全 文 ：文章编号:1001-4829(2005)02-0222-03
　　收稿日期:2004-10-09
作者简介:姚连芳(1955-),女 ,汉族 , 山东东阿, 河南科技学院
园艺系副教授 ,河南省园艺学会常务理事 ,主要从事观赏园艺学
的教学和科研工作。
秋水仙素处理对野生百合形态影响的研究
姚连芳 ,李桂荣 ,张建伟
(河南科技学院园艺系 ,河南 新乡　453003)
摘　要:用 0.1 %秋水仙素溶液连续两次处理野生百合试管苗 ,具有明显的效果。诱导苗在叶长 、叶厚 、叶宽 、叶色等外部形态上
与未处理苗相比具有明显差异 ,其叶表内的保卫细胞、纵横径明显增大 ,与对照相比差异显著。
关键词:野生百合;组织培养;秋水仙素诱导
中图分类号:S682.2　　　文献标识码:A
Effects of colchicine on the form of wild Lily
YAO Lian-fang , LI Gui-rong , ZHANG Jian-w ei
(Department of Horticulture , Henan Institute of Science and Technology , Henan Xinxiang 453003 , China)
Abstract:The test-tube plant of w ild Li ly w as t reated wi th 0.1 % colchicine for tw o-t imes.T he result s show ed that cont inuous tw o-times
treatment of 0.1 % colchicine had the signi ficant effects on the leaf length , the leaf thickness , the leaf width and the leaf color of the test-
tube plant of w ild Li ly.The st raight diameter and the across diameter of fence cell in leaf became clearly big.The signif icant dif ference be-
tw een t reatment and control w as observed.
Key words:w ild Lily;t issue culture;colchicine induction
　　百合(Lily)是百合科百合属多年生球根花卉 ,
在世界观赏花卉生产中占有重要地位。随着市场需
求量的不断增加 ,人们对百合花的品种 、质量要求也
越来越高 。为进一步丰富和改善百合品种及观赏价
值 ,开发野生百合花资源 ,提高百合的观赏价值及商
品价值 ,人们对其进行了大量的研究[ 1 ～ 4] ,但对野
生百合的组培繁殖和秋水仙素诱导尚未见报道。本
试验旨在研究秋水仙素处理对野生百合形态的诱导
效应 。
1　材料与方法
1.1　材料
试验于 1999年 11月至 2001 年 6 月在河南科
技学院园艺系组培试验室进行 。供试材料为采自太
行山区的枯黄色野生百合 。
1.2　方法
将野生百合鳞片用肥皂刷洗干净 , 70 %酒精消
毒 30 min ,然后在饱和漂白粉水溶液中表面消毒 20
min ,用无菌水冲洗干净 ,用无菌滤纸吸去鳞片表面水
分[ 5 ～ 8] 。分别接种到培养基组成为Ⅰ.Ms+6 BA 2.0
mg/ L , Ⅱ.Ms+6 BA 2.0 mg/ L+NAA 0.5 mg/ L ,
Ⅲ.M s+6BA 2.0 mg/ L+2.4-D 0.2 mg/ L。
将组织培养获得的试管苗 ,于无菌条件下 ,分别
用 0.1 %和 0.3 %秋水仙素溶液对其进行处理 ,35
d后 ,对第 1次处理过的试管苗进行第 2 次处理 ,将
处理后的试管苗继代培养后 ,取其叶片 ,观察记载结
果 。
培养室温度控制在 23±2 ℃,光照为 2000 lx ,
光照时数为 12 h/ d 。
2　结果与分析
