全 文 ：的熊果酸放置 12h稳定。
2. 9 重复性试验 取三草胶囊样品(批号:100318)，照 2. 3
项下方法制备 6 份供试品溶液，照上述色谱条件测定熊果酸
含量，结果熊果酸平均含量为 0. 21mg·g －1，ＲSD = 0. 6%(n
= 6)。
2. 10 加样回收率试验 取已知含量的同一批号(批号:
100318)三草胶囊样品，采用加样回收试验，2. 3 项下方法制
备 6 份供试品溶液，照上述色谱条件测定，并计算熊果酸的回
收率(见表 1)。
表 1 熊果酸加样回收率试验结果
称样量
(g)
样品
含量
(mg)
对照品
加入量
(mg)
测得值
(mg)
回收率
(%)
平均回收率
(%)
ＲSD
(%)
3. 0156 0. 6333 1. 2227 98. 76
3. 0578 0. 6421 1. 2407 100. 30
3. 1110 0. 6533 0. 5968 1. 2412 98. 51 99. 2 1. 3
3. 0698 0. 6447 1. 2270 97. 58
3. 0723 0. 6452 1. 2367 99. 11
3. 0386 3. 0386 1. 2412 101. 05
2. 11 样品的测定 照正文含量测定方法测定批号 100318、
100325、100402 3 批样品含量，结果熊果酸含量分别为 0. 21、
0. 22、0. 20mg·g －1。
3 讨论
3. 1 熊果酸是广泛存在于枇杷叶、女贞子、车前草等天然植
物中的一种五环三萜类化合物，有研究表明熊果酸具有镇静、
抗炎、抗菌、抗溃疡、抗糖尿病、降血糖等多种生物学效应。熊
果酸还具有明显的抗氧化功能，因而被广泛地用作医药和化
妆品原料。
3. 2 溶剂的选择 有些科研工作者〔2 ～ 4〕，通过正交实验确定
85% ～95%的乙醇提取熊果酸效果最佳，本文采用 95%乙醇
提取车前草中的熊果酸，经方法学验证提取效果较好。
3. 3 流动相的选择 齐墩果酸与熊果酸为一对性质极为相
近的同分异构体，采用常规的薄层色谱法较难将二者分离。
本文参考有关文献〔5 ～ 7〕，选用多种流动相系统分离此两种成
分，结果表明，当流动相为甲醇-0. 1%甲酸(88∶ 12)时，样品中
的熊果酸与齐墩果酸能有效分离，且峰型良好，故作为本文制
剂分析的流动相。
参考文献
〔1〕何丽君，程心玲，张秀，等 . 三草汤胶囊的制备及防潮工艺研究
〔J〕. 陕西中医学院学报，2010，33(6):112-116.
〔2〕原春兰，李宗孝，杨佩云 . 地榆中熊果酸的提取〔J〕. 中国医药工
业杂志，2002，33(10):478.
〔3〕李开泉，邹盛勤，陈武，等 . 陆英中乌索酸提取工艺的正交优选
〔J〕. 中草药，2003，34(9):791.
〔4〕陈鸿英，马雪梅 . 泽兰中齐墩果酸和熊果酸的提取和分离〔J〕. 天
津中医药，2003，20(5):74.
〔5〕罗晓清，祝伟玮，钱苏生 . ＲP-HPLC 法测定石楠叶中熊果酸和齐
墩果酸的含量〔J〕. 现代中药研究与实践，2003，17(5):1414.
〔6〕鞠建华，周亮，郑瑞霞，等 . 高效液相色谱法测定中药批把叶中熊
果酸的含量〔J〕. 中国药学杂志，2003，38(9):657.
〔7〕施慧君，黄有兴 . HPLC 法测定知柏地黄冲剂中熊果酸含量〔J〕.
中药材，2004，27(2):136.
高效液相色谱法测定金毛耳草中芦丁的含量
吴孔松，吴安明，支永英(江西天施康中药股份有限公司 鹰潭 335000)
摘要:目的 采用 HPLC法测定金毛耳草中芦丁的含量。方法采用 Dikma C18色谱柱( 250mm × 4. 6mm，5μm) ，流动相为乙腈-0. 3%冰醋酸( 18
∶82) ，流速 1. 0mL·min －1，检测波长 350nm，柱温: 25℃。结果 芦丁的质量浓度在 5. 3μg·mL －1 ～ 85. 0μg·mL －1范围内与峰面积呈良好线性
关系，平均回收率为 97. 88%，ＲSD为 0. 75%。结论 本方法简便、准确，重复性好，可作为金毛耳草药材的质量控制方法。
关键词:高效液相色谱;金毛耳草;芦丁;含量测定
中图分类号:Ｒ927. 2;Ｒ282. 71 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2014)-08-0466-0044-03
作者简介:吴孔松，男(1980. 12 －)。毕业于中南大学。学历:硕士。职称:工程师。从事药品研究开发工作，联系电话:13507018493
Determination of Ｒutin in Hedyotis Chrysoticha by HPLC
WU Kong-song，WU An-ming，ZHI Yong-ying(Jiangxi Tian Shi Kang Chinese Herbal Drugs Limited Com-
pany，Yingtan 335000，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To establish a method for the determination of rutin in Hedyotis chrysoticha by
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海峡药学 2014 年 第 26 卷 第 8 期
HPLC. METHODS The separation was performed on a Dikma C18 column(250mm × 4. 6mm，5μm)with a mobile
phase of acetonitrile-0. 3% acetic acid(18 ∶ 82). The flow rate was 1. 0mL·min －1 . The detection wavelength was
350nm and the column temperature was 25℃ . ＲESULTS The calibration cure of rutin was performed over the
range of 5. 3μg·mL －1 ～ 85. 0μg·mL －1. The average recovery was 97. 88% with ＲSD of 0. 75%. CONCLUSION
The method is simple and accurate with good reproducibility，and can be used for the quality control of Hedyotis
chrysoticha.
