全 文 :银边富贵竹组织培养及植株再生①
林加耕 , 张树河 , 吴维坚 , 周龙生
(福建省农科院甘蔗研究所闽台园艺研究中心 , 福建 漳州 363005)
摘 要:将银边富贵竹带腋芽的茎段接种于不同激素的 M S培养基上 ,结果表明 ,以 MS+ BA3 mg /L+
N AA0. 3 mg /L对芽继代增殖效果最好 ,并伴有胚性愈伤组织的形成 ,将筛选出来的胚状体转接到 MS
+ BA6 mg /L+ N AA0. 1 mg /L的分化培养基上 ,则可分化出较理想的丛生苗 ,最佳的生根培养基为改
良 1 /2M S+ IBA0. 5 mg /L+ N AA0. 1 mg /L,生根率 90% ,移栽成活率 94% 。
关键词: 银边富贵竹 ;组织培养 ;丛生芽 ;胚状体 ;植株再生
银边富贵竹 (Dracaenasanderlana )是百合科龙
血树属的一种 ,系常绿小乔木 ,植株矮小 ,直立生长 ,
没有分枝 ,叶片银绿色条纹相映 ,淡雅清秀 ,适合于中
小盆栽或花瓶水养 ,摆放点缀厅堂居室给人以吉祥、
富贵的感觉 ,是近几年来较受欢迎和畅销的室内观赏
花卉品种。其常规的繁殖方法是利用茎段进行扦插 ,
速度较慢 ,繁殖系数低 ,笔者通过组织培养成功获得
了再生植株 ,为大量快繁银边富贵竹提供了一条新途
径。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
为银边富贵竹健壮嫩梢的带芽茎段。
1. 2 试验方法
将叶片剥离 ,把带有腋芽的茎段用自来水冲洗干
净 ,沥干后用 75%的酒精浸 30 s后置于 0. 1%的升
汞中 15 min;在超净工作台的无菌条件下取出 ,用无
菌水冲洗 4~ 5遍 ,切成带一个腋芽的茎段接种于启
动培养基上培养。
1. 3 培养基
腋芽和茎尖生长培养基采用 MS附加不同比例
的 BA和 NAA植物生长调节剂 ,其浓度和配比见表
1;胚状体的增殖和分化采用 MS附加不同比例的
2, 4-D、 BA、 NAA (详见表 3) ;生根培养基以改良
1 /2M S附加 IBA、 NAA,以上培养基 pH值均为 5. 8,
琼脂浓度为 0. 7% ,蔗糖浓度为 3%。
1. 4 培养条件
培养温度为 26± 2℃ ;每天光照 10~ 12 h,光照
强度为 1 500~ 2 000 Lx。
2 结果与分析
2. 1 不同培养基对芽萌发及生长的影响
接种于不同培养基上的外殖体 ,接种后 20 d左
右芽开始萌发伸长 , 30 d后调查结果见表 1,外植体
在不同激素处理的培养基上均能萌动 ,在 NAA
0. 1 mg /L浓度相同处理的条件下 ,萌芽率随 BA浓
度的升高而增加 ,以 BA4 mg /L为较多 ,但苗长势
弱。 以 MS+ BA3 mg /L+ N AA0. 1 mg /L处理的萌
发芽生长健壮为最佳。
表 1 不同的激素水平对芽萌发及生长的影响
培养基
/mg /L
接种数
/个
萌芽数
/个
平均芽高
/cm
芽生长情况
MS+ BA1+ N AA0. 1 20 11 2. 3 生长缓慢+
MS+ BA2+ N AA0. 1 20 15 2. 7 生长较慢+ +
MS+ BA3+ N AA0. 1 20 18 3. 1 生长快芽健壮+ + +
MS+ BA4+ N AA0. 1 20 19 2. 2 生长慢芽弱+
M S0 20 9 1. 5 生长慢芽弱+
2. 2 不同激素浓度对芽增殖的影响
将已出芽的外殖体转接到不同处理的增殖培养
基上进行继代培养见表 2;在 NAA0. 3 mg /L时 , BA
浓度高低对丛生芽的形成有较大的影响 ,随着 BA浓
度的增加 ,芽的增殖也不断增加 ,但达到 BA5 mg /L
后 ,芽增殖就受到抑制 ,增殖系数明显下降。在本试验
52006年 第 17卷 第 1期 广 西 园 艺 · 试验研究·
① 收稿日期: 2005- 07- 27
中笔者还发现 ,以 BA4 mg /L+ N AA0. 3 mg /L的激
素组合中 ,芽在增殖的过程中发现部分有胚状体愈伤
组织的形成。
