全 文 ：第 28卷 第 10期
2 0 10年 10月
中 华 中 医 药 学 刊
CH INESE ARCH IVES OF TRAD IT IONAL CH INESE MED IC INE
Vo.l 28 N o. 10
O c.t 2 0 1 0
中
药
研
究
扫
描
中华中医药
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学刊
HPLC法同时测定南葶苈子中槲皮素
山柰素及异鼠李素的含量
马梅芳1,张岱州 2,李 洁3
( 1枣庄市药品检验所,山东 枣庄 277102; 2. 山东省医药工业研究所, 山东 济南 250100;
3.山东中医药大学, 山东 济南 250355)
摘 要:目的:建立南葶苈子中槲皮素、山柰素及异鼠李素的含量测定方法。方法: 色谱柱: D iamond - C18
( 4. 6mm @ 250mm, 5Lm) ;流动相: 甲醇 - 0. 4%磷酸溶液 ( 50 B50 ); 检测波长: 360nm; 流速: 1. 0m L /m in; 柱温:
30e 。结果:槲皮素在 01 1184~ 0. 8288Lg范围内, r= 0. 9995,加样回收率 99. 46% , RSD = 0. 98% ( n = 6); 山柰素
在 01 0258~ 0. 1806Lg范围内, r = 0. 9994, 加样回收率 98. 75% , RSD = 1. 30% ( n = 6); 异鼠李素在 0. 0444 ~
013108Lg范围内, r= 0. 9994, 加样回收率 98. 77% , RSD= 1. 47% ( n = 6)。结论: 该方法操作简便、准确, 重复性
好,可用于南葶苈子中槲皮素、山柰素及异鼠李素的含量测定。
关键词:南葶苈子;槲皮素; 山柰素;异鼠李素; H PLC; 含量测定
中图分类号: R284. 1 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2010) 10 -2210 - 03
SimultaneousDeterm ination ofQuerce tin Kaempferol and Isorhamnetin in
Descurain ia Sophia (L. ) W ebb ex P rantl by HPLC
MA M ei-fang1, ZANG Dai-zhou2, L I Jie3
( 1. Zao Zhuang In stitu te ofD rug C on tro,l Zaozhuang 277102, Sh andong, Ch ina;
2. Shandong In stitu te ofM edicine Indu stry, Jinan 250100, S handong, Ch ina;
3. S handong Un iversity of TCM, Jinan 250355, Shandong, Ch ina)
Abstrac t: Ob jective: To de te rm ine the Quercetin, Kaem pfero l and Iso rhamne tin inD escura in ia Soph ia ( L. ) W ebb ex
P ran tl by HPLC.M ethod s: The column emp loyed w as D iam ond - C18Colum n ( 4. 6mm @ 250mm, 5Lm ); the m ob ile phase
wasm e thano l -0. 4% phospho ric acid( 50 B50); the flow rate wa s 1. 0m l /m in and de tec tion was effected at 360nm. R e-
sults: The linea r range of Que rcetin was 0. 1184~ 0. 8288Lg ( r = 0. 9995 ), the m ean recovery w as 99. 46% , RSD =
0. 98% ( n = 6), the linear range o f Kaem pfero l was 0. 0258~ 0. 1806Lg ( r= 0. 9994), the m ean recove ry wa s 98. 75% ,
RSD= 1. 30% ( n = 6); the linea r range of Isorhamnetin w as 0. 0444~ 0. 3108Lg ( r= 0. 9994), the m ean recove ry w as