2.1　秋水仙素诱导分化状况
2.1.1　诱变率　接种 30株 ,接种后试管苗的分化 、
诱导情况见表 1。由表 1 可以看出接种后 ,第一阶
段对照苗第 5天开始萌动 ,第 11天开始长出嫩叶且
生长较为迅速;0.1 %秋水仙素诱导苗第 8天芽开
始萌动 ,第 18天开始长出嫩叶且生长较为缓慢 ,而
0.3%秋水仙素诱导苗在生长过程中茎尖生长点枯
222
西　南　农　业　学　报
Sou thw est China Journal of Agricultural S ciences
　　　　　　　　　　　　　　2005年 18卷 2期
Vol.18　　No.2
DOI :10.16213/j.cnki.scjas.2005.02.028
表 1　野生百合试管苗分化 、诱导状况
Table 1　Situat ion of dif ferentiation and induct ion for wild Li ly test tube plan t
处理
Treatment
接种株数
No.of
inoculation
plants
芽开始
萌动时间
Budding time
开始长出
嫩叶时间(天)
Time of
tender
bud grow th
感染株数
No.of
infection
plant
诱导株数
No.of
induced plant
感染率(%)
Infection
rate(%)
诱导率(%)
Induced
rate(%)
死亡率(%)
Mortality
第一阶段
对照 30 5 11 3 0 10 0 0
0.1% 30 8 18 9 18 30 87.14 0
0.3% 30 — — 6 0 20 0 100
第二阶段 2次 0.1% 30 9 20 6 21 20 87.50 0
2次 0.3% 30 — — 9 0 30 0 100
0.1% 30 8 18 6 0 20 0 0
萎 ,逐渐死亡。第二阶段中 ,将 0.1 %秋水仙素处理
过的试管苗经继代培养后 ,再次用 0.1 %和 0.3 %
秋水仙素处理 ,结果见表 2。第 1 次 0.1 %秋水仙
素处理苗的芽萌动时间略晚于对照苗 3 d ,但开始长
出嫩叶时间与第 1 次 0.1 %秋水仙素处理结果相
同 ,均为 18 d。第 2 次 0.1 %秋水仙素处理苗芽开
始萌动时间为 9 d ,晚于第1次 0.1 %秋水仙素处理
1 d ,开始长出嫩叶时间为 20 d ,晚于 0.1 %秋水仙
素处理2 d ,诱导率与第 1次0.1 %秋水仙素处理接
近 ,分别为 87.5 %和85.71 %。而经 2次0.3 %秋
水仙素诱导苗除有 9株感染外 ,均渐渐死亡。另外
在整个接种过程中 0.1 %秋水仙素诱导率较高且感
染率较轻 。
由表 1还可看出 。两个处理的接种苗感染率均
高于对照 ,以 0.1 %处理感染率最高达 30 %。而
0.3 %秋水仙素处理死亡率最高 ,两次结果均达100
%。结果表明 ,诱导苗生长比未诱导苗生长缓慢 ,开
始萌动和长出嫩叶都相对较晚 ,并且容易感染 。两
次试验结果均以 0.1 %秋水仙素效果明显 。0.3 %
秋水仙素处理浓度过大 ,对试管苗伤害严重 ,不能形
成植株。
2.1.2　形态比较　从表 2可以看出 ,0.1 %秋水仙
素处理野生百合试管苗 ,叶长明显变短 ,按照对照 、1
次 0.1 %秋水仙素处理 、2次秋水仙素处理顺序看 ,
叶子长度依次为 5.79 、3.78和 2.53 cm 。叶宽明显
变宽依次为 0.34 、0.83 、1.09 cm ,叶子厚度明显加
厚依次为 0.027 、0.069 、0.098 cm 。根球直径明显
增加依次为 0.48 、0.76 、0.97 cm 。叶子颜色依次加
深表现为淡绿 、嫩绿 、暗绿 ,但根球质地以对照较为
坚实 ,而 0.1 %秋水仙素处理的根球质地松脆 ,从外
观观察明显可见连续 2次0.1 %秋水仙素处理的试
管苗 ,叶子生长状态表现为莲座状 ,叶片短粗 、厚实 、
叶色暗绿 ,将处理苗接种到 Ms+6BA 2.0 mg/ L+
