全 文 ：中国药房 2001年第 12卷第 1期 China Pharm acy 2001 Vol.12 No.1 · 15·
·实验研究 ·
白前的镇痛 、抗炎和抗血栓形成作用*
沈雅琴1 ,张明发1 ,朱自平2 ,王红武2(1.上海美优制药有限公司 ,上海市 201423;2.陕西省中医药研究院中药
所药理室 ,西安市 710003)
中图分类号:R96 文献标识码:B 文章编号:1001-0408(2001)01-0015-02
摘要:目的:研究白前的镇痛、抗炎和抗血栓形成作用 。方法:采用常规的炎症和疼痛模型以及电刺激麻醉动物颈动脉的体内血栓形
成模型 。结果:给小鼠 ig(口服灌胃)白前醇提物 5g/kg 和 15g/kg ,能显著延长热痛刺激甩尾反应的潜伏期 ,减少由乙酸引起的扭体
反应的次数 ,抑制二甲苯引起的耳肿 、角叉菜胶引起的足跖肿胀 。此外 ,它还能显著延长大鼠体内血栓形成时间和凝血时间 。结论:
白前具有镇痛 、抗炎和抗血栓形成作用 。
关键词:白前;抗炎药;镇痛药;抗血栓形成药
*基金项目:国家自然科学基金资助项目(39370838)
白前为温化寒痰药 ,入肺经 。其功用为降气 、消痰 、止咳[1 ] ,
可用于治疗感冒风寒 、支气管炎及咽喉炎[2 ] 。本文进行镇痛 、抗
炎及抗血栓形成的药理实验 , 以期对其临床主治及开辟新的临
床应用适应证提供一些实验研究依据 。
1 材料
白前(Rhizoma Cynanchi stountonii):购自陕西省药材公
司南院门中药店 ,经陕西省中医药研究院中药所生药研究室鉴
定为萝摩科植物柳叶白前 (Cynanchum stauntoni(Decne .)
Schltr e t Levl)干燥的根茎及根 ,符合 1995年版《中国药典》规
定 。将白前碾碎 ,用 75%乙醇回流提取 3次 ,每次 8h ,提取液减
压回收乙醇 ,并在水浴上浓缩成 1∶1浓度(1g 生药 1ml),供实
验用;阿斯匹林水溶片:中国无锡华瑞制药有限公司生产;乙柳
酰胺(et henzamide):陕西省医药工业研究所附属二厂生产;华
法令(w ar farin):英国 Glaxo 集团制造;伊文思蓝:上海新中化
学厂产品;角叉菜胶:辽宁药物研究所产品;活化部分凝血活酶
时间(APTT)试验盒:中国医学科学院血液学研究所血栓与止
血研究室制;凝血活酶(兔脑粉):上海市医学化验所试剂厂产
品 。实验用小鼠:ICR品系 , 由西安医科大学实验动物中心提
供;实验用大鼠:SD 品系 , 由陕西省中医药研究院实验动物研
究室提供;BT 87-2型实验性体内血栓形成测定仪:包头医学
院心血管研究室制造 。
2 方法与结果
2.1 镇痛作用
2.1.1 对热痛刺激引起小鼠甩尾反应潜伏期的影响:按文
献[ 3 ] 要求挑选出 40只合格的小鼠 , ♀♂各半 , 体重 (20.5±
1.9)g ,随机分为 4组 , 每组 10只:(1)空白对照组:ig 自来水
10m l/kg ;(2)乙柳酰胺组:给药 0.1g/kg 组;(3)白前 5g/kg
组;(4)白前 15g/kg 。先测出每只小鼠在(50±0.5)℃水中甩尾
反应的潜伏时间 , 作为给药前正常痛阈 , 再于各组小鼠 ig 自来
水或药物后 0.5 、1 、2 、3h分别测定每只小鼠的甩尾反应潜伏时
间。对各组小鼠每个时相的药后与药前的甩尾反应潜伏期之差
值(变化值)进行组间 t 检验 。结果 ,与自来水组比较 ,乙柳酰胺
组在给药后 0.5h及 3h能显著地延长小鼠甩尾反应的潜伏期;
白前 5g/kg 组在给药后 2 、3h , 白前 15g/kg 组在给药后 1 、2 、
3h均能非常显著地延长小鼠甩尾反应的潜伏期 ,详见表 1 。
表 1 ig 白前 75%醇提物对热痛刺激引起小鼠甩尾反应
潜伏期的影响(x ±s , n=10)
剂量
(g/k g)
药前潜伏期
(s)
药后潜伏期变化值(s)
