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竹芋的组织培养快繁技术



全 文 :育种与栽培毛红丽:竹芋的组织培养快繁技术
应尽量减少田间作业,避免人为原因造成机械性伤口;同时还
要做好前期的病害防治工作,尽可能地减少病斑性伤口;在对
白菜植株追施化肥时,应注意与离根系保持一定的距离,以免
烧伤根系而使软腐病菌有机可乘;此外还要注意保持田间的供
水均衡,避免出现土壤暴干或暴湿问题,造成白菜叶出现生理
性裂口;对于已经出现伤口的白菜植株,应尽可能的创造适宜
的温度和空气条件,这样可以加速伤口的愈合,从而降低软腐
病的发病率。
第三,药剂防治软腐病。 除采用以上预防措施外,对于已经
发生病害的白菜植株应及时用药进行防治,具体是:可以使用
硫酸链霉素 1000~1300 倍液、50%的代森铵水剂 100 倍液以及
70%敌克松可湿性粉剂 800~1000 倍液等对病害部位进行喷雾
或灌根。 采用药剂防治方法时,应重点将药剂喷在软腐病植株
叶柄及其周围的菜株地表上,若能使药剂流入菜心,则其效果
会更好。
结语:总而言之,软腐病对白菜类蔬菜的危害非常大,因此
应及时采取有效的病害防治措施,减少病害的发生几率,从而
降低经济损失。
参考文献:
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[5] 刘传华、王广龙、崔慕华,大白菜软腐病的发生与防治[J].现代农
业科技,2008(22).
作者简介:
李跃进(1959—),男,汉族,四川成都人。
孔雀竹芋属竹芋科肖竹芋属,为多年生长绿草本植物。 叶
片薄革质,表面的绿色底上隐约呈现着一种金属光泽,且明亮
艳丽,沿着主脉两侧分布着羽状暗绿色,长椭圆形的斑块,与斑
块相对应的叶背面为紫色,左右交互排列,极似孔雀开屏尾羽。
孔雀竹芋具有美丽的叶,又具有耐荫的能力,是理想的室内绿
化植物。 孔雀竹芋主要用于分株繁殖,但速度较慢,利用组织培
养可提供一条快繁途径。
1 材料和方法
1.1 材料
从市场上购买盆栽孔雀竹芋的蘖芽。
1.2 方法
1.2.1 培养条件。 采用 MS 为基本培养基添加不同种类和不同
浓度的植物激素进行培养。 所有培养基中均加蔗糖 3%, 琼脂
0.7%,PH 值 5.8~6.0, 培养温度 25℃左右, 培养室内相对湿度
70%~80%,光照时间 12h/d,光照强度 1000~1300Lx。
1.2.2 常规灭菌。 取孔雀竹芋蘖芽,用清水冲洗,再放入洗衣粉
水浸泡 20 分钟,流水冲洗 30 分钟,无菌条件下用 75%酒精灭
菌 30 秒,无菌水冲洗 2 次,再用 0.1%的升汞灭菌 10 分钟,用无
菌水冲洗 4~5 次。
1.2.3 蘖芽生长培养。 准备材料、工具等,上台用酒精对手、台
面进行消毒,再把接种用具在酒精灯上灼烧,放入培养皿中间,
待凉后切割大小合适的材料,将处理好的无菌蘖芽分别接种在
加有不同浓度激素的 MS 培养基上,各接 10 瓶,每瓶 2 个芽。观
察芽生长。
1.2.4 芽的增殖。 将生长至 1cm 左右的芽在无菌条件下切下,
转接到 MS 加不同浓度激素的芽增殖培养基上, 各接 10 瓶,每
瓶 2 个芽,观察芽增殖情况。
1.2.5 不定根的诱导。 待新生芽生长至 2~3cm 高时,在无菌操
作台上切下,接种至 MS+NAA1—2mg/l 的生根培养基中 ,各接
10 瓶,每瓶接 2 个芽。 观察根生长情况。
2 实验结果与分析
2.1 外植体灭菌
竹芋的组织培养快繁技术
毛红丽
(襄阳职业技术学院,湖北 襄阳 441021)
[摘 要]以孔雀竹芋的蘖芽为材料进行组织培养,蘖芽生长的合适培养基为 MS+6-BA3mg/l+NAA0.3mg/l,蘖
芽生长率可达 87%; 适合芽增殖培养基为 MS+6-BA5mg/l+NAA0.3mg/l, 新芽增加平均数高达 4.1; 生根培养基为
MS+NAA1.5mg/l,生根率为 100%。
[关键词]孔雀竹芋;组织培养;快速繁殖
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农村经济与科技 2012 年第 23 卷第 03 期(总第 289 期)育种与栽培
因为外植体为蘖芽,取自栽培基质中的根、茎结合区域,对
