全 文 ： 2010, Vol. 31, No. 06 食品科学 ※工艺技术80
两种苦荞黄酮提取方法的优化及含量测定
李 欣，王步军 *
(中国农业科学院作物科学研究所，农业部谷物品质监督检验测试中心，北京 100081)
摘 要：采用超声波和恒温水浴振荡两种前处理方法，通过单因素和正交试验确定最佳提取方法，并对确定的最
佳提取方法进行总黄酮和芦丁含量的回收率、重复性、精密度等验证，初步建立苦荞麦黄酮类化合物的提取测定
方法。结果表明：超声波法的最佳提取条件为 80%乙醇溶液、液固比 40:1、超声提取 30min；恒温水浴的最佳
提取条件为 80%乙醇溶液、液固比 30:1、60℃提取 3h。两种提取方法的最终提取效果差异不显著，而超声波法
则大大节省了时间。
关键词：苦荞麦；总黄酮；芦丁
Optimization of Two Extraction Techniques of Total Flavonoids from Tartary Buckwheat and HPLC
Determination Based on the Two Extraction Techniques of Total Flavonoids in Tartary Buckwheat
LI Xin，WANG Bu-jun*
(Cereal Quality Supervision and Testing Center, Ministry of Agriculture, Institute of Crop Sciences,
Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China)
Abstract ：Ultrasonic or constant temperature shaking water bath was used for extraction of total flavonoids from tartary
buckwheat in the present study. The optimal ultrasonic-assisted and constant temperature shaking water bath extraction
procedures were investigated by single factor and orthogonal array methods. Meanwhile, HPLC determination based on the two
optimized extraction techniques of total flavonoids in tartary buckwheat was carried out. Results showed that the optimal values
of crucial parameters affecting extraction of total flavonoids, including ethanol concentration, liquid/solid ratio and extraction
time were 80%, 40:1 and 30 min for ultrasonic-assisted extraction and 80%, 30:1 and 3 h for constant temperature shaking water
bath extraction. Very close yields of total flavonoids were obtained in extraction from tartary buckwheat by both techniques.
However, much less time consumption was needed for ultrasonic-assisted extraction. Moreover, analytical figures of merit
including spike recovery, reproducibility and precision for HPLC determination of total flavonoids in tartary buckwheat, in
which both techniques were used for sample preparation, were satisfying.
Key words：tartary buckwheat；total flavonoids；rutin
中图分类号：S517 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2010)06-0080-06
收稿日期：2009-04-02
基金项目：科技部科研院所社会公益研究专项(2004DIB4J145)
作者简介：李欣(1985—)，女，硕士研究生，研究方向为农产品质量安全与检测技术。E-mail：kalx_630@hotmail.com
* 通信作者：王步军( 1 9 6 0 —)，男，研究员，博士，研究方向为农产品质量安全与检测技术。
E-mail：wangbj@mail.caas.net.cn
