全 文 ：中国科技信息 2 0」4年第 」2斯 CH NI A S C IEN C EA N D T ECH N o L o G Y IN F o RM灯旧 N J u n . Z o 1 4 基础及前沿
陈玉梅 ( 1 9 8 3一 )女 广东兴宁市人 大学毕业 广州市绿化公司白云苗圃 研究方向
花卉繁育 。
陈玉梅
薰 本文 以花叶 良姜 (八晒nai sna d e o ea HO 吐 . ) 根状茎为材料 , 对其组培快繁体 系的建立进行 了探讨 。 试验表明 : 初代无菌芽萌生培 养基为 M S + 6一B八 ( 6 一 节基腺漂吟 ) 2 . s mg / L (单位下 同 ) +I B八 ( 引味丁酸 ) 0 . 2 ;5 丛生芽继代增殖培养基为 M+s 6一 B八2 . 0 + 盯 (激动素 ) 0 . 5
+ 旧八 0 . 5 ; 试管苗生根培养基为 1 / Z M+s 旧八0 . 2 5 , 其效果较为理想 。
D o l : 10
.
3 9 6 9 / i
.
is s n
.
10 0 1一 8 9 72
.
20 14
.
12
.
0 13
花叶良姜组培快繁体系建立的探讨
概述
花叶良姜 ( A加in ia sa n d er ae H or t . ) 又名艳山姜 、
彩叶姜 、 斑纹月桃 、 花叶艳山姜 , 为姜科 山姜属 , 常绿
草本观叶植物 ; 喜高温高湿 、 有耐萌性 ; 生长最适温 :
15℃ ~ 30 ℃ , 生长最低温 : 5℃左右 ; 在琉松 、 疏水性良
好的壤土中生长较好 , 原产东南亚热带亚热带地区 , 适宜
我国华南及东南地区栽植 。
花叶良姜一般 l m 一 Zm 高 , 根茎横生 , 叶面有金黄
色的纵斑纹 、 斑块 , 光泽艳俪而迷人 ; 夏季开花 , 花弯近
钟形 , 具独特花姿 色彩鲜艳夺目 , 格外雅观 , 极具观赏性 。
多用于景观山石一旁 , 绿地边缘及庭院一角 , 其观赏效果
甚佳 ; 也常点缀于室内 , 深受人们喜爱 , 市场需求量大 。
花叶良姜常采用分株法繁殖 , 由于分秦少 , 其繁殖速度难
以满足市场的需求 。 目前 , 我国众多学者对其进行了大量
的组织培养和快速繁殖技术的研究 , 以满足于市场的需求 。
为快速花叶良姜的生产速度 , 本文作者自 2 0 10 年以来 ,
参考前人的经验与成果 , 以花叶良姜根状茎为外植体 , 对
其组培快繁技术与方法进行了摸索与探讨 , 已成功建立了
其快繁体系 。 现将其试验结果介绍如下 。
材料与方法
试验材料
取 广 州 市 白云 苗 圃栽 培 的 花 叶 良 姜 ( A加in ia
sa n de ar
e H Or t
.
) 的根状茎作为试验外植体 。
试验方法
初代无菌芽的建立
选择长势好的一年生花叶良姜植株 , 取其地下根茎 ,
除去地上部分茎叶 , 经冲刷 、 清洗干净 , 再经 自来水冲
洗 l lh 】in 左右 , 置于超静工作台上用 10% N a CI O 溶液浸
泡 15m in , 70 % C H 3 C H ZO H 浸泡 l m in , 无菌水冲洗 4
次 , 再用 0 . 15% H gc lZ 溶液消毒 l lh】 in , 然后用无菌水漂
洗 4次后 , 将其根茎切成 1 . O cln 长的茎段 , 接种到 M S + 6 -
B A ( 0
.
5
、
1
.
5
、
2
.
5
、
3
.
5 ) + IB A ( 0
.
0 5
、
0
.
15
、
0
.
2 5
、
0
.
5 )
+ 0
.
2% 活性炭的初代芽诱导培养基中 ; 每种培养基接种
10 管 , 每管接种 1段 置于已消毒灭菌过的培养室中培养 。
继代增殖培养
将初代阶段所诱导出的花叶良姜无菌芽 , 沿基部分割
成单芽 , 进而接种到继代增殖培养基上 , 进行增殖培养 ;
其培养基选用 M S 基本培养基 , 生长调节物质为 : 6 一 B A
( 1
.