0.5h 1h 2h 3h
自来水 8.7±1.8 -2.0±1.6 -0.7±2.0 -1.2±2.6 -1.9±2.0
乙柳酰胺 0.1 8.4±1.6 1.5±1.9 0.6±1.8 0.6±2.5 0.6±2.4
白前 5 8.4±2.6 -1.1±2.5 0.4±2.1 1.9±3.5 2.2±5.1
15 8.6±1.9 -0.2±3.0 3.7±4.4 8.0±7.2 4.9±5.4
**
** **
*
**
*
*
*P<0.05;**P<0.01
2.1.2 对乙酸引起小鼠扭体反应次数的影响 :小鼠 44只 ,
♀♂皆用 ,体重(22.4±2.9)g ,随机分为 4组 ,分组情况同“甩
尾”实验 ,乙柳酰胺组的剂量为 0.3g/kg 。各组小鼠分别 ig 自来
水或药物后 1h ,每只小鼠 ip 0.7%乙酸 10ml/kg , 5min后开始
计数 10min内的扭体反应次数 ,数据进行组间 t 检验 。结果 ,乙
Study on Analgesic , Anti-inflammatory and Anti-thrombotic Ef fects of Rhizoma Cynanchi Stauntonii
SHEN Yaqin ,ZHANG M ingfa(Shanghai M eiy ou Pharmaceutical L td ,Shanghai 201423)
ZHU Ziping ,WANG Hongwu(Dept.o f Pharmacolog y ,S hanxi Academy of Tradi tional Chinese Medicine ,Xi
an 710003)
ABSTRACT:OBJECTIVE:To study the analgesic , anti-inflammato ry and anti-throm botic effects of Rhizoma Cynanchi
Staun tonii.METHODS :Experiments were carried ou t on conventional mouse models of inflammation and pain , and on a
th rombotic m odel o f using direc t current continuously to stimula te the carotid ar tery on one side o f t he neck o f anesthetic
rat.RESULTS:Alcoholic ex tract of Rhizoma Cynanchi Staun tonii ,in dosages o f 5g herb/kg and 15g herb/kg ig ,prolonged the
latent per iod o f tail flip response to ho t w ate r stimula tion and reduced acetic acid-induced w rit hing frequency , and inhibited
xy lene-induced swelling o f the ear and car rageenin-induced sw elling of the planta .T he ex tract , 10g herb/kg ig ,prolonged in
vivo coagulative time and thrombotic tim e induced by elect ric stim ulating ar tery in ra ts.CONCLUSION :Rhizoma Cynanchi
Staun tonii has analgesic ,anti-inflamm ato ry and anti-thrombotic eff ects.
