全 文 ：［收稿日期］ 20160224(008)
［基金项目］ 国家自然科学基金项目(81573717，21365023);山东省自然科学基金项目(ZＲ2013HQ024) ;山东省中医药科技发展计划项
目(2015-230)
［第一作者］ 刘冬梅，硕士，副教授，从事天然产物化学研究，Tel:0536-8462493，E-mail:ldmwfmc@ 163. com
［通讯作者］ * 盛继文，硕士，副教授，从事天然产物化学研究，Tel:0536-8462065，E-mail:sjwchy@ wfmc． edu． cn
猴腿蹄盖蕨根茎化学成分及其还原能力
刘冬梅1，盛继文1* ，王思宏2，张维芬1，张晓红1，王得运1
(1. 潍坊医学院 药学院，山东 潍坊 261053;2. 延边大学 分析测试中心，吉林 延吉 133002)
［摘要］ 目的:研究猴腿蹄盖蕨 Athyrium multidentatum根茎化学成分并测定各成分的还原能力。方法:利用硅胶柱色谱
技术分离纯化化学成分，结合理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。采用紫外-可见分光光度法测定化合物的还原能力。
结果:得到 11 个化合物，分别为亚油酸甲酯(1)，大黄素甲醚(2)，二十四碳酸(3)，正二十六烷醇(4)，亚油酸(5)，β-谷甾醇
(6)，胡萝卜苷(7)，striatisporolide A(8) ，原儿茶酸甲酯(9)，原儿茶酸(10)及 D-葡萄糖(11)。结论:除化合物 3 和 6，其他化合
物均为首次从猴腿蹄盖蕨中分离得到。化合物 9，10 具有较强的还原能力。
［关键词］ 猴腿蹄盖蕨;大黄素甲醚;striatisporolide A;还原能力
［中图分类号］ Ｒ284． 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2016)21-0059-04
［doi］ 10. 13422 / j． cnki． syfjx． 2016210059
［网络出版地址］ http:/ /www． cnki． net /kcms /detail /11． 3495． Ｒ． 20160804． 1052． 028． html
［网络出版时间］ 2016-08-04 10:52
Chemical Constituents from Athyrium multidentatum Ｒhizome and Their Ｒeducing Capacity
LIU Dong-mei1，SHENG Ji-wen1* ，WANG Si-hong2，ZHANG Wei-fen1，ZHANG Xiao-hong1，WANG De-yun1
(1. School of Pharmacy of Weifang Medical University，Weifang 261053，China;
2. Analysis and Test Center of Yianbian University，Yanji 133002，China)
［Abstract］ Objective:To study the chemical constituents from rhizome of Athyrium multidentatum and
their reducing capacity． Method:The chemical constituents were separated and purified by silica-gel column
chromatography，and identified according to physicochemical properties and spectral data． The reducing capacity
was detected by ultraviolet-visible spectrophotometry． Ｒesult: Eleven compounds were obtained from
A． multidentatum rhizome and identified as methyl linoleate (1)，physcion (2) ，tetracosanoic acid (3) ，
