全 文 ：第 6卷 第 3 期 桨 学 学 报
19 5 7年 9 月 A C A T P HA M RA C E U TIC A SI I C NA
Vo L V
,
N .o 3
S即 t . 叮 b e r , 1 95 7
山道年的 比色 测 定 方 法
1
. 三氯化缺法” ’
曹初宁 沙世炎
(中国医学科学院病物系分析化学室 )
山道年 ( aS ont n in )的含量侧定 , 文献所载有容量法 『, J
、旋光法 IL左、重量法 lt, 2· ’ 0等 ,但
F
- 一般采用的仍偏重于重量法以 ’ 6J . rF o nu e c 3
,
4] 的桔晶法至今仍被广泛采作依据 。 但在
分析桔果上有的方法需耍加校正数 , 有的用样品量很大 , 费时亦长 。 近年来关于山道年
的比色方法作了不少工作 , 日人山口一孝 5L, 目 与山岸正治门曹进行了 , , 4 二稍基苯阱比
色法 , 前者利用山道年与 2 , 4 二稍基苯阱作成 苯腺沉淀然后溶解比色 , 后者利用山道年
与 2 , 4 二稍基苯阱作成苯腺 ,不需沉淀及滤取 , 放置一夜后 , 通过旗满氧化铝之吸附柱 ,
然后洗出比色 , 费时仍久 . 19 眼 年岩山阻祥尹1曹进行了二偶氮苯磺酸的比色法 , 将山道
年加酸使成变霄山道年 , 然后与二偶氮苯磺酸偶合 , 呈色侧定 , 所生颜色尚稳定 . 最近
山岸正洽日, ’叮报告了甲醇钠的比色法 ;但此反应厥水性强 , 甲醇需不含水 , 空气中所含水
份亦将影响色度 , 雨季及湿度大时桔果均不稳定 。
本实撇采用三氛化族作献剂 。 早在 1 9邓年 S往d den st 屺 h「, ’ J即用三氯化铁稀溶液与
山道年呈色反应 , 直到现在仍被广泛采作山道年的霎别定性反应 。 本工作的 目的即进
一步研究三氯化轶作山道年定量的可能性 。
这个反应所根据的原蟹 1” 即山道年遇矿酸变为变矍山道年 ( desm o tr o p o ga n ot n in )
然后用稀三氯化铁溶液与变熨山道年的酚基产生颇色反应 。
C H
, C H .八/ 、
}} { ! H一 C比— 犬 岁、 夕一一C 一C 卜`才 、 尹 \ / 刃一 0 H o e坛占一亡一 o山道年 变贾山遭年
. 1 9 5 7年 4 月 邓 日收到 。
. 木工作中所用山遭年甘汞片及山道年片系北京市稍掀所供粉 . 又木文食性周同感 、 梁勇天二先生指正 , .
此致翻 。
DOI : 10. 16438 /j . 0513 -4870. 1957. 03. 009
. 幼 6 奖 学 学 报 6卷
实 脸 部 分
(一 )吠药
1
. 山道年枯晶 : m . p . 1 71. 8一 1 7.3 8 OC 新华制药厂出品 .
2
.
.0 8肠三抓化铁拭剂 : A. R . 北京化学拭剂研究所 .
3
.
1 : 1硫酸 : C P . 北京化学藏剂研究所 .
4
. 肠外酒精 :重蒸韶 。
6
. 氧化钙 : 由氢氧化钙 G . R . ( E . M re ck ) 蜂制 .
6
. 骨炭 : 医药用 , 日本出品 .
7
. 抓仿 : .A R . 北京化学拭剂研先所 .
,
(二 )仪器
1 : oS 油1et 提取器 。
· 且. 玩四吐川n 光电比色补 .
(三 )操作
1
. 此色方法的探时
(1 ) 选却泌犬片— 将山道年酒情溶液 2 毫升 (0 · 2 毫克山道年 )放于拭管内 , 蒸干后加 1 , l 硫酸 3 毫升 ,于佛水港中加热数分健 , 加 .0 8形三氛化铁献剂 .0 1 毫升 , 得橙叙
色溶液 , 用 肠外酒精 3 毫升稀释后用 B ce h a n 分光光度针侧量其透光率 , 透光曲桂如
圈 1所示 。 睡光率最小时之波长为 486 训` , 因此在用 uL m创 tr o n 光 电比色补进行比色
浏定时选用蓝撇色滤光片 .