表 2 不同激素浓度对芽增殖的影响
培养基
/mg /L
接种芽
数 /株
增殖芽苗
数 /株
增殖系
数 /倍 备 注
BA1+ NAA0. 3 40 85 2. 12 部分有胚
BA2+ NAA0. 3 40 92 2. 30 状体形成
BA3+ NAA0. 3 40 125 3. 12
BA4+ NAA0. 3 40 120 3. 00
BA5+ NAA0. 3 40 91 2. 25
2. 3 胚状体的继代增殖培养
从诱导出的胚状体中筛选出较好的组织块 (淡黄
白色的胚状体 ) ,切成 0. 5 cm左右大小的方块 ,接种
到 MS+ BA1 mg /L+ 2, 4-D 1 mg /L的培养基上继
代增殖。在继代培养中 ,每 25 d转接一次 ,以保证胚
状体细胞较旺盛的活力 ,如果转接时间超过 30 d,则
组织块会慢慢发生褐变 ,继而丧失增殖的能力。
2. 4 胚状体的分化和植株再生
将胚状体转接到不同激素处理的诱导分化培养
基中进行培养 ,结果见表 3,胚状体在不同处理的培
养基中都能诱导成苗 ,但其分化效果不同 ,以 MS+
BA6 mg /L+ N AA0. 1 mg /L组合配方的诱导分化率
76%为最好。在本试验各处理中 ,随着 NAA浓度的
增加分化率反而下降。
表 3 不同激素组合对胚状体分化率的影响
激素组合
/mg /L
接种块数
/块
不定芽数
/个
分化率
/%
BA1+ NAA0. 1 50 18 36
BA1+ NAA0. 5 50 12 24
BA3+ NAA0. 1 50 22 44
BA3+ NAA0. 5 50 17 34
BA6+ NAA0. 1 50 38 76
BA6+ NAA0. 5 50 25 50
BA8+ NAA0. 1 50 26 52
BA8+ NAA0. 5 50 20 40
2. 5 不同生长素对生根诱导的影响
将苗高约 2~ 3 cm的幼苗转接到改良 M S大量元
素减半的不同激素处理的诱导生根的培养基上见表
4, 20 d后调查生根结果 ,不同处理的培养基都能诱
导生根 ,但生根率有很大的差异 ,以 NAA0. 1 mg /L
+ IBA0. 5 mg /L的诱导生根率 90%为最高 ,较高浓
度的 NAA对根系诱导有明显的抑制。
表 4 不同生长素对生根诱导的影响
激素组合 /mg /L 接种数
/株
生根数
/条
平均生根
条数 /条
根诱导率
/%
1 /2M S+ N AA0. 1 30 22 1. 7 73. 3
1 /2M S+ N AA0. 1+
IBA0. 5
30 27 2. 5 90. 0
1 /2M S+ N AA0. 5 30 20 1. 5 66. 6
1 /2M S+ N AA1 30 17 1. 6 56. 6
2. 6 试管苗的移栽
将已生根的试管苗移出培养室 ,在自然光照下炼
苗 6~ 8 d,然后洗去培养基 ,即可假植于沙床中 ,保持
湿度 85%左右 ,并加盖遮阳网 ,以防太阳曝晒 ,注意
肥水管理 ,一个半月后即可移栽大田或上盆栽培 ,成
活率可达 94%以上。
3 小结与讨论
3. 1 目前 ,银边富贵竹试管苗快速繁殖的方法 ,主要
是通过诱导丛生芽进行繁殖 ,虽然诱导分化率较高 ,
但前期生长缓慢 ,一个周期需 50~ 60 d。而结合与胚
状体的途径进行继代增殖 ,是加快银边富贵竹繁殖的
有效手段。
3. 2 试验中发现 ,在分化出的绿苗中 ,大部份都保持
了原品种叶片有银边条纹的特征 ,但个别株叶片只有
绿色而失去银边条纹。 种植后是否能恢复原来的特
征 ,否则即可能发生变异产生新的变种 ,这方面的问
题有待于进一步的探讨。
参考文献
[1 ] 李浚明编译 .植物组织培养教程 [M ].北京: 中国农业大
学出版社 , 2003. 7.
[2 ] 熊丽 ,吴丽芳 .观赏花卉的组织培养与大规模生产 [M ].
北京: 化学工业出版社 , 2003. 1.
[3 ] 程宗胜 .植物组织培养与工厂化育苗技术 [M ].北京: 金
盾出版社 , 2003. 1.
6 · 试验研究· 广 西 园 艺 2006年 第 17卷 第 1期