全 文 ：兰 州 大 学 学 报 (自 然 科 学 版 ), 1 0 5。 , 2 5 ( s ) : 1 14 ` 1 1 7
J O U R N A L O F L A N Z H O U U N IV E RS IT Y ( N
a t u r a l S e ie n e e , )
几种植物生长调节剂对伊 贝母愈伤组织
生长量和贝母碱蓄积量的影响 *
贾廷耀 吴玛丽 代秀英 王仑山
(甘肃省科学院生驹如所 ) ( 兰州 大学生物 系 )
摘 要 本 文 用正 交试脸方法研完 了伊 贝毋组织 培养中几种植物生 长调 节剂时愈伤 组织 生 长量和 贝
毋碱蓄积量 的影 响 . 结果表明 . 适 宜的培养基组合不仅可加速愈伤组 织 的生长 , 同 时也可提高贝母城
的含童 . 证 明 了离体培养的贝毋愈伤组 织 同样具有生 物 合成 次 生物 质— 贝毋碱的 全能性 , 这就为贝母 组织培养用于商业性生产提供了一些 依据 .
关键词 伊 贝母 . 组织培养 , 贝毋城 .
伊 贝母 ( F r i t `Il a r i a · P a l l￡d i f l o r a s e h r e n k )是百合科贝母属多年生草本植物 , 它和
浙贝 、 川贝一样 , 都是名贵中药材 , 以鳞茎入药 , 其有效成 分是`贝母碱 川 . 由于贝母
生长周期长 (约需 5~ 6年 ) , 无性繁殖系数低 (只有 1 . 5一 1 . 6) , 所以市场供需矛盾十分突
出 . 为解决这一问题 , 有的作者 已用组织培养方法加速其繁殖 「“ 一 ` ’ . 但 通 过组织培养
愈伤组织的生长量及其 贝母碱含量的变化还未见报道 . 已有不少资料报道了利用组织培
养方法生产有用化合物 ` 5 一 8 ’ ,本文是 .这方面工作的一部分 , 以期为贝母植物通过组织培
养方法直接生产药用贝母碱提供一些依据 .
1 材料和方法
供试材料 为大田栽培的伊 贝母鳞茎诱导形成的愈伤组织 . 选取颜色 、 质地比较一致
的愈伤组织切成小块混匀后 随机取切块转接在 M S固体培养基上 .
生长调节物质为茶乙酸 ( N A A ) 、 6一节氨基嚓吟 ( 6一 B A ) 、 激动 素 ( K T )和水解乳
旦白 ( L H )共四种 . 实验用正 交方法安排 `” , 每个因素各取三个变量水平 ( N A A 为。 . 5 、
1
.
5和 2 . 5毫克 /升 , 6一 B A 为 0 . 0 、 0 . 5和 1 . 0毫克 /升 , K T 为0 . 0 、 1 . 0和 2 . 0毫克 /升 , L H
为。 、 1 0 0和 20 。毫克 /升 ) . 蔗糖浓度 4 肠 , 琼脂 0 . 65 肠 , p H S . 6 ~ 5 . 8 , 培养 温 度 为25 ℃
士 , 室 内自然光线辅之以一定时间的 1 50 0 L u x 的人工光照 . 愈伤 组织 的生长量 (鳞重增
殖量 )按一定培养时间内 , 1克培养物每天增加的鳞重 (毫克 )计 算 , 每一处理材料及对照
( 已生长 5年的鳞茎 )蓄积的贝母碱百分含量按张秀琴等 “ ” ’ 的方法进行测定 .
2 结果和讨论
不同因素处理结果见附表和附图 . 可以看出 , 因素与因素水平对考察指标有明显的作
甘 肃省 自然科学墓金资助课 题 .
本 文 1 0 5 5年 1 0月 1 5日收至】.
DOI : 10. 13885 /j . i ssn. 0455 -2059. 1989. 03. 021
第三期 几种植物生长调节剂对伊贝母愈伤组织生长量和贝母碱蓄积量的影响
附表 几种植物生长调节剂对伊贝母组织培养中愈伤组织生长皿
和贝母碱含最影响的正交试验方案与结果分析
1 1 5
L
。
( 3
`
)
试 验 号 因 素 ( 毫克 /升 )考 察 指 标
12 34
N A·
{
。一 KT L H生长速 度 贝毋城含全
( 奄克 /克 /日 ( )拓 )
l 1( 0
.
5)l ( 0
.
0 ) 3( 2
.
