全 文 ：较高 ,为 16%。寄生蜂幼虫老熟后在寄主蛹内化
蛹 ,羽化时在寄主蛹胸部咬成圆形小孔爬出 ,羽化多
在寄主羽化末期 ,总寄生率为 23%。
2.4　发生与环境的关系　野外调查发现 , 云杉梢
斑螟发生危害受海拔 、坡向 、 温度 、 降水及林分 、
立地条件等多方面因子的影响 , 具有明显差异。一
般低海拔重于高海拔 , 坡下部重于中 、 上部 , 半阴
坡重于阴坡 , 且半阴坡越冬幼虫较阴坡提早 2 ～ 3 d
活动 , 纯林重于混交林 , 林缘及郁闭度较低的林分
发生较重 , 林相整齐 、生长旺盛 、 郁闭度大的林分
发生较轻;成虫羽化期如遇连续降雨 , 特别是大风
雨会使成虫大量死亡 , 从而降低产卵量 , 使第 2年
危害减轻 。
3　防治方法
3.1　幼虫期防治　6月上旬 ,95%幼虫处于 2 ～ 3龄
阶段 ,此时害虫食量小 ,抗性弱 ,且尚未转移到新叶
上危害 ,是防治的最佳时机 ,可使用 2.5%敌杀死乳
油 4 000倍液或 2.5%天王星乳油 5 000倍液喷雾 ,
防治效果在 95%以上 ,可迅速降低虫口密度 ,但对
天敌杀伤较大;使用 25%灭幼脲 Ⅲ号悬浮剂 3 000
倍液喷雾 ,防治效果 90%左右 ,且减少对环境污染 ,
有效的保护天敌 ,可起到长期控制害虫作用。
3.2　成虫期防治　水源困难的林区 ,在成虫羽化盛
期 ,可利用成虫具有较强趋光性的特性进行灯光诱
杀 ,以降低产卵量 ,减少虫口基数 。
(责任编辑　王瑞红)
马占相思炭疽菌的鉴定和有关生物学特性的研究
熊　英1 ,梁红艳1 ,余浩光2 ,叶志敏2 ,黄飞龙1
(1.广西大学林学院 ,广西 南宁　530001;　2.广西高峰林场 ,广西 南宁　530001)
摘要:对广西高峰林场马占相思苗木炭疽菌进行分离鉴定 ,结果表明是胶孢炭疽菌 Colletotrichum
gloeosporioides(Penz.)Sacc.和平头炭疽菌 Colletotrichum truncatum(Schw).Anolrus &Noore 。胶孢炭疽
菌菌丝在 10 ～ 35 ℃范围内能生长 ,分生孢子亦可萌发 ,适温为 20 ～ 30 ℃,分生孢子萌发需要高湿
的条件 ,在 RH=100%+水滴的条件下萌发良好;菌丝在 pH 值 3 ～ 11范围内均能生长 ,适宜的 pH
值为 5 ～ 9。平头炭疽菌菌丝生长及分生孢子萌发的条件与胶胞炭疽菌基本一致 ,不同的是 ,在试
验温度范围内 ,平头炭疽菌分生孢子的萌发率明显低于胶孢炭疽菌 ,且在 10 ℃时不萌发。两种炭
疽菌在马占相思上普遍存在潜伏侵染现象 ,且以胶孢炭疽菌较普遍。
关键词:马占相思;胶孢炭疽菌;平头炭疽菌;生物学特性
中图分类号:S763.15　文献标识码:A　文章编号:1671-0886(2003)01-0005-05
Identification of Colletotrichum spp.on Acacia mangium and its bionomics /XIONG Ying , et al.(Forestry
College ,Guangxi University ,Nanning　530001 ,China)
Abstract:The results of the identification and biological character research of Colletotrichum spp.on Acacia
mangium in Gaofeng Forestry Farm of Guangxi proved to be Colletotrichum gloeosporioides(Penz.)Sacc.and
C.truncatum(Schw.)Anolrus &Noore.The C.gloeosporioides mycelial could grow and conidium could
germinate between 10-35 ℃.The optimum temperature was 20-30 ℃.The germination of conidium needed
high humidity.The condium could germinate well in RH 100% or in water.The pH value range for mycelial
growth was 3-11 and the optimum pH value was 5-9.The condition of C.truncatum mycelial growth and conidum
收稿日期:2002-05-08
资金项目:广西高峰林场相思树短期工业用材基地高产林试验与推广。
作者简介:熊英(1964-),女 ,硕士研究生 ,实验师 ,从事林木病理学和微生物学教学与研究工作。
·5·中国森林病虫　2003年 1月　第 22卷　第 1期
germination was almost the same as C.gloeosporioides.But the conidia germination rate of C.truncatum was
obviously lower than that ofC.gloeosporioides and the conidum couldnt germinate in 10 ℃.The results also
showed that C.gloeosporioides and C.truncatum lied in Acacia mangium widespreadly and the more occurrent
was C.gloeosporioides.