0
、
2
.
0
、
3
.
0
、
4
.
0 ) + K T ( 0
.
0
、
0
.
10
、
0
.
50
、
1
.
0 0 ) IB A ( 0
.
0 0
、
.0 2 5
、
0
.
5 0
、
.0 7助 。 每个培养基接种 6 0 瓶 , 每瓶接种 3
个无菌芽 , 继代培养 4 5d 后统计其芽的增殖系数 (瓶内分
孽侧芽总数 / 瓶内原有接种总芽数 ) 和瓶内的有效芽 (长
出 3一 4 片叶 , 叶绿色且伸展的小植株 ) 。
生根诱导培养
继代增殖培养长出的有效花叶良姜丛生芽 , 高达 2 . s c m
以上时 , 将其分成单芽转接到 1/ ZM s + BI A ( 0 .沥 、 .0 2 5 、
0
.刃 、 0 . 7匀 生根培养基中 , 进行生根诱导 ; 28 d 时统计芽
的生根率 (生根的总株数 / 接种的总芽数 ) 。
以 上 培 养 基 , 琼 脂 : 0 . 8% ; 蔗 糖 : 3 0% ; p H
值 : 5 . 6 一 5 . 8 ; 培 养 温 度 : 2 5 士 2 ℃ , 光 照 强 度 :
1刃 ol x 一 2 0 0l x , 光照时间 : 12 h 左右 / d 。
一 51一
基础及前沿 中国科技信息 20」4年第 」2斯 CH IN A S C IEN C EA N D T ECH N o L o G Y NI F o RM灯旧 N J u n . Z o l斗
3
试验结果及分析
初代无菌茅的建立
初代建立无菌芽 , 是为继代增殖培养作准备 , 也是组
培快繁的关键技术 。 当花叶良姜地下根茎在初代培养基中
培养 22 士 Zd 时 , 便萌生出侧芽来 , 试验表明 :
芽萌生率及萌生芽系数都与培养基中所加的 6 一 B A 、
BI A 浓度有关 , 当培养基 中的 6一 B A 浓度达 3 . s m g/ L 、
BI A .O刃 m g/ L 时 , 所萌生的芽呈结块状 , 叶不展开 , 其
形态不太正常; M S + 6 一 B A 2 . 5 + BI A O . 2 5 是花叶良姜初代培
养效果较佳的初代无菌芽诱导培养基 (见表 l) 。
表 1 不同培养基质对青苹果竹芋丛生芽诱导的影响
生根诱导培养与移栽
生根诱导培养也是组培快繁体系建立的关键 , 系关花
叶良姜组培快繁技术的应用 。 选取 2 . s cln 花叶良姜不定芽 ,
转接到含有 BI A 的生根培养基中 , 培养 15d 左右便开始出
根 , 28 d 左右平均生根数 3 一 5 条 ; 从表 3 不难看出: 生
根培养基中 BI A 浓度影响其生根效果 , 当 BI A 低于 0 . 2 5
m g/ L 时 , 不定芽生根率和每株生根数均较低 ; 但 BI A 体
积质量超过 O . sm g/ L 时 , 虽不定芽生根率和平均每株生
根数较高 , 但其试管苗基部均有淡黄色的愈伤组织 , 影响
试管苗的移栽 。 可见 , 诱导花叶良姜不定芽生根培养基 :
12/ M s
+ BI A o
.
2 5
, 生根率高 , 每株平均根数亦较多 , 是较
为理想的生根培养基 。
表 3 不同培养基质对青苹果竹芋试管苗生根的影响
培养基 (浓度 m虾 )L 萌生芽的 芽萌 萌生芽萌生芽 生长势
外植体 生率 数 系数
M S+ 6 一 B A O
.
5 + I B A O
.
O S 4 6 46 6 7 1 4 5 芽生长正常
M S+ 6 一 B A I
.
5 + I B A O
.
15 7 7 7 7 5 6 2力 3 芽生长正常
M S+ 6 一 B A 2
.
5 + I B A O
.
