全 文 ：19 9 4年 第6 期
中 山 大学 学 报 论 丛
S U P PL EM N T ETO T H EJR O UN AL
O FS UN YATR S N N I S I T V U E EY9 9 4 1
海萝藻水提物的营养成分和保健功效
许实波 彭注铎 王 晶 洪生勤 陈梓挺 李挺东
( 中山 大学生命科学学院药理室)( 汕头大学生物学系)
摘 要 海萝藻( o l G。州。 了 *、) 水提物对小鼠灌胃的最大耐受量> 0 3. 39 /k g, 对小鼠常压
耐缺氧有明显的保护作用 , 能延长血液凝固时间 , 增强免疫功能 , 并有一定的抗艾氏腹水瘤
作用 .
关键词 海萝藻提取物 , 最大耐受量 , 常压耐缺氧 , 抗凝血作用 , 体液免疫 , 细胞免疫 , 抑
瘤作用
实验材料
海萝藻水提物由海萝藻经水提 、 酒沉 、 离心 、 烘干等过程制得 , 实验时用蒸馏水配
成所需浓度 . 实验动物 N IH 小鼠和豚鼠由中山大学生命科学学院药理室实验动物养殖场
提供 . 所用药品均购 自广州市医药批发中心 .
2 方法及结果
2
.
1 急性毒性试验
选取健康 N IH 小鼠 10 只 , 体重 17 ~ 21 9 , 雌雄各半 , 灌胃给药 , 每隔 h2 一次 , 每天
8 次 , 每次 。. 6 m l / 2 09 体重 , 海萝提取物浓度为 12 % , 观察 d7 , 动物健康无一死亡 , 剖
检未见脏器异常 , 提示海萝藻提取物小鼠灌胃给药的最大耐受量> 30 . 3 9 / gk 体重 .
2
.
2 对小鼠常压耐缺氧的保护作用
选取健康 , 体重为 18 ~ 20 9 的 M H 小鼠 36 只 : 随机均分为 4组 , 设生理盐水组和海
萝藻提取物高 、 中 、 低剂量组 , 灌胃给药〔 , 〕 . 每天一次 , 连续给药 ds . 最后一次给药后
3 o im n
, 放入容量为 125 m l 的广口瓶中 , 瓶中预先放有 6 9 钠石灰 , 盖上周围涂有凡士林的
盖子密封 , 同时用秒表记录小鼠自放入瓶内至死亡的时间即为小鼠常压耐缺氧的存活时
间 . 实验时室温为 25 一C , 结果如表 1 .
中山大学学报论丛 1 9 9 4年
表 1海萝提取物对小 鼠常压付缺氧的保护作用
Ta b
.
1 P rot e e ti n o o fx e t ra e t f1 n o rG如如 2咧艺绍 户似诬勿 oa n n ox xa n li e e un d en ro r ma P l rs s e u re
组 别 剂量 ( g/ g k)存活时间 ( min )存活时间延长率 ( % )
生理盐水3 0n飞 l/ kg1 4.2 2士 1 .3 6
海萝低剂量 0.3 13 1 7 . 59士 1 .3 4” ’3 2· 7
海萝中剂量 0.62 51 7 .6名士 1 .的 “ ` 2 4码
海萝高剂量 1 .2 2 51 . 4通士3 .9 5“ ` 0 5· 7 7
; ~9
, 牙士朋 ; 与生理盐水比较 : 二 二 * 尸 < 0 . 01
结果表明 : 海萝藻提取物能延长小鼠在常压缺氧情况下的存活时间 , 与生理盐水 比
较 , 各剂量组差异极显著 , 提示海萝藻提取物对静态常压耐缺氧具有保护作用 .
2
.
3 对小鼠血疑的影响
采用小鼠鼠尾法试验川 . 选取健康 N IH 小鼠 36 只 , 体重 18 一 2 29 , 雌雄兼有 , 随机
均分为 4 组 , 每组 9 只 , 组别 、 剂量设置同 2 . 2 . 每天灌胃给药一次 , 连续 s d , 最后 一次
给药后 35 m in 做剪尾测定凝血和止血时间 .
