全 文 ：正交试验法优选金毛耳草配方颗粒的提取工艺
吴孔松，吴安明，支永英(江西天施康中药股份有限公司 鹰潭 335000)
摘要:目的 优选金毛耳草配方颗粒的提取工艺。方法 采用正交试验法，以得膏率、芦丁的转移率为考察指标，考察加水量、提取时间、提取
次数 3 个因素，优选提取工艺。结果 金毛耳草配方颗粒优选提取工艺为加 12 倍量水，煎煮 2 次，1 次 1h。结论 该工艺条件提取充分，稳定
可行，且适用于大生产，可作为金毛耳草配方颗粒的提取工艺。
关键词:高效液相色谱;金毛耳草;芦丁;含量测定
中图分类号:Ｒ94 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2016)-10-0415-0037-03
作者简介:吴孔松，男(1980. 12 －)。毕业于中南大学。学历:硕士。
职称:高级工程师。从事药品研究开发工作。
Optimization of the Extraction Process of Hedyotis Chrysoticha Dispensing
Granules by Orthogonal Test
WU Kong-song，WU An-ming，ZHI Yong-ying(Jiangxi Tian Shi Kang Chinese Herbal Drugs Limited Com-
pany，Yingtan 335000，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To optimize the extraction process of Hedyotis chrysoticha dispensing Gran-
ules. METHODS The extraction process of the dispensing granules was optimized through orthogonal experiment-
while the yield of dry extracts，the content of rutin，and influences of solvent dosage，extractiontime and extraction
times were studied. ＲESULTS The optimum extraction process conditions were determined asfollows:To add water
with 1 ∶ 12，and to decoct 2 times，decoct time 1heverytime. CONCLUSION The extraction process is reasona-
ble. The method can be used for industrial production.
KEY WOＲDS:Hedyotis chrysoticha;Dispensing Granules;Extraction process;Orthogonal test
金毛耳草 Hedyotis chrysoticha(Palib. )Merr. 为茜草科耳
草属植物，别名黄毛耳草、扑地蜈蚣、下山蜈蚣、野地脚、白地
茄等，主要分布于安徽、江苏、浙江、江西、福建、湖南、广东、广
西、云南等地，具有清热除湿、解毒消肿、活血舒筋的功效，收
载于 2012 年版《江西省中药材标准》。据文献报道，金毛耳
草主要含环烯醚萜类、黄酮类、三萜类等化学成分，如鸡屎藤
苷甲酯、芦丁、乌索酸等〔1〕。中药配方颗粒包装小，携带方
便，可免去患者自行煎煮的过程，方便患者使用，同时也符合
中医药的发展前景〔2〕。该研究通过采用正交试验法，以得膏
率、芦丁的转移率为评价指标，优选金毛耳草配方颗粒的提取
工艺参数，从而为其实际生产提供实验依据。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 Agilent1100 高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公
司);202-OAB型电热恒温干燥箱(天津泰斯仪器有限公司);
DHG-9101-39A型电热恒温鼓风干燥箱(上海三发科学仪器
有限公司);DZF-6020 型真空干燥箱(上海一恒科技有限公
司);KQ3200DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限
公司);AB265-S分析天平(METTLEＲ TOLEDO);SENCO旋转
蒸发仪(上海申生科技有限公司);SHB-B95 型循环式多用真
空泵(郑州长城科工贸有限公司)。
1. 2 试药 芦丁对照品(批号:100080-200707，HPLC用含量
按 90. 5%计，中国药品生物制品检定所)，金毛耳草药材由江
西天施康弋阳制药有限公司提供，批号 YZ001-140902;金毛
耳草饮片由江西天施康中药股份有限公司炮制，批号 YP-
JME150201。
2 方法与结果
2. 1 得膏率的测定 取金毛耳草提取液，滤过，精密吸取滤
液 20mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于
105℃干燥 3h，移置干燥器中，冷却 30min，迅速精密称定重
量，计算出总干浸膏量。得膏率 = 总干浸膏量 /药材量 ×
100%。
2. 2 芦丁的含量测定
2. 2. 1 色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅
胶为填充剂;以乙腈-0. 3%冰醋酸溶液(18∶ 82)为流动相;检
