全 文 ：— 83 —现代中药研究与实践2011年第25卷第6期Chin Med J Res Prac,2011 Nov.,Vol.25 No.6
苍耳草为菊科植物苍耳 Xanthium sibiricum Patr.
的全草，入药部位为地上干燥部分。具有祛风散热，
除湿解毒之功效 ；民间主要用于治疗感冒、头风、
头晕、鼻渊、目赤、目翳、风湿痹痛、拘挛麻木、
疥癣、皮肤骚痒、痔疮、痢疾等症 [1-3]。全草含苍耳
苷 (strumaroside)、隐苍耳内酯 (xanthinin)、苍耳内酯
(xanthumin)、8-(3- 异戊烯基 )-5，7，3，4- 四羟基黄酮、
咖啡酸、1，4- 二咖啡酰奎宁酸、β- 谷甾醇、豆甾醇、
二十八醇、β- 香树脂醇等 [1]。苍耳全国均有分布，
其主要产区有山东的荣城、文登、荷泽，江西宜春，
湖北黄岗、孝感，江苏苏州、徐州以及安徽等 [4]。
绿原酸 (chlorogenic acid,CHA) 为众多药材和中成药
抗菌解毒、消炎利胆的主要有效成分，同时是质量控
HPLC 法测定不同采收期苍耳草中绿原酸的含量
王美琴 1，徐圣秋 2，雷 雨 3，李伟东 3*
（1. 江苏省镇江市丹徒区药检所，江苏 镇江 212028 ；2. 江苏省徐州市第一人民医院，江苏 徐州
221002 ；3. 南京中医药大学 江苏省中药炮制重点实验室 国家中医药管理局中药炮制标准重点实验室，
江苏 南京 210029）
摘要 ：目的 确定苍耳草的最佳采收期。方法 用高效液相色谱 (HPLC) 法测定不同生长采收期苍耳
草中绿原酸的含量。结果 绿原酸的含量 6 月份最高，7 月份含量最低。结论 若以绿原酸含量为指标，
苍耳草的最佳采收期定为 6 月份为宜。
关键词 ：苍耳草 ；不同采收期 ；绿原酸 ；高效液相色谱法 ；含量测定
中图分类号 ：R282.4 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673-6427(2011)06-0083-03
制的重要指标 [5]。本文应用 HPLC 法对苍耳草不同采
收期绿原酸的含量进行测定，比较苍耳草不同采收期
中绿原酸含量的差异，为确定苍耳草的最佳采收季节
提供实验依据。
1 实验材料
1.1 样品来源
苍耳草药材采自江苏徐州，经南京中医药大学
药学院陈建伟教授鉴定为菊科植物苍耳 Xantliiurn
sihiricum Patr. 的干燥全草。药材情况见表 1。
1.2 仪器与试剂
收稿日期：2011-03-11
基金项目：江苏徐州社会发展项目(XJ08063)
作者简介：王美琴，女，主管药师，从事药品检验工作。
*通讯作者：李伟东，副研究员，研究方向：中药复方化学研究及中药质量
控制， E-mail: liweidong0801@163.com
表1 样品一般情况
Tab.1 The general condition of samples
编号
1
2
3
4
5
6
产地
江苏徐州
江苏徐州
江苏徐州
江苏徐州
江苏徐州
江苏徐州
药材
茎叶
茎叶
茎叶
茎叶
茎叶
茎叶带有少量果实
采收时间
20080501
20080601
20080701
20080801
20080901
20081001
Determination of Chlorogenic Acid from Xanthium sibiricum Patr. Harvested in
Different Periods by HPLC
WANG Mei-qin1, XU Sheng-qiu2，LEI YU3, LI Wei-dong3
(1. Dantu District Institute for Drug Control, Zhenjiang 212028,China; 2. The fi rst people’s hospital of Xuzhou,
Xuzhou 221002, China; 3. Nanjing University of Chinese Medicine, Jiangsu Key Laboratory of Chinese Medicine
Processing, State Key Laboratory of Standardization for Chinese Medicine Processing of State Administration of TCM
of P.R.C.,Nanjing 210029, China)
Abstract: Objective To confirm the harvest period of Xanthium sibiricum Patrin ex Widder.
Methods The content of chlorogenic acid from Xanthium sibiricum Patrin ex Widder. harvested in different
periods was determined by HPLC. Results The content of chlorogenic acid from Xanthium sibiricum Patrin ex
Widder. harvested in May was the highest, and the lowest in July. Conclusion The optimized harvest period of
Xanthium sibiricum Patrin ex Widder. was May, according to the content of chlorogenic acid.