表面进行彻底灭菌比较困难, 使用单一表面消毒剂效果不好。
应对外植体用 75%酒精处理 30 秒后,再用 0.1%升汞消毒 10 分
钟,灭菌效果较好。 另外在采材料时,应在晴天下午采,污染少,
因为材料经过日晒后可杀死部分细菌和真菌。
2.2 不同浓度激素对蘖芽生长影响
将无菌蘖芽分别
接种在加有不同浓度
激 素 的 MS 培 养 基
上,培养 10d 后,芽开
始生长, 培养 25d 左
右 ,芽生长到 1cm 左
右高度, 即可切下进
行增殖培养。 不同激
素组合对蘖芽生长有
影响。 (见表 1)
从表 1 可以看出, 在以上添加各种浓度配比的 MS 培养基
中,蘖芽都能生长,但就 MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L 培养基效
果最好,蘖芽生长率可达 87%。 在植物组织培养中使用的激素
主要是生长素和细胞分裂素,生长素的主要作用是诱导愈伤组
织的产生,促进细胞壁分化,促进生根;细胞分裂素主要目的是
刺激细胞分裂,诱导芽的分化,抑制根的生长。当细胞分裂素/生
长素的值高时,促进芽的生长;值低时,促进根的生长;合适时,
形成愈伤。 该试验要促进芽的生长,所以要有合适的激素组合。
2.3 芽的增殖培养
将生长至 1cm 左右的芽在
无菌条件转接到 MS 加不同浓
度激素的培养基上, 进行增殖
培养, 大约 25~30 天可形成新
芽。 不同浓度激素组合的培养
基对新芽的形成有影响。 (见表
2)
从表 2 可看出在以上六种
培养基中, 接种的芽均可生长
并在基部形成新芽, 但以 MS+
6-BA5mg/l+NAA0.3mg/l 培养基效果为好,芽生长健壮,新芽生
长的平均数也高达 4.1。 因为细胞分裂素的主要作用是促进芽
的分化,打破顶端优势,促进腋芽发生,抑制衰老,减少叶绿素
分解,延缓离体组织或器官的衰老过程,有保鲜效果,细胞分裂
素和生长素的相对比例影响根与芽的分化。 所以应选择合适的
比例进行芽增殖培养。 同时发现培养基中 6—BA 的浓度过高
时,不仅新芽形成的平均数降低,且出现轻微玻璃化现象。 在芽
增殖培养中,还尝试在培养基中加入适量的肌醇(50mg/L),发
现对新芽的形成有促进作用, 最适用量有待于进一步试验确
定。
2.4 生根培养
待新生芽生长
至 2~3cm 高时 ,在
无菌操作台上切
下 , 接 种 至 MS +
NAA1—2mg/l 的生
根 培 养 基 中 , 约
15~20 天均可形成
不定根。 培养基和
培养时间对生根培
养有影响(见表 3)
从表 3 可看出 MS+NAA1.5mg/l 培养基生根效果最好,生根
率为100%,且苗生长健壮。细胞分裂素会抑制根的生长,不利于
移栽,所以一般生根培养基中需要完全去除或仅用很低的细胞
分裂素,并加入适量的生长素,最常用的就是 NAA,因为生长素
能促进长根,也能提高试管苗的成活率。 但根据不同的植物,适
应的浓度不同,浓度过高或过低都会影响生根效果。
2.5 瓶苗的移栽
在培养室中打开瓶膜,在适宜条件下炼苗 1~2 天,取出瓶
苗,洗净粘在根部的培养基,根据根的生长分析,再用 1000 倍
的多菌灵浸根灭菌 5~10 分钟,移栽到经过消毒的基质中。 保持
一定的温度和水分,光照由弱到强,温度在 18~20℃,湿度由高
到低,通风透气,2 周后喷营养液,3 周后可移栽至盆中。
3 结论
根据上述实验结果与分析可知, 对孔雀竹芋进行组织培
养, 蘖芽生长的合适培养基为 MS+6-BA3mg/l+NAA0.3mg/l,芽
增殖培养基为 MS+6-BA5mg/l+NAA0.3mg/l,生根培养基为 MS+
NAA1.5mg/l。
参考文献:
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[3] 陈佩度,作物育种生物技术,中国农业出版社,2001.
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[7] 候占铭、满都拉,柴背竹芋的组织培养,植物生理学通讯,2001.
作者简介:
毛红丽(1961—),女,湖北襄阳人,高级实验师,现供职于襄阳职业技术
学院生物工程学院。
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