KEY WOＲDS:HPLC;Hedyotis chrysoticha;Ｒutin;Determination
金毛耳草 Hedyotis chrysoticha(Palib. )Merr. 为茜草科耳
草属植物，别名黄毛耳草、扑地蜈蚣、下山蜈蚣、野地脚、白地
茄等，主要分布于安徽、江苏、浙江、江西、福建、湖南、广东、广
西、云南等地，具有清热除湿、解毒消肿、活血舒筋的功效，收
载于江西省中药材标准(1996 年版第 136 页)(见图 1)。现
行药材标准中还没有明确的质量控制方法。据文献报道，金
毛耳草含有环烯醚萜类、黄酮类、三萜类等化学成分，如鸡屎
藤苷甲酯、芦丁、乌索酸等〔1〕。为更有效地对其进行质量控
制，本文建立了金毛耳草中芦丁的高效液相色谱测定方法。
图 1 金毛耳草
1 仪器与试剂
安捷伦 1200 型高效液相色谱仪;TU1901 型紫外分光光
度计;KQ100DB 型数控超声波清洗器;AB265-S 型电子分析
天平;乙腈为色谱纯，水为超纯水(自制)，其余试剂均为分析
纯;芦丁对照品(批号:100080-201408，供含量测定用，中国食
品药品检定研究院);金毛耳草(江西天施康中药股份有限公
司提供，批号:130801、130802、130803)。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Dikma C18色谱柱(250mm × 4. 6mm，5μm)，
流动相为乙腈-0. 3%冰醋酸(18∶ 82)，流速 1. 0mL·min －1，柱
温 25℃，检测波长 350nm，进样量 20μL。理论板数按芦丁色
谱峰计应不低于 4000，色谱图(见图 2)。
芦丁对照品 金毛耳草供试品
图 2 金毛耳草中芦丁高效液相色谱图
2. 2 溶液制备
2. 2. 1 对照品溶液的制备:取在 120℃减压干燥至恒重的芦
丁对照品适量，精密称定，用甲醇制成每 1mL 含 15μg 的溶
液，即得。
2. 2. 2 供试品溶液的制备:取金毛耳草粉末(过 3 号筛)约
2. 0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 50mL，密塞，
称定重量，超声(功率 250W，频率 33KHz)处理 30min，放冷，
称重，加甲醇补足减失的重量，摇匀，用 0. 45μm 微孔滤膜过
滤，取续滤液即得。
2. 3 检测波长的选择 取上述对照品溶液在 200nm ～ 400nm
波长范围内扫描，在 260nm和 350nm波长附近均有较强的紫
外吸收，检测波长为 350nm 时，主峰高，分离效果好，其他成
分在该波长处无干扰，因此，选择此波长作为检测波长。
2. 4 线性和范围 精密称取在 120℃减压干燥至恒重的芦
丁对照品适量，用甲醇制成浓度为 212. 5μg·mL －1的对照品
储备液。精密吸取上述储备液 0. 25、0. 5、1. 0、2. 0、4. 0mL，分
别至 10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得系列浓度
的对照品溶液。按上述色谱条件依次进样，记录峰面积，以对
照品溶液质量浓度 X(μg·mL －1)对峰面积 Y进行线性回归，
得回归方程:Y = 68. 16X + 266. 83，r = 0. 9999，表明芦丁的质
量浓度在 5. 3μg·mL －1 ～ 85. 0μg·mL －1范围内与峰面积呈
良好的线性关系。
2. 5 精密度试验 取同一对照溶液(21. 25μg·mL －1)，按照
上述色谱条件连续进样 5 次，记录芦丁峰面积，结果芦丁峰面
积的 ＲSD为 0. 83%。
2. 6 稳定性试验 取同一供试品溶液(批号 130801)，按上
述色谱条件在 0、1、2、4、6、8h 分别进样，记录芦丁峰面积，结
果芦丁峰面积 ＲSD为 0. 94%，表明供试品溶液在 8h 内稳定
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Strait Pharmaceutical Journal Vol 26 No. 8 2014
性良好。
2. 7 重复性试验 取同一批号(130801)金毛耳草粉末(过 3
号筛)适量，按“供试品溶液的制备”项下方法操作，平行制备
供试品溶液 6 份，在上述色谱条件下分别进行测定，结果样品
中芦丁的平均含量为 0. 037%，ＲSD为 1. 06%。
2. 8 加样回收率试验 取同一批号(130801)金毛耳草粉末
(过 3 号筛)约 1. 0g，共 6 份，精密称定，置具塞锥形瓶中，精
密加入芦丁对照品适量，按“供试品溶液的制备”项下方法操
作，制得供试品溶液。按上述色谱条件进行测定，计算回收率
(见表 1)。
表 1 回收率试验结果
样品
取样量
(g)
样品
中量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均
回收率
(%)
ＲSD
(%)
1. 0235 0. 378 0. 425 0. 785 97. 76