0 )2 ( 0 10 ) 94
.
2 0
.
!8
2 ( 1
.
5 )一( 0
.
0 ) 1( 0
.
0 ) 1( 2 0 0 )2 3( 2
.
5 ) 1( 0
.
0 )2 ( 1
.
0 ) 3( o )2 3
.
50
.
12
一( 0
.
5 )2 ( 0
.
5 )2 ( 2 0 )l ( 2 0 0 )
32 ( 1
.
5 ) 3( o )6 3
.
0 0
.
17
3( 2
.
5 )2 ( 0 0 1 )
4 1( 0
.
5 ) 3( o )2 2
.
10
.
15
2 ( r
.
5 )2 ( 10 0 )
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.
5 )2 ( 0
.
5 ) 3( 2
.
0 ) 1( 2 0 0 )4 5
.
70
.
0 7
52 ( 0
.
5 )
3( 1
.
0 )l ( 0
.
0 ) 54
.
2 0
.
6 1
6 3( 2
.
0 ) 1( 0
.
0 )
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.
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.
0 )
74 5
.
0 0
.
0 9
8 78
.
6 0
.
18
3( 2
.
0 )2 5
.
0 3
.
12
.
9
愈 K i 16 1 .3 18 0 .7 12 2 .7 70 .9注 : 对照的 贝毋碱百 分含
伤 K 3 14 7 .8 12 2 .0 16 3 .72 2 7 .0 量 为。 .0 1男
组 K: 14 2 .5 14 8 .9 16 2 5 1 5 3 .7
织 R i 5 3 .8 6 0 .2 4 0 92 3 .6
生 R : 4 9 .34 0 .7 54 .6 7 5 .7
长 R 34 74 5 9 .6 5 5 .1 5 1 .2
速 R 6 .3 19 .5 14 .2 52 .1
度
贝 K i0 4 2 0 4 0 7 .370 3 9
毋 K2 0 .0 37 .8 30 .0 5 Q .2 5
城 K。 .0 .4 0 5 .3 90 .3 70 3 3
含 R 10 .4 0 1 .16 0 .2 0 1 .1 3
全 R 2 0 .12 0 .10 0 3 17 .17
R 30
.
10 5
.
0 1 3
.
12 0
.
1 1
R 0
.
0 0 3
.
0 0 3
.
0 0 5
.
06
1 1 6兰 州 大 学 学 报 一 5 9 9年 9月
用 .从极差 R值及示意图上看 , 四个因素对生长速度的影响依次是 L H > 6一 B A > K T >
N A A
, 而对贝母碱的蓄积来说 , 其作用大小依次是 L H > K T > 6一 B A 二 N A A .
从 N A A来看 , 在 0 . 5~ 2 . 5的范围内 , 低浓度 N A A有 利于 生长 , 而高浓度的 N A A
则有利于贝母碱的合成 . 6一B A 似乎对生长和合成均不利 . K T 的作用是 , 在浓度为 l p p m
. 愈伤组织生长量
0 贝母喊含员
产./ /.丫扮火
汗|.IJ寸补1ó了丹05
泪日降义
以下时 , 随着浓度的增加 , 生
长和合成均有增长的趋势 , 而
超过 l p p m时 ,生长 量 很 少 增
加 , 贝母碱的蓄积量反而明显
下降 . 从 L H来看 , I O 0 p p m 的
用量对生长和合成都有显著的
促进作用 , 如果加 大 用 量 到
Z o o p p m
, 对合成和生长 均 有
抑制作用 , 尤其对生长的抑制
作用甚更 . 由此得出 , 有利 子
愈伤组织增殖的适 宜 组 合 是
N A A ( 0
.
5毫克 / 升 或 以 下 )
+ K T ( 2
.
0毫克 /升或 以上 ) +
.l0丫 、 八 /
0 5 1
.
5
N A A
0 5 1
.
0
6 一 B A
1
.
0 2
K T
0 10 0 艺O() 因素水平
附 图 因素水平对 K S值作用示意图
L H ( 1 0 毫克 /升 ) , 这一结论与表 1所得的第 l 号试验方案基本上相符 . 由图 1 还 可 推 测
出 , 贝母碱的合成以 N A A ( 2 . 5毫克 /升或以上 ) + K T ( 1 . 0毫克 /升 ) + L H ( 1 0 毫克 /升 )
较为合适 . 既有利于愈伤组织的生长又可增加 贝母碱蓄积量的可能组合以 N A A ( 0 . 5毫
克 /升 ) + K T ( 1 . 0毫克 /升 ) + L H ( 1 0 0毫克 /升 )为宜 . 如再安排一些因素水平 , 可望得到
更好的结果 .
