全 文 ：·生物技术· 北方园艺２０１２（２３）：１１６～１１８
第一作者简介：王晶（１９８２－），女，硕士，讲师，研究方向为园林园艺
植物。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｊｉｎｇ０３１２＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ．
责任作者：刘立功（１９７４－），男，硕士，副研究员，研究方向为单倍体
育种。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｌｉｇｏｎｇ＠ｎｅｒｃｖ．ｏｒｇ．
收稿日期：２０１２－０８－２７
柔毛矾根组培快繁技术研究
王 　 晶１，刘 立 功２，左 丽 娟１，唐 存 莲１
（１．北京农业职业学院，北京１０２４４２；２．北京市农林科学院 蔬菜研究中心，
农业部华北地区园艺作物生物与种质创制重点实验室，北京１０００９７）
　　摘　要：以柔毛矾根“香茅”和“饴糖”为试材，对其组培快繁技术进行系统研究。结果表明：以
温室采集的芽作为外植体较适宜；初代培养最佳培养基配方为 ＭＳ＋６－ＢＡ　０．２ｍｇ／Ｌ；ＭＳ＋ＢＡ
０．２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．０１ｍｇ／Ｌ作为增殖培养基效果最好；生根阶段的最佳培养基为１／２ＭＳ＋ＩＢＡ
１．５ｍｇ／Ｌ。用蛭石和珍珠岩１∶１的比例移栽苗时成活率可达９５％以上。
关键词：柔毛矾根；组织培养；快速繁殖
中图分类号：Ｓ　６８２．１＋９　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－０００９（２０１２）２３－０１１６－０３
　　柔毛矾根（Ｈｅｕｃｈｅｒａ　ｖｉｌｏｓａ）为虎耳草科矾根属多
年生草本花卉，株高５０～６０ｃｍ，叶基生，圆形掌状决裂，
边沿有锯齿，叶色亮丽、丰富，花期６～７月。其性耐寒，
喜阳耐阴，忌强光直射。喜中性偏酸、排水良好、富含腐
殖质的土壤，适合林下片植营造精良的阴生地被景观，
是少有的彩叶阴生地被植物。柔毛矾根主要采用分株
方式繁殖，目前因其母株数量比较少，繁殖系数低，短期
内要形成大规模的生产困难较大，限制了新品种的应用
速度，如果引进种苗，价格又很高，采用组织培养的繁殖
方法，可以很好地解决上述难题。该试验以柔毛矾根
“香茅”和“饴糖”为试材，对其组培快繁技术进行系统研
究，为工厂化育苗提供技术依据。
１　材料与方法
１．１　试验材料
试验材料采自北京农业职业学院栽植的柔毛矾
根“香茅”（Ｈｅｕｃｈｅｒａ　ｖｉｌｌｏｓａ ‘Ｃｉｔｒｏｎｅｌｅ’）和“饴糖”
（Ｈｅｕｃｈｅｒａ　ｖｉｌｏｓａ‘Ｃａｒａｍｅｌｒ’）植株。选取矾根的顶芽、
叶柄、叶片、叶鞘作为外植体材料。
１．２　试验方法
１．２．１　外植体的筛选　４月份从露地及日光温室栽培
的生长健壮、无病虫害的植株上分别选取幼芽、茎段、叶
片、叶鞘作为外植体。用流水冲洗材料２ｈ，洗涤灵水溶
液清洗３０ｍｉｎ，将外植体转入超净工作台，用７５％酒精
清洗２０～３０ｓ，用无菌水清洗１～２次，再在０．１％升汞溶
液浸泡４～５ｍｉｎ，并不断搅动，用无菌水漂洗数次后备
用。在ＭＳ＋６－ＢＡ　０．２ｍｇ／Ｌ培养基上培养，依据发芽
率确定适宜的外植体。
１．２．２　继代培养基的筛选　以ＭＳ为基本培养基，添加
不同类型及浓度的植物生长调节剂，３０ｄ后调查接种后
不同处理的生长情况。
１．２．３　生根培养基的筛选　以１／２ＭＳ为基本培养基，
添加不同类型及浓度的生长素，３０ｄ后调查接种后各处
理的试管苗生根情况。继代和生根培养基都添加蔗糖
３０ｇ／Ｌ，琼脂６．５ｇ／Ｌ，ｐＨ　５．８～６．０。培养条件：室温
（２５±１）℃，光照时间１２ｈ／ｄ，光照强度２　０００～２　５００ｌｘ。
１．２．４　练苗移栽　移栽前，在温室内去掉培养瓶上的塑
料瓶盖练苗０～５ｄ。将组培苗从瓶内取出，洗去沾附在
根部的琼脂培养基，将其栽入蛭石和珍珠岩为１∶１的
基质中。依据移栽成活率，确定开瓶练苗的适宜时间。
２　结果与分析
２．１　不同外植体材料对柔毛矾根初代诱导的影响
试验选取露地栽培、日光温室栽培的矾根顶芽、叶
柄、叶片、叶鞘各３０个作为外植体材料，进行消毒后，在
诱导培养基上进行培养，依据发芽率确定适宜的外植体
材料。由表１可知，从日光温室采集的样本，外植体污
染率变化在２０％～３３％，而从露地采集外植体样本污染
　　　表１　不同外植体材料对柔毛矾根初代培养的影响