Key words:Acacia mangium ;Colletotrichum gloeosporioides;Colletotrichum truncatum;bionomics
　　马占相思 Acacia mangium Willd ,20 世纪 80 年
代初从澳洲引进我国栽培 ,在桂南地区生长良好 ,是
理想的速生丰产树种 ,可用做优质的纸浆材和高密
度板材 ,经济价值日益受人们所青睐。广西高峰林
场自 20世纪 90年代中期引种马占相思以来 ,栽培
面积不断扩大 ,苗木生产量也日益增加。在育苗中
我们发现其苗木受茎腐病 、白粉病及炭疽病等危害
严重 ,其中扦插苗受炭疽菌危害发病率 25%以上 ,
导致叶子和嫩梢枯死 ,甚至整株死亡 ,严重地影响了
苗木生产。目前 ,国内尚未见有对马占相思炭疽病
的报道 。为了弄清广西马占相思炭疽菌种的分类 ,
并为防治该病提供理论依据 ,作者根据 Sutton[ 1] 在
炭疽菌分类中所采用的依据 形态学特征 、培养性
状及寄主范围 3个条件相结合 ,对在马占相思苗木
上分离得到的两种炭疽菌的形态特征 、寄主范围和
相关的生物学特性作了研究 ,并将其鉴定到种 ,现将
结果报道如下。
1　材料和方法
1.1　材料
1.1.1　供试菌株　从高峰林场中心苗圃采集马占
相思苗木炭疽病病株 ,进行常规组织分离 ,经单孢纯
化 、培养获得供试菌株2株 ,代号分别取为 C1和 C2 。
1.1.2　分生孢子悬浮液的制备　将供试菌株 C1 和
C2分别移植于 PDA平板上培养 ,10 d后用无菌水洗
下分生孢子 ,配制成分生孢子悬浮液 ,浓度 1.3×106
个/mL左右。
1.1.3　供试鉴别寄主(寄主范围测定用的树种)　
马占相思 Acacia mangium 、厚夹相思 A.crassicarpa 、
台湾相思 A.confusa 、黑木相思 A.melanoxylon 、八角
Ilicium verum 、阴 香 Cinamomum burmannii 、芒 果
Mangifera indica 、扁桃 Mangifera silvatica 、黄槐 Cassia
surattensis 、金花茶 camellia chrysanthera 。
1.2　方法
1.2.1　病原菌的鉴定
1.2.1.1　形态观察与测量　选择症状典型的病组
织做切片 , 镜检 , 观察病菌形态特征 , 并做主要特
征的显微拍摄及其大小的显微测量;将分离纯化后
的C1、 C2 分别移植到 PDA 平板上 , 置于 25 ℃、
12 h自然光照与 12 h黑暗交替条件下培养 , 逐日观
察 , 记录病原菌的培养性状 , 培养 10 d , 挑取子实
体镜检 、观察 , 拍摄并测量病菌的形态及分生孢子
大小 。分生孢子萌发产生附着胞则是在玻片上用
PCA培养基培养 (2 d)进行 , 培养温度为 25 ℃,
相对湿度100%, 其形态观察及大小测量与分生孢
子方法相同 。
1.2.1.2　致病性测定　采集马占相思健康嫩枝和
叶片 , 进行如下处理:自来水冲洗表面※70%酒精
擦拭表面消毒※无菌水冲洗※用以下 3 种方法接
种:①叶子针刺接种 , 每片叶刺 8 ～ 10个针眼;②
嫩枝伤口接种 , 新剪下嫩枝作上述处理后分别插入
两种分生孢子液中 , 浸泡深度为 2 cm , 浸 2 h 后取
出;③实生苗茎部接种 , 用无菌针头刺伤实生苗嫩