Key words: Xanthium sibiricum Patrin ex Widder.; different harvest periods; chlorogenic acid; high-
performance liquid chromatography (HPLC); content determination
DOI:10.13728/j.1673-6427.2011.06.034
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Agilent1100 型高效液相色谱仪（包括在线脱气
机、四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列
检测器），Mettler Toledo AG285 十万分之一天平，医
用超声清洗器（KQ-500E 型，昆山超声仪器有限公
司）。
色谱甲醇（美国 Tedia 公司生产），水为娃哈哈
纯净水 ；分析甲醇（南京化学试剂有限公司，批号 ：
09020310079），分析磷酸（广东光华化学厂有限公
司，批号 ：20071101），绿原酸对照品购于中国药品
生物制品检定所（批号 ：110753-200413）。
2 方法与结果
2.1 测定波长的选择
取绿原酸对照品适量，加 50% 甲醇制成浓度为
0.443 mg/mL 的溶液，在 200~400 nm 波长范围扫描，
测得绿原酸的最大吸收波长为 326 nm。
2.2 色谱条件 [6]
色谱柱 ：AlltimaTM C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)，
流动相 A 甲醇 -B 0.1% 磷酸水溶液，梯度洗脱见表 2，
流速 0.8 mL/min，柱温 25℃，检测波长 326 nm，进
样量 20 μL，采样时间 60 min。
2.3 对照品溶液的制备
精密称取绿原酸对照品 4.43 mg，加 50% 甲醇
制成浓度为 0.443 mg/mL 的溶液，作为绿原酸对照品
溶液。
2.4 供试品溶液的制备
按照《中国药典》（一部）2010 版附录高效液
相色谱法试验，对样品进行均匀取样，称样。精密
称取 5~10 月份采收的苍耳草药材粉末（过 50 目筛）
各 500 mg，置 250 mL 圆底烧瓶中，加入 25 mL50%
甲醇，称重，85℃加热回流 1 h, 放置室温，用 50%
甲醇补足原重。离心后移取上清液，过 0.45 μm 滤膜，
置于棕色样品瓶中，作为供试品溶液。
2.5 线性关系考察
精密称取绿原酸对照品溶液，分别精密吸取
0.025 mL、0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0
mL、2.0 mL，置于 10 mL 量瓶中，加 50% 甲醇至刻
度，摇匀，进样 20 μL，记录色谱图，见图 1。

线性关系考察结果，绿原酸在 1.1075~88.6 μg/
mL 范围内，其色谱峰面积 (A) 与浓度 (C) 呈线性关
系，回归方程为 A=42.509C-19.445(r=0.999 9)。
2.6 精密度试验
精密称取 2 号药材粉末 100 mg，按供试品溶液
的制备方法制备，按上述色谱条件连续进样 6 次，求
的峰面积，计算 RSD 为 0.81%，说明仪器的精密度
良好。
2.7 稳定性试验
精密称取 2 号药材粉末 100 mg，按供试品溶液
的制备方法制备，分别在 0 、2 、4 、6 、8 、10 、
12 、24 h 按上述色谱条件进样，RSD 为 1.47%，说
明供试品在 24 h 内基本稳定。
2.8 重复性试验
取 2 号药材粉末，按供试品溶液的制备方法，
制的 5 份供试品溶液，分别精密进样 20.0 μL，按上
述方法进行测定，计算 RSD 为 1.73%，说明本方法
重复性良好。
2.9 加样回收率
精密称取 2 号药材粉末 500 mg，共 6 份，置于
250 mL 圆底烧瓶中，精密加入 50% 甲醇 25 mL，加
入 44.3 μg/mL 绿原酸对照溶液 1.0 mL，按供试品溶
液制备方法操作，于 326 nm 处测定，结果平均回收
率为 97.33%，RSD 为 1.76%(n=6)，结果见表 3。
2.10 样品含量测定
表2 梯度洗脱时间表
Tab. 2 Time table of gradient elution
时间(min)
0
20
50
60
流动相A(%)
20
40
50
50
流动相B(%)
80
60
50
50
表3 绿原酸加样回收率实验(n=6)
Tab. 3 Recovery test results of chlorogenic acid
取样量
(mg)
500.00
500.31
500.44
500.22
500.57
500.08
样品含量
(μg)
237.50
237.65
237.71
237.60
237.77
237.54
添加量
(mg)
1107.50
1107.50
1107.50
1107.50
1107.50
1107.50
测得量
(mg)
1321.07
1309.31
1314.36
1309.31
1348.59
1290.84
回收率
%
97.84
96.76
97.21
96.76
100.30
95.11
平均回收
率%
97.33
RSD
%
1.76
— 85 —现代中药研究与实践2011年第25卷第6期Chin Med J Res Prac,2011 Nov.,Vol.25 No.6
表4 绿原酸含量测定(n=3)
Tab. 4 Content of chlorogenic acid in samples