目 1 用 B ce al 侧坦 分光光度叶诩埠山道年之透光曲接
3期 曹初宁等 : 山道年的比色 ifJl 定方法 皿 7
2( ) 酸的谧度— 取山道年酒精溶液 2毫升 (相当于 .0 2毫克山道年 ) , 蒸去酒精后加不同摄度之硫酸 ( 12 N, 1 5N, 1 6N, 1 7N, 1 8N, 2 0N, 邓 N, 触 N ) 3毫升 , 于佛水浴中
加热十分谊 , 加 .0 8沁三氛化族献剂 0 . 1 毫升 , 得橙杠色溶液 , 比较其所生颜色的深浅 ,
桔果如下:
1 2万者儿乎不产生西色 ; 2 4 N 者呈棕褐色 ; 其他滇度中以 18 N 者最好 。 故硫酸之
镇度以采用 18 N ( 1 : 1) 为合适 。 拜更进一步藏麟了 18 N 硫酸的适用量 :
取 l助道年酒精溶液 5 毫升 (含山道年 .0 6 毫克 ) , 蒸干后加不同量 l : l 硫酸 (1 , 2 , a,
4
, 5 毫升 ) , 于沸水浴中加热数分技 , 加 .0 8外三氯化铁献剂 0 . 1毫升 , 用酒精 3 毫升稀
释后用光电比色补侧量其透光率 ;桔果以加入 3 毫升及 4 毫升时透光率最小 (圆 2 ) , 因
此采用 3毫升 .
T 义 的
1 之 3 4 5
1: 1 凡 50 月 m l
团 2 1:1 硫酸盆与透光率之关系
(3 ) 加热时简— 取含 .0 5 毫克山道年的酒精榕液 , 蒸干后加 l : l 硫酸 3 毫升 , 在佛水浴中分别加热 2 , 3 , 5 , 7 分嫂 , 然后再加 .0 8肠三氛化铁 0 . 1毫升 , 以 肠外酒精 3 毫
升稀释后进行比色 ;桔果以加热三分挂的颇色最深 ,透光率最小 ,但在重复献娥时虽然仍
以加热三分撞时颇色最深 , 但二批桔果不一致 , 可能由于加入三氛化铁时各拭管温度不
同 ; 因此拭教将山道年与酸加热水解三分挂 , 取出冷却到室温后加入 0 . 1毫升 .0 8外 三
氛化铁拭剂 , 再在沸水浴中加热五分撞 , 如此不同批的桔果重现性较好 . 为了节省操作
手艘 , 更进而拭墩将硫酸与三氛化铁同时加入 , 然后在佛水浴中加热不同时简 ( 6 , 8 , 乳
10
, 1 1 , 1 5 , 17 分投 ) , 桔果以十分撞颜色最深 (圆 3 ) , 而且重现性较好 , 因此我仍采用了
这一方式 。
(4 ) .0 8 肠三氯化铁拭剂的用量— 取含 .0 5 毫克山道年的酒精溶液蒸干 , 加入 1 : l硫酸 3毫升及 .0肠 , .0 10 , .0 1 6 , .0 20 毫升的 0多外三叙化铁献剂 , 在佛水浴中加热十分趁
2 2 8望 学 学 去1之 5 卷
80
透光举
5 89 幻 r l r万 1 7
水解加热时简 (分蹄 )
圆 3 加热时阴与透光率之关未
后取出冷却 , 以 肠灿酒精 3 毫升稀释进行比色 ;桔果以加人址为 0 . 1 毫升时透 光率了kt, 卜
(圆 4 ) .
(勿 初步操作步嵘 -— 根据以上精果 , 拟出比色操作如 卜: 将山道 一年之酒精溶液 践试管内 , 在沸水浴中蒸去酒精 , 加入 :1 1硫酸 3 毫升反 .0 8知三纵化铁 0 . 1毫升 , 价之沸水
浴中加热十分拉 , 取出冷却 , 加人 95 灿酒精 3 毫升 , 棍合均匀 , 倒入 J一匕色份内加塞 , 进行
比色 , 用 、武剂作空自 .
在重艇拭瀚中精 一梁不稳定 , 常不一致 , 可能因住水浴中蒸必时有水汽进入 . 蒸于程
T 义
, 。S ` f o
、
15
.0 8多石 eF C I , 耐
圈 4 .0 8%三叙化铁量与透光率之关采
3期 曹初宁等 : 山道年的此色 fl J i定方法 她 g
度不一致影响其呈色度 ;因此改用砂港 (温度在 10 OC左右 )蒸干 , 如此重复实欲时精
果稳定 ,同时当产生颜色后用酒精稀释时必镇冷却井加塞 , 以免酒精挥赞 .