茎和茎基 , 用无菌棉蘸取孢子液敷于针刺处 , 并用
塑料带绑好保湿。将①②置于 25 ℃条件下保湿培
养 , 将③自然温度 (24 ℃～ 32 ℃)下培养 。用无
菌水代替分生孢子液接种作对照 , 每处理设 14个
重复 , 对照设3个重复 。接种后 , 逐日观察 , 记录
致病情况 , 并对接种成功的病斑进行组织分离 , 确
认致病菌株 。
1.2.1.3　寄主范围测定　分别采集供试鉴别寄主
(见 1.1.3)的健康叶片 ,进行接种试验 ,并设对照 ,
方法同1.2.1.2。每处理设 4个重复 ,接种后3 ～ 12 d
观察结果 ,并对接种成功的病斑进行组织分离 ,确认
致病菌株。
1.2.2　潜伏侵染特性的测定　从苗床上采集无病
害症状的马占相思苗木嫩枝 、叶片 ,切成 1 ～ 1.5 cm
长的组织块 ,进行表面消毒后 ,置于灭菌培养皿内保
湿培养 ,7 d后检查结果;另按常规组织分离法 ,先用
70%酒精擦拭组织块 ※置于 0.1 HgCl2 内浸泡
1 ～ 3 min※用无菌水冲洗 3次※用无菌吸水纸吸干
表面水分※置于PDA平板上培养8 ～ 12 d ,观察统计
·6· Forest Pest and Disease　Jan.2003　No.1
a　分生孢子盘　b　马占相思平头炭疽菌的分生孢子及其萌发后形成附着胞
图 2:马占相思平头炭疽菌
a　分生孢子盘　b　分生孢子及其萌发后形成附着胞
图 1:马占相思胶孢炭疽菌
炭疽菌出现的频率。从 8株无病害症状苗上取组织
块培养 ,每株取 10块 ,共 80块。
1.2.3　生物特性试验
1.2.3.1　温度 、pH值对菌丝生长的影响　用无菌
打孔器(Υ=5 mm)打取在 PDA平板上培养了 4 d的
菌落边缘的病菌组织块 ,移植到 PDA 平板上 ,分别
置于 10 、15 、20 、25 、30 、35 、40 ℃温度下培养;分别用
1 mol HCl和 1mol NaOH将 PDA培养基分别调节 pH
值为 3 、4 、5 、6 、7 、8 、9 、10 、11 ,然后倒平皿 ,将菌块分
别移植于以上不同 pH 值的 PDA平板上 ,置于 25 ℃
恒温箱中培养;上述试验每处理设 4个重复。培养
过程每2 d测量 1次菌落直径 ,共测 3次。
1.2.3.2　温度 、湿度对分生孢子萌发的影响　将
分生孢子悬浮液滴于洁净的载玻片上 ,在相对湿度
RH=100%条件下 ,置于 10、15、20 、25、30、35 、40 ℃温度
下培养 ,经 48 h随机检查 300个以上分生孢子的萌
发情况;另根据方中达小密闭容器内不同 H2SO4 浓
度调节空气相对湿度方法[ 2] ,在Υ=24 cm 的干燥器
内创造相对湿度分别是 70%、80%、90%、100%和
100%+水滴共 5个不同湿度的小环境 ,将分生孢子
悬浮液滴于洁净的载玻片上 ,阴干(RH100%+水滴
除外)后置于上述不同湿度环境下培养(t=25 ℃),
经 48 h随机检查 300个以上分生孢子的萌发情况 。
2　结果
2.1　病原菌特征 　菌株 C1:菌落圆形 ,边缘整齐 ,
菌丝稠密 ,棉絮状 ,初为白色 ,后转为灰白色或鼠灰
色 ,基质内菌丝初为白色 ,后期培养基呈淡褐色 。培
养过程中菌落有时会出现不同程度的黑褐色扇形块
变化 ,扇变部分菌丝生长旺盛 ,却很少产生分生孢
子 。一般情况下菌落上易产生黑色的分生孢子盘 ,