　　Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｐｌａｎｔｓ　ｏｎ　ｐｒｉｍａｒｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｈｅｕｃｈｅｒａ　ｖｉｌｏｓａ
外植体
材料
Ｅｘｐｌａｎｔｓ
露地样本
Ｅｘｐｌａｎｔｓ　ｉｎ　ｏｐｅｎｆｉｅｌｄ
日光温室样本
Ｅｘｐｌａｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ
污染率
Ｐｏｌｕｔｉｏｎ　ｒａｔｅ／％
出芽率
Ｓｐｒｏｕｔｉｎｇ　ｒａｔｅ／％
污染率
Ｐｏｌｕｔｉｏｎ　ｒａｔｅ／％
出芽率
Ｓｐｒｏｕｔｉｎｇ　ｒａｔｅ／％
顶芽 ５５　 ３３　 ２０　 ６７
叶柄 ４５　 ０　 ２５　 ０
叶片 ８２　 ０　 ３３　 ０
叶鞘 ７７　 １０　 ２８　 １６
６１１
北方园艺２０１２（２３）：１１６～１１８ ·生物技术·
率较高，在４５％以上。以顶芽、叶鞘作为外植体可以诱
导出芽，从温室采集的样本发芽率分别为６７％和１６％，
如图１Ａ所示，叶柄和叶片不能诱导出芽。因此，从温室
采集的柔毛矾根的顶芽作为外植体较适宜。
２．２　继代培养基的筛选
将初代培养获得的芽置入继代培养基中，在继代培
养基中添加不同植物生长调节剂培养３０ｄ后，依据试管
苗的增殖系数和生长势２项指标筛选柔毛矾根适宜的
培养基。由表２可知，处理４增殖率最高，但苗的长势一
般，叶片较小，不舒展，部分苗出现玻璃化现象。处理５、
６高浓度的细胞分裂素形成疏松的愈伤组织，分化出的
芽组织较脆，出现玻璃化现象。从增殖苗的增殖系数和
生长情况综合分析，适宜的增殖培养基为 ＭＳ＋ＢＡ　０．２
ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．０１ｍｇ／Ｌ（图１Ｂ）。
　　表２ 不同培养基对柔毛矾根增殖的影响
　　Ｔａｂｌｅ　２ Ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｄｉａｓ　ｏｎ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｈｅｕｃｈｅｒａ　ｖｉｌｌｏｓａ
序号
Ｎｏ．
培养基
Ｍｅｄｉｕｍ／ｍｇ·Ｌ－１
接种数
Ｑｕａｎｔｉｔｙ　ｏｆ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｅｘｐｌａｎｔｓ／株
总分化数
Ｑｕａｎｔｉｔｙ　ｏｆ　ｐｒｏｐａｇａｔｅｄ　ｅｘｐｌａｎｔｓ／株
增殖系数
Ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ
生长情况
Ｇｒｏｗｉｎｇ　ｓｔａｔｅ
１ ＭＳ＋ＢＡ　０．２＋ＮＡＡ　０．０１　 ３０　 ２７９　 ９．３ 苗生长健壮、叶舒展
２ ＭＳ＋ＢＡ　０．２＋ＮＡＡ　０．０５　 ３０　 ２６４　 ８．８ 苗生长健壮、叶舒展
３ ＭＳ＋ＢＡ　０．５＋ＮＡＡ　０．０１　 ３０　 ３９９　 １３．３ 长势一般，出现部分玻璃化苗
４ ＭＳ＋ＢＡ　０．５＋ＮＡＡ　０．０５　 ３０　 ４７１　 １５．７ 长势一般，叶片皱缩，部分苗玻璃化
５ ＭＳ＋ＢＡ　１＋ＮＡＡ　０．０１　 ３０　 １８６　 ６．２ 出现愈伤组织，苗玻璃化严重
６ ＭＳ＋ＢＡ　１＋ＮＡＡ　０．０５　 ３０　 ２０７　 ６．９ 出现愈伤组织，苗玻璃化严重
　　注：增殖系数＝培养后株数／接种株数。
２．３　生根培养基的筛选
选取生长健壮的矾根无根试管苗，在１／２ＭＳ培养
基中加入不同类型及浓度的生长素，生根培养３０ｄ后观
察试管苗的生根情况（表３）。基本培养基加入生长素，
随着ＩＢＡ浓度的增加生根情况越好，当添加ＩＢＡ浓度为
１．５ｍｇ／Ｌ时，从生根数、根长、生根率、生根情况４项指
标来看，生根数量多、根长，根系生长健壮，生根率为
１００％。当ＩＢＡ浓度达到２ｍｇ／Ｌ时，生长素浓度过高，
小苗根部出现愈伤，生根培养各项指标降低。因此，
１／２ＭＳ＋ＩＢＡ　１．５ ｍｇ／Ｌ 是较适合 的 生 根 培 养 基
（图１Ｃ～Ｄ）。
　　表３ 不同培养基对柔毛矾根生根的影响
　　Ｔａｂｌｅ　３ Ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｄｉａｓ　ｏｎ　ｒｏｏｔａｇｅ　ｏｆ　Ｈｅｕｃｈｅｒａ　ｖｉｌｌｏｓａ
序号
Ｎｏ．
培养基
Ｍｅｄｉｕｍ／ｍｇ·Ｌ－１
接种数
Ｑｕａｎｔｉｔｙ　ｏｆ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｅｘｐｌａｎｔｓ／株
平均根数
Ａｖｅｒａｇｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｒｏｏｔ／条
根长
Ｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　ｒｏｏｔ／ｃｍ
生根率
Ｒｏｏｔｉｎｇ　ｒａｔｅ／％
生根情况
Ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｏｏｔ
１
２
３
４
５
１／２ＭＳ＋ＩＢＡ　０．２
１／２ＭＳ＋ＩＢＡ　０．５
１／２ＭＳ＋ＩＢＡ　１．０
１／２ＭＳ＋ＩＢＡ　１．５
１／２ＭＳ＋ＩＢＡ　２
３０
３０
３０
３０
３０
３．２
４．０
６．７
８．８
４．８
１．１
１．５
２．１
２．６
０．８
８０．５
９０．２
１００
１００
９５．５
根短，量少
根较短，细
根多，较长
根长，多，生长健壮
根部有少量愈伤
图１　柔毛矾根组织培养
注：Ａ．柔毛矾根“饴糖”顶芽外植体培养２０ｄ后诱导出小苗；Ｂ．柔毛
矾根继代培养产生的丛生芽；Ｃ．柔毛矾根根系生长情况；Ｄ．柔毛矾根生
根壮苗；Ｅ．柔毛矾根“饴糖”试管苗练苗移栽；Ｆ．柔毛矾根“香茅”的植株。
２．４　试管苗移栽
将生长健壮的生根组培苗，打开培养瓶上的封口
膜，在驯化温室放置２～３ｄ。然后将组培苗从瓶内取
出，洗去沾附在根部的琼脂培养基，用８００倍液多菌灵消
毒后，将其栽入蛭石∶珍珠岩为１∶１的基质中，覆盖塑
料膜。在温度为２０～２５℃，相对湿度７０％～８０％的条件
下进行练苗，注意遮荫和通风。７ｄ后去掉覆盖膜，２～
３周后移栽苗成活，调查其成活率为９５％（图１Ｅ～Ｆ）。
３　结论
柔毛矾根以温室采集的顶芽作为外植体较适宜。
最佳诱导培养基配方为ＭＳ＋６－ＢＡ　０．２ｍｇ／Ｌ，诱导率可
达６７％，污染率为２０％。在继代与增殖培养阶段，ＭＳ＋
ＢＡ　０．２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．０１ｍｇ／Ｌ作为增殖培养基效果
最好。生根阶段的最佳培养基配方，以１／２ＭＳ＋ＩＢＡ
１．５ｍｇ／Ｌ生根效果最好，生根率达１００％，根长而且粗
壮。练苗移栽的基质为蛭石∶珍珠岩为１∶１，移栽成活
率可达９５％以上。通过观察，柔毛矾根通过组培繁殖的
方法能够保持其特性，为以后的大规模工厂化组培苗生
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·生物技术· 北方园艺２０１２（２３）：１１６～１１８
产实践提供参考依据。
参考文献
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ＷＡＮＧ　Ｊｉｎｇ１，ＬＩＵ　Ｌｉ－ｇｏｎｇ２，ＺＵＯ　Ｌｉ－ｊｕａｎ１，ＴＡＮＧ　Ｃｕｎ－ｌｉａｎ１
（１．Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０２４４２；２．Ｖｅｇｅｔａｂｌｅ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｇｅｎｅｔｉｃ　Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｃｒｏｐｓ（Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　Ｃｈｉｎａ），Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ
１０００９７）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｒａｐｉｄ　ｍｉｃｒｏｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｈｅｕｃｈｅｒａ　ｖｉｌｏｓａ‘Ｃｉｔｒｏｎｅｌｅ’ａｎｄ　Ｈｅｕｃｈｅｒａ　ｖｉｌｏｓａ‘Ｃａｒａｍｅｌｒ’ｗｅｒｅ
ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｓｕｉｔａｂｌｅ　ｅｘｐｌａｎｔｓ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｂｕｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｇｒｅｅｎｈｏｕｓｅ；ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ
ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｂｕｄ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ＭＳ＋６－ＢＡ　０．２ｍｇ／Ｌ；ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅ　ｔｒａｎｓｆｅｒ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｗａｓ　ＭＳ＋ＢＡ
０．２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．０１ｍｇ／Ｌ；ａｎｄ　ｕｓｉｎｇ　１／２ＭＳ＋ＩＢＡ　１．５ｍｇ／Ｌ　ａｓ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗａｓ　ｂｅｔｔｅｒ．Ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ
ｏｎ　ｍｅｄｉａ　ｗｈｉｃｈ　ｃｏｎｔａｉｎｅｄ　ｖｅｒｍｉｃｕｌｉｔｅ　ａｎｄ　ｐｅｒｌｉｔｅ　ｗｉｔｈ　１∶１ｈａｄ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　９５％．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｈｅｕｃｈｅｒａ　ｖｉｌｏｓａ；ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ；ｒａｐｉｄ　ｐｒｏｐａｇ
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ａｔｉｏｎ
雨季草坪施药应注意的事项
一要注意观看天气，择时巧施药。一般来说，雨后施药效果要好于施药后下雨或边施药边下雨。因此，要注意天气情况，尽可能选
择好天气时段喷施，以提高防治效果。此外，还应根据害虫的活动规律巧选施药时间，如对一些夜间活动的害虫如稻纵卷叶螟应在傍晚
施药。
二要注意选择适当的药剂。雨季选用内吸性、速效性、耐雨性及微生物农药效果好。速效性农药：如杀虫剂中的敌敌畏、速灭杀丁、
久效磷、杀螟松、敌杀死、快杀灵、速灭威、溴氰菊酯等农药，具有很强的触杀和熏蒸作用，施药后１～２ｈ或４～５ｈ后便可将害虫杀灭。内
吸性农药：内吸性农药可通过作物的根、茎、叶等部位进入植株体内，并输送到其它部位，在较短的时间内起作用。如多菌灵、三唑酮、叶
枯净、粉锈宁、托布津、灭病威、久效磷、呋喃丹、甲胺磷、乐果、氧化乐果、磷胺等杀菌杀虫剂，施用后４～５ｈ便有８０％的有效成分被作物
吸收到组织内部，较少因雨水淋洗而丧失药性。微生物活性农药：常用的ＢＴ７８１、青虫菌、白僵菌等微生物农药，在高湿条件下更有利其
孢子体的萌发和繁殖，阴雨天施用这类农药，更能充分发挥其灭虫作用。耐冲洗农药：杀菌剂中井冈霉素和灭病威、速克灵等具有较好
的耐雨性，施药１～５ｈ后即使遇到阵雨，也不会被淋刷而影响药效。
三要注意药液中加入粘着剂和辅助增效剂。将洗衣粉、木薯浆水、茶枯浸出液等有粘附作用的物质加入农药中，能增强农药在作物
及害虫虫体上的附着力，从而提高防治效果。具体方法是：每５０ｋｇ药液中加洗衣粉剂５０～７０ｇ，或木薯粉１００～１５０ｇ，或茶枯浸出滤液
２００～３００ｇ，搅拌均匀后及时喷施。注意最好现配现用，不可久置。洗衣粉、茶枯浸出液一般不宜与酸性农药混用。
四要注意适当增加药液浓度。雨季施药应适当增加农药的浓度（剧毒农药除外），防病、治虫、除草的效果才有保证。如某种农药常
用浓度为１　０００～１　５００倍液，雨季可用８００～１　０００倍液。
五要注意改进施药方法。如选择内吸性杀虫剂，在害虫大面积发生前，拌细土施入农作物根部泥土，让植株吸收，致使害虫取食中
毒而死。喷雾施药前要用光滑的长竹竿轻轻擀掉植株上的水珠，然后施药。打药时改传统的前行身体正前方之字摆喷头为侧身之字摆
喷头，这样，路边刚刚喷在植株上的药液就不会因人的走动而被扫掉。有条件的地方，雨季可选用超低容量喷雾器施药，这种器械的雾
粒均匀、细密，易被植物叶片、茎秆粘住而不流失。将手动喷雾器喷杆上１．３ｍｍ孔径的喷片换成０．７ｍｍ孔径的不锈钢喷片也有同样
的防治效果，配制药液时注意用细网将水过滤，以防喷孔堵塞。
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