凝血时间测 定采用玻片法 lj[ . 剪尾取血 , 滴二滴血 于坡片两端 , 血滴直径约 5一
I Om m
, 立即开始计时 , 此后每隔 30 5 用干燥 、 洁净注射针头挑动血液一次 , 至针头能挑
起纤维蛋白为止 , 即为凝血时间 . 结果见表 .2
表 2 海萝提取物对凝血和止血时间的影响
T a b
.
2 E f f e e认 o f e x t r a e t f r o m G女)。网材 户“ 翅“。 o n b l o o d e o a g u l a t z o n t im e a n d b l e e d i n g t i` Tl e
组 别 剂量
( g / kg )
凝血时间
( m in )
凝血时间延长率
(% )
止血时间
( I n i n )
止血时间延长率
( % )
生理盐水 3Om 工/ k g 4 . H 士 0. 9 一 2 1 . 5 6土 2 . 69
海萝低剂量 0 . 3 1 3 4 、 3 3士 1 . 0 0 · 5 . 3 5 3 0 . 0 0士 ] 3 . 4 5 · 3 9 . 15
海萝中剂量 0 . 6 2 5 4. 5 0士 0 . 7 1 · 9 . J g 3 J . 8 3士 一5 , 2 6二 6 1 . 5 5
海萝高剂量 1 . 2 5 5 . 1 6士 0 . 7 0二 2 5 . 5 5 3 6 . 1 1士 1 3 . 7 4 , 二 6 7 . 4 9
n
= 9
, 于士 SD ; 与生理盐水比较 : 关 p > 0. 0 5 , * * p < 0 . 05 , 二 , 关 尸< 0 . 0 1
止血时间为剪断鼠尾 , 血液自行溢出计起 , 每隔 3 05 用滤纸接触伤 口 , 直至无血痕为
止即为止血时间 (见表 2) . 实验时室温为 19 C .
结果表明 : 海萝藻提取物能使小鼠的凝血时间和止血时间延长 , 特别是止血时间的
延长更加显著 , 与生理盐水组比较 , 高剂量组差异非常显著 ; 中剂量组差异显著 ; 低剂
量组 , 差异无显著性意义 , 量效关系非常明显 . 凝血时间都有所延长 , 与生理盐水组比
较 , 高剂量组有显著性差异 , 中 、 低剂量组差异不显著 , 量与效有一定关系 . 提示海萝
提取物具有抗凝血作用 .
2
.
4 对小鼠体液和细胞免疫功能的影响
选取健康 NI H 小鼠 40 只 , 体重 18 ~ 20 9 , 雌雄兼有 , 随机均分为 4 组 . 设空白对照
第 6期 许实波等 :海萝藻水提物的营养成分和保健功效
组和海萝提取物高 、 中、 低剂量组 , 灌胃给药 ·
体液免疫采用血清溶血素测定法 aj[ . 取 2 只豚鼠血清混合 , 用灭菌生理盐水配成
10 %血清稀释液作为补体 , 4℃保存备用 . 无菌操作制备 5写鸡红细胞悬液 , 小鼠灌胃给
药前一天腹腔注射 5肠鸡红细胞悬液 o ` 2 0 1/ 只 , 次日开始给药 , `每天一次 , 连续 d7 , 然
后眼球后静脉取血 , 每鼠取血清 2咖l , 加人生理盐水和 。. s m l 鸡红细胞悬液 , 。℃加补体
1m l
,
37 C孵育 3m0 in , o℃终止反应 , 离心取上清液 , 于 72 l A 型分光光度计测波长为
例 on m 处的 oD 值 , 结果见表 3
,
表 3 海萝提取物对体液 和细胞免疫的影响
T ab
.
3 E f f e cts of 吹tr ac t fr 咖 伽如子烈艺济 户 ,咖 o ir h u m o r a生a n d c e l l i m m u n e
组 别 剂量
( g / k g )
溶血量
(O D )
变化率
(环 )
淋巴细胞数
( k i lo )
变化率
(% )
空白对照
海萝低剂量
海萝中剂量
海萝高剂量
0
、 刁7 3士 0 . 027 5 . 1 7士 0、 7 3 4
0
.