垫状突起 ,单生或丛生 ,圆形或近圆形 ,直径 100 ～
350μm 。刚毛混生 ,黑色 ,从基部至端部渐细 ,顶端
钝圆 ,1 ～ 4隔 , 90 ～ 150 μm×3 ～ 5 μm;分生孢子梗无
色 ,粗短 ,基部分枝 , 2 ～ 3隔 ,产孢细胞无色 ,瓶梗
状;分生孢子团桔黄色 ,分生孢子无色 ,单胞 ,圆柱形
或棒状 ,两端钝圆 ,具 1 ～ 2个油点 ,大小为 9 ～ 17.5
μm×3.1 ～ 4.4μm ,平均 12.1μm×4μm;附着胞深褐
色 ,近圆形或不规则形 , 6 ～ 14.5 μm ×4.8 ～ 10 μm
(见图 1)。
菌株 C2:菌落圆形 , 边缘
整齐 ,菌丝较稀疏 ,紧贴培养基
生长 ,初为白色 ,后为浅灰色 ,
培养过程中菌落也有扇变现
象 ,扇变部分菌丝较发达 ,绒毛
状 ,极少产生分生孢子。分生
孢子盘黑色堆状突起 ,单生至
丛生 ,近圆形 ,直径 200 ～ 500
μm;刚毛混生 ,多为黑褐色 ,从
基部至端部渐细 ,鞭状 , 1 ～ 5
个分隔 ,长 100 ～ 180 μm;分生
孢子梗无色至淡褐色 ,分生孢
子堆淡肉色(接近泥白色),分
生孢子无色 ,镰刀状 ,无分隔 ,
两端稍尖 ,大小为 14.8 ～ 28.7
μm ×2.8 ～ 4.5 μm;平均 21.2
μm ×3.7 μm;附着胞 3.1 ～ 5
μm×2.5 ～ 3.8μm ,平均4.1μm
×2.7 μm ,深褐色 ,近圆形或不
规则形(见图2)。
2.1.2　致病性测定　将分离
得到的菌株 C1 和 C2 分别人工
回接到马占相思离体嫩枝 、叶
·7·中国森林病虫　2003年 1月　第 22卷　第 1期
子和盆栽实生幼苗嫩茎部位 ,均能发病 ,且表现出与
自然条件下症状一致的病斑。菌株 C1 接种后 3 d
开始发病 ,形成圆形 、黄褐色至黑褐色病斑 ,第 4 d
后出现小黑点 ,第 5 d在子实体上出现桔黄色的分
生孢子堆 ,嫩茎接种部位及以上部分很快萎蔫死亡 ,
在嫩茎和叶子上 C1的致病率和死亡率均为 100%。
菌株 C2 接种后 5 d开始发病 ,接种部位变褐色至黑
褐色 。第 7 d出现黑色分生孢子盘 ,并相继出现淡
肉色的分生孢子堆 ,也能导致幼嫩部位死亡 ,其致病
率为 85.7%,致死率为 71.4%。对照不发病。对接
种成功的病部组织再次分离仍得到原来的菌株 ,说
明菌株C1和 C2对马占相思嫩茎和叶子有较强的致
病性 。
2.1.3　寄主范围测定　供试鉴别寄主的离体叶片
经接种后 ,菌株 C1 对 10个树种均能致病 ,潜育期一
般为 2 ～ 3 d ,第 3 d后表现出明显的症状 ,4 ～ 5 d有
灰白色的霉层和桔黄色的分生孢子堆出现;菌株 C2
接种的 10个树种中有 5个树种发病 ,它们是:马占
相思 、台湾相思 、黑木相思 、厚夹相思和黄槐 ,其余均
不发病。潜育期一般为 5 ～ 7 d ,一周后症状明显 ,
10 ～ 12 d有淡肉色分生孢子堆出现 ,病斑经组织分
离后仍得到原来的菌株 ,对照不发病;可见 C1 的寄
主范围较广 ,而 C2 只对豆科植物有致病性。
2.1.4　菌株分类地位的确定　根据菌株的形态特
征 ,培养性状和寄主范围 ,参照 Sutton BC.给出炭疽
菌的分类条件 ,并对照张中义[ 3]和吴文平[ 4]对炭疽
菌的描述及其分种的检索表 ,鉴定菌株 C1 为胶孢炭