KEY WORDS:Rhizoma Cynanchi S tauntonii;analgesics;anti-inflammatory agen ts;anti-thrombotics
· 16· China Pharm acy 2001 Vol.12 No .1 中国药房 2001年第 12卷第 1期
柳酰胺组及白前 15g/kg 组有非常显著的抑制乙酸引起小鼠扭
体反应次数的作用 ,结果见表 2。
表 2 ig白前 75%醇提物对乙酸引起小鼠扭体
反应的影响(n=11)
剂量(g/ kg) 扭体次数( ±s) 抑制(%)
自来水 48±15
乙柳酰胺 0.3 7±8* 85.4
白前 5 33±19 31.2
15 6±10* 87.5
x
*P<0.01
2.2 抗炎作用
2.2.1 对二甲苯致小鼠耳壳肿胀的影响:小鼠 40只 , ♀♂皆
用 ,体重(24.1±1.8)g ,随机分为 4组 ,分组情况同“扭体反应”
实验 。每天 ig 药物 1次 ,连续 3d 。末次给药前用千分卡尺测量
每只小鼠的右耳厚度 , 作为致炎前的正常值 。末次 ig 药物后
0.5h ,在每只小鼠的右耳涂抹 20μl的二甲苯致炎 ,致炎后 0.5 、
1 、2 、3 、4h ,分别测量每只小鼠的右耳厚度 。致炎后的右耳厚度
与致炎前正常值之差 ,即为肿胀值 ,数据进行组间 t 检验 。乙柳
酰胺组有非常显著的抑制小鼠耳壳肿胀作用 , 且作用维持了
3h;白前 5g/kg 组和 15g/kg 组均有不同程度的抑制小鼠耳壳
肿胀作用 ,结果见表 3 。
表 3 ig白前 75%醇提物对二甲苯致小鼠耳肿
的影响(x ±s , n=10)
剂量
(g/kg)
正常厚度
(μm)
二甲苯致小鼠耳肿值(μm)
0.5h 1h 2h 3h 4h
自来水 246±8 161±32 144±31 115±42 104±29 74±33
乙柳酰胺 0.3 246±22 117±38* 90±28 68±30 60±36 52±29
白前 5 242±11 140±23 113±30* 83±30 74±26* 56±22
15 248±17 123±27 117±35 81±22* 70±22 59±17**
** ** **
**
*P<0.05;**P <0.01
2.2.2 对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀的影响:小鼠 40只 , ♀♂
皆用 ,体重(27.0±2.2)g ,随机分为 4组:(1)自来水 10ml/kg
组;(2)阿斯匹林 0.3g/kg 组;(3)白前 5g/kg 组;(4)白前 15g/
kg 组 。每天 ig 药物 1次 ,连续 3d ,末次给药前用千分卡尺测量
每只小鼠右后足跖厚度 ,作为致炎前的正常值 。末次 ig 药物后
立即给每只小鼠的右后足跖皮下注射 1%角叉菜胶 0.05m l。致
炎后 1 、2 、3 、4 、5 、6h 分别用千分卡尺测量每只小鼠的右后足跖
的厚度 , 致炎后各时相的每只小鼠的右后足跖的厚度与致炎前
正常厚度之差值 ,即为肿胀数 。数据进行组间 t 检验 。阿斯匹林
组 、白前 5g/kg 组和 15g/kg 组均呈现了显著而持久的抑制小
鼠足跖肿胀的作用 ,结果见表 4。
表 4 ig白前 75%醇提物对角叉菜胶致小鼠足跖肿胀
的影响(x ±s , n=10)
剂量
(g /kg)
正常足跖厚度
(m m)
角叉菜胶致小鼠足跖肿胀值(mm)
1h 2h 3h 4h 5h 6h
自来水 1.46±0.10 0.64±0.10 0.72±0.12 0.76±0.07 0.77±0.10 0.78±0.09 0.71±0.11
阿斯匹林 0.3 1.42±0.05 0.52±0.07 0.55±0.08 0.61±0.08 0.60±0.05 0.62±0.08 0.62±0.08
白前 5 1.45±0.06 0.54±0.06 0.63±0.05 0.63±0.10 0.66±0.09 0.66±0.14 0.62±0.13
15 1.45±0.07 0.58±0.08 0.60±0.07 0.63±0.09 0.62±0.09 0.63±0.10 0.59±0.11
**
*
**
*
*
**
**
**
**
*
**
**
*
***
*P<0.05;**P <0.01
2.2.3 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响:小鼠 44只 , ♀♂
兼用 ,体重(25.0±2.0)g ,随机分为 4组 ,分组情况同“足跖肿