1-hexacosanol (4) ，linoleic acid (5) ，β-sitosterol (6) ，daucosterol (7) ，striatisporolide A (8) ，protocatechuic
acid methyl ester (9) ，protocatechuic acid (10)and D-glucose (11)． Conclusion:Except for compounds 3 and
6，all of the remaining compounds were prepared from A． multidentatum for the first time，and compounds 9 and 10
showed a notable reducing capacity．
［Key words］ Athyrium multidentatum;physcion;striatisporolide A;reducing capacity
猴腿蹄盖蕨别名多齿蹄盖蕨、短叶蹄盖蕨，为多
年生草本蹄盖蕨科植物，主要分布于我国东北、华北
等地。该植物高 50 ～ 100 cm，其根状茎短而直立，
密生黑褐色披针形鳞片。《中国长白山药用植物彩
色图志》记载猴腿蹄盖蕨春秋季采挖，去掉茎叶，以
根状茎入药，可用于治疗流行性感冒、子宫出血、寄
生虫等疾病［1］。猴腿蹄盖蕨为中药贯众的一个习
用品种，是长白山地区一种重要的民间药物。王金
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兰等［2-3］从猴腿蹄盖蕨中分离得到绵马酚 B，山柰
酚，槲皮素，3-羟基-5，6-环氧-β-紫罗兰酮，山柰酚-3-
β-D-葡萄糖苷，山柰酚-7-β-D-葡萄糖苷等 17 个化合
物，并发现其具有抗菌作用。笔者前期对猴腿蹄盖
蕨根茎多糖的抗氧化、抗衰老活性进行了报道［4-5］，
对其化学成分进一步深入研究，从中分离得到 11 个
化合物，其中 9 个化合物均为首次从猴腿蹄盖蕨中
分离得到。植物化学成分研究结果表明猴腿蹄盖蕨
化学成分很有特色，但其化学成分及生物活性研究
尚不深入，限制了猴腿蹄盖蕨资源的进一步合理开
发利用。本研究结果丰富了现有药用蕨类植物研究
理论，具有重要意义。
1 材料
AV-300，AV-500，JEOL JNM-ECP 600 型核磁共
振波谱仪(TMS 为内标，德国 Bruker 公司)，LCQ
ADVANTAGE MAX 型液质连用质谱仪(Finniga 公
司)，UV-5000 型紫外-可见分光光度计(上海元析仪
器有限公司)，AL 201 型 1 /万电子天平(梅特勒-托
利多仪器上海有限公司)。柱色谱硅胶(100 ～ 200
目)，GF254薄层色谱硅胶(青岛海洋化工厂);石油
醚、乙酸乙酯、甲醇(分析纯，天津科密欧化学试剂
有限公司);维生素 C(批号 20150925)，铁氰化钾，
三氯乙酸(化学纯，上海国药集团化学试剂有限公
司)。
猴腿蹄盖蕨根茎于 2013 年 9 月采自吉林省抚
松县，由潍坊医学院生物技术制药与生药学教研室
许崇梅博士鉴定为蹄盖蕨科猴腿蹄盖蕨 Athyrium
multidentatum的根茎。该植物样品存放于潍坊医学
院药学院药物化学实验室。
2 提取与分离
取猴腿蹄盖蕨干燥根茎 6. 5 kg，粉碎，甲醇室温
浸泡，过滤，浓缩，得褐色浸膏 120. 3 g。将浸膏加水
混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，每种溶
剂萃取 3 次，合并同一溶剂萃取物，浓缩，得石油醚
提取物 34. 7 g，乙酸乙酯提取物 25. 9 g，正丁醇提取
物 49. 3 g。取石油醚提取物浸膏进行硅胶柱色谱(8
cm ×60 cm)分离，以石油醚-乙酸乙酯体系进行梯
度洗脱(100∶ 0 ～ 50∶ 50)，得流分Ⅰ ～Ⅳ。
流分Ⅰ(100 ∶ 0)浓缩至无溶剂，得化合物 1
(1. 76 g)。流分Ⅱ(100 ∶ 0)浓缩后加入少量石油
醚，放置过夜，得化合物 2(6 mg)，所得母液室温暗
处放置 2 d，得化合物 3(18 mg)，所得母液继续放置
3 d，得化合物 4(6 mg)。流分Ⅲ(25∶ 1)经硅胶柱色
谱(2. 5 cm × 40 cm)分离，石油醚-乙酸乙酯体系梯
度洗脱，得化合物 5(100 ∶ 0，1. 31 g)，6(25 ∶ 1，867