1. 0183 0. 377 0. 425 0. 788 98. 25
1. 0129 0. 375 0. 425 0. 776 97. 00 97. 88 0. 75
1. 0086 0. 373 0. 425 0. 791 99. 12
1. 0106 0. 374 0. 425 0. 779 97. 50
1. 0178 0. 376 0. 425 0. 782 97. 63
2. 9 样品测定 取 3 个批号样品，按“供试品溶液的制备”
项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定，记录芦丁峰
面积，外标法计算各批样品的含量，结果 3 批样品芦丁的含量
分别为 0. 037%、0. 031%、0. 040%。
3 讨论
本实验曾用甲醇-0. 3%冰醋酸(35 ∶ 65)、甲醇-水(35 ∶
65)、乙腈-0. 3%冰醋酸(18∶ 82)为流动相，经比较，乙腈-0. 3%
冰醋酸(18∶82)为流动相时，各峰分离度、峰形较佳，柱效较
好。因此，实验选用该比例的流动相。金毛耳草虽在南方使
用广泛，但《中华人民共和国药典》历版均未收载，《江西省中
药材标准》1996 年版收载了金毛耳草，标准中未见以其化学
成分含量为指标的质量控制方法，黄酮类化合物重要的药理
活性提示其在药物质量控制中的重要意义，目前已有文献〔2〕
报道了黄酮类化合物槲皮素的含量测定，但槲皮素平均含量
仅为 0. 008%左右。本实验建立了高效液相色谱法测定其黄
酮类化合物芦丁含量的分析方法，方法简便、快速、准确，重复
性好，可为金毛耳草药材的质量控制提供一定的科学依据。
参考文献
〔1〕马明娟，罗永明，杨美华 . 黄毛耳草的研究进展〔J〕. 中国药业，
2011，20(24):21-24.
〔2〕李萍 . 高效液相色谱法测定黄毛耳草中槲皮素的含量〔J〕. 广东
药学院学报，2006，22(1):57-58.
苍泽疏肝活血颗粒的质量标准研究
刘国彬(安徽六安市中医院药剂科 六安 237000)
摘要:目的 研究苍泽疏肝活血颗粒的质量控制标准。方法 采用薄层色谱法对颗粒中决明子、何首乌、丹参进行定性鉴别，并用高效液相色
谱法对方中决明子、何首乌中的大黄酚进行含量测定。结果 薄层色谱分离清晰，阴性无干扰。大黄酚在 0. 474 ～ 2. 370μg范围内呈良好的线
性关系。平均加样回收率为 98. 22%，ＲSD =1. 67% ( n = 6) 。结论 该方法专属性强，灵敏度高，重复性好，可用于该制剂的质量控制。
关键词:苍泽疏肝活血颗粒;薄层色谱法;大黄酚; HPLC
中图分类号:Ｒ927. 11 文献标识码:A 文章编号:1006-3765(2014)-08-0473-0046-03
作者简介:刘国彬，男(1978. 9 －)。学历:本科。职称:主管药师。研究方向为中药新药研究与质量控制。联系电话:0564-3311394，E-mail:
2020358868@ qq. com
Ｒesearch on Quality Standard for Cangze Shuganhuoxue Granules
LIU Guo-bin(Department of Pharmacy，The Traditional Hospital of Auhui Liu’an，Liu’an 237000，China)
ABSTＲACT:OBJECTIVE To establish the quality standard for Cangze Shuganhuoxue Granules. METHODS
Semen Cassiae，Ｒadix Polygoni Multiflori and Ｒadix Salviae Miltiorrhizae were identified by TLC. The content of
Chrysophanol was determinated by HPLC. ＲESULTS The established identification methods were proper and re-
flecting a good specificity. The experiment showed good linear relationship at the ranges of 0. 474 ～ 2. 370μg for
Chrysophanol. The average recovery rare of Chrysophanol was 98. 22%，ＲSD was 1. 67%(n = 6). CONCLUSION
The established methods are specific、sensitive and repeatable，which can control the quality of Cangze Shuganhuoxue
Granules.
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