疽菌 Colletotrichum gloeosporioides(Penz.)Sacc.、菌株
C2 为平头炭疽菌 C.truncatum(Schw.)Anolrus &
Noore。
2.2　潜伏侵染特性的测定　对外观无病害症状的
马占相思枝叶进行组织分离后 ,胶孢炭疽菌检出率
为55%,平头炭疽菌的检出率为 18.8%;保湿培养
后胶孢炭疽菌的检出率为 42.5%,平头炭疽菌为
11.3%。可见 ,这两种炭疽菌在马占相思幼苗上具
有潜伏侵染的特性 ,其中胶孢炭疽菌潜伏性较普遍 。
2.3　病原菌有关生物学特性试验
2.3.1　温度 、pH 值对营养生长及分生孢子形成影
响　两菌株菌丝在 10 ～ 35 ℃范围内均可生长 ,适宜
温度为20 ～ 30 ℃,最适宜温度25 ℃,10 ℃时生长速
度极慢 ,35 ℃时菌丝生长速度明显下降 , 40 ℃时菌
丝停止生长 ,接种菌块变褐 ,菌丝失去生活力 。总的
来说 ,两个菌株生长的温度范围较接近 ,而 C2 比 C1
耐高温 ,它在 10 ℃时基本不生长 ,而在 35 ℃时仍基
本正常生长;从产孢情况看 ,两个菌株在 20 ～ 35 ℃
均可产生分生孢子 , C1 的最佳产孢温度为 25 ～ 30
℃,C2的最佳产孢温度为 25 ～ 35 ℃,在最佳产孢温
度范围内它们产孢早 ,产孢多 ,温度过高过低不利于
分生孢子的形成(见表 1)。
表1　温度对菌落生长速度的影响 mm/ d
温度/ ℃ 10 15 20 25 30 35 40
C1
C2
　15
0.25
4.9
4.0
8.8
7.5
13.7
10.9
12.0
10.8
5.1
8.0
0
0
　　表中的测量数值为 4 次重复的平均值(下同)。
两菌株生长的 pH 值范围较宽 ,在 pH 值 3 ～ 11
范围内均可生长 , pH值 5 ～ 9范围内生长良好 ,最适
pH值为 7 ,pH 值小于 4或大于 10时菌丝生长明显
受抑制。从形成子实体产孢情况来看 ,在试验 pH
值范围内均能形成子实体 ,而以 pH 为 7 ～ 9最利于
分生孢子的形成 ,且产孢量大。总之 ,中性偏碱有利
于子实体形成和分生孢子的产生(见表2)。
表 2　pH 值对菌落生长速度的影响(t=25 ℃)mm/ d
pH值 3 4 5 6 7 8 9 10 11
C1
C2
5.8
4.7
8.6
8.3
12.3
10.8
14.7
12.5
15
13
14.2
12.2
13.0
11.7
10.8
9.5
8.5
7.3
2.3.2　温度 、湿度对分生孢子萌发的影响　温度 、
湿度对分生孢子萌发的影响分别见表 3 、 表 4。从
表 3可见 , 培养48 h后 , C1 分生孢子在 10 ℃～ 35
℃范围内可萌发 , 适宜范围是 20 ℃～ 30 ℃, 40 ℃
下经48 h仍不萌发。C2 分生孢子在15 ℃～ 40 ℃范
围内可萌发 , 适宜范围是 20 ℃～ 30 ℃, 10 ℃下经
48 h仍不萌发;可见 C1和 C2 的分生孢子萌发适宜
温度范围基本相同 , 但 C2 的分生孢子萌发要求温
度较 C1高;培养 48 h 后 , C1 和 C2 的分生孢子在
RH 70%以上均可萌发 , 以 RH 100%+水滴中萌发
最好;在适宜温度 、 湿度范围内 C1 的分生孢子萌
发率较 C2高 。
表3　温度对分生孢子萌发的影响 %
温度/ ℃ 10 15 20 25 30 35 40