98. 77% , RSD= 1. 47% ( n= 6). Conc lusion: Thism e thod is sim ple, rapid and accurate w ith good reproducibility, it is
suitab le for the quality con tro l ofDescurainia Soph ia ( L. ) W ebb ex P rant.l
Keywords: Descurain ia Soph ia ( L. ) W ebb ex P rant;l Querce tin; K aemp fe ro ;l Isorhamnetin; HPLC; Dete rm ina tion
收稿日期: 2010 - 05 - 11
作者简介:马梅芳 ( 1973 - ) ,女, 山东枣庄人,主管中药师, 研究方
向:中药质量控制。
南葶苈子为十字花科植物播娘蒿 [D escura inia Soph ia
( L. ) W ebb ex P ran tl]的干燥成熟种子, 味辛、苦, 性大寒,
具有止咳平喘、消肿利尿、强心之功效, 临床应用十分广泛,
主治痰涎咳喘,水饮内停,肺源性心脏病等。化学成分研究
表明 [1 - 3], 南葶苈子中含有槲皮素、山柰素、异鼠李素以及
它们的苷等黄酮类化合物。药理研究表明 [4 - 6], 槲皮素具
有抗菌、抗病毒、抗炎、止咳、祛痰、平喘、抗心率失常、降低
血压、增加冠脉血流量、降血脂、抗过敏等作用;山柰素具有
抗菌、抗炎、止咳、祛痰、增强免疫等作用; 异鼠李素具有扩
张冠状动脉、增加冠脉血流量、降低胆固醇、抗脂质过氧化
等作用;均与南葶苈子止咳化痰、泻肺平喘,治疗各种类型
心衰等多方面临床疗效密切相关, 是南葶苈子中重要的有
效成分。因此测定槲皮素、山柰素、异鼠李素的含量对于控
制南葶苈子药材的质量具有重要意义。
1 仪器与试药
SP - 8810高效液相色谱仪; Spectra 100检测器; N2000
色谱工作站;超声波药品处理机 (济宁金百特电子有限公
司 ); sarto rius电子天平。槲皮素对照品 (中国药品生物制
品检定所,批号 100081) 200406); 山柰素对照品 (中国药
品生物制品检定所, 批号 110861) 200304); 异鼠李素对照
品 (中国药品生物制品检定所, 批号 110860) 200406); 甲
醇为色谱纯;水为纯净水; 其余试剂均为分析纯。山东、河
北、江苏、陕西、河南、安徽、湖北、内蒙古 8个省 (自治区 )
的 2009年的南葶苈子样品,经山东中医药大学石俊英教授
鉴定为十字花科植物播娘蒿 Descurain ia soph ia ( L. ) Webb
ex P rant.l的种子。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 [7 ]
色谱柱: D iam ond - C18 ( 4. 6mm @ 250mm, 5Lm ); 流动
相:甲醇 - 0. 4%磷酸溶液 ( 50 B50 ); 检测波长: 360nm; 流
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DOI：10.13193/j.archtcm.2010.10.196.mamf.069
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速: 1. 0m L /m in;柱温: 30e ; 进样量: 20LL; 理论塔板数按槲
皮素峰计算应不低于 2500;分离度大于 1. 5。在此条件下,
对照品溶液与供试品溶液色谱图见图 1。
A对照品溶液色谱图
B供试品溶液色谱图
1槲皮素 2山柰素 3异鼠李素
图 1 高效液相色谱图
2. 2 线性关系考察 精密称取五氧化二磷干燥器中减压
干燥 48h以上的槲皮素、山柰素、异鼠李素对照品适量,置
容量瓶中,以甲醇溶解并定容 ,再以甲醇稀释成 7个系列浓
度的对照品溶液,分别精密吸取 20LL, 注入高效液相色谱
仪,按上述色谱条件测定峰面积, 以峰面积 ( A )对进样量
( C )回归, 得回归方程分别为: 槲皮素 A = 3763431C -
103810 r= 0. 9995,线性范围 0. 1184~ 0. 8288Lg; 山柰
素 A= 4567172C + 5125 r= 0. 9994, 线性范围 01 0258
~ 0. 1806Lg; 异鼠李素 A = 4298404C + 7100 r =
019994, 线性范围 0. 0444 ~ 0. 3108Lg。表明在线性范围
