全 文 ： 药理药化
收稿日期:2006-11-08;　修订日期:2007-02-08
基金项目:泸州医学院 2004年重点科研资助项目(N o. 2004 - 10 - 86)
作者简介:唐　灿(1967-),男(汉族),四川广安人 ,现任泸州医学院药学
院副主任药师 ,硕士学位 ,主要从事中药制剂工艺与质量标准研究工作.
砂仁复方挥发油提取工艺优选研究
唐　灿 1 , 吴仕财2 , 李云鹏 1 , 张彦燕1 ,赵　剑 1 , 蒲清荣1 , 兰　才 1
(1. 泸州医学院药学院 ,四川 泸州　646000;
　2.大拇指药物色谱分析技术开发研究所 ,四川 泸州　646000)
摘要:目的 优选砂仁复方挥发油提取工艺。方法 以乙酸龙脑酯收率为指标 , 采用气相色谱仪 , 运用正交设计法优选砂
仁复方挥发油提取工艺条件。结果 优选出的砂仁复方挥发油提取工艺为:取砂仁捣破 , 其他药材切成饮片 , 加水浸泡
0. 5 h,加水量为药材量的 96倍 ,采用水蒸气蒸馏法提取 4 h。结论 采用该提取工艺提取砂仁复方挥发油有效成分乙酸
龙脑酯收率较高且稳定 ,说明该工艺合理可行。
关键词:砂仁复方挥发油;　乙酸龙脑酯 ;　气相色谱法;　提取工艺
中图分类号:R284. 2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2007)08-1847-02
Study on the Extracting Process of VolatileO il from Amomum villosum E tc.
TANG C an
1 , WU S hi-ca i2 , L I Yun-peng1 , ZHANG Yan-yan1 , ZHAO J ian1 , PU Q ing-rong1 , LAN C ai1
(1. The Pharmacy School of LuzhouMedical College, Luzhou 646000, China;2. The Ana ly tica l TechnologyDe-
veloping R esearch Institu te of ThumbDrug in Chromatography, Luzhou 646000, China)
Abstract:Objective To optim ize the extracting proce ss of vola tile oil from Am om um villosum e tc. M ethods By the orthogona l
design and gas chrom atog raphy, taking the ra te o f Bo rny l Ace tate a s the index, w e op tim ized the ex trac ting process conditions o f
vo latile o il from Am om um villosum etc. Resu lts The optimum ex tracting process conditions o f vo la tile oil from Amom um villosum
e tc. w ere thatAmom um v illosum w as pounded to pieces, w a te rwa s 96 tim es the we ight of herbs, soaking tim e was ha lf an hour and
ex tracting tim e was 4 hou rs. Conc lu sion Experim ent resu lts m ake it c lea r that because the rate o f borny l ace ta te in vola tile oil
from Amom um villosum etc. by the optimum ex trac ting pro ce ss is high and stable, the ex trac ting proce ss of vo latile o il from Am o-
m um villosum etc. is reasonable and feasib le.
Key words:Vo la tile o il from Amom um v illosum etc. ;　Bo rny l aceta te;　G as chrom atog raphy;　Ex trac ting pro ce ss
　　砂仁为姜科植物阳春砂 、绿壳砂 、海南砂的干燥成熟果实 ,具
有化湿行气 、温中止呕止泻 、安胎之功效 , 主要用于湿邪困脾 、脾
胃气滞 、脾胃虚寒吐泻以及气滞妊娠恶阻 、胎动不安等症。主含
挥发油 , 油中主要有效成分之一为乙酸龙脑酯 (Borny l aceta te)。
