3-2&株L.5
邓肯测验
-![0/0.5
根\ 0/’8 7D 0/’U D
根] 0/G8 7% ./08 7%
根^ 0/W0 D 0/G0 D
$L L
!#年 $ 月 第 !# 卷第 % 期热带农业科学
&’()的培养基进行芽增殖培养! 在 *(!+,-.
/00+*1+&’()的培养基上进行 #+2的室内生
根培养 然后转移到荫棚中炼苗 !周! 栽植
在用表土# 河砂# 椰糠# 腐熟牛粪配制成营
养土的营养杯中 按常规育苗技术进行水肥
管理$
!#++增殖系数问题
本试验增殖培养阶段的增殖率仅约为
! 故尚需进一步的研究 以提高增殖率$
参考文献
*++徐昭玺 魏建和3+热门及名贵中草药种植技术3+
北京% 中国农业出版社 !*3+!445!6!
!7+武孔云 陈宝儿 赵伯涛3+中药材种养关键技
术丛书3+无锡% 江苏科学技术出版社 !!3+
*489*$$
#++黄小光 丘银清 林 雄3+大肉姜的组织培养3+
植物生理学通讯 ! #6:4;% %%*
%++陈 薇 和江明 寸守铣3+圆瓣姜花茎尖组织
培养3+植物生理学通讯 !! #$:!;% *%6
4++周建中 陈礼彬 陈 晨3+姜黄花的组织培养3+
植物生理学通讯 !! #$:%;% #4!
6++李 坚3+春砂仁茎尖组织培养3+植物生理学通
讯 *<$8:#;% %
8++梅贝坚 艾 华3+花叶良姜的组织培养3+植物
生理学通讯 *<<:!;% %%=%4
$++胡玉姬 陈升振 羡蕴山3+花叶艳山姜的组织
培养3+植物生理学通讯 *<<:%;% 4>4*
7
7
! #$%&’ !#$%& ’( ()’)*) +’,$+$,*+-&. )* +* ,
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