NAA 0.2 mg/ L 的培养基上 ,生长良好 。另外 ,百
合诱导苗根球膨大 ,加粗 ,呈纯圆形乳突状 ,诱导苗
在叶片上有明显的变化 ,与原对照苗相比 ,诱导苗叶
片肥厚 ,叶片变短变宽 , 叶色也渐次加深并富有光
彩 。
2.2　保卫细胞形态变化
将处理后的试管苗与对照苗 ,经继代培养后 ,取
其叶片 ,在显微镜下用目镜测微 ,测定保卫细胞的纵
径 、横径以及一个圆形视野下保卫细胞的密度 ,观察
比较结果。
由表 3可以看出 ,两次 0.1 %秋水仙素处理野
生百合 。对野生百合间叶片内保卫细胞的形态有较
大的影响 ,按照对照 1次 0.1 %秋水仙素处理 、2次
0.1 %秋水仙素处理顺序看 ,其横径分别为 35.76 、
46.80 、69.12 μm , 经新复差法进行差异显著性测
定 ,对照与 2次秋水仙素处理及对照和 1 次秋水仙
素处理之间的差异分别达显著水平(0.05),而对照
与1次秋水仙素处理相比 ,差异不显著 。其纵径平
表 2　0.1 %秋水仙素溶液处理对叶形态的影响
Table 2　Ef fect of 0.1 % colchicine solution on the leaf form of wild Lily
处理
Treatment
叶长(cm)
Leaf length
叶宽(cm)
Leaf width
叶厚(cm)
Leaf thickness
根球直径(cm)
Bulb diameter
叶色
Leaf colour
质地
Quali ty
对照 5.79 0.34 0.027 0.48 淡黄 紧实
1次 0.1 % 3.78 0.83 0.069 0.76 嫩绿 松脆
2次 0.1 % 2.53 1.09 0.089 0.97 暗绿 松脆
2232期 姚连芳等:秋水仙素处理对野生百合形态影响的研究
表 3　0.1 %秋水仙素处理对野生百合保卫细胞形态的影响
Table 3　Effect of 0.1 % colchicime on the form of fence cell for
w ild Lily
处理
Treatment
平均横径(μm)
Av.across
diameter
平均纵径(μm)
Av.st raight
diameter
密度
(个数/ 视野)
Density
对照 35.76a 58.78a 16.80a
1次 0.1 % 46.80a 66.00ab 7.31a
2次 0.1 % 69.12b 90.72b 3.19a
均数分别为 58.78 , 66.00 , 90.72 μm ,三者相比 ,对
照与 2 次秋水仙素处理之间的差异达显著水平
(0.05)。对照与 1 次秋水仙素处理相比 , 1 次秋水
仙素处理与 2次秋水仙素处理相比 ,二者差异均不
显著。从表 3看出 ,保卫细胞在叶表内分布密度状
况 ,按对照 、1次 0.1 %秋水仙素处理 ,2次0.1 %秋
水仙素处理顺序 ,保卫细胞密度依次降低 ,经新复极
差法进行差异显著性测定 ,处理间差异不显著 。
3　结　论
试验结果表明 ,利用野生百合鳞片做外殖体 ,在
MS 添加 6-BA 2.0 mg/ L 及 6-BA 2.0 mg/ L 与
NAA 0.5 mg/ L 的培养基上 ,可以得到大量 、健壮
的野生百合试管苗 。用 0.1 %秋水仙素溶液连续两
次诱导野生百合试管苗效果明显 ,诱导苗在叶片 、叶
厚 、叶宽 、叶色等外部形态上与原对照苗相比存在着
较大的差异 。尤以连续 2次用0.1 %秋水仙素处理
的效果明显 。2次 0.1 %秋水仙素处理对野生百合
叶表内保卫细胞的形态有较大的影响 ,其纵 、横径明
显变大 ,其差异与对照相比均达显著水平 ,但对叶表
内保卫细胞的密度没有影响 。0.3 %秋水仙素处理
浓度过大 ,对试管苗伤害严重 ,不能形成植株。
参考文献:
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(责任编辑　谢成英)
224 西　南　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　18卷