4 9 4士 0.
0
`
5 0 1士 D .
02 1
杯
01名肠 烤
4
.
4 4
5
、
9 2
5
.
7 2 5士 0 . 8 5 9 ` 1 0, 7 4
Z Q
.
50 9土 0 . 02 1 一 ’ “ 7 . 6 2
6
.
1 7 5士 0 . 9 2 7 “ “
6
.
35 0士 0 . 9 0 0 俘 侣 书
1 9
,
44
扮22 . 8 2
; 一 IQ , 云士 sD^ ; 与生理盐水比较 : , P> 0 0 5 , 二 二 P < 0 . 05 . 、 * , 尸 < 0 . 01
细胞免疫采用淋巴细胞绝对值法川 . 置淋 巴细胞计数稀释液 0 . 38 lm 于试管内 , 用血
红蛋白吸管吸取血液 2 0川 , .吹入以上试管中 , 混匀 , 静置 3、 s m in , 待红细胞和血小板完
全溶解后 , 再混匀 , 取 1滴滴入白细胞计数盘中 , 静置 2 、 3m jn , 待白细胞沉下后开始计
数 (见表 .3) 一 一
结果表明: ①海萝藻提取物能使溶血量增加 , 与空白对照组 比较 , 中、 高剂量组差
异分别具显著性和非常显著性 , 低剂量组差异不显著 , 但溶血量仍有所增加 , 量效关系
明显 , 提示海萝提取物能提高小鼠的体液免疫机能 . ②海萝藻提取物能使淋巴细胞数提
高 , 与空白对照组比较 , 高剂量组差异非常显著 ; 中剂量组差异显著 , 低剂量组差异不
显著 , 量效关系较明显 , 提示海萝提取物能提高细胞免疫功能 .
2
.
5 对肿瘤的抑制作用 - 一
2
,
5
.
1 对体外培养的肿瘤细胞 的抑制作用 采用艾氏腹水癌 (E hr il ch A iSC ct es ca icr 。 ,
E人c) 小鼠作为瘤株 , 无菌操作王`人颈椎脱臼处死瘤鼠 , 用 7 5%酒精消毒腹部 , 切开腹部
皮肤 , 保瘤叽层 , 用注射器抽取腹水 , 置于培养皿内 , 加入无菌生理盐水 , 配比为 1 , ·几
制成肿瘤细胞悬液 , 将悬液 1叨Or/ m玩 离心 工。m in , 弃去上清液后加入 R P姐一 16 钓 培养
液 . 混匀 , 静置 息。m in , 小合吸取上层液 , 则得纯的肿瘤细胞 , 取肿瘤液 0 . 加 1于试管中 ,
每组取 切 管 , 加 0 . 9 ml R PM I一 1 6 4。培养液 , 。, 2 川 海萝提取物 ,共 3 组 ,对照组加 .0 物 1
生理盐水 , 3 7℃恒温 7 h2 , 取出各管滴加 0 . 0 5写甲稀兰 2 滴 , 染色 4。二 , 计数板计数 , 经
组间 `检验统计处理 , 结果见表 4 .
中山大学学报论丛 1 9 9 4年
表 4海萝提取物对体外培养的 EAC 细胞的影响
T a b
.
f f E 4e e t so fe xt ra e t f ro mGI 。 的脚及胳 户心如 o e nu lt iva t e d inv it o rA EC e e l ls
组 别 浓 度
(m g /L )
肿瘤细胞数 72 h巨癌细胞死亡数 抑 瘤 率
(个 ) (个 ) (环 )
生理盐水 0. 9写 3 8 3 3 8 1. 1士 2 0. 53 2 7. 3 4
海萝高剂量 1 7 42 2 5 53 8 . 4 4士 48· l` ” 2 4· 6 7
海萝中剂量 3 2 7 598 2 97. 1 0士 8 6· 9 5` ’ ` 2 4· 6 7
海萝低剂量 1 43 3 3 2 096. 9 0士 76. 2 7` “ ’ 2 2. 09
、 二 1 0, 汤士 DS ; 与生理盐水比较 : 、 * 关 尸 < 0 . 01
结果显示 : 海萝藻提取物对 EA C 细胞的生长有一定的抑制作用 , 与生理盐水组比较 ,
高剂量组差异极显著 ; 中剂量组差异极显著 ; 低剂量组差异非常显著 , 量效关系明显 . 提
示海萝提取物对体外培养的 E A c 细胞的生长有抑制作用 .
