全 文 ：ＤＯＩ：１０．１１９７３／ｌｈｊｙ－ｈｘ２０１５１００１０　
超高效液相色谱法快速测定贝类中的
软骨藻酸残留
褚莹倩１，谢　瀛２，陈　溪１，崔　晗１，张晓林１，黄大亮１
（１．大连出入境检验检疫局，大连１１６４００；　２．本溪市疾病预防控制中心，本溪１１７０００）
摘　要：利用超高效液相色谱快速测定贝类中的软骨藻酸残留。样品经甲醇（１＋１）溶液提取，
采用Ｏａｓｉｓ　ＭＡＸ固相萃取柱对提取液进行净化后，在 Ｗａｔｅｒｓ　ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＢＥＨ　Ｃ１８色谱柱
上分离，以乙腈－０．１％（体积分数）三氟乙酸（１３＋８７）混合液为流动相进行洗脱，紫外检测波长为
２４２ｎｍ。软骨藻酸的线性范围为０．１～１０．０ｍｇ·Ｌ－１，测定下限（１０Ｓ／Ｎ）为０．２ｍｇ·ｋｇ－１。加标
回收率在７６．８％～９１．２％之间，测定值的相对标准偏差（ｎ＝６）在１１％～１６％之间。
关键词：超高效液相色谱法；软骨藻酸；贝类
中图分类号：Ｏ６５７．７　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００１－４０２０（２０１５）１０－１３９６－０４
ＵＨＰＬＣ　Ｒａｐｉｄ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒｅｓｉｄｕａｌ　Ｄｏｍｏｉｃ　Ａｃｉｄ　ｉｎ　Ｓｈｅｌｆｉｓｈｅｓ
ＣＨＵ　Ｙｉｎｇ－ｑｉａｎ１，ＸＩＥ　Ｙｉｎｇ２，ＣＨＥＮ　Ｘｉ　１，ＣＵＩ　Ｈａｎ１，ＺＨＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｌｉｎ１，ＨＵＡＮＧ　Ｄａ－ｌｉａｎｇ１
（１．Ｄａｌｉａｎ　Ｅｎｔｒｙ－Ｅｘｉｔ　Ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｑｕａｒａｎｔｉｎｅ　Ｂｕｒｅａｕ，Ｄａｌｉａｎ１１６４００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｂｅｎｘｉ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　Ｄｉｓｅａｓｅ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　ａｎｄ　Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，Ｂｅｎｘｉ　１１７０００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＵＨＰＬＣ　ｗａｓ　ａｐｐｌｉｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒｅｓｉｄｕａｌ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｓｈｅｌｆｉｓｈｅｓ．Ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｗａｓ
ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｍｅｔｈａｎｏｌ（１＋１）ｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｗａｓ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｏｎ　Ｏａｓｉｓ　ＭＡＸ　ｓｏｌｉｄ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｃｏｌｕｍｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ
ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ　ｗａｓ　ｓｅｐａｒａｔｅｄ　ｏｎ　Ｗａｔｅｒｓ　ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＢＥＨ　Ｃ１８ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｌｕｍｎ　ｗｉｔｈ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－０．１％