实验结果说明 , 离体培养的贝母愈伤组织 , 同样具有生物合成次生物质— 贝母碱的全能性 . 只要选择适 当的培养基 , 既可以使培养组织快速生长 , 同时又能蓄积贝母碱
并且 使含量赶上并大大超过未经培养的组织 . 如通过试验能进一步提高生长速度 , 特别
是提 高贝母碱含量以及改进生产技术 , 进行贝母的组织培养实现其贝母碱的商业化生产
还是大有希望的 .
从实验还可看出 , 正交试验在多因素条件下应用不仅可以迅速 、 准确 、 科学地确定
工艺条件 , 而且可以获得有效的试验结果 . 克服了试验的盲 目性 , 节省了人力 、 物力 、
财力 , 所以有很大的优越性 .
参 考 文 献
朱子清 . 化学通报 . 1 9 7 9 ; 14 : 14
孙敬三等 . 植物学报 . 19 7 7 ; 1。 ( 2 ) : 1 6 1
郝玉蓉等 . 西北植物研究一 9 5 2 ; 2 ( 1 ) : 3 5
王仑 山等 . 兰州大学学报 ( 自)一 9 5 5 ; 2 4 (一) : 1 0 9
N i e k e l l
,
L
.
G
.
P l a n t T i s s u e C u t t
u r e a s a S o u r e e o f B i
o e h e m i c a l s
.
E
.
J
.
S t a b a (
e d
.
)
,
C R C P r e s s
,
I n e
. ,
B o c a R a t o n
.
F l
.
1 9 8 0
: 2 3 5~ 2 6 9
飞lJ t.f .1,J门上23
第三期 几种植物生 一长调节剂对伊贝母愈伤组织生长量和贝母碱蓄积 量的影响 1 17
[ 6〕
〔 7 〕
[ 8 〕
[ 9〕
〔1 0」
郑光植 . 植物生理学通讯 . 1 8 9。 ; 4 : 1
何卓培 . 植物生理学通讯 . 1 98 3; 4 : 8
郑光植等 · 植物字报 · 1 7 9 6; 1 8 ( 2人 1 6 3 , 扭’ 二
杨纪坷等 . 应用统计学 . 科学出版社 . 19 83 : 2 42 ~ 2 65
张秀琴等 . 中草若通讯 · ,即户万谷 ` 3 ;” ` : ` !
E f f e e t s o f S e v e r a l R e g u l a t o r s o f P l a n t G r o w t h
o n G r o w t h A m o u n t a n d P e i m i n e A e e u m u l a t i o n i n
F
.
P a l l i d i f l o r a s e h r e n k C a l l i
J i
a T i gn 夕 a o 附 u M a l i D a毛
( I
n , t it u t e o f B io lo g y
,
G a n , u A e a d e
戈 .幼y . 打g
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附 a gn L u n s h a n
( D
e p a r t m e n t o f B i o lo g y
,
L a o z h o u U n iv e r g it y )
A b s t r a e t
兮
B y m e a n s o f p o s i t i v e e r o s s e x P e r i m e n r t h e a u t h
o r s
h a
v e s t u d i e d t h e
e f f e e t s o f s e v e r a l r e g u l a t o r s o f p l
a n t g r o w t h o n g r o w t h a m o u n t s a n d p e i
-
m i n e a e e u m u l
a t i o n s i n e a l l i
.
T h e r e s u l t s h o w e d
,
t h a t t h e s u i t a b l e m e d i u m
g r o u P n o t o n l y e a n s P e e d u p t h e g r o w t h o f e a l l u s
,
b u t a l s o r a i s e p e i m i n e
e o n *e n t s
.
I t d
e m o n s t r a t e d t h a t F
.
P a ll id i f lo
r a e a l l i o f i s o l a t i n g e u l t u r e
l i k e w i s e p o s s e s s t o t i p o t e n e v o f s y n t h s i z i n g s e e o n d a r y m a t e r i a l
s 一 P e i m i n e
.
T h i s o f f e
r s e v i d e n e e f o r e o m m e r e i a l p r o d u e t i o n o f t i s
s u e e u l t u r e o f F
.
P a l l i d i f l o r a
.
K e y W o r d s
:
F
.
P a l l id i f l o r a
s e h t e n k
,
T i s s u e e u l t u r e
,
P e i m i n e
.
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