( 6) 反应的稳定情况— 利用不同量之山道年用上法操作后在不同时简内测其透光率的改变 , 视其稳定性如何 , 桔果如圆 5 .
.o 咭弓
o
·
10可
6
·
15
认 2 5署
.0 50 弓
10肋卯透光甲
相加
加.f
2 3
简隔时简 (小时 )
圈 5 反应的稳定情况
由此圆知 : 在产生颇色后 3 6 分撞内萌色较稳定 , 一小时后倾色褪去速度显著精快 ,
四小时后不再褪色 ; 同时看出 , 褪色的程度与山道年量成正比 。
( 7 ) 光密度与滇度的关系— 准确称取 20 毫克山道年桔晶 , 用 95 肠酒精二 次稀释做成 0 . 1 毫克 /毫升之溶液 , 取此榕液不同量 ( 0 .的 5 , 0 . 0 50 , 0 . 0 7 6 , 0 . 1 0 0 , 0 . 1 5 0 , 0 j 0 0 ,
0那 5 , 0 , 的 , .0 30 0 毫克 )在砂浴中 10 “ C 左右蒸去酒精后 , 按照 已拟定的方法操作 , 在
三十五分幢内比色 ,在比色中我俩所用的空白除不含山道年外 , 其他拭剂用量相同 , 所
得桔果以透光率及山道年含量作座标画圆得一直挑 , 但不通过原点 。 我仍考虑 .可能是
空白中含三氛化铁太多的徐故 ,莲拭嫩在对照空白内降低 .0 8外三氯化铁用量 ,如 .0肠 ,
.0胜毫升等 ,枯果在空白对照内仅加 .0皿毫升 .0 8肠三氛化轶 , 而含山道年的样品中仍
用 .0 1 毫升 .0 8肠三氛化铁 , 这样重复拭歇多次 , 在山道年含量低于 .0 25 毫克可得一符
合于 B er 定律并通过原点的直挑如圆 6 。
侈 ) 拟定的比色方法— 取山道年酒精溶液 1 毫升 (含量在 0二5毫克以内 ) , 在砂浴中 ( 1 0 0 0 C 左右 )蒸去酒精 , 冷后加入 :1 1 硫酸 3 毫升及 .0 8外三氯化铁拭剂 .0 1毫升 ,
于沸腾水浴中加热十分渡 , 取出 , 用冷水冷却 , 然后加入 % %酒精 3 毫升 , 混合均匀 ,倒
入比色管内密塞 , 在 35 分盆内用 L u 团eL仕 O n 光电比色朴进行比色 , 滤光 片为蓝糠 色
(4 9伍川名) , 用拭剂作空白 (其中除不含山道年外仅含 .0 . 毫升 .0 8形三氯化铁献剂 ) . 所
得桔果 , 自标准曲核上 , 即蔽出蔽 1 毫升溶液内所含山道年的毫克数 。
(9) 方法的准确度— 用山道年腕枯晶之酒精溶液 (0 . 1毫克 /毫升 )不同量 ( .0 03 一
,脚 集 学 举 报 6卷
O J睡盛竟 ) ,彼服上远此色法操作 , 共桔果如表 1
,0l0勺七,x自0
山道年 口 g
口 6 山道年含纽与光密度之关系
获 1 不同 , 山道年进行比色定 , 的枯 .
功日峋阳献呀充 ) 月出 t (奄克 ) “ ” ’ ` ”
!
山道年 t (奄克 ) 浏出 t (奄克 )
.习肠 0习翻 ) 0刀 .0 1 4 0 0一 1幼
O刀日 0 0. 0 3 2 + 6 . 7 0 . 14 0 0 . 13 9
.0 06 0 0
.
0肠 ~ .8 3 0 . 1 5 0 0一 14 7
O月口 . 0.肠 8 ~ 3 . 3 0一 1 6 0 0 . 1 6 5
.0 0B0 0
.
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.
