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高效液相色谱法测定小叶榕中牡荆素的含量



全 文 :来越受到关注 , 具有很大的开发潜力 ,可以充分利用其有效成分 ,
变害为利 , 造福人类。
参考文献:
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ponentsinSolidagoherba[ J].ActaPharmHung, 2004, 74(4):223.
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resisandlevelsofelectrolytes[ J] .ActaPolPharm.1991, 48(5 -
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[ 6 ]  Fujita, Shinichim.NipponNegakuKaishi[ M] .1990, 64:1729.
收稿日期:2007-10-19; 修订日期:2008-02-10
基金项目:贵州省中药现代化科技产业研究开发专项资助项目(No.黔科
合中药专字 [ 2004] 20号)
作者简介:陈 化(1970-),女(汉族),四川成都人 ,现任贵州省兴义市人
民工人医院药剂科主管药师 ,执业药师 , 学士学位 ,主要从事医院药学与
药物研究工作.
高效液相色谱法测定小叶榕中牡荆素的含量
陈 化
(贵州省兴义市人民工人医院 ,贵州 兴义 562400)
摘要:目的 建立小叶榕中牡荆素的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法 , 色谱柱为迪马 TC-C18柱(250 mm×
4.6mm, 5 μm),流动相为乙腈 -1%醋酸(14∶86), 流速 1.0 ml/min, 柱温为 25℃, 检测波长 340 nm。结果 牡荆素在
0.082 4 ~ 0.82 4μg范围内呈良好的线性关系 , r=0.999 7;平均回收率为 100.39%, RSD为 2.20%。结论 该方法简单 、
灵敏度高 , 可用于小叶榕中牡荆素的含量测定。
关键词:小叶榕; 牡荆素; 高效液相色谱
中图分类号:R284.2  文献标识码:A  文章编号:1008-0805(2008)09-2122-02
ContentDeterminationofViterxininXiaoyerongbyHPLC
CHENHua
(People′sWorkersHospitalofXingyiinGuizhou, Xingyi, Guizhou562400, China)
Abstract:Objective:ToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofViterxininXiaoyerong.MethodsLUNAODSC18
BDS(250mm×4.6mm, 5 μm)wasusedwithacetonitrile-1%AceticAcid(14∶86)asmobilephase.Theflowratewas1.0
ml· min-1.Thedetectionwavelengthwas340 nm.ResultsThelinearrangeofViterxinwas0.082 4 ~ 0.824 μg, r=0.999 7.
Theaveragerecoverywas100.39%, RSDwas2.20%.ConclusionThemethodissimple, rapidandaccurate.
Keywords:Xiaoyerong; Viterxin; HPLC
  小叶榕 Xiaoyerong为桑科植物榕树 FicusmicrocarpaL.f.的
干燥叶 , 又名:细叶椿 、细叶榕 、垂叶榕 , 属桑科椿属常绿大乔木 ,
高 20 ~ 25 m,生气根 [ 1 ~ 2] 。 全年可采收 , 斩取叶和幼枝 , 除去树
枝 , 取净叶片 ,晒干。小叶榕多生长于村边或山林中 ,分布于我国
的广西 、广东 、福建 、台湾 、浙江南部 、云南 、贵州等地 ,印度 、缅甸 、
马来西亚等国也有分布。
小叶榕既可作风景树 、行道树 , 又具有药用价值。其树皮纤
维可制鱼网和人造棉 ,茎 、皮 、果 、叶 、胶汁等均可入药 , 具有祛风
清热 、活血解毒 、散淤利湿等功效。民间多用于治疗关节风湿痛 、
跌打损伤 、小便不通 、风火牙痛 、急性痢疾及肠炎 、疥癣 、痔疮等病
症。其叶 、皮 、果等提取的浸膏是治疗止咳 、感冒类中成药的主要
原料。
小叶榕中的主要有效成分是黄酮类化合物 ,具有止咳祛痰 、
抗菌消炎的作用。小叶榕药用部位中黄酮类化合物的种类很多 ,
其中以牡荆素的含量较高 , 并且生理活性较强 , 具有抗病毒 、抗甲
状腺肿和抑制肿瘤细胞生长等作用。因此以牡荆素作为测定指
标 , 有利于评价小叶榕药用部位的质量。
采用高效液相色谱法测定小叶榕中牡荆素的研究尚未见报
道。现报道如下。
1 器材
LC-2010AH型高效液相色谱仪(日本岛津);HS10260D型
超声波清洗器(f超声工作频率 40 kHz、天津市恒奥科技发展有
限公司);AUW120D型电子天平(日本岛津)。醋酸(AR);乙腈
(色谱纯);娃哈哈纯净水;牡荆素(Viterxin)对照品(中国药品生
物制品检定所 , No.111687, 供含量测定用);新鲜小叶榕采自贵