（φ）ｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（１３＋８７）ａｓ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ　ｆｏｒ　ｉｓｏｃｒａｔｉｃ　ｅｌｕｔｉｏｎ．ＵＶ－ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｍａｄｅ　ａｔ　ｔｈｅ
ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　２４２ｎｍ．Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ｗａｓ　０．１－１０．０ｍｇ·Ｌ－１，ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｌｏｗｅｒ　ｌｉｍｉｔ　ｏｆ
ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ（１０Ｓ／Ｎ）ｏｆ　０．２ｍｇ·ｋｇ－１．Ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｒａｔｅｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｂｙ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ａｄｄｉｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｅｒｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ
７６．８％－９１．２％，ａｎｄ　ＲＳＤｓ（ｎ＝６）ｗｅｒｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　１１％－１６％．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＵＨＰＬＣ；Ｄｏｍｉｃ　ａｃｉｄ；Ｓｈｅｌｆｉｓｈｅｓ
　　１９８７年，加拿大有１５０多人因误食了一种被不
知名的毒素污染了的贝类而导致了大规模的中毒，
大多数中毒者的临床症状表现为胃肠疼痛、神志不
清、痉挛、永久或短期失忆，个别病例出现死亡症状。
因此，这种不知名的毒素被称作记忆缺失性贝类毒
素（ＡＳＰ）［１－２］。ＡＳＰ的主要成分为软骨藻酸（ＤＡ），
是由一些浮游藻类产生的类氨基酸物质［３－４］。研究
结果显示：有相当一部分滤食性海洋生物能够在其
体内富集ＤＡ，并随食物链进入人体［３，５－６］。加拿大
收稿日期：２０１４－０９－１２
作者简介：褚莹倩（１９８７－），女，辽宁本溪人，硕士研究生，研究
　方向为生物毒素。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｕｙｉｎｇｑｉａｎ＠１６３．ｃｏｍ
相关法律规定ＤＡ的最大残留限量为２０ｍｇ·ｋｇ－１，
当贝类中ＤＡ的质量分数大于２０ｍｇ·ｋｇ－１时，该
贝类已不宜人类食用。美国以及欧洲各国也相继针
对海产品中软骨藻酸含量采用了这一限量标准。
目前常用的测定 ＡＳＰ的方法有小鼠生物检测
法［１］、高效液相色谱法［５，７］、高效液相色谱－质谱
法［８－１０］、酶联免疫吸附法［１１－１４］、毛细管电泳法［１５］和分
子印迹法［１６］等。高效液相色谱法具有准确、稳定、
灵敏度高的优点，是政府农业化学家协会（ＡＯＡＣ）
和欧洲标准化委员会（ＣＥＮ）认可的分析贝类中ＤＡ
的分析方法［４］。与高效液相色谱相比，超高效液相
色谱（ＵＨＰＬＣ）具有快速、高效、节省溶剂的优点，
·６９３１·
褚莹倩等：超高效液相色谱法快速测定贝类中的软骨藻酸残留
具有更广阔的应用前景，但目前 ＵＨＰＬＣ检测ＡＳＰ
的研究鲜见报道。本工作利用 ＵＨＰＬＣ建立并优
化了贝类中ＡＳＰ的快速高效测定方法。
１　试验部分
１．１　仪器与试剂
Ｗａｔｅｒｓ　ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ－ＴＵＶ 型超高效液
相色谱仪，配紫外－可见光检测器；ＴＤ２５－ＷＳ型多管
架自动平衡离心机；ＰＬ１００１－Ｌ型电子天平；ＭＳ　３型
数显涡旋混合仪；ＦＦ　２０型精密ｐＨ计；ＫＱ　３２００ＤＶ
型超声仪；固相萃取柱：Ｏａｓｉｓ　ＭＡＸ（１５０ ｍｇ／
６ｍＬ）、ＬＣ－ＳＡＸ（５００ ｍｇ／３ ｍＬ）、Ｐｏｌｙｍｅｒ　ＳＡＸ
（１５０ｍｇ／６ｍＬ）。
软骨藻酸标准溶液：１００ｍｇ·Ｌ－１。
柠檬酸溶液：０．５ｍｏｌ·Ｌ－１，称取一水柠檬酸
４０．４ｇ和柠檬酸三铵１４．０ｇ溶解于４００ｍＬ水中，