2 5 8 2 82 2 6 0 3
.
16 芽生长正常
M S+ 6 一 B A 3
.
5 + I B A O SO 8 6 86 4 0 5 4
.
7 1 芽呈结块状
培养基 (浓度 m g / L ) 生根株数 生根率 (% ) 平均根数 (条 ) 生长情况
l / ZM S + IB A O刀5 5 6 5 6 2 . 6 0 正常 , 无愈伤组织
l / ZM S + IB A 0 2 5 9 6 9 6 3 2 1 正常 , 无愈伤组织
l / ZM S + IB A O巧 0 1 0 0 1 0 0刀0 4刀0 有淡黄色愈伤组织
l / ZM S + IB A O刀5 1 0 0 1 0 0刀0 5名0 有淡黄色愈伤组织
注 : 接种试管苗数均为 ! 0
注 : 接种茅数均为 ! 0 , 茅萌生率以 % 计
继代增殖培养
将初代培养所产生的花叶良姜无菌芽 , 分别以单个芽
的形式转移到继代增殖培养基中 , 以获取大量丛生芽为目
的 , 进行继代增殖培养 , 此阶段系关组培快繁的意义及价
值 。 表 2表明 , 培养基所添加的三种生长调节物质 ( 6一 B A ,
K T
,
BI A )
, 对其诱导丛生芽的产生和提高芽的增殖系数
都有明显的影响; 单独添加 6 一 B A , 芽的增殖系数和有效
苗均受影响 ; 当 6 一 B A 、 K T 浓度过高 , 虽可使芽的增殖
系数得以提高 , 但芽的有效苗数确降低 ; 可见花叶良姜继
代增殖培养 , 配合使用 6 一 B A , K T , BI A 三种生长调节物
质为佳 , 即 : M S + 6 一 B A Z . O+ K T O . 5 + BI A O . 5 为理想的继代
增殖培养基 。
当花叶良姜试管苗生有 4 条左右根 , 根长 Z cln 左右 ,
其苗高 5姗 左右时 , 即可移栽 。 移栽时将瓶苗于温室炼苗
4 一 s d 后 , 将其取出并将培养基清洗掉 , 经 100 倍多菌灵
灭菌后 , 栽植于营养泥炭 + 珍珠岩 + 河沙 ( 2 : 1 : l) 混
合基质中 ; 喷淋水后 , 用 80 一 100 0 倍甲基托布津灭菌 ;
在温度 2 5℃ 左右 , 相对温度 80% 左右 , 遮阳 , 夏季透光
率 30 % 左右条件下培养; 当小苗长新叶后 , 进行常规管理 。
4 小结
表 2 不同培养基质对青苹果竹芋丛生芽诱导的影响
培养基 (浓度 m虾 )L 丛生芽数 增殖 有效 有效苗率 /%
(个 ) 系数 苗数
M S + 6一 B A I O+ K T O O+ I B A 0 0 0 1 37 1 9 5 10 2 7 4
.
50
M S + 6一 B A Z
.
O+ K T O
.
1+ I B A O 2 5 2 50 3
.
57 2 2 3 8 9
.
34
M S + 6一 B A 3
.
O+ K T O
.
5 + I B A O
.
SO 40 0 5 6 5 3 5 0 8 7湃 5
M S + 6一 B A 4
.
O+ K T I O+ I B A O
.
7 5 49 2 7力3 3 0 6 6 2 . 16
花叶良姜因色彩鲜艳 , 叶色艳丽 , 株形美妍 ; 常点
缀于景观 山石一旁 , 绿地边缘及庭院一角 ; 装饰于客
厅 、 办 公室及厅堂过道等较明亮处 , 极具观赏性 , 深
受人们喜爱 , 市场需求量大 。 用 其地下根茎为组培外
植体 , 方可有效建立其快繁体系 。 其初代无菌侧芽诱
导 : M S + 6 一 B A 2 . 5 + BI A O . 2况 丛生芽继代增殖 : M S + 6 -
B A Z
.
O+ K T O
.
5 + BI A O
.况 不定芽生根 : 1/ ZM S + BI A O . 2 5 。
要规模化进行花叶良姜生产育苗 , 尚待进一步摸索探讨 。
注 : 接种茅数均为 7。
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