胀” 实验 。每天 ig 药物 1次 , 连续 3d 。末次 ig 药物或自来水
0.5h 后 ,iv0.5%伊文思蓝 5ml/kg , 5min 后再 ip 0.7%乙酸
10ml/kg 。间隔 0.5h处死动物 ,用 10ml生理盐水冲洗腹腔 ,冲
洗液离心 ,用 721型分光光度计(590nm)比色[4 ] 。计算每管 冲
洗液中伊文思蓝的含量 ,数据进行组间 t 检验 。结果 ,与自来水
对照组比较 , 0.3g/kg 阿斯匹林组非常显著地抑制小鼠腹腔毛
细血管通透性的增加 (抑制率为 71.7%), 而白前 5g/kg 组和
15g/kg 组均无显著抑制作用(抑制率分别为 15%和 20.0%)。
2.2.4 对大鼠实验性体内血栓形成及凝血功能的影响:大鼠
32只 , ♀♂各半 , 体重(220±55)g ,随机分为 4组:(1)自来水
10ml/kg 组;(2)华法令 0.01g/kg 组;(3)白前 3.0g/kg 组;(4)
白前 10g/kg 组 。每天 ig 药物 1次 , 连续 3d 。末次给药后
45min , 在乌拉坦麻醉下切开颈部皮肤 , 分离左颈总动脉 , 将
BT 87-2型实验性体内血栓形成测定仪的刺激电极和温控探
头钩挂于颈动脉 ,用 2.0mA 直流电刺激 300s ,温度传感器监测
血管表面温度变化 , 当动脉内血栓形成堵塞血流 , 血管远端温
度突降时 ,仪器报警 ,并自动记录时间 。从刺激结束到温度突降
所需时间 ,即为血栓形成时间 。然后剪断右侧颈总动脉取血 ,测
定每只大鼠的凝血时间及制备血浆 , 分别用白陶土法测定大鼠
的部分凝血活酶时间 (KPT T)及用兔脑粉法测定凝血酶原时
间(PT)。血栓形成时间超过 700s ,按 700s计算;凝血酶原时间
出现不凝者按 80s计算 。用x ±s表示各组数据 ,序值法检验判
定组间有否显著性差异 。结果 ,与自来水组比较 ,华法令组能非
常显著地延长所测 4项指标的时间 , 白前 10g/kg组能显著地
延长血栓形成时间及凝血时间 ,结果见表 5。
表 5 ig白前 75%醇提物对大鼠动脉内血栓形成及凝血功能
的影响(x ±s , n=8)
剂量
(g/kg)
血栓形成时间
(s)
延长率
(%)
凝血时间
(s)
延长率
(%)
PT
(s)
延长率
(%)
KPTT
(s)
延长率
(%)
自来水 412±139 26.9±9.4 20.0±2.0 18.8±5.0
华法令 0.01 >700 >69.991.3±29.7 239.0 >80 >300.0 36.8±10 .3 95.7
白前 3 560±156 21.430.5±10.1 13.4 20.1±1.5 0.5 15.9±4.0 -15.4
10 633±112 53.637.6±8.0 39.8 24.2±10.7 21.0 19.5±5.3 3.7
**
**
** ** **
*P<0.05;**P <0.01
3 讨论
关于中药白前的药理实验研究的报道甚少 , 主要实验内容
为镇咳 、祛痰及抗炎作用[5 ] 。文献仅报告白前醇提物 ip 能显著
抑制巴豆油致小鼠耳壳肿胀[5 ] 。我们的实验结果表明 , 白前
75%醇提物 ig 不仅能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿 , 而且还能
显著抑制角叉菜胶致小鼠足跖肿胀 , 其还有减少乙酸引起的小
鼠扭体反应的次数及延长小鼠对热痛刺激甩尾反应的潜伏
期 。它的镇痛和抗炎药理活性 , 无疑对其在临床上用于治疗感
冒风寒 、支气管炎及咽喉炎起了支持作用 。我们的实验结果还
表明 , 白前能延长大鼠体内血栓形成时间及凝血时间 , 提示临
床上不应仅将白前用作温化寒痰药 , 还应考虑开辟其新的适应
证 ,如试用于心血管疾病的治疗 。
参考文献:
[ 1] 骆和生 , 王建华主编.中药方剂的药理与临床研究进展
[M ] .第 1版.广州:华南理工大学出版社 , 1991:151.
[ 2] 杨仓良主编.毒药本草[ M ] .第 1版.北京:中国中医药
出版社 ,1993:759.
[ 3] 徐叔云 ,卞如谦 ,陈 修.药理实验方法学[M ].第 2版.
北京:人民卫生出版社 ,1991:695.
[ 4] 张明发 , 沈雅琴.小檗碱的抗腹泻和抗炎作用[ J] .中国
药理学报 , 1989 ,10(2):174.
[ 5] 梁爱华 ,薛宝云 ,杨 庆 ,等.柳叶白前的镇咳 、祛痰及抗
炎作用[ J].中国中药杂志 ,1996 ,21(3):173.
(收稿日期:2000-07-10 修回日期:2000-11-02)