mg)。流分Ⅳ(2 ∶ 1 ～ 1 ∶ 1)浓缩后得化合物 7(2. 3
g)。取乙酸乙酯提取物浸膏，以石油醚-乙酸乙酯体
系梯度洗脱，流分经 TLC 跟踪监测，合并 Ｒf 值相同
组分，得化合物 8(4∶ 1，102 mg)，9(2∶ 1，134 mg) ，10
(1∶ 1，268 mg)。取正丁醇提取物浸膏进行硅胶柱
色谱分离，以乙酸乙酯-甲醇体系梯度洗脱，得化合
物 11(10∶ 1，11 mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 黄色油状物。1H-NMＲ (CDCl3，500
MHz)δ:5. 38 ～ 5. 28 (4H，m，H-9，H-10，H-12，
H-13)，3. 64 (3H，s，-OCH3)，2. 75 (2H，t，J =
6. 5 Hz，H-11) ，2. 28 (2H，t，J = 7. 6 Hz，H-2) ，
2. 02 (4H，dt，J = 11. 4，6. 2 Hz，H-8，H-14) ，
1. 61 ～ 1. 58 (2H，m，H-3) ，1. 37 ～ 1. 24 (14H，m，
H-4 ～ H-7，H-15，H-17) ，0. 87 (3H，dd，J = 11. 9，
6. 7 Hz，H-18)。13C-NMＲ (CDCl3，125 MHz)δ:
174. 2 (C-1)，130. 1 (C-9 或 C-13) ，129. 9 (C-13
或 C-9) ，128. 0 (C-10 或 C-12) ，127. 9 (C-12 或 C-
10) ，51. 3 (C-1) ，34. 1 (C-2) ，31. 9 (C-16) ，
29. 7 ～ 29. 1 (5C，C-4 ～ 7，C-15) ，27. 2 (C-8 或 C-
14) ，27. 1 (C-14 或 C-8) ，25. 6 (C-11) ，24. 9 (C-
3) ，22. 7 (C-17) ，14. 1 (C-18)。以上数据与文献
报道的亚油酸甲酯波谱数据基本一致［6］，故鉴定化
合物为亚油酸甲酯。
化合物 2 橙红色针晶，醋酸镁反应显橙红色，
mp 203 ～ 204 ℃。1H-NMＲ (CDCl3，300 MHz)δ:
12. 33 (1H，s，8-OH)，12. 13 (1H，s，1-OH) ，
7. 64 (1H，s，H-5) ，7. 38 (1H，d，J = 2. 6 Hz，H-
4) ，7. 09 (1H，s，H-7) ，6. 69 (1H，d，J = 2. 5 Hz，
H-2) ，3. 94 (3H，s，-OCH3)，2. 46 (3H，s，-CH3)。
13C-NMＲ (CDCl3，75 MHz)δ:191. 0 (C-9)，182. 3
(C-10) ，166. 7 (C-3) ，165. 4 (C-1) ，162. 7 (C-
8) ，148. 7 (C-6) ，135. 4 (C-4a) ，133. 4 (C-10a) ，
124. 7 (C-7) ，121. 5 (C-5) ，113. 9 (C-9a) ，110. 5
(C-8a ) ，108. 5 (C-2 ) ，107. 0 (C-4 ) ，
56. 3(-OCH3)，22. 4 (-CH3)。以上数据与文献［7］
报道一致，故鉴定化合物为大黄素甲醚。
化合物 3 白色絮状固体，mp 81 ～ 83 ℃，ESI-
MS m / z 369［M + H］+。1H-NMＲ (CDCl3，300 MHz)
δ:2. 35 (2H，t，J = 7. 5 Hz，H-2)，1. 63 (2H，m，
H-3) ，1. 25 (40H，br s，H-4 ～ 23) ，0. 88 (3H，t，
J = 6. 6 Hz，H-24)。以上数据与文献［8］一致，故鉴
定化合物为二十四碳酸。
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化合物 4 白色固体颗粒，mp 77 ～ 78 ℃。1H
NMＲ (CDCl3，300 MHz)δ:3. 65 (2H，t，J = 6. 7
Hz，H-1)，1. 56 (2H，m，H-2) ，1. 25 (46H，br s，
H-3 ～ 25) ，0. 88 (3H，t，J = 6. 7 Hz，H-26)。以上