苦荞麦，学名“鞑靼荞麦”(Fagopyrum tararicum)，
属蓼料双子叶植物，为我国的特色农作物之一。四川
省是苦荞的主要产区。苦荞含黄酮类等多种活性成分，
其主要成分为芦丁，芦丁含量占总黄酮的 70%～90%[1-2]。
研究[3-8]表明这些活性成分有防治心脑血管疾病、降低血
脂、防治糖尿病等多种疗效。
目前对苦荞麦中黄酮类物质的提取方法多为索氏提
取法、碱水提取法和热水浸提法等[9]。索式提取法耗费
时间长且提取率不高[1 0]；碱水提取法提取物成分复杂，
含有蛋白质、果胶、淀粉等，给过滤带来困难；而
热水提取仅限于提取甙类，因提取杂质多，提取物易
霉变，故不常用[ 1 1 ]。恒温水浴振荡提取利用机械振动
加速被提取成分的萃取，而超声提取法则利用超声波在
液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取。本研
究通过超声提取和恒温水浴振荡法提取苦荞麦中总黄
酮，并通过正交试验优化提取条件，探讨苦荞麦中黄
81※工艺技术 食品科学 2010, Vol. 31, No. 06
酮类化合物的提取和测定方法。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
苦荞麦皮粉 西昌航飞苦荞麦开发中心。
芦丁标准品 中国药品生物制品检定所；甲醇(色
谱纯 )；三氯化铝、乙酸钾、无水乙醇、磷酸 (分析
纯 ) ；超纯水。
UV-2550紫外测定仪、LC-20AB高效液相色谱仪(配
有可变波长紫外检测器、双元泵和 LC-Solution色谱工作
站) 日本岛津公司；THZ-82恒温水浴振荡器 国华企
业；2K15高速冷冻离心机 Sigma公司；氮吹仪；超
声仪；分析天平；抽滤装置；X W 8 0 旋涡振荡器。
1.2 方法
1.2.1 总黄酮含量测定
标准液配制和标准曲线：准确称取芦丁标准品
11.2mg，用色谱级甲醇溶解，定容至 50mL。分别取芦
丁标准溶液 0.25、0.5、1、2、3、4mL于 6支 10mL
比色管中，加入2mL 0.1mol/L三氯化铝溶液，3mL 1mol/L
乙酸钾溶液，30%乙醇溶液定容至 10mL，摇匀，室温
下放置 30min。同时做试剂空白。
用紫外 -可见分光光度计，在 200～600nm范围内以
2nm光谱带宽，1nm采样间隔进行吸光度扫描，2次扫
描重复平均，确定最大特征吸收峰为 420nm。
在波长 420n m 处测定吸光度 A，以试剂空白做
参比，芦丁质量浓度 Y 与吸光度 A 的回归方程是：
Y=0.0343A－ 0.0003，相关系数 r=0.9999，其结果见图 1。
供试液的制备：准确称取两组苦荞麦皮粉各 0.5g于
25mL三角瓶中，按要求加入一定量乙醇，分别将两组
进行超声提取和一定温度下恒温水浴振荡提取，趁热减
压抽滤，定容，吸取 1mL提取液于 10mL容量瓶中，分
别加入 0.1mol/L三氯化铝溶液 2mL，1mol/L乙酸钾溶液
3mL，用体积分数 30 % 乙醇溶液定容至刻度，摇匀，
室温下静置 30min[12]。在 4000r/min速度下离心 10min，
于波长 420nm处测定吸光度，将其代入标准曲线方程计
算出总黄酮的质量浓度。

C×V×D×100
总黄酮得率的计算：Y/%=—————————×100

m×1000(100－H)
式中：C为由标准曲线计算得出的待测试液的总黄
酮质量浓度 /(mg/mL)；V为待测试液的体积 /mL；D为
试料的总稀释倍数；m为试料的质量 /g；H为试样水分
的质量分数。
在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差
值不大于这两个测定值的算术平均值的 10%[13]。
试样水分含量的测定：按照GB/T 5497— 1985《粮
食、油料检验：水分测定法》规定执行。
1.2.2 芦丁的HPLC含量方法测定[14]
色谱条件：Agilent TC C18(4.6mm× 250mm，5μm)
色谱柱，甲醇 -0 .5%磷酸溶液(50:50，V/V)为流动相，
流速0.8 mL/min，检测波长为257nm，样品进样量10μL。
对照品溶液的制备：精密称取芦丁对照品 481mg，
置于 10mL 容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(芦
丁质量浓度 48.1mg/mL)。
供试品溶液的制备：精密称取苦荞麦皮粉 1g，按
1.2.1节供试液制备方法处理，抽滤取 1mL滤液，氮吹
浓缩，1mL 甲醇溶解，振荡摇匀，测定前用微孔滤膜
(0 . 2μm)滤过，即得。
图1 标准曲线的相关性
Fig.1 Calibration curve for determination of total flavonoids
under the standard of rutin
0.10
0.08
0.06
0.04
0.02
0芦
丁
质
量
浓
度
/(
m
g/
m
L
)
吸光度
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3
图3 苦荞麦样品色谱图
Fig.3 HPLC chromatogram of ethanol extract of buckwheat