测波长为 254nm。理论板数按芦丁峰计算应不低于 3000〔3〕。
2. 2. 2 对照品溶液的制备:取芦丁对照品适量，精密称定，加
甲醇制成每 1mL含 15μg的溶液，即得。
2. 2. 3 供试品溶液的制备:取金毛耳草粉末(过三号筛)适
量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 50mL，称定重
量，超声处理(功率 150W，频率 40KHz)30min，放冷，用甲醇
补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 28 No. 10 2016
2. 2. 4 测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液
10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
2. 2. 5 线性关系的考察:精密称取芦丁对照品 105. 58mg，置
于 25mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度摇匀，使之成为浓度为
3. 822mg·mL －1的对照品储备液，精密量取对照品储备液
1mL，置于 50mL 量瓶中，甲醇稀释至刻度，得 0. 07644mg·
mL －1的溶液。分别精密吸取上述对照品溶液 1mL、2mL、
3mL、4mL、5mL、10mL至 10mL 量瓶中，加甲醇定容，摇匀，滤
过，得浓度为 7. 64、15. 29、22. 93、30. 58、38. 22、76. 44μg·
mL －1的对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，测定峰面
积，以芦丁峰面积(Y)为纵坐标，以对照品浓度(X)为横坐
标，分别进行线性回归和作图，得回归方程 Y = 19. 607X －
9. 7156，Ｒ2 = 0. 9999，表明芦丁在 7. 644 ～ 76. 44μg·mL －1浓
度范围内呈现良好的线性关系。
2. 3 正交试验设计 经预实验，根据影响提取的主要因素，
选择加水量、提取时间和提取次数作为考察因素，以得膏率，
芦丁转移率为考察指标，按 L9(3
4)表进行正交试验。因素水
平(见表 1)，试验设计与结果(见表 2)。
表 1 正交试验因素水平表
水平
因素
A提取次数 B提取时间(h) C加水倍数(倍)
1 1 0. 5 8
2 2 1 10
3 3 1. 5 12
表 2 正交试验设计与结果
实验号
考察因素 试验结果
A B C 空 得膏率(%) 芦丁转移率(%) 综合评分(%)
1 1 1 1 1 10. 12 32. 49 75. 16
2 1 2 2 2 12. 96 34. 52 81. 78
3 1 3 3 3 12. 82 27. 23 66. 79
4 2 1 2 3 16. 24 32. 22 79. 96
5 2 2 3 1 20. 81 39. 21 98. 23
6 2 3 1 2 19. 16 24. 33 66. 43
7 3 1 3 2 22. 83 30. 12 81. 46
8 3 2 1 3 18. 63 20. 26 57. 67
9 3 3 2 1 19. 93 24. 31 67. 06
以得膏率(%)计
K1 35. 885 49. 18 47. 91 50. 85
K2 56. 21 52. 4 49. 12 54. 94
K3 61. 385 51. 9 56. 45 47. 69
Ｒ 8. 500 1. 073 2. 847 2. 417
以芦丁转移率(%)计
K1 94. 24 94. 83 77. 08 96. 01
K2 95. 75 93. 99 91. 04 88. 97
K3 74. 69 75. 87 96. 56 79. 71
Ｒ 21. 06 18. 96 19. 48 16. 30
以综合评分(%)计
K1 223. 72 236. 58 199. 26 240. 45
K2 244. 63 237. 68 228. 80 229. 67
K3 206. 19 200. 28 246. 48 204. 42
Ｒ 12. 812 12. 467 15. 741 12. 011
注:综合评分计算方法:在正交设计的 9 组试验中，以各评价指标的最高值设为 100%，其余试验组相应折算为其最高值的百分比，再以得膏率和
芦丁转移率权重分别占 20%和 80%的比例进行相加而得
2. 4 数据处理与分析 根据正交设计试验结果，对各评价指
标的影响因素进行直观分析(见表 2)和方差分析(见表 3 ～
5)。从方差分析结果可知，加水量、提取次数和提取时间影
响均无显著性差异。从直观分析结果可知，以得膏率为考察
指标筛选的最佳提取工艺为 A3B2C3;以芦丁转移率为考察指
标筛选的最佳提取工艺为 A2B1C3;根据上述两个评价指标试
验结果进行综合评分，最终选择的最佳提取工艺为 A2B2C3，
即加 12 倍量水，提取 2 次，1 次 1h。
表 3 得膏率(%)方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 F值 P
A 121. 126 2 13. 75 ＞ 0. 05
B 2. 002 2 0. 23 ＞ 0. 05
C 14. 236 2 1. 62 ＞ 0. 05
误差 8. 808 2
2. 5 验证试验 为进一步验证所选条件的正确性与科学性，
对所选最佳提取工艺进行 3 批验证性试验，以增加实验可信
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海峡药学 2016 年 第 28 卷 第 10 期