2
.
5
.
2 对 E A e 小 鼠的抑瘤作用 选取 1 5一 1 79 的健康 N I H 小鼠 4 0 只 , 雌雄兼有 . 均分
为 4组 , 每组 10 只 . 设生理盐水组 、 海萝提取物高 、 中 、 低剂量组 . 每鼠腹腔注射 。 . Zml
E A C 细胞悬液 , 第 7 天开始生理盐水皮下注射生理盐水 0 . Zm l / 10 9 体重 , 海萝提取物高 、
中 、 低剂量组分别皮下注射浓度为 4 om g / gk , 14 m g / k g , I Om g / k g 的海萝提取物 .0 Zm l/ i o g
体重 . 饲养观察各组小鼠的死亡情况 , 当对照组的小鼠全部死亡时 , 计算各组动物存活
率 , 结果见表 .5
表 5 海萝提取物对 EA c 小 鼠存活 率的影响
T a b
.
5 E f f e e t s o f e x t r a e t f r o m G I。 。网。 如。观口 o n s u r v i v in g r a t i o o f E A C m i e e
组 别 动物数
0204劝生理盐水
海萝低剂量
海萝中剂量
海萝高剂量
1 0
1 0
l 0
1 0
剂 量
( m g / k g )
0
.
Zm l / kg
1 0
动物存活数 存活率
(% )
尸值
l 4
4 0
> 0
.
0 5
> 0
.
0 5
( 0
.
0 5
结果表明 : 海萝提取物对提高 E A C 小鼠的存活率有一定的作用 , 与生理盐水组比较 .
高剂量组差异显著 , 中 、 低剂量组差异无显著性意义 , 量效关系明显 , 提示海萝提取物
在整体动物上能延长 E A C 小鼠的生命 , 但给药量需较大 .
3 结 语
本文对海萝提取物进行了急性毒性 、 常压耐缺氧 、 抗凝血 、 提高免疫功能 、 抗肿瘤
等方面的药理研究 . 结果表明 , 海萝提取物能延长小鼠常压耐缺氧存活时间 、 延长出血
和血凝时间 、 提高体液免疫和细胞免疫功能 、 抗肿瘤 . 说明海萝提取物可望开发为保健
第 6期 许实波等 :海萝藻水提物的营养成分和保健功效
食品 , 但进一步的药理研究还待进行 .
参 考 文 献
李仪奎等 . 中药药理实验方法学 . 上海 : 上海科技出版社 , 1 9 , 1 .
许实波等 . 海洋药物 . 1 9 8 6 , 4 : 15 ~ 19
Z h a n g T a n m u e t a l
.
A e t a P h a r m a e o lo g i e a S in i ca
,
1 98 1
,
2
,
1 29
徐叔云等 . 药理实验方法学 . 北京 : 人民卫生出版社 , (第二版 ) ,
~ 1 1 4 6
1 1 0于 4份3
199 2
.
1 089
,
9 45~ 946
,
一
111 5
P h a r m a c o lo g i c a l A c t i o n s o f t h e
E x tr a c t o f G勿如那夕15 f . c a at
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A b s t r a e t T h e e x t r a e t o f G勿。娜 15 fu ca at P r o l o n g s th e s u r v i v i n g tim e o f a n o x i a m i e e u n d e r n o r -
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39 / k g
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余 S e e t i o n o f P h a r m a e o l o g y , cS h
o o l o f L i f e S e i e n e e s
.
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