内,槲皮素、山柰素、异鼠李素吸收峰面积与各自进样量之
间均存在良好的线性关系。
2. 3 精密度实验 取同一浓度对照品溶液, 按上述色谱
条件,连续进样 5次, 测得槲皮素 RSD = 0. 77% ; 山柰素
RSD= 0. 95% ; 异鼠李素 RSD = 0. 89% ; 表明仪器精密度良
好。
2. 4 稳定性实验 取同一供试品溶液, 分别于制备 0, 2,
4, 6, 8h后进样测定并计算。槲皮素 RSD = 1. 05% ;山柰素
RSD= 1. 43% ; 异鼠李素 RSD = 1. 22% ; 表明供试品溶液在
制备后 8h内基本稳定。
2. 5 重复性实验 取同一样品, 平行制备 5份供试品溶
液,按上述色谱条件测定并计算。槲皮素 RSD= 0. 58% ; 山
柰素 RSD= 0192% ;异鼠李素 RSD= 0. 67% ; 表明方法的重
现性良好。
2. 6 加样回收率实验 取已知含量样品粉末 1g, 精密称
定,加入一定量槲皮素、山柰素、异鼠李素对照品, 按样品测
定方法测定并计算, 槲皮素平均加样回收率 99. 46% , RSD
= 0. 98% ; 山柰素平均加样回收率 98. 75% , RSD= 1. 30% ;
异鼠李素平均加样回收率 98. 77% , RSD = 1. 47% ; 表明测
定方法准确、可靠。
2. 7 样品测定 取南葶苈子样品粉末 1g, 精密称定, 置索
氏提取器中,加石油醚 ( 60~ 90e ) 100m L, 回流提取至提取
液无色,弃去溶剂, 药渣挥干, 加甲醇 100m L回流提取 4h,
提取液蒸干,残渣精密加入甲醇 - 25%盐酸溶液 ( 4 B1 )混
合液 50m L,称定重量, 加热回流 1h, 放冷, 用甲醇补足损失
的重量, 0145Lm微孔滤膜滤过后, 作为供试品溶液。分别
精密吸取供试品溶液和对照品溶液各 20LL,注入高效液相
色谱仪,按上述色谱条件测定, 计算。结果见表 1。
表 1 南葶苈子中槲皮素 山柰素
异鼠李素含量测定结果 ( n= 3, % )
样品
编号 产地
槲皮素
含量 RSD
山柰素
含量 RSD
异鼠李素
含量 RSD
1 山东滨州 0. 0702 0. 68 0. 0154 1. 76 0. 0367 0. 93
2 河北保定 0. 0599 0. 50 0. 0115 1. 52 0. 0288 0. 70
3 河北安国 0. 0562 0. 74 0. 0108 2. 45 0. 0283 1. 17
4 江苏南通 0. 0558 0. 59 0. 0108 2. 00 0. 0283 0. 97
5 内蒙古赤峰 0. 0583 0. 61 0. 0119 1. 90 0. 0303 1. 19
6 陕西商洛 0. 0539 0. 66 0. 0102 1. 26 0. 0279 1. 28
7 湖北宜昌 0. 0565 0. 80 0. 0104 0. 90 0. 0289 1. 47
8 安徽亳州 0. 0574 1. 04 0. 0118 2. 66 0. 0315 1. 24
9 河南南阳 0. 0570 0. 66 0. 0109 2. 90 0. 0292 0. 43
3 讨 论
3. 1 样品前处理方法的选择 考虑到南葶苈子中含有大
量的脂肪油,实验过程中笔者比较了是否有必要先脱脂再
提取测定。结果显示,不脱脂样品由于甲醇可以提出部分
脂肪油, 制备的供试液中有大的油滴, 无法保证最终进样均
匀一致,故确定先脱脂再提取测定。脱脂溶剂笔者比较了
乙醚、氯仿、石油醚,其中乙醚沸点较低, 氯仿毒性较大, 且
均对游离型的槲皮素、山柰素、异鼠李素有一定溶解度, 而
石油醚不会造成槲皮素、山柰素、异鼠李素的溶解损失, 且
毒性较低,沸点适中, 操作起来相对也较为安全, 故确定石
油醚 ( 60~ 90e )为脱脂溶剂。
3. 2 样品提取方法的选择 根据文献报道 [ 1 -3 ], 并通
过预试证实,槲皮素、山柰素、异鼠李素在南葶苈子中主要
以苷的形式存在,必须经过水解以后才能检测。提取方法
笔者比较了¹ 酸水 -甲醇直接回流提取; º先甲醇提取,提
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收稿日期: 2010 - 05 - 28
作者简介:吕悦 ( 1978 - ),男,辽宁大连人,主治医师,硕士,研究方
向:中医内科。
取物再用酸水 -甲醇回流水解。结果显示,方法¹ 提取液
中杂质太多,影响槲皮素、山柰素、异鼠李素的分离,而方法
º提取完全,除杂质较好。故确定先用甲醇提取,再用酸水
-甲醇回流水解。
3. 3 回流水解时间的选择 回流水解时间笔者比较了 0.