度。分别称取金毛耳草饮片 3 份，每份 500g，按拟定的最佳工
艺进行提取，验证得膏率及芦丁的转移率情况，结果(见表
6)。结果表明正交试验的最优工艺的放大验证实验与最优
工艺结果差异不大。
表 4 芦丁转移率(%)方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 F值 P
A 91. 967 2 2. 06 ＞ 0. 05
B 76. 468 2 1. 72 ＞ 0. 05
C 67. 177 2 1. 51 ＞ 0. 05
误差 44. 570 2
表 5 综合评分方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 F值 P
A 246. 864 2 1. 08 ＞ 0. 05
B 301. 926 2 1. 32 ＞ 0. 05
C 379. 465 2 1. 66 ＞ 0. 05
误差 228. 028 2
表 6 验证试验结果
试验号 得膏率(%) 芦丁转移率(%)
1 18. 0 38. 5
2 19. 0 39. 7
3 18. 6 39. 2
均值 18. 5 39. 1
3 讨论
中药配方颗粒是由单味中药饮片经水提、浓缩、干燥、制
粒而成，在中医临床配方后，供患者冲服使用。因此，本研究
选用水作为提取溶媒。黄酮类化合物是金毛耳草饮片中的重
要成分，其中芦丁的含量相对较高〔3〕。因此，选取得膏率和
芦丁转移率作为优选金毛耳草配方颗粒最优提取工艺的评价
指标，具有一定代表性和合理性。
参考医院汤剂，中药饮片一般煎煮 2 次，加水量为加水至
水面高出饮片 2 ～ 3cm，为合理提高中药饮片的利用率，本研
究在正交试验中设计了提取次数为 1 次、2 次和 3 次;加水量
3 个水平分别设计为 8 倍、10 倍和 12 倍;提取时间则选择了
0. 5、1. 0、1. 5h。正交试验结果的方差分析表明加水量、提取
次数和提取时间 3 个因素对得膏率和芦丁转移率均无显著性
影响，最后综合考虑确定了金毛耳草配方颗粒的最优提取工
艺参数为加 12 倍量水，煎煮 2 次，1 次 1h。经放大实验验证，
结果进一步表明优选的工艺稳定，重现性好，可为金毛耳草配
方颗粒的规范化生产提供参考依据。
参考文献
〔1〕马明娟，罗永明，杨美华 . 黄毛耳草的研究进展〔J〕. 中国药业，
2011，20(24):21-24.
〔2〕董红丽 . 中药配方颗粒和中药汤剂的比较〔J〕. 现代诊断与治疗，
2012，23(7):911-912.
〔3〕吴孔松，吴安明，支永英 . 高效液相色谱法测定金毛耳草中芦丁
的含量〔J〕. 海峡药学，2014，26(8):44-46.
作者简介:张 杰，男(1987 －)。学历:研究生。研究方向为中药分析和天然药物化学。E-mail:13478536926@ 163. com
通讯作者:顾正兵。学历:博士。研究方向:天然药物化学。联系电话:(0523)80183620，E-mail:zbg@ youging. com
管花肉苁蓉提取物中化学成分研究
张 杰1，赵天翼2，李鸿钰3，徐丽丽1，曾 铖1，顾正兵1* (1. 江苏永健医药科技有限公司 泰州 225300;2. 南京
师范大学附属中学江宁分校 南京 211102;3. 湖南省宁乡县人民医院普外科 22 病室 宁乡 410600)
摘要:目的 对管花肉苁蓉提取物中化学成分进行研究。方法 采用硅胶柱色谱，制备液相色谱和 Sephadex LH-20 等方法进行分离纯化，并根
据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果 分离鉴定了 6 个化学成分，经波谱解析分别鉴定为松果菊苷(echinacoside，1)，管花苷 A
(cistantubuloside A，2)，类叶升麻苷(acteoside，3)，8-表去氧马钱酸(8-epideoxyloganic acid，4)，丁香树脂酚葡萄糖苷((+)-syringaresinol O-β-D-
glucopyranoside，5) ，异类叶升麻苷(isoacteoside，6)。结论 首次对管花肉苁蓉提取物中化学成分进行研究，为其质量控制以及进一步研究利用
提供物质基础。
关键词:管花肉苁蓉提取物;苯乙醇苷;木脂素苷;环烯醚萜苷;化学成分
中图分类号:Ｒ917 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2016)-10-04117-0039-03
Studies on Chemical Constituents of Cistanche tubulosa (Schrenk)Wight
extract
ZHANG Jie1，ZHAO Tian-yi2，LI Hong-yu3，Xu Li-li1，ZENG Cheng1，Gu Zheng-bing1* (1. Jiangsu Yongjian
Pharmaceutical Technology Co. ，Ltd. ，Taizhou 225300，China;2. High School Affiliated to Nanjing Normal
University Jiangning Campus，Nanjing 211102，China;3. The People’s Hospital of Ningxiang County De-
partment of general surgery，22 ward Ningxiang 410600，China)
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