以氨水调溶液ｐＨ至３．２，加入乙腈５０ｍＬ，完全溶
解后，用水定容至５００ｍＬ。
甲醇、乙腈、三氟乙酸为色谱纯，一水柠檬酸、柠
檬酸三铵为优级纯，试验用水为超纯水。
１．２　色谱条件
Ｗａｔｅｒｓ　ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＢＥＨ　Ｃ１８ 色谱 柱
（１００ｍｍ×２．１ｍｍ，１．７μｍ）；流动相为乙腈－０．１％
（体积分数，下同）三氟乙酸（１３＋８７）混合溶液；流量
０．２ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样量１０μＬ；检测波长２４２ｎｍ；
柱温为室温。
１．３　试验方法
以虾夷扇贝为测试样品，先用清水将贝壳外表
彻底洗净，然后切断闭壳肌，开壳，用清水淋洗内部
去除泥沙及其他外来物。将闭壳肌和连接在胶合部
的组织切开，仔细取出贝肉，切勿割破肉体。开壳前
不得加热或用麻醉剂。将收集的２００ｇ贝肉置于
２ｍｍ筛中沥水５ｍｉｎ（不要使肉堆积），检出碎壳等
杂物，将贝肉均质。
称取试样５．０００　０ｇ于５０ｍＬ加盖离心管中，
加入甲醇（１＋１）溶液１０ｍＬ，涡旋混匀１ｍｉｎ，超声
提取５ｍｉｎ，以４　０００ｒ·ｍｉｎ－１转速离心２０ｍｉｎ，使
固液两相彻底分离。移出上清液至２５ｍＬ容量瓶
中，残渣再用甲醇（１＋１）溶液５ｍＬ重复提取两次，
合并上清液于２５ｍＬ容量瓶中，以水稀释至刻度，
混匀。
移取上述提取液 ５．００ ｍＬ，依次过经甲醇
６ｍＬ、水３ｍＬ、甲醇（１＋１）溶液３ｍＬ处理过的
ＳＰＥ柱，待液体以每秒１滴的速率流出后，再依次
用乙腈（１＋９）溶液５ｍＬ，柠檬酸洗脱液０．５ｍＬ以
每秒１滴的速率过柱，弃去流出液，最后用柠檬酸洗
液２ｍＬ洗脱吸附在柱上的ＤＡ，按仪器工作条件进
行测定。
２　结果与讨论
２．１　色谱柱的选择
Ｗａｔｅｒｓ　ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＢＥＨ　Ｃ１８ 色谱柱
（１００ｍｍ×２．１ｍｍ，１．７μｍ）是适合各种分析物的
通用、高效分离色谱柱，Ｗａｔｅｒｓ　ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ
ＢＥＨ　ＨＩＬＩＣ色谱柱（１００ｍｍ×２．１ｍｍ，１．７μｍ）利
用一种未键合的ＢＥＨ颗粒提高强极性物质的保留
并可以有效分离极性和可电离化合物，Ｗａｔｅｒｓ
ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　ＨＳＳ　Ｔ３ 色谱柱 （１５０ ｍｍ×
２．１ｍｍ，１．７μｍ）在极性化合物保留、水相兼容性
方面具有优势。鉴于ＤＡ是一种水溶性较好且可电
离的物质，试验考察了ＤＡ在上述３种常用 ＵＰＬＣ
色谱柱上的分离情况，结果见图１。
（ａ）　ＢＥＨ　Ｃ１８柱 （ｂ）　ＢＥＨ　ＨＩＬＩＣ柱 （ｃ）　ＨＳＳ　Ｔ３柱
图１　３种色谱柱所得软骨藻酸的色谱图
Ｆｉｇ．１　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ　ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｎ　３ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｃｏｌｕｍｎ
　　结果发现：在ＢＥＨ　Ｃ１８柱上ＤＡ在２．３４４ｍｉｎ 出峰，峰形的对称性良好，且与溶剂峰间不存在互相
·７９３１·
褚莹倩等：超高效液相色谱法快速测定贝类中的软骨藻酸残留
干 扰；ＤＡ 在 ＨＳＳ　Ｔ３ 柱 上 的 保 留 时 间 为
７．０９３ｍｉｎ，同样与溶剂峰间不存在互相干扰，但是
与ＢＥＨ　Ｃ１８相比较，ＤＡ的色谱峰的保留时间相对
较长，峰形的对称性较差；ＤＡ在ＢＥＨ　ＨＩＬＩＣ柱上
未能与溶剂峰分开。试验选择 ＢＥＨ　Ｃ１８柱为分
离柱。
２．２　固相萃取柱的选择
研究发现［３］，ＤＡ含有３个羧基和１个次级氨
基官能团，其中３个羧基官能团的ｐＫａ 值分别为
２．１０，３．７２，４．９７，氨基官能团的ｐＫａ值为９．８２。因
此，ＤＡ能在一个较宽的ｐＨ 范围内以离子状态存
在；在中性条件下，３个羧基和１个氨基官能团均以
离子状态存在，随着溶液ｐＨ的降低，羧基官能团逐
渐质子化。
大多动物性食品基质比较复杂，因此，试验选用
固相萃取柱对提取液进一步净化，去除一些与目标
化合物结构、性质相似的干扰物。基于ＤＡ在中性
条件下以离子状态存在，试验选取了３种阴离子交
换固相萃取柱，比较了不同固相萃取柱对目标化合