椐文献报道 , 目前砂仁药材及其中成药质量是以挥发油收率进行
控制的。但挥发油为混合物 , 组成和性质均不稳定 , 作为定量标
准还不很完善。而乙酸龙脑酯结构清楚 , 含量较高 , 药理实验证
实乙酸龙脑酯为与砂仁功效主治密切相关的有效成分。乙酸龙
脑酯作为砂仁及其中成药的定量标准较挥发油更完善 ,能够更好
地控制砂仁药材及其中成药的质量 [ 1] 。因此采用气相色谱法 ,
以乙酸龙脑酯收率为指标 ,优选砂仁复方挥发油提取工艺具有重
要的质量控制意义。
1　仪器及材料
GX-300A氮 、氢 、空三气一体发生器(北京市中兴科技发展
有限公司), GC112A气相色谱仪(上海分析仪器厂)、双圈牌电子
分析天平(上海天平仪器厂), TG-328A分析天平(上海分析仪器
厂), 1 000, 2 000 m l挥发油测定器(轻油)、20 μl微量移液器 , 10
m l容量瓶 , 1 μl, 10 μl微量注射器;砂仁药材购自泸州宝光医药
公司白招牌大药房 , 经鉴定为阳春砂。醋酸乙酯 (分析纯)、蒸馏
水(自制)、乙酸龙脑酯化学对照品(供含量测定用 , 759-200102,
0. 2 m l)(中国药品生物制品检定所)。
2　方法与结果
2. 1　GC分析条件 [ 2] 色谱柱:硅烷化 102白色载体 (60 ～ 80
目)、固定液 5%SE-30(3 mm ×2 m, 不锈钢柱);柱温:程序升温
80 ～ 140℃(15℃ /m in)、 140 ～ 200℃(40℃ /m in);载气:N2 流速
30 m l /m in;H
2
流速 20 m l /m in;空气流速 200 m l /m in, 初始时间 、
升温时间 、终止时间均为 5 m in,检测器:F ID;仪器:GC112A气相
色谱仪 、GX-300A氮氢空三气一体机。
2. 2 　砂仁挥发油含量与成分分析 砂仁等药材均含较多挥发
油 , 其中阳春砂达到约 3. 0%以上 , 油中最主要成分之一———乙
酸龙脑酯的含量占到 25% ～ 30%左右 , 可见乙酸龙脑酯为砂仁
的最主要有效成分之一 ,其权重系数最大 , 而且乙酸龙脑酯受热
稳定。故采用水蒸气蒸馏法提取有效成分乙酸龙脑酯的方法具
有充分的理论依据 [ 3, 4] 。
2. 3　工艺优选 砂仁等药材采用水蒸气蒸馏法提取挥发油 ,以乙
酸龙脑酯收率为指标 ,考察水蒸气蒸馏法的最佳工艺条件。准确
称取砂仁等药材 ,按 L9(34)正交表 ,共 9份实验 , 见表 1 ～ 2。
表 1　考察的因素水平
水平 A砂仁粒径
B
加水量 /倍
C
浸泡 t /h
D
提取 t /h
1 未捣破 32 0. 5 4
2 捣破 48 2 8
3 捣破并打碎 96 4 12
2. 3. 1　制取砂仁等药材挥发油溶液 按上述正交表安排的水蒸
气蒸馏法提取 ,收集挥发油 , 读数(m l),利用油水分离性质 ,油在
上 , 水在下 ,采用 20μl微量移液器抽取挥发油 , 用醋酸乙酯溶解
1847
LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2007 VOL. 18 NO. 8 时珍国医国药 2007年第 18卷第 8期
挥发油并定容于 10 m l容量瓶中 ,即得砂仁等药材挥发油乙酸龙
脑酯溶液;以醋酸乙酯溶剂作为空白对照 , 以缺砂仁的其它两药
同法制醋酸乙酯溶液作为阴性对照 ,贮存备用。
2. 3. 2　乙酸龙脑酯标准曲线的绘制 精密称取乙酸龙脑酯化学
对照品 0. 192 7 g,用醋酸乙酯溶解并定容于 10 m l容量瓶中 ,配
制成乙酸龙脑酯对照品溶液的浓度为 19. 27 m g /m l, 在 2. 1项 GC
分析条件下测定 , 乙酸龙脑酯化学对照品积分面积 A与其质量 M
呈现良好的线性关系:A =6 070. 157 2 +51 976. 565 4 M , r=
0. 999 0(n =6), 线性范围:0. 038 54 ～ 19. 27 μg。
表 2　砂仁等药材挥发油提取正交设计实验
实验
号 A B C D
提油量
v /m l
醋酸龙脑
酯量 m /mg
醋酸龙脑
酯收率(%)
1 1 1 1 1 0. 10 17. 88 0. 198 6
2 1 2 2 2 0. 15 5. 838 0. 06487
3 1 3 3 3 0. 35 37. 10 0. 412 3
4 2 1 2 3 0. 35 57. 25 0. 636 2
5 2 2 3 1 0. 40 31. 83 0. 353 6
6 2 3 1 2 0. 50 48. 12 0. 534 7
7 3 1 3 2 0. 40 27. 18 0. 302 0
8 3 2 2 3 0. 50 2. 045 0. 022 72
9 3 3 1 1 0. 55 56. 81 0. 653 5
Ⅰ 0. 675 8 1. 136 8 1. 386 8 1. 205 7