数据与文献［9］报道一致，故鉴定化合物为正二十
六烷醇。
化合物 5 白色蜡状固体。1H-NMＲ (CDCl3，
500 MHz)δ:5. 38 ～ 5. 32 (4H，m，H-9，H-10，H-
12，H-13)，2. 77 (2H，t，J = 6. 5 Hz，H-11) ，2. 35
(2H，t，J = 7. 6 Hz，H-2) ，2. 04 (4H，dt，J =
11. 4，6. 2 Hz，H-8，H-14) ，1. 66 ～ 1. 60 (2H，m，
H-3) ，1. 32 ～ 1. 25 (14H，m，H-4 ～ H-7，H-15，H-
17) ，0. 88 (3H，dd，J = 9. 3，4. 3 Hz，H-18)。13C-
NMＲ (CDCl3，125 MHz)δ:180. 0 (C-1)，130. 1
(C-9 或 C-13) ，129. 9 (C-13 或 C-9) ，128. 0 (C-10
或 C-12) ，127. 9 (C-12 或 C-10) ，34. 0 (C-2) ，
31. 9 (C-16) ，29. 7-29. 1 (5C，C-4 ～ 7，C-15) ，
27. 2 (C-8 或 C-14) ，27. 1 (C-14 或 C-8) ，25. 6 (C-
11) ，24. 7 (C-3) ，22. 6 (C-17) ，14. 1 (C-18)。以
上数据与文献报道的亚油酸数据一致［6］，因此鉴
定为亚油酸。
化合物 6 白色针状结晶，mp 137 ～ 138 ℃。1H-
NMＲ (CDCl3，600 MHz)δ:5. 35 (1H，br s，d，J =
4. 8 Hz，H-6)，3. 52 (1H，tt，J = 9. 6，4. 8 Hz，H-
3) ，1. 01 (3H，s，H-18) ，0. 93 (3H，d，J = 6. 7
Hz，H-21) ，0. 85 (3H，t，J = 8. 0 Hz，H-26) ，0. 84
(3H，d，J = 7. 2 Hz，H-28) ，0. 81 (3H，d，J = 7. 2
Hz，H-29) ，0. 68 (3H，s，H-19) ，0. 92 ～ 2. 29
(29H，m)。以上数据与文献报道的 β-谷甾醇数据
基本一致［3］，因此鉴定为 β-谷甾醇。
化合物 7 白色固体颗粒，mp 297 ～ 299 ℃。1H-
NMＲ (DMSO-d6，600 MHz)δ:5. 33 (1H，br s，H-
6)，4. 91 (1H，d，J = 7. 8 Hz，H-1) ，4. 43 (1H，t，
J = 5. 8 Hz，H-6b) ，4. 21 (1H，d，J = 7. 7 Hz，H-6
a) ，3. 64 (1H，dd，J = 10. 1，5. 8 Hz，H-3) ，
3. 21 ～ 2. 97 (3H，m，H-2，H-4，H-5)。13C-NMＲ
(DMSO-d6，150 MHz)δ:38. 3 (C-1)，29. 3 (C-2) ，
76. 7 (C-3) ，41. 8 (C-4) ，140. 4 (C-5) ，121. 2 (C-
6) ，31. 4 (C-7) ，33. 3 (C-8) ，49. 6 (C-9) ，36. 8
(C-10) ，20. 6 (C-11) ，38. 1 (C-12) ，41. 9 (C-
13) ，56. 2 (C-14) ，23. 9 (C-15) ，27. 8 (C-16) ，
55. 4 (C-17) ，11. 8 (C-18) ，19. 1 (C-19) ，36. 2
(C-20) ，18. 6 (C-21) ，35. 5 (C-22) ，25. 4 (C-
23) ，45. 1 (C-24) ，28. 7 (C-25) ，19. 7 (C-26) ，
18. 9 (C-27) ，22. 6 (C-28) ，11. 7 (C-29) ，100. 8
(C-1) ，73. 4 (C-2) ，76. 9 (C-3) ，70. 1 (C-4) ，
76. 7 (C-5) ，61. 1 (C-6)。以上数据与文献［10-
11］报道基本一致，鉴定化合物为胡萝卜苷。
化合物 8 淡黄绿色结晶状颗粒(乙醚)，mp
115 ～ 116 ℃，有香甜味。1H-NMＲ (CDCl3，500
MHz)δ:5. 13 (1H，dd，J = 5. 6，2. 4 Hz，H-4)，