物的净化能力。结果发现：由于固相萃取柱的填料
量过大，提取液在ＬＣ－ＳＡＸ柱（５００ｍｇ／３ｍＬ）上存
在堵塞现象。进一步选取填料量较少的 Ｏａｓｉｓ
ＭＡＸ（１５０ｍｇ／６ｍＬ）和 Ｐｏｌｙｍｅｒ　ＳＡＸ（１５０ｍｇ／
６ｍＬ）固相萃取柱对ＤＡ进行净化，结果发现：提取
液均可以以一定速度流过固相萃取柱，且ＤＡ可在
这两种固相萃取柱上保留并有效地洗脱下来。通过
回收试验发现，Ｏａｓｉｓ　ＭＡＸ对ＤＡ富集和净化的效
果要高于Ｐｏｌｙｍｅｒ　ＳＡＸ。因此，试验选择用 Ｏａｓｉｓ
ＭＡＸ柱进行提取液的净化。
２．３　标准曲线和检出限
以乙腈（１＋９）溶液稀释ＤＡ标准储备溶液，配
成质量浓度分别为０．１，１．０，２．５，５．０，１０．０ｍｇ·
Ｌ－１的ＤＡ标准溶液，在仪器工作条件下测定。每
个样品测定３次，以ＤＡ的质量浓度为横坐标，以
ＤＡ的平均峰面积为纵坐标绘制标准曲线。ＤＡ的
质量浓度在０．１～１０．０ｍｇ·Ｌ－１范围内与其峰面积
呈线性关系，线性回归方程为ｙ＝１．６０５×１０５　ｘ－
１．８３４×１０４，相关系数为０．９９８　５。方法的测定下限
（１０Ｓ／Ｎ）为０．２ｍｇ·ｋｇ－１。
２．４　回收试验
称取阴性试样５．０００　０ｇ，分别按０．２０，０．３０，
０．４０ｍｇ·ｋｇ－１添加ＤＡ标准溶液，按试验方法处
理后进行测定，每个水平做６个平行样品，计算其加
标回收率和精密度，结果见表１。
表１　精密度和回收试验结果（ｎ＝６）
Ｔａｂ．１　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｔｅｓｔｓ　ｆｏｒ　ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ
加标量
ρ／（ｍｇ·Ｌ－１）
测定总量
ρ／（ｍｇ·Ｌ－１）
回收率
／％
ＲＳＤ
／％
０．１０　 ０．０７７　 ７６．８　 １６
０．１５　 ０．１３７　 ９１．２　 １５
０．２０　 ０．１７０　 ８４．８　 １１
２．５　样品分析
采用该方法对双壳贝类中ＤＡ进行了共２０批
次的测定，在该方法的检测水平下，贝类样品中均为
未检出ＤＡ。同时进行了添加量为０．２ｍｇ·ｋｇ－１的
加标回收试验，根据回收率计算平均数（ｘ）及标准
差（Ｓ），以ｘ为中心线，以ｘ±Ｓ为上下辅助线，以
ｘ±２Ｓ为上下警告线，以ｘ±３Ｓ为上下控制线，绘制
ＤＡ的加标回收率的质量控制图，见图２。
图２　软骨藻酸加标回收率质量控制图
Ｆｉｇ．２　Ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｃｈａｒｔｓ　ｏｆ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ａｄｄｉｔｉｏｎ
ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ
分析软骨藻酸加标回收率质量控制图发现：落
在ｘ±Ｓ范围内的点占总点数的７５％，大于６８％；
不存在连续７个点位于中心线的同一侧；所有点距
中心线的距离均未超过３个标准差；不存在连续
７点上升或下降；在相邻的三点中不存在两点屡屡
接近控制线。结果表明：采用该方法对贝类中软骨
藻酸的检测过程中不存在异常情况，检验分析过程
处于控制状态，样品的分析结果有效。
２．６　ＵＨＰＬＣ和ＨＰＬＣ的比较
文献［１７－１９］中，ＤＡ的 ＨＰＬＣ中流动相的流量
为０．５～１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，ＤＡ 的保留时间为５～
１７ｍｉｎ，而本方法的流动相流量为０．２ｍＬ·ｍｉｎ－１，
ＤＡ的保留时间为２．３ｍｉｎ，在保证分离度的情况
下，大大缩短了分析时间，节省了溶剂使用量。
本工作基于贝类产品中记忆缺失性贝类毒素
ＤＡ的前处理方法，并结合色谱分析技术，选择
·８９３１·
褚莹倩等：超高效液相色谱法快速测定贝类中的软骨藻酸残留
Ｏａｓｉｓ　ＭＡＸ柱为固相萃取柱，建立了贝类中ＤＡ的
ＵＨＰＬＣ分析方法。方法灵敏、稳定且可靠，适用于
贝类中记忆缺失性贝毒ＤＡ的日常检测。
参考文献：
［１］　ＬＥＦＥＢＶＲＥ　Ｋ　Ａ，ＲＯＢＥＲＴＳＯＮ　Ａ．Ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ
ｈｕｍａｎ　ｅｘｐｏｓｕｒｅ　ｒｉｓｋｓ［Ｊ］．Ｔｏｘｉｃｏｎ，２０１０，５６：２１８－
２３０．
［２］　吴冬梅，张雁秋，程伟，等．软骨藻酸神经毒性作用机制
研究进展［Ｊ］．生态毒理学报，２０１３，８（１）：１－６．
