全 文 ：做拍盆布每返如 尸之。 nt Ph , 。 10 109 梦 oC m m u n i e a t io 肪 1 9 89 (4) : 3 9~ 45
贯众叶片愈伤组织的诱导和植株再生
尹怀约 (四川师范学院 , 南充 ) 杨春蕾(J .日七医院 , 南充 )
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了人N G C h u n 一eL i (N砰公、 S `。为训。 万ed `耐 C o z刃。夕e , 名`比~ 刀口脱无。 ” 夕)
植物名称 : 贯众阅吵了云帅沁 . 了厉言咖蕊) 。
材料类别: 幼叶片、 叶柄。
培养条件 : 诱导愈伤 组 织培 养基 为 N 。十 K T
0
.
2~ 1
.
0 扭盯L (单位下同 ) + 2 , 企 D 0 . 4、 2 . 0 , 蔗
糖 4 % , 琼脂。 . 8 % , p H 5 . ;8 丛芽分化培养基为
M S + B A O
.
1~ 0
.
4 + N人人 0 . 5~ 2 . 。; 生根培养基为
1/ 2 M S + I B A O
.
7 + I A A O
.
6
。 培养温度 24~ 2 5 o C ,
每日光照 12~ 1 4 小时 , 光照度 17 0 ~ 2 000 l x 左右 。
生长和分化情况 : 二月下旬采集新长出地面不
久的贯众幼叶 , 此时幼嫩叶片为拳状 , 自来水冲洗 3
小时 ,’ 以清除材料表面的污染物 , 洗后用滤纸把材料
表面的水分吸干 ,然后放于 75 % 酒精中浸几秒钟 ,再
用刀 . 1% 抓化汞消毒 6~ 8 分钟 , 最后用无菌水冲洗
4 ~ 5 次 , 在无菌条件下将叶片切成 0 . 5~ o . s c衅 的
小块 , 叶柄切成 o . 8 0 m 长的小段 ,平放于试管中 , 每
管一块 , 七天后卷曲的叶片小块膨大 , 接着产生愈伤
组织 , 叶柄的愈组织先由切 口处开始 , 以后逐渐向中
央扩展 , 最后连结成一块。 愈伤组织呈颗粒状松散成
堆 , 一摇动很容易散开 , 散开后分裂很快 , 不久又堆
集起来 ,初为淡绿色 , 以后变为深绿色。 诱导产生愈
伤组织的激素以 K T 0 . 8 , 2 , -4 D 1 . 5 为最好 , 愈伤
组织的诱导率为 95 % 。 半月后将深绿色的愈伤组织
转接在分化培养基上 , 愈伤组织细胞继续分裂 , 一月
后从颗粒状愈伤组织长出很多丛芽 , 丛芽产生的激
素组合以 B人 0 . 1+ N 人人 2 . 0 为最佳 , 芽的诱导率为
10 0%
。 当叶片长至 1 ~ 2 o m 长时 , 将芽转入生根培
养基中 , 经过一段时间培养 , 在叶柄基部长出数条
根 , 根上有很多黄色的毛状体。 脓类植物的移栽要
求阴湿的外界环境 , 成活率达到 82 % 。
新进展 : 贯众组织培养成功 , 国内外尚未见报
道。
意义和用途 : 贯众是药用植物 , 亦可作农药 ,现
常用做盆景 。 本实验结果对这类植物的繁殖有一定
参考价值 。
收稿 1 9 8 年 9月 3 日 致谢 承张建平同志给以支持。
夭鹅绒竹竿组织培养
张启明 莫汉坤 李倩卿(中国科学院华南植物研究所 , 广州 51 06 50 )
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植物名称 . 天鹅绒竹芋伽、 古叩州心 ~ ag 心
-
“ 仍 ) .
材料类别 : 多年生植株当年萌生的嫩株 , 剥去
叶片 , 取茎段作为外植体进行培养`
.
3 9
.