2. 24 (3H，d，J = 2. 0 Hz，H3-10)，2. 13 (1H，m，
H-5a)，1. 60 (1H，m，H-5b)，1. 40 (2H，m，H-6) ，
1. 29 (4H，m，H-7，H-8) ，0. 89 (3H，t，J = 6. 9
Hz，H3-9)。以上数据与文献［12］报道一致，鉴定
化合物为 striatisporolide A。
化合物 9 米白色蓬松固体粉末，mp 134 ～ 136
℃，三氯化铁-铁氰化钾反应呈阳性。1H-NMＲ (D2O，
500 MHz)δ:7. 48 (1H，br s，H-2)，7. 46 (1H，d，
J = 8. 6 Hz，H-6) ，6. 85 (1H，d，J = 8. 6 Hz，H-5) ，
3. 78 (3H，s，-OCH3)。
13C-NMＲ (D2O，125 MHz)
δ:170. 6 (CO)，150. 1 (C-4) ，147. 1 (C-3) ，124. 4
(C-6) ，122. 2 (C-1) ，115. 1 (C-2) ，113. 4 (C-5) ，
55. 9 (-OCH3)。以上数据与文献［13］报道一致，鉴
定化合物为原儿茶酸甲酯。
化合物 10 无色棒状晶体(无水乙醇)，mp
201 ～ 203 ℃。1H-NMＲ (DMSO-d6，500 MHz) δ:
12. 30 (1H，br s，COOH)，9. 66 (1H，br s，3-
OH) ，9. 27 (1H，br s，4-OH) ，7. 33 (1H，d，J =
2. 1 Hz，H-2) ，7. 28 (1H，dd，J = 8. 1，2. 1 Hz，H-
6) ，6. 78 (1H，d，J = 8. 2 Hz，H-5)。以上数据与
文献报道一致［13］，故鉴定化合物为原儿茶酸。
化合物 11 白色正方体结晶(甲醇)，mp 146 ～
148 ℃。1H-NMＲ (D2O，500 MHz)δ:5. 24 (1H，d，
J = 3. 4 Hz，H-1α)，4. 65 (1H，d，J = 7. 9 Hz，H-
1β)。13C-NMＲ (D2O，125 MHz)δ:98. 56 (C-1β)，
94. 74 (C-1α) ，78. 60 (C-5β) ，78. 41 (C-3β) ，
76. 79 (C-2β) ，75. 42 (C-3α) ，74. 14 (C-5α) ，
74. 09 (C-2α) ，72. 30 (C-4β) ，72. 26 (C-4α) ，
63. 41 (C-6β) ，63. 25 (C-6α)。以上数据与文献
［14］报道一致，鉴定化合物为 D-葡萄糖。
4 还原能力
精密称取维生素 C，原儿茶酸及原儿茶酸甲酯
各 10 mg分别置于 10 mL 量瓶中，蒸馏水溶解并定
容至刻度，摇匀。
采用铁氰化钾还原法测定样品的还原能力。精
密吸取 0. 1，0. 2，0. 3，0. 4，0. 5 mL 样品溶液分别置
于 10 mL试管中，加入蒸馏水补足至 0. 5 mL。依次
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加入 0. 2 mol·L －1磷酸缓冲溶液(pH 6. 8)1. 0 mL，
1%铁氰化钾 2. 0 mL，摇匀，50 ℃水浴 20 min，取出，
急速冷却。再加入 10%三氯乙酸 0. 5 mL，0. 1%三
氯化铁 50 μL，摇匀，静置 10 min。以蒸馏水为参
照，700 nm波长处比色，测定吸光度 A。A越大表示
样品的还原力越强，维生素 C为对照。见图 1。
图 1 原儿茶酸(A)，原儿茶酸甲酯(E)及维生素 C(Vit C)的还原
能力
Fig． 1 Ｒeducing power of protocatechuic acid (A)，protocatechuic
acid methyl ester (E)and Vit C
由图 1 可以看出所有样品的还原能力均与样品
浓度呈依赖关系。原儿茶酸及原儿茶酸甲酯均具有
较强的还原能力，原儿茶酸的还原能力强于原儿茶
酸甲酯，但它们的还原能力均比维生素 C低。
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［责任编辑 邹晓翠］
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