［３］　ＪＥＦＦＥＲＹ　Ｂ，ＢＡＲＬＯＷ　Ｔ，ＭＯＩＺＥＲ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．Ａｍ－
ｎｅｓｉｃ　ｓｈｅｌｆｉｓｈ　ｐｏｉｓｏｎ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｔｏｘｉｃｏｌ－
ｏｇｙ，２００４，４２：５４５－５５７．
［４］　ＣＬＡＹＤＥＮ　Ｊ，ＲＥＡＤ　Ｂ，ＨＥＢＤＩＴＣＨ　Ｋ　Ｒ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ，ｉｓｏｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄｓ，ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ａｎａｌｏｇｕｅｓ
［Ｊ］．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，２００５，６１：５７１３－５７２４．
［５］　ＲＥＧＵＥＩＲＯ　Ｊ，ＬＶＡＲＥＺ　Ｇ，ＭＡＵＲＩＺ　Ａ，ｅｔ　ａｌ．
Ｈｉｇｈ　ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ａｍｎｅｓｉｃ　ｓｈｅｌｆｉｓｈ　ｐｏｉｓｏｎ－
ｉｎｇ　ｔｏｘｉｎｓ　ｉｎ　ｂｉｖａｌｖｅ　ｍｏｌｕｓｃｓ　ｂｙ　ｄｉｓｐｅｒｓｉｖｅ　ｓｏｌｉｄ－ｐｈａｓｅ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ
ｕｓｉｎｇ　ａ　ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ　ｃｏｌｕｍｎ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１，
１２７：１８８４－１８９１．
［６］　马荣桧，高彦，万进，等．贝类毒素及检测技术的研究现
状［Ｊ］．食品研究与开发，２０１３，３４（２２）：１０４－１０８．
［７］　ＧＢ／Ｔ　５００９．１９８－２００３　贝类 记忆丧失性贝类毒素软
骨藻酸的测定［Ｓ］．
［８］　ＣＩＭＩＮＩＥＬＬＯ　Ｐ， ＤＥＬＬ′ ＡＶＥＲＳＡＮＯ　Ｃ， ＦＡＴ－
ＴＯＲＵＳＳＯ　Ｅ，ｅｔ　ａｌ．Ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｉｄ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ／ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　ｆｏｒ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　Ａｄｒｉａｔｉｃ　ｓｈｅｌｆｉｓｈ［Ｊ］．Ｒａｐｉｄ　Ｃｏｍｍｕ－
ｎｉｃａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，２００５，１９：２０３０－２０３８．
［９］　ＲＥＧＵＥＩＲＯ　Ｊ，ＭＡＲＴＩＮ　Ｅ，ＬＶＡＲＥＺ　Ｇ，ｅｔ　ａｌ．
Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｓｈｅｌｆｉｓｈ　ｂｙ
ｏｎ－ｌｉｎｅ　ｃｏｕｐｌｉｎｇ　ｏｆ　ｗｅａｋ　ａｎｉｏｎ　ｅｘｃｈａｎｇｅ　ｓｏｌｉｄ－ｐｈａｓｅ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｄｉｏｄｅ　ａｒｒａｙ　ｄｅ－
ｔｅｃｔｉｏｎ－ｔａｎｄｅｍ　ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓ－
ｔｒｙ，２０１１，１２９：６７２－６７８．
［１０］　ＴＯＲ　Ｅ　Ｒ，ＰＵＳＣＨＮＥＲ　Ｂ，ＷＨＩＴＥＨＥＡＤ　Ｗ　Ｅ．
Ｒａｐｉｄ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｓｅｒｕｍ　ａｎｄ　ｕ－
ｒｉｎｅ　ｂｙ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ　ｔａｎｄｅｍ
ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ
Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，５１（７）：１７９１－１７９６．
