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植物生理学通讯 尸勿耐 外梦城勿男 肠叨~ 七以必韶 1 9 9 2
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2 8 ( 4 )
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百合叶片愈伤组织的诱导和植株再生 `
马 , 惠郁扶兴 周俊彦 罗新谈 (西辈植姗究所 , 陕西杨陵 “ 2 `“ 0)
C a l lu s I n d u e t ion a n d P l
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植物名称 : 百合扛衣勿饥 `幻爪义戒尸 ) 。
材料类别 : 实生苗叶片切段 。 将百合种子 (来源
于 日本 T A lK l 种子公司 )用水浸饱 l d ,经 70 % 乙醇
处理 30 5 , .0 1%升汞溶液灭菌 15 m in ,用无菌水淋洗
5次后接种于 M s 培养基上 。 培养温度 25 士 2℃ , 光周
期 1 2 h 光照八 Z h 黑暗 , 光照度 1 5 00一 20 0 0 lx 。 培养
] 月后种子萌发 , 相 d 后无菌苗高 8~ 1 0c m ,线形叶
片宽度 2 ~ 3 m m ,叶片淡绿色 , 于无菌条件下将叶片
切成 s m m 长的切段 ,做为外植体进行愈伤组织诱导 .
培养条件 : 基本培养基含 M s 大量 、 微量元素
和有机物质及蔗糖 3 % , 琼脂。 . 6 % , p H S . 几6一 5 . 8 。
诱导愈伤组织的培养基为 M s 十 2 . 4 一 D (浓度分别为
0
.
0 5
,
0
.
1
,
0
.
2
,
0
.
5
,
1
.
0
,
2
.
0 m g / L
,单位下同 )以及
M s + 2
,
4
一
D I
·
0十BA .0 05 , 以 M s 作对照 。 分化培养
基 : ( l) Ms + 呵A A 0
.
05 + BA (或 KT , zT 等 , 浓度均为
1
.
0 ) ; ( 2 )M s + N A A 0
.
05 + T D Z ( 0
.
0 0 2
,
0
.
0 5 )
。 生根
培养基为 M s 。
生长与分化愉况 : 将外植体接种于诱导愈伤组织
的培养基上 ,置光照下培养 , 10 d 后可见外植体切 口
处开始膨大 . 产生少量淡黄色愈伤组织 , 质地疏松声
周后在切 口处形成直径 2~ 10 ~ 的愈伤组织
,在不
含 2 , 4一 D 的 M s 上也有少数外植体 (6 % )可产生少量
愈伤组织 。 在 2 , 4 一D 0 . 05 ~ 1. 0 的培养基上 ,诱导频
率与 2 , 4一 D 浓度有正相关 ( 10 % ~ 45 % ) , 以 2 , 4一 D
1
.
0 时诱导率最高 , 且愈伤组织生长也最好 , 直径约
10 ~ 15 m m
,个别外植体可在此培养基上直接诱导出
苗 , 但苗细弱黄绿 , 高约 0 . 2 c m 。 将以上愈伤组织转
入分化培养基上 , 在光下继代培养 , 2 ~ 3 周后 , 形成
颗粒状 、疏松的愈伤组织 , 其表面开始出现绿点 。 l 月
后可见有少量微小绿芽形成 , 在 M s + N A A 0 . 05 +
BA 1
.
0 上 .苗分化率最高 , 达 49 . 3 % ,苗生长最禽 ,达
8~ 10
c m
, 但偶有轻微玻璃化现象 。 将高约 4 ~ 5 c m
的正常生长的苗转入 M s 上 , 培养 l 月后便长出 2~ 5
条细小白根 ,形成完整植株 。 先将生根试管苗在室内
锻炼 3~ 刁 d ,洗净根上培养基 ,移栽于营养钵中 , 营养
钵基质为蛙石与砂 (体积比为 l : l) , 移栽成活率达
80 %以上 。 1 9 8 7 年移栽成活的苗已于第 2 年开花 , 并
产生地下鳞茎 。
意义与进展 :百合属植物组织培养已有报道 ,但
未见关于本种百合及叶片为外植体的有关报道 . 本
种百合据中国植物志记载为握丹 (加必抓 。” “ 汉加 ) ,
花及鳞茎较一般百合稍小 ,花为桔红色 . 含芳香油 ,可
做香料 。 本研究用 L枷m `切汉汉毋 的实生苗幼叶做外
植体 , 诱导愈伤组织所要求的 2 , 4 一 D最低浓度仅
0
.
05 m g L/
, 较其他研究中所用生长素浓度要低得多 ,
这可能与外植体为实生苗幼叶有关 . 同时器官发生所
要求的条件亦不同 。 TDz 和其他苯基脉衍生物过去
在双子叶植物 ,特别是木本植物组织培养中应用较
多 .在百合组织培养中首次应用 T zD 代替普通细胞
分裂素 以诱导器官发生 。 研究表 明 T D z 为 0 . 0 0 2
哪 / L 时即可诱导愈伤组织完成器官发生 (频率达
47
.
6 % )
, 其效果与 B人 为 1 m g L/ 时相近 , 这表明
DT z 等也可在单子叶植物中表现出很高的细胞分裂
素活性 。
收稿 19 9 1一 1 1一 2 7
l 国家自然科学基金资助项目 。
缩 写 T D z : hT i d iaz u r叨 , ( N 一hP e n 又l 一N ’ 一 l , 2 , 3一 t h i d iaz o l一 5 -
y 一u r ae . )是 s七h e v i n s 公司 19 8 8 年产品 . 由 C o 一e t G F
教授赠送 。
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DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1992. 04. 020