州省兴义市沧江乡。
2 方法与结果
2.1 含量测定方法
2.1.1 色谱条件 色谱柱为迪马 TC-C18柱(250 mm×4.6mm, 5 μm);流动相为乙腈 -1%醋酸(14∶86);流速 1 ml/min;
柱温 25℃;检测波长 340nm;进样量为 20 μl;牡荆素对照品浓度
为 0.0824 mg/ml;在此条件下 , 色谱图如图 1, 牡荆素保留时间为
30.417 min, 理论板数 31 141。
图 1 牡荆素对照品色谱图
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 9期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.9 
2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取牡荆素对照品适量 , 加甲
醇制成每毫升含 0.082 4 mg的溶液 ,即得。
2.1.3 供试品溶液的制备 取小叶榕药材粉末(过 40目筛)
2.0 g,精密称定 , 置具塞锥形瓶中 ,精密加 30%乙醇 25ml, 密塞 ,
称定重量 , 超声波振荡 60 min, 放冷 , 再称定重量 ,用 30%乙醇补
足减失的重量 , 滤过 ,取续滤液作为供试品溶液。
2.1.4 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 20
μl,注入液相色谱仪 , 测定即得。小叶榕药材色谱图见图 2。供
试品中牡荆素保留时间为 30.487 min, 理论塔板数 36 241。
2.2 测定方法学研究
2.2.1 检测波长的确定 取对照品溶液测定其紫外光谱。牡荆
素在 340 nm处有最大吸收 ,所以检测波长选定为 340 nm。
图 2 小叶榕药材色谱图
2.2.2 线性关系考察 精密吸取对照品溶液(0.082 4mg/ml)1,
2, 4, 6, 8, 10μl,按上述色谱条件注入液相色谱仪 , 记录峰面积 ,
以峰面积(A)为纵坐标 , 以牡荆素进样质量(B)为横坐标绘制标
准曲线 , 得回归方程:A=14.801+1 135.9B, r=0.999 7。表明牡
荆素在 0.082 4 ~ 0.824 μg范围内峰面积呈良好的线性关系。
2.2.3 精密度实验 精密吸取小叶榕药材供试品溶液 20 μl,连
续进样 5次 , 测得峰面积平均值为 388.101 2, RSD为 1.42%,表
明测定的精密度良好 。
2.2.4 稳定性实验 取同一供试品溶液分别于 1, 2, 4, 8, 12, 24
h依法测定。 结果见表 1。 峰面积平均值为 382.954。 RSD=
2.11%。表明供试品在 8 h内稳定性良好 。
表 1 牡荆素含量测定稳定性实验结果
时间t/h 峰面积 RSD(%)
1 390.798 5
2 392.324 8
4 384.908 2 2.11
8 381.894 9
12 371.862 1
24 375.935 4
2.2.5 重复性实验 精密称取同一小叶榕药材粉末 5份 , 按照
上述方法制备供试品溶液 , 测定并计算牡荆素含量(见表 2)。药
材中牡荆素含量测定的 RSD为 3.38%,说明本方法的重复性好。
2.2.6 回收率实验 采用加样法进行回收率实验。精密称取 1.0
g小叶榕药材粉末(含量 0.021%)5份 , 分别精密加入牡荆素
对照品储备液(0.0824mg/ml)2.5ml, 按照上述方法制备供试液并
测定。依照以下公式计算回收率:回收率(%)=(测得量 -药材
含量)/对照品加入量 ×100%。结果表明 5个加入量的回收率都
较高 , 平均达到 100.39%, RSD为 2.20%。结果见表 3。
表 2 牡荆素含量测定重复性实验结果 %
编号 牡荆素含量 RSD
1 0.021
2 0.020
3 0.020 3.38
4 0.021
5 0.022
表 3 牡荆素含量测定回收率实验结果


药材含量
m/mg
对照品
加入量 m/mg
测得量
m/mg
回收率
(%)
RSD
(%)
1 0.21 0.206 0.418 100.97
2 0.21 0.206 0.410 97.09
3 0.21 0.206 0.415 99.51 2.20
4 0.21 0.206 0.422 102.91
5 0.21 0.206 0.419 101.46
2.3 药材测定结果 按照上述方法测定 10批小叶榕药材的牡荆
素含量 。结果见表 4。
表 4 小叶榕药材牡荆素含量测定结果 %
编号 含量
1 0.031
2 0.032
3 0.021
4 0.022
5 0.041
6 0.029
7 0.020
8 0.022
9 0.035
10 0.016
  n=3
从表 4测定结果中可以看出 , 10批小叶榕药材样品中牡荆
素含量最高为 0.041%,最低为 0.016%, 小叶榕药材牡荆素的含
量均在 0.010%以上。据此研究结果制订小叶榕中牡荆素含量
标准为:本品按干燥品计算牡荆素含量不得低于 0.010%。
3 讨论
目前 ,对小叶榕化学成分的研究文献报道的很少。本实验研
究从小叶榕中提取出牡荆素 ,通过实验表明牡荆素为小叶榕中可
控成分之一 , 故将其作为药材中的指标性成分进行含量测定 , 可
有效地控制小叶榕的质量。
参考文献:
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.9 时珍国医国药 2008年第 19卷第 9期