5
4
3
2
1
0
μ
V
(×
10
5 )
时间 /min
0 5 10 15 20 25 30 35
图2 芦丁标准品色谱图
Fig.2 HPLC chromatogram of rutin standard
2.00
1.75
1.50
1.25
1.00
0.75
0.50
0.25
0
μ
V
(×
10
5 )
时间 /min
0 5 10 15 20 25 30 35
2010, Vol. 31, No. 06 食品科学 ※工艺技术82
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注
入液相色谱仪，测定，计算供试品中芦丁含量。
线性关系考察：准确称取芦丁对照品溶于色谱纯甲
醇，配制成含量 0.816mg/mL的芦丁对照品溶液，依次
精密吸取对照品溶液 0 .2、0 .4、0 .6、0 .8、1mL，再
加入甲醇使每个梯度的终体积为 1mL，进样 10μL，按
上述条件测定，得回归线性方程，Y＝ 21551.9X+47845，
r=0.99987，Y为响应值，X为芦丁进样量(μg/mL)，芦
丁含量在 163.2～816μg/mL范围内呈线性关系。
1.2.3 实验设计
分别考查乙醇溶液体积分数、温度、液固比、时
间因素对黄苦荞黄酮提取的影响，在此基础上通过正交
试验确定超声波提取法和恒温水浴提取法的最佳工艺参
数，并对提取结果进行比较。
2 结果与分析
2.1 单因素试验[15]
2.1.1 乙醇溶液体积分数对总黄酮得率的影响
在两组 0.5g苦荞样品中，分别加入 25mL体积分数
为 20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%
的乙醇溶液，第一组超声提取 30min，第二组 50℃恒温
水浴振荡提取 2 h。抽滤，定容，测其吸光度，分别
计算总黄酮含量，得乙醇溶液体积分数对总黄酮得率影
响的关系图(图 4)。由图 4可见，随着乙醇体积分数的
增加，总黄酮得率呈指数增加，当体积分数增加到 50%
以后，曲线趋于平缓，继续增加乙醇溶液体积分数对
总黄酮得率的影响变小。
2.1.2 液固比对总黄酮得率的影响
在两组 1.0g 样品中，分别加入 5、10、15、20、
25、30、35、40、50mL 70%乙醇溶液，第一组超声
提取 30min，第二组 50℃恒温水浴振荡提取 2h。抽滤，
定容，测其吸光度，分别计算总黄酮得率，得液固比
对总黄酮得率影响的关系图(图 5)。由图可见，随着液
固比增加，总黄酮得率呈指数增加，当液固比增加到
20:1 (V/ m )以后，继续增加液固比对提高提取量的影
响变小。
2.1.4 温度对总黄酮得率的影响
图6 超声时间选择
Fig.6 Effect of ultrasonic treatment time on total flavonoid yield
2.56
2.54
2.52
2.50
2.48
2.46
2.44
2.42
时间 /min
总
黄
酮
得
率
/%
0 10 20 30 40 50
2.1.3 时间对总黄酮得率的影响
在 0.5g样品中，加入 25mL 70%乙醇溶液，第一
组超声提取 5、1 0、1 5、2 0、2 5、3 0、4 0 m i n，第
二组 5 0℃恒温水浴振荡分别提取 1、2、2 .5、3、4、
5、6 h，抽滤，定容，测其吸光度，分别计算总黄
酮得率，得时间对总黄酮得率影响的关系图(图 6、7)。
由图 6、7可见，超声提取实验中，提取 30min达到总
黄酮得率的最高值，而在恒温振荡水浴实验中，3h 以
后继续增加时间对得率的影响变小。
图4 乙醇溶液体积分数选择
Fig.4 Effect of ethanol concentration on total flavonoid yield
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
0
超声提取
恒温水浴振荡提取总
黄
酮
得
率
/%
乙醇溶液体积分数 /%
0 20 40 60 80 100
图5 液固比选择
Fig.5 Effect of the liquid-to-solid ratio on total flavonoid yield
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
0
超声提取
恒温水浴振荡提取
总
黄
酮
得
率
/%
液固比
0 10:1 20:1 30:1 40:1 50:1
图7 恒温振荡水浴时间选择
Fig.7 Effect of constant temperature shaking water bath extraction
time on total flavonoid yield
2.56
2.54
2.52
2.50
2.48
2.46
2.44
2.42
2.40
2.38
时间 /h
总
黄
酮
得
率
/%
0 1 2 3 4 5 6 7
83※工艺技术 食品科学 2010, Vol. 31, No. 06
在 0.5 g样品中，加入 25mL 70%乙醇溶液，分别
在 20、30、40、50、60、70、80℃恒温水浴振荡提