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.0 1幼 0. 1 1 7 一么 5 0 . 2 4 0 0 . 2 3 0
苹均映差 : 士 4%
久此色方法的应用
(t ) 姻落生龚样晶中山道年的侧定
.a 山道年的分离提取 : 取用 3 , 4 二葫基苯阱沉淀法分析多次之生葵徉品 , 其中含山
遨牟 t 为 l邵肠 ,握分别用 R滋凶记。 与 S OC血 s氏 1Or 苯加热迥流提取法 , aG ar t 氏 [’J
苯的室退提取法 , 3 山扭叮 氏。 习氛仿加热遇流提取法 , 苏联葵典法 arj 及本院植化室骨
炭吸附法 D目 , 分离提取山道气 然后进行比色侧定 ; 桔果以采用钙盐抽出及骨炭吸附
法。 ` 旧分离侧定拮条最接近于重 t 法分析拮果 ( l j a 肠 ) , 因此我仍采用了最后的方法 。
3期 曹初宁等 :山道年的比色m lJ定方法
但在具体操作及加热迥流时简上稍有改变 。
b
.侧定步砚 :称取蛔篙生奖粉末 0. 6克于乳钵内与 0.1 克新制鱿氧化钙研磨 , 混合
均匀 , 以助毫升热燕馏水移此混合物于三角瓶内 ,煮佛十分谊 , 用布氏漏斗抽滤 , 滤液
冷却川 J , 通过 马克骨炭 , 使山道年钙盐被吸着炭上 , 旋以 1形盐酸酸化 , 游离山道年 , 再
以氯仿加热迥流提取 lut . 粗献脆豹 2 小时全部提出 , 蒸去氯仿 ,趁渣以 9 6弘 酒精溶解 ,
井用滤袄过滤 , 然后稀释到 的毫升 (含量高的样品可稀释到 10 毫升 ) . 取此酒精溶液
一定体积 , 按上远此色方法进行侧定 。
用同一蛔篙沉合粉末样品比色分析十次 , 其桔果为 1 . 16 升 , 1 .邓外 , 1 .触 肠 , l j 6弘 ,
l j 6外 , 1卫7外 , 1 . 2 8外 , 1 . 2 7升 , 1 . 2 6沁 , 1 . 2 6形 ; 平均值为 1汤 6外 ,并与 2 , 4 二稍基苯阱沉
淀法 (其桔果为 1 . 23 形 )比较 , 偏差为士 1 . 6弘。
c
. 五种生集样品的分析: 取本院集用植物室 1 9弱 年蛔篙 ( A r 讼优众白 城%沈` eK le )r
样品粉末五种 , 利用上述比色法作山道年含量侧定 , 并与 2 , 4 二稍基苯阱沉淀法〔 , 6J .比
较 ,其桔果如表 2 .
表 2 五种生蕊样品分析桔果
样 品 号 礴 } 三 氮 化 铁 比 色 法 。幻 } 2 , 4 二 硝 基 苯 拼 沉 沱 法 , ( 多` )
4nUO`2l`
,1…d.口卫三盈! 内`nj八曰Q白一
肥 17
肥 18
肥 3 8
第 二 期 花 蕾
敲枯果系梁彬 、夏秀坤同志所做 .
( 2 ) 山道年甘汞片及山道年片中山道年的侧定— 取山道年甘汞片及山道年片一定最 , 按中华人民共和国羹典方法『,’ J提出山道年后 , 制成酒情榕液 , 然后按上述比色方
法进行侧定桔果如表 3 .
表 3 山道年甘汞片及山道年片分析桔果 (以每片含山遭年毫克爵 )
样 品 三 叙 化 铁 比 色法 犯 典 方 法 标 签 含 盆
15
.
4 1 4
.
8 15
.
0
2 9
.
9 3 0
.
0 3 0
.
0
桔 输
. 山道年艇酸处理后与三氯化铁稀溶液产生颜色反应 , 三十五分挂内很稳定 , 颜色
夕驰 集 学 学 报 5卷
的澡度与山道年含盈成正比 , 在 6毫升内含山道年量在 0二5 毫克以内者 , 符合于 B e r
定执县直摘关系 ,可作定量之用 . 不均艇差为士 4形 .
久在生集中作山道牟侧 定 所得秸 果与 2 , 4 二稍基 苯阱 沉淀法相似 , 差别为
士 .1 6肠 , 但 aJ n o t 及 M o u ot lnr ” 怒为另 , 4 二晴基攀讲沉健决倍果佩 .寄。 本去亦可胎富
高 , 因为反应时利用酚基与三氧化铁起作用 , 生奖中含有其他类似的化合物而被带入最
后核液时就能使桔果材高 。
3
. 在山道年片与山道年甘汞片中侧定桔果 , 与集典方法尚一致 , 佩差在方法准确度
范团内 。
4
. 此法简便而节省时简 ,每一徉品侧定 , 一天内可以作完 ; 用徉品量亦少 。
参 考 文 献
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r
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3 期 曹初宁等 :山道年的比色 i flJ定方法 23
CO LO I RM E TI RCE E D T RM I A I N TO NO FS A N TO I N N
1
.
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