C1 10.7 36.3 57.3 72 39.7 6.3 0
C2 0 1.7 5.7 16 12 3.7 1.7
　　RH=100+水滴 ,培养 48 h
·8· Forest Pest and Disease　Jan.2003　No.1
表 4　湿度对分生孢子萌发的影响 %
相对湿度 70 80 90 100 100+水滴
C1 0.6 2 4 10.3 72
C2 0.3 0.6 1.7 8.7 16
　　t=25 ℃,培养 48 h
3　小结与讨论
3.1　炭疽菌属 Colletotrichum Cda.是一类重要的植
物病原真菌 , 该属的分类问题一直处于混乱状
态[ 4 ,5] ,Duke 、Von Arx[ 7、8]和Sutton[ 3]论文的发表使炭
疽菌属的分类发生了根本的变化 ,他们以现代生物
学种的概念为依据 ,重新建立了炭疽菌属的种的分
类系统 , 并且已被人们所熟悉与接受 。作者以
Sutton分类系统为依据 ,对从马占相思分离得到的
两株炭疽菌进行了纯培养 ,从纯培养物形态学 、培养
特征学和寄主范围对其进行了研究 ,发现它们的菌
丝生长 、菌落特征 、分生孢子盘和分生孢子的形成 、
分生孢子和附着胞形态大小等性状 、以及其寄主范
围分别与 Sutton提出的关于胶孢炭疽菌和平头炭疽
菌的分类标准相符 ,为此 ,认为侵染马占相思的炭疽
菌的种 为 Colletotrichum gloeosporioides 和 Colleto-
trichum truncatum ,此结论在国内尚为首次报道。
3.2　炭疽病是森林植物中一大类病害 ,该类病害有
潜伏侵染的特点[ 9～ 11] 。本文的研究结果与此结论
相同 ,即马占相思炭疽菌在嫩枝和叶子上存在潜伏
带菌的现象 ,具有潜伏侵染的特性 。众所周知 ,炭疽
菌是一类弱寄生菌或腐生菌 ,经研究发现 ,马占相思
炭疽菌主要自伤口侵入 ,且从幼嫩伤口侵入快速 ,如
果苗木生长良好 ,在木质化程度较高茎基部接种不
容易成功。此结论与雷增普[ 10]及黄炳金[ 11]等人报
道的兰花炭疽菌及银杏炭疽菌 Colletotrichum
gloeosporioides的潜伏侵染特性有相似之处。马占相
思2株炭疽菌中 ,胶孢炭疽菌潜伏侵染现象较普遍 ,
致病性较强 。马占相思扦插苗炭疽病发病率之高 ,
与插穗伤口带菌侵入密切相关 ,因此在育苗工作中 ,
注意保护插穗切口的完整性 ,加强工具和切口的消
毒 ,是预防炭疽菌侵入的关键环节 ,有关具体防治措
施有待进一步探讨 。
3.3　马占相思炭疽病2个菌株的菌落和分生孢子在
10 ～ 35 ℃范围内均可生长 、萌发(C2 的分生孢子在
15 ～ 40 ℃可萌发),适温为 20 ～ 30 ℃,40 ℃时菌丝
几乎停止生长 ,甚至死亡 ,这与黄炳金及张超冲[ 12]
等人分别对银杏及柱花草的炭疽菌 Colletotrichum
gloeosporioides 的研究结果基本一致 。分生孢子在
RH 70%以上可萌发 ,在高湿条件下(RH100%+水
滴)萌发良好;菌丝生长 pH值范围较广 ,适宜 pH值
为 5 ～ 9 ,以中性偏碱较好 ,pH值过大过小不利于菌
丝的生长。
参考文献:
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(责任编辑　杨静丽)
·9·中国森林病虫　2003年 1月　第 22卷　第 1期