取 2 h，抽滤，定容，测其吸光度，分别计算总黄酮
得率，得时间对总黄酮得率影响的关系图(图 8)。由图
可见，随着温度升高，总黄酮得率逐渐增大，当温度
达到 40℃以后，继续升高温度对得率的影响变小。
2.2 正交试验
2.2.1 超声提取方法
在单因素试验的基础上，选择时间、乙醇溶液体
积分数、液固比为考察因素，以总黄酮得率为考察指
标，选用 L16(45)正交表进行正交设计来进行提取工艺的
优选，并确定优化的条件(表 1 )。
序号 A时间 /min B乙醇体积分数 /% C液固比
总黄酮得率 /%
重复 1 重复 2
1 4(40) 1(50) 1(15:1) 2.0568 2.0258
2 3(30) 2(60) 1 2.1181 2.1483
3 2(25) 3(70) 1 2.1823 2.1313
4 1(20) 4(80) 1 2.4599 2.5919
5 1 1 2(20:1) 2.1982 2.2709
6 2 2 2 2.4220 2.4303
7 3 3 2 2.5775 2.5093
8 4 4 2 2.6226 2.6134
9 3 1 3(30:1) 2.3266 2.4039
10 4 2 3 2.3556 2.2896
11 1 3 3 2.5671 2.4260
12 2 4 3 2.7223 2.6381
13 2 1 4(40:1) 2.3747 2.3087
14 1 2 4 2.3997 2.4057
15 4 3 4 2.5489 2.5100
16 3 4 4 2.7478 2.6455
K1 9.6597 8.9828 8.8572
K2 9.6049 9.2847 9.8221
K3 9.7385 9.7262 9.8647
K4 9.5114 10.5208 9.9705
R 0.2270 1.5379 1.0075
表1 超声提取正交试验设计及极差分析结果
Table 1 Arrangement and experimental results of orthogonal
array design for optimal ultrasonic-assisted extraction of total
flavonoids from tartary buckwheat
顺序依次为：乙醇溶液体积分数＞液固比＞提取时间，
优化的提取条件为 A 3 B 4 C 4，即乙醇溶液体积分数为
80%、液固比为 40:1(V/m)，提取时间 30min，提取总
黄酮得率平均为 2.6967%。
2.2.2 恒温水浴振荡提取方法
在单因素试验的基础上，选择温度、时间、乙醇
溶液体积分数、液固比为考察因素，以总黄酮得率为
考察指标，选用 L16(45)进行正交设计来进行提取工艺的
优选，并确定优化的条件(表 2 )。
由表 2可看出，四个因素对总黄酮得率影响的主次
顺序依次为：乙醇溶液体积分数＞液固比＞时间＞温
度，优化的提取条件为 A 3B 3C 4D 3，即乙醇体积分数为
80%，液固比为 30:1(V/m)，60℃提取 3h，提取总黄酮
含量平均为 2.7031%。
通过分光光度法测定两种提取方法得到总黄酮得率
结果(表 1、2)可知，两种方法提取总量差异并不显著，
而超声提取法则大大节省了时间。
2.3 总黄酮含量的测定
2.3.1 稳定性实验
精密吸取超声提取和恒温水浴振荡提取苦荞麦总黄
酮供试液各 1mL 置于 10mL 试管中，按 1.2.1节标准曲
线的制作条件下测定吸光度，于 1 5、3 0、4 5、6 0、
图8 恒温水浴振荡温度选择
Fig.8 Effect of water bath temperature on total flavonoid yield
2.9
2.7
2.5
2.3
2.1
1.9
1.7
1.5
温度 /℃
总
黄
酮
得
率
/%
0 20 40 60 80 100
由表 1可看出，3个因素对总黄酮得率影响的主次
序号
A温度 / B时间 / C乙醇溶液 D 总黄酮得率 /%
℃ h 体积分数 /% 液固比 重复 1 重复 2
1 1(40) 1(2) 3(70) 3(30:1) 12.3314 2.3942
2 1 3(3) 2(60) 1(15:1) 2.2475 2.2715
3 1 2(2.5) 1(50) 4(40:1) 2.2483 2.1953
4 1 4(4) 4(80) 2(20:1) 2.5001 2.4596
5 2(50) 3 1 3 2.2736 2.3066
6 2 1 4 1 2.2475 2.2475
7 2 4 3 4 2.4791 2.4789
8 2 2 2 2 2.2658 2.2889
9 3(60) 4 1 1 2.1823 2.1483
10 3 2 4 3 2.7006 2.7312
11 3 3 3 2 2.4688 2.4815
12 3 1 2 4 2.2502 2.2506
13 4(70) 2 3 1 2.1313 2.1313
14 4 4 2 3 2.3181 2.3202
15 4 1 1 2 2.2966 2.2241
16 4 3 4 4 2.7493 2.6889
K1 9.3240% 9.1211% 8.9375% 8.8035%
K2 9.2938% 9.3463% 9.1064% 9.4927%