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1989. 04. 013
培养条件: ①芽的诱导培养基采用 MS 基本培
养基 , 除去维生素氏和烟酸 , 附加 K T Z m盯L (单位
下同 ) 。 ② 壮苗培养基 : 基本培养基与① 相同 , 附加
B人 2 . 0 + 工A人 0 . 4 。 ③ 生根培养基 : 1 / 2 M 8 培养基 ,
附加 工B A Z , O 。 蔗糖均为 2 % , 琼脂 0 . 7% 。 培养温
度为 25 ~ 28 OC, 光照强度为 2 00 1二 , 每日光照 10 ~
1 2小时 。
生长和分化情况 : 材料经消毒后 , 在无菌条件
下 , 将长约 o . s c m 茎段接种到诱芽培养基上 , 培养
助~ 30 天后 , 茎段切 口表面分别长出很多小丛芽 , 待
芽长到 2 . 高时 ,将其分别转到壮苗培养基上 ,待小
苗长到 3~ 4 om 高时 , 可将小苗转到生根培养基中 ,
培养 10 天后开始形成根 , 获得完整植株。 继代繁殖
吮可将丛芽切割成若干小块 , 转入壮苗培养基上继
代培养。 每个芽可分化出 7~ s 个芽 , 每隔 30 ~ 翻
天继代一次 ,可获得大量小苗。
试管苗移栽时 , 先除去棉塞炼苗 2 天 , 然后从试
管中取出小苗 , 清洗根部培养基 , 然后栽植到以珍珠
岩 、 蛙石和塘泥 (1 : 1 : 2) 为基质的花盆中 , 成活率达
85 % 以上 。
新进展: 天鹅绒竹芋茎段组 织培养和植株再
生 , 国内外还未见报道。
意义和用途 : 天鹅绒竹芋靠分株繁殖 , 繁殖系数
低 , 采用组织培养繁殖 , 可在短期内获得大量的种
苗 , 为加速繁殖这一名贵观叶植物提供新的途径。
收稿 1 9 8 9年 1月 1 7 日
芝麻下胚轴愈伤组织的诱导和植株再生
石淑稳 蔡 明(中国农业科学院油料作物研究所 , 武汉 43 0 62 )
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, 平“ 加” )
植物名称: 芝麻 ( S eB a、 。 `耐初 , )中芝 5号
材料类别: 中芝 5号成熟种子用 70% 乙醇浸
泡半分钟 , 再用 0 . 1% H邻l , 消毒 15 分钟 , 然后用无
菌水冲洗 4 次 , 接种在 1/ 2M 8 培养基上 。 第一对真
叶伸展后 , 将下胚轴切成 o . s e二 长的切段作外植
体。
培养条件: 脱分化培养基为 M S, 附加激素如
下 : (1 ) 分别单独补加 A B A , 工人 A , I B人 和 N A人
(浓度为 0 . 5 m彭L 或 1 . O m岁L ) ; ( 2) G A 。 2 . O m翻
L (单位下同 ) ; ( 3) 2 , 企 D l . 0 或 2 . 0 ; (4 ) B A 2 . 5 , Z T
3
.
0
,
K T 3
.
0 分 g1J 与 2 , ` D ( 1 , 0 或 2 . 0 )组合加入 ,
蔗搪 4% 。 分化培养基为 M S , 几 , N it即 h (1 96 9 ) 。
激素配比为: (5 ) B A O . 5~ 2 .仑 ( 6 ) K T 或卿 0 . 5~
2
.死 (7 ) B人 , K T , Z T (浓度同 5, 6) 分别与 N A人
二 1成 0 . 2, 2 ,少D O . 05 组合加入 , 蔗糖 3% 。 脱分
化和分化培养基均加入卜丝氨酸 300 , 谷氨酷胺或
水解酪蛋白 以刃 , 琼脂 0 . 5% 。 生根培养基是场+
I B人0 . 3 + B人 0 . 丸B ` + I B A O . 1 , 蔗搪 3% 。 培养温
度 24 ~ 2 8 o C , 光强约 10的 11 , 每日光照 12 小时。
生长和分化价况 : 下胚 轴切段 在含有 0 . 5 或
1
.
O m g/ L 的 I么人 工B人和 N人人 的 M B 培养基与
2周后所有切段整块膨大 , 内部也脱分化 , 质地松
软 , 呈淡黄色。 生长素 1 . o m g/ L 比 o . 6 m g / L 水平
更易使外植体脱分化 , 3 种生 长 素 中 , 以 N人人对
愈伤组织的诱导效应最好。 2, 夯 D单独使用能使下
胚轴产生愈伤组织 , 当与 B人 , K T 和 ZT 配合使用
时 , 愈伤组织生长更旺盛 。 转到分化培养基后 , 愈
伤组织表面迅速增生 , 形成淡黄色 、 松散的颗粒状
物 , 2 周后大多变为深褐色 , 渐渐老化死亡。 有的继
续生长 , 形成半透明的绿色球状物和绿色小块 , 但未
能分化出芽 。 仅在 M S 十 B A O . 6+ N 人人 0 . 1 上的愈
伤组织分化了芽 。 把近 Z om 大的芽切下 转入生根
培养基中 , 7 天后均能长出淡绿色的根 , 进而发育成
完整植株。
靳进展 : 芝麻下胚轴的培养国内未见 报道 , 国
外虽有报道, 但仅获得了愈伤组织 , 我们经反复试脸
得到了再生植株。
惫义和用途 : 通过愈伤组织途径使芝麻体细胞
再生植株 , 为将来芝麻大量筛选突变体 、 遗传转化莫
定了基础 , 并能为芝麻育种工作开辟新途径。
收鹅 1 9朋 年 O月功 a
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