5h、1h、1. 5h、2h,结果显示, 回流 1h即可以水解完全, 回流
1. 5h后,各组分含量则开始下降,故确定回流水解时间 1h。
3. 4 提取时间的选择 提取时间笔者比较了 2h、3h、4h、
5h,结果显示, 4h以后, 延长提取时间, 测得各组分含量不
再增加,故确定提取时间 4h。
4 结 果
实验结果表明,不同产地的南葶苈子样品中槲皮素、山
柰素、异鼠李素的含量有一定差异。其中山东滨州产的南
葶苈子槲皮素、山柰素、异鼠李素的含量最高, 分别达
010702%、0. 0154%、0. 0367% , 陕西商洛产的南葶苈子槲
皮素、山柰素、异鼠李素含量最低, 分别为 0. 0539%、
01 0102%、0. 0279%。可见, 产地对南葶苈子药材中槲皮
素、山柰素、异鼠李素的含量有一定的影响。
5 结 论
HPLC法同时测定南葶苈子中槲皮素、山柰素及异鼠
李素的含量,操作简便、准确、重现性好、加样回收率高, 为
控制南葶苈子药材质量,提供了新的依据。
参考文献
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2003, 20( 6 ) : 419 - 421.
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杂志, 2003, 13( 4 ): 233, 248.
[ 3 ] 王爱芹,王秀坤,李军林, 等.南葶苈子化学成分的分离与结
构鉴定 [ J].药学学报, 2004, 39( 1) : 46 - 51.
[ 4 ] 孙文基,绳金房.天然活性成分简明手册 [M ].北京:中国医
药科技出版社, 1998.
[ 5 ] 季宇彬.中药有效成分药理与临床 [M ].哈尔滨: 黑龙江科学
技术出版社, 1995.
[ 6 ] 陈蕙芳.植物活性成分辞典# 一册 [M ].北京:中国医药科技
出版社, 2001.
[ 7 ] 国家药典委员会。中国药典# 一部 [S ].北京:化学工业出版
社, 2005: 220.
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中药益糖康胶囊的药代动力学研究
吕 悦1,石 岩 2,杨宇峰2
( 1.大连市第二人民医院 ,辽宁 大连 116021; 2. 辽宁中医药大学,辽宁 沈阳 110847)
摘 要:目的:对益糖康胶囊在家兔体内的药代动力学特征进行初步研究, 为益糖康胶囊的进一步的研究和
临床应用提供依据。建立家兔血浆内盐酸小檗碱的含量测定方法, 研究灌胃给药后, 盐酸小檗碱在家兔体内的药
代动力学规律。方法:采用高效液相色谱法 ( HPLC )测定中药益糖康胶囊中主要成分盐酸小檗碱在血浆中随时
间变化的浓度变化, 并据此描绘盐酸小檗碱在兔体内的药物代谢 -时间曲线。结果: 对家兔予中药益糖康灌胃
后,益糖康中盐酸小檗碱能迅速被吸收,达峰时间短, 吸收速度快,消除速度快。其含量在 5m in内达到高峰, 之后
盐酸小檗碱的含量随时间推移而迅速降低, 2h后盐酸小檗碱含量降到最低。
关键词:益糖康;盐酸小檗碱; 药代动力学;高效液相色谱法
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1673 - 7717( 2010) 10 -2212 - 03
Pharmacokinetics ofY i- Tang -Kang Capsule
LU Yue1, SH IYan2, YANG Yu-feng2
( 1. Dalian S econd Peop lesH osp ita,l Dalian 116021, L iaon ing, C hina;
2. Liaoning Un iversity ofTCM, S henyang 110847, L iaoning, C hina)
Abstrac t: Objective: The purpo se of th is study is to estab lish a quantitative m easurem ent fo r berberine hydroch lo ride
in cony blood plasm a a fte r feed w ith Y i- Tang -K ang and the pharm acokinetic sw as studied using thism ethod. M ethod:
The concentration o f berbe rine hyd roch lo ride in the plasm a was a ssayed by theHPLCm ethod. Then acco rding to the resu lt
to de scribe the a rcua tion of pharm acokinetic s. Result: A fter feed rabbit w ith Y i- Tang -K ang, the be rbe rine hydroch lo ride
can be ingest rap id ly. The contents of be rberine hydrochloride in the p lasm a is max lm um in fivem inu te s. W ith tim e past,
the con tents of berberine hyd roch lo ride is reduce. It is reach m in imum leve l a t two hours afte r feed.
Keyw ords: Y i -Tang -Kang; berbe rine hydrochloride; pharm acokinetic; H PLC
益糖康胶囊是一种治疗糖尿病及其并发症的中药新
药,由红参、黄连、黄柏、葛根、枸杞、五味子、三七等十二味
药物组方。从抗 DNA损伤、降糖、降脂三方面对糖尿病及
其并发症进行治疗。笔者采用高效液相色谱法 ( HPLC )对
中药益糖康胶囊中主要成分盐酸小檗碱药代动力学特征进
行初步研究,为益糖康胶囊的进一步的研究和临床应用提
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