Ⅱ 1. 524 5 0. 441 2 0. 723 8 0. 901 6 最佳工艺为 A2 B3 C1D1Ⅲ 0. 978 2 1. 600 5 1. 067 9 1. 071 2
2. 3. 3　重复性实验及优选工艺复核实验 按照优选出的砂仁等
药材挥发油提取工艺 A 2B3C1D1 投料 , 提取 6次挥发油 , 分别测
定油中乙酸龙脑酯含量 , 结果乙酸龙脑酯收率为药材量的
(0. 727 6±0. 018 15)%, n =6, RSD =2. 49%, 说明 A2B3C1D1工
艺能够很好的重复并将乙酸龙脑酯含量提取达到最高。
2. 3. 4　精密度实验与稳定性实验 以乙酸龙脑酯对照品溶液
19. 27μg /μl,进 0. 5μl /次 ,从 2005-12-23下午 14:00-晚上 21:40,
每隔 36 m in测定 1次 , 连续测定 12次 ,以积分面积计算精密度实
验和稳定性实验 RSD(%)。其中稳定性试验 RSD =3. 31%,表明
乙酸龙脑酯在 6 h 内测定含量是稳定的;精密度试验 RSD =
2. 06%,表明仪器精密度试验良好。
2. 3. 5　加样回收率实验 取已测定乙酸龙脑酯含量的砂仁 ,加入
乙酸龙脑酯对照品 , 同法提取 , 按砂仁挥发油中乙酸龙脑酯含量
测定方法操作。结果见表 3。
表 3　砂仁挥发油中乙酸龙脑酯加样回收率实验
样品含量
m /mg
加入量
m /m g
测得值
m /m g
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
95. 6 19. 27 114. 60 98. 5
29. 95 19. 27 49. 07 99. 2
69. 49 19. 27 88. 95 101. 0 99. 4 0. 987 8
156. 96 19. 27 175. 90 98. 3
127. 37 19. 27 146. 60 99. 6
89. 82 19. 27 109. 05 99. 8
2. 3. 6　样品测定 取砂仁等药材挥发油乙酸龙脑酯溶液① ～ ⑨
样品 , 分别进样 1 μl,在 2. 1项 GC分析条件下测定 , 采用标准曲
线法计算含量 , 结果见表 2, 优选出的最佳工艺为 A2B3C1D1。经
过复核实验 , 证明 A2B3C1D1最佳。 即将砂仁捣破 , 其他药材切
成饮片 , 加水量为药材量的 96倍 ,浸泡 0. 5 h, 水蒸气蒸馏提取 4
h,砂仁等药材挥发油中乙酸龙脑酯收率达到 (0. 727 6 ±
0. 018 2)%, n=6, RSD =2. 49%。
3　讨论
在实验中曾比较 5%SE-30, 2%OV-17两种气相色谱柱填料 ,
根据砂仁挥发油中乙酸龙脑酯 、樟脑的色谱行为综合考虑 , 以
5%SE -30较好。并进行了等温与程序升温试验比较 , 结果发现
程序升温色谱图较理想。 并对程序升温进行一阶与二阶升温试
验 , 发现二阶程序升温(80 ～ 140℃, 15℃ /m in, 一阶;140～ 200℃,
40℃ /m in,二阶)得到非常理想的色谱图。 见图 1。 乙酸龙脑酯
峰与杂质樟脑峰的分离度 、峰对称性 , 理论塔板数均达到最佳。
醋酸乙酯空白对照无干扰 ,缺砂仁的其它两药的醋酸乙酯阴性对
照溶液无干扰 ,结果令人满意。
a-化学对照品　　 b-样品　　　　 c-空白对照品
图 1　气相色谱图
对砂仁单方提取挥发油以及砂仁等 3种中药复方提取挥发
油。含量进行比较结果发现单方提取与复方提取所得挥发油中
乙酸龙脑酯含量相差较大。经测定单方提取挥发油量较少 ,但是
乙酸龙脑酯含量较多;复方提取挥发油量较多 , 但是乙酸龙脑酯
含量较低。可能系复方提取时 3种挥发油相互乳化 , 产生干扰 ,
致使乙酸龙脑酯在色谱柱中分离更困难(经测定复方提取 8 h乙
酸龙脑酯含量反而比提取 4 h低 , 可能系复方提取时间越长 , 挥
发油相互乳化越彻底 ,分离就越困难)或者 3种挥发油在气化室
约 200℃温度下产生化学变化导致乙酸龙脑酯含量下降 , 其机理
有待于进一步研究。
参考文献:
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研究 [ J] .华西药学杂志 , 2001, 16(5):356.
[ 2 ] 　陈发奎. 常用中草药有效成分含量测定 [M ] .北京:人民卫生出版
社 , 1997:461.
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学科技出版社 , 2002:647.
[ 4 ] 　孙文基 , 谢世昌. 天然药物成分定量分析 [ M ] .北京:中国医学科
技出版社 , 2003:78, 84.
1848
时珍国医国药 2007年第 18卷第 8期 LISH IZHEN MEDIC INE AND MATERIA M ED ICA RESEARCH 2007VOL. 18 NO. 8