K3 9.6068% 9.7438% 9.4483% 9.6880%
K4 9.4299% 9.4433% 10.1623% 9.6702%
R 0.3130% 0.6227% 1.2248% 0.8845%
表2 恒温振荡水浴正交试验设计及极差分析结果
Table 2 Arrangement and experimental results of orthogonal
array design for optimal constant temperature shaking water bath
extraction of total flavonoids from tartary buckwheat
2010, Vol. 31, No. 06 食品科学 ※工艺技术84
提取 称样 样品中黄酮 对照品加 测得总 回收率 / 平均回 RSD/
方法 量 /g 含量 /mg 入量 /mg 含量 /mg % 收率 /% %
0.9999 24.5186 9.62 34.8617 107.52
1.0001 24.8069 9.62 35.1979 108.01
超声法 1.0002 24.7468 9.62 34.9903 106.48 107.19 1.03
1.0001 24.8284 9.62 34.9922 105.65
1.0003 24.9512 9.62 35.3688 108.29
1.0002 24.1461 9.62 34.2014 104.52
恒温 0.9999 23.8992 9.62 34.1064 106.10
水浴 1.0000 23.9693 9.62 34.0610 104.90 105.81 1.02
振荡 1.0002 24.0010 9.62 34.3083 107.14
0.9999 23.8793 9.62 34.1126 106.37
表5 总黄酮回收率实验结果
Table 5 Recoveries of total flavonoids in tartray buckwheat
determined by HPLC method based on ultrasonic-assisted or
constant temperature shaking water bath extraction (n = 5)
提取方法
芦丁含量 /%
1 2 3 4 5
平均值 /% RSD/%
超声法 1.73 1.78 1.73 1.75 1.74 1.75 1.2
恒温水浴振荡 1.77 1.78 1.80 1.81 1.81 1.79 1.11
表6 芦丁的重复性实验结果
Table 6 Reproducibility test for HPLC method based on ultra-
sonic-assisted or constant temperature shaking water bath extrac-
tion for determination of rutin in tartray buckwheat
提取方法 1h 2h 3h 4h 5h RSD/%
超声提取峰面积 8548807 8632816 8697224 8504655 8730432 1.11
恒温水浴振荡提取峰面积 8256327 8332397 8346599 8317981 8292581 0.43
表7 芦丁的稳定性测定结果
Table 7 Stability test for HPLC method based on ultrasonic-
assisted or constant temperature shaking water bath extraction for
determination of rutin in tartray buckwheat
2.3.2 重现性实验
精密称取苦荞麦皮粉 1g，共 5 份，按 1.2.1节供试
液制备方法制备，分别按上述的含量测定方法测定其吸
光度(表 4 )。结果表明重现性实验符合要求。
2.4 芦丁的HPLC 含量测定结果
2.4.1 精密度实验
按 1.2.2节制备苦荞麦供试液，精密吸取 10μL进
样，连续进样 6次，得精密度 RSD 为 1.18%，符合实
验要求。
2.4.2 重复性实验
分别精密称取苦荞麦皮粉 1g共 5份，制备供试品
溶液，按上述色谱条件测定芦丁含量(表 6)。结果表明
重复性实验符合要求。
提取 称样 样品中芦丁 对照品加 测得总 回收 平均回收 RSD/
方法 量 /g 含量 /mg 入量 /mg 含量 /mg 率 /% 率 /% %
0.9999 15.77764 9.62 25.90516 105.28
1.0001 15.93356 9.62 26.06568 105.32
超声法 1.0002 16.05308 9.62 26.26108 106.11 105.54 1.03
1.0000 15.69568 9.62 25.97392 106.84
1.0002 16.11472 9.62 26.13148 104.12
1.0001 14.7719 9.62 25.1357 107.73
恒温 1.0000 14.7273 9.62 25.1561 108.41