批号
1
2
3
4
5
6
编号
1-1
1-2
1-3
2-1
2-2
2-3
3-1
3-2
3-3
4-1
4-2
4-3
5-1
5-2
5-3
6-1
6-2
6-3
取样量(mg)
500.54
500.46
500.48
500.38
500.26
500.17
500.70
500.49
500.54
500.49
500.40
500.69
500.47
500.40
500.66
500.72
500.62
500.21
峰面积
3419.1
3374.9
3258.2
385.6
384.3
383.4
57.1
54.5
57.0
50.6
51.1
53.5
172.5
173.8
175.7
328.7
315.5
315.0
含量(%)
0.4040
0.3989
0.3852
0.0476
0.0475
0.0474
0.0090
0.0087
0.0090
0.0082
0.0083
0.0086
0.0226
0.0227
0.0229
0.0409
0.0393
0.0393
平均含量(%)
0.3960
0.0475
0.0089
0.0084
0.0227
0.0399
RSD(%)
2.45
0.21
1.95
2.49
0.67
2.32
精密称取 1~6 号药材粉末各 500 mg，3 份，按
供试品溶液制备方法操作，在以上色谱条件下进样，
结果见表 4，不同采收期绿原酸含量比较见图 2。
3 结论
3.1 不同采收期的苍耳草中绿原酸的含量测定结果
显示，以 5 月份含量最高，5 月之后随生长采收期的
板蓝根药材及颗粒中总有机酸含量测定方法研究
刘丽敏 1，年四辉 2*，包淑云 2，刘子荣 2
（1 安徽中医药高等专科学校，安徽 芜湖 241002 ；2 皖南医学院，安徽 芜湖 241002）
摘要 ：目的 建立板蓝根药材及其颗粒中总有机酸含量的测定方法。方法 板蓝根药材、颗粒以 70%
乙醇回流提取或分次溶解后，通过 SA-2 阳离子树脂消除氨基酸干扰后采用直接电位滴定法测定总有机酸的
含量。结果 板蓝根药材中有机酸含量 >1.67%（以水杨酸计），板蓝根颗粒中有机酸含量为 0.10%~0.32%（折
合生药后含量），水杨酸加样回收率为 98.43%~101.09%。结论 该法可以作为板蓝根中总有机酸质量控制
方法之一。
关键词 ：板蓝根 ；直接电位滴定法 ；有机酸 ；含量测定
中图分类号 ：R927.2 文献标识码 ：A 文章编号 ：1673-6427(2011)06-0085-04
收稿日期：2011-03-30
基金项目：安徽省教育厅项目，《基于生物酶技术和大孔树脂技术板蓝根新工艺初步研究》，项目编号KJ2009B104Z； 芜湖市科技局项目，《板蓝根创新工艺及
药效学评价研究》，项目编号2009卫1-5
作者简介： 刘丽敏，女，讲师，研究方向：中药制剂新工艺
*通讯作者：年四辉，Tel:13956197375，0553-3932497， E-mail：niansihui@sina.com
延长含量逐渐降低。因此，以绿原酸的含量为指标，
苍耳草的最佳采收期应定为 5 月份。
3.2 该方法重复性和稳定性好，操作简便，可以很
好地检测苍耳草中绿原酸的含量。
参考文献
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技术出版社 ,2006 ：1486.
[2] 沈连生主编 . 中药图典 [M]. 北京 : 华夏出版社 ,2006 ：7.
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社 ,2003 ：590.
[4] 朱圣和 . 中国药材商品学 [M]. 北京 : 人民卫生出版社 ,1990 ：266.
[5] 张鞍灵 , 马 琼 , 高锦明 , 等 . 绿原酸及其类似物与生物活性 [J]. 中草
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[6] Ting Han,Qiao-Yan Zhan,Hong Zhang,et al.Authentication and quantitative
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performance liquid chromatography-diode-arraydetection tandem mass
spectrometry method[J].Analytica Chimica Acta, 2009, 634:272–278.
Determination of Total Organic Acids in Isatidis Radix and Granule
LIU Li-min1,Nian Si-hui2,BAO Shu-yuan2,LIU Zi-rong2
(1.Anhui collage of Traditional Chinese Medidcine,Wuhu 241002,China;2.Wannan nedical collage,Wuhu
241002,China)
Abstract: Objective To establish the method for determining the total organic acids in Isatidis Radix and
granule. Methods After extracting from the materials and the preparation by 70% Ethanol, remove amino acid