［１１］　ＧＡＲＴＨＷＡＩＴＥ　Ｉ，ＲＯＳＳ　Ｋ　Ｍ，ＭＩＬＥＳ　Ｃ　Ｏ，ｅｔ　ａｌ．
Ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｔｏ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ，ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｕｓｅ　ｉｎ
ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ　ｆｏｒ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｓｅａ　ｗａｔｅｒ　ａｎｄ　ｓｈｅｌ－
ｆｉｓｈ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒａｌ　Ｔｏｘｉｎｓ，１９９８，６：９３－１０４．
［１２］　ＹＵ　Ｆｅｎｇ－ｙｉｈ，ＬＩＵ　Ｂｉｎｇ－ｈｕｉ，ＷＵ　Ｔｉｎｇ－ｓｈｕａｎ，ｅｔ
ａｌ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ａ　ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ　ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄ　ｉｍｍｕ－
ｎｏｓｏｒｂｅｎｔ　ａｓｓａｙ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ
ｉｎ　ｓｈｅｌｆｉｓｈ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００４，５２（１７）：５３３４－５３３９．
［１３］　刘淑娟，赵晓祥，王茜，等．软骨藻酸快速检测方法技
术研究［Ｊ］．上海交通大学学报：农业科学版，２０１４，
３２（２）：１０－１４．
［１４］　ＳＭＩＴＨ　Ｄ，ＫＩＴＴＳ　Ｄ　Ｄ．Ｅｎｚｙｍｅ　ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ　ｆｏｒ
ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｍｕｓｓｅｌ　ｅｘｔｒａｃｔｓ
［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，
１９９５，４３（２）：３６７－３７１．
［１５］　ＺＨＡＯ　Ｊｉａｎ－ｙｉｎｇ，ＴＨＩＢＡＵＬＴ　Ｐ，ＱＵＩＬＬＩＡＭ　Ｍ　Ａ．
Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ－ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｉｓｏｍｅｒｓ　ｉｎ
ｓｅａｆｏｏｄ　ｂｙ　ｃａｐｉｌａｒｙ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏ－
ｒｅｓｉｓ，１９９７，１８：２６８－２７６．
［１６］　ＺＨＯＵ　Ｗｅｎ－ｈｕｉ，ＧＵＯ　Ｘｉｕ－ｃｈｕｎ，ＺＨＡＯ　Ｈｅｎｇ－
ｑｉａｎｇ，ｅｔ　ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ　ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ　ｐｏｌｙｍｅｒ　ｆｏｒ　ｓｅｌｅｃ－
ｔｉｖｅ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｏｍｏｉｃ　ａｃｉｄ　ｆｒｏｍ　ｓｅａｆｏｏｄ　ｃｏｕｐｌｅｄ
ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｄｅｔｅｒ－
ｍｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｔａｌａｎｔａ，２０１１，８４：７７７－７８２．
［１７］　卫锋，程昉，宫静宏，等．高效液相色谱法测定贝类中
的软骨藻酸［Ｊ］．色谱，２００１，１９（３）：２４８－２５０．
［１８］　吉薇，郑洁莹，曾雪萍，等．南海海域软骨藻酸（ＤＡ）贝
类毒素的 ＨＰＬＣ方法检测［Ｊ］．现代食品科技，２０１１，
２７（１）：１２０－１２２．
［１９］　周秀锦，周向阳，郑斌，等．ＨＰＬＣ法快速检测记忆缺
失性贝毒软骨藻酸［Ｊ］．浙江海洋学院学报：自然科学
版，２０１２，３１（５）：２１１－２１４．
·９９３１·