水浴 1.0002 14.7931 9.62 25.1663 107.83 108.06 1.02
振荡 1.0002 14.7845 9.62 25.1698 107.96
1.0000 14.7234 9.62 25.1504 108.39
表8 芦丁回收率实验结果
Table 8 Recoveries of rutin in tartray buckwheat determined by
HPLC method based on ultrasonic-assisted or constant temperature
shaking water bath extraction (n = 5)
提取方法
吸光度
1 2 3 4 5
平均值 RSD/%
超声法 1.8660 1.8511 1.8127 1.8578 1.8346 1.84443 1.15
恒温水浴振荡 2.5569 2.6967 2.8628 2.2870 2.4104 2.7348 0.87
表4 总黄酮的重现性实验结果
Table 4 Reproducibility test for HPLC method based on ultra-
sonic-assisted or constant temperature shaking water bath extrac-
tion for determination of total flavonoids in tartray buckwheat
2.4.4 芦丁的回收率实验
精密称取苦荞麦皮粉 1g，分别精密加入芦丁对照
品溶液(48.1mg/mL)0.2mL，按上述供试溶液制备方法制
备，在同样的色谱条件下进样 1 0μL，测定，计算回
收率(表 8)。平均回收率分别为 105.54%和 108.06%，二
者回收率接近，超声波的效果略好，均符合实验要求。
提取方法
吸光度
15min 30min 45min 60min 90min
RSD/%
超声提取 1.84599 1.83259 1.85227 1.86517 1.87775 0.94
恒温水浴振荡 2.55688 2.57592 2.55448 2.50704 2.57484 1.10
表3 总黄酮的稳定性实验结果
Table 3 Stability test for HPLC method based on ultrasonic-
assisted or constant temperature shaking water bath extraction for
determination of total flavonoids in tartray buckwheat
90min各测 1 次(表 3)。结果表明该显色反应在 90min内
基本稳定。
2.3.3 回收率实验
精密称取苦荞麦皮粉 1g，共 5 份，用于超声方法
提取的样品中加入 40mL乙醇，恒温水浴振荡提取的样
品中加入 30mL乙醇，再分别准确加入 0.2mL的芦丁标
准品溶液(质量浓度为 48.1mg/mL)，按上述供试品溶液的
制备法制各样品溶液。按含量测定方法测定吸光度(表
5)。结果表明，平均回收率分别为 105.81%、107.19%，
符合实验要求，二者的回收率接近，恒温水浴振荡效
果略好。
2.4.3 稳定性实验
取苦荞麦同一份供试品溶液，每隔 1h进样 10μL，
5h内测定芦丁含量(表 7)。结果表明芦丁在5h内基本稳定。
85※工艺技术 食品科学 2010, Vol. 31, No. 06
3 讨 论
3.1 目前提取黄酮类化合物的方法很多，多用加热回
流法和浸提法。比较加热回流法、浸提法、超声提取
法和恒温振荡提取法，发现加热回流法耗时长，提取
杂质较多。本实验选用超声提取是利用超声波的热效
应、机械粉碎作用和空化作用，提取杂质少，且耗时
短，操作简便。本实验选用的恒温水浴振荡也相对于
水浴浸提法耗时短，提取率高。
3.2 在提取溶剂的选择上，曾试验过甲醇、乙醇和丙
酮[16]，发现甲醇提取率相对较高，但由于甲醇和丙酮有
毒，所以最终选用了乙醇作为提取溶剂。
3.3 总黄酮含量测定，目前多采用NaNO2-AlCl3法，这
种方法源于芦丁含量测定法，并逐步用于黄酮类化合物
的测定，后来发现这并不是黄酮类化合物的专属反应，
因为凡具有邻苯二羟基结构的物质，均能用此法进行显
色定量[ 1 7 ]。据文献报道，荞麦中发现原儿茶酸、原花
色素等都具有邻苯二羟基结构[18]，使该法的测定结果偏
高。本实验选用了 AlCl3法，该法对黄酮类化合物的专
属性较强[ 1 9 ]，具有较高的准确度。
3.4 在进行HPLC测定时，曾单纯实验过甲醇 -水、乙
腈 - 水作为流动相，虽然能将待测峰和其他峰分离开，
但拖尾现象严重，在甲醇 -水中加入少量磷酸，不仅分
离效果好，还克服了拖尾现象。
4 结 论
本实验通过正交试验确定了超声法提取苦荞麦皮粉
中黄酮类的最佳条件为 80%乙醇溶液、液固比 40:1、超
声提取 30min；恒温水浴振荡提取苦荞麦皮粉中黄酮类
的最佳条件为 80%乙醇溶液、液固比 30:1、60℃提取
3h。本研究的初步结果对进一步改进提取工艺以提高黄
酮类化合物得率具有一定的参考性。
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