全 文 :龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)为红藻门(Rhodophy-
ta)杉藻目(Gigartinales)江蓠科(Gracilariaceae)江蓠属
(Gracilaria)下的一个种。龙须菜的分布遍及中国沿海的广阔
海域,在浅海和深海均有栽培,它分枝多,生长快,最适生长温
度为15~25℃,其多糖成分具有抗肿瘤作用,还具有较强的产
氧和吸收氮磷的能力,可用于净化养殖废水、修复近岸富营养
化海域环境及治理赤潮。而龙须菜的重要用途是从中提取琼
胶,并且琼胶含量可以高达20%以上,目前,从龙须菜中提取
的琼胶量占我国琼胶产量的80%以上,因此具有重要的经济
价值。
琼胶,俗称洋粉、冻粉或冻胶,是植物胶的一种,常用海产
的石花菜、江蓠等制成,为无色、无固定形状的固体,溶于热水。
而其的产量、质量在很大程度上取决于它的生长环境、采收季
节等。琼胶结构上是由(1-3)-β-D-半乳糖和(1-4)-
3,6-内醚-α-L-半乳糖等组成的链状聚合物。
龙须菜琼胶经碱处理后,可显著提高琼胶的出胶率和凝胶
强度,这是由于碱处理后大部分硫酸基被除去,其去除机理如
图1所示,这样琼胶凝胶形成能力增加,同时半乳糖-6-硫酸
酯转变成3,6-内醚-半乳糖。而且在3,6-内醚-半乳糖的
含量增加的同时,在琼胶凝胶形成双螺旋构型中氢链形成能力
增大,如图2所示,这两方面的综合作用使得碱处理后龙须菜
琼胶凝胶强度大大增加。
图 1 碱处理硫酸基去除机理
图 2 琼胶凝胶中稳定琼胶分子双螺旋结构的氢链
本文通过正交试验法,综合研究了碱液浓度、温度、处理时
间和漂白液浓度对龙须菜出胶率、凝胶强度和白度的影响。
1 试验材料与方法
1.1 材料
龙须菜采自广东廉江,原料首先剔除杂质,再用自来水洗
净,去掉藻体表面的附带的沙土和浮游生物,晾干表面水分,再
于50℃条件下烘干,干燥后的龙须菜用塑料袋密封后置于干
燥阴凉处保存。使用前在45~50℃下烘干,冷却后称重使用。
1.2 试验方法
1.2.1 琼胶提取工艺流程及简述
预处理:洗干净龙须菜,自然晒干,以除去江蓠中的泥砂及
其它杂物,尽量排除杂质的干扰,再用50℃左右的烘箱烘大约
半小时,备用。
碱处理:用电子分析天平称取一定质量的NaOH在适当的
容量瓶中定容,将预处理后的龙须菜置于装有NaOH溶液的烧
杯中,碱液用量约为龙须菜藻重的20倍,用保鲜膜封住烧杯口
后在水浴锅中以适宜温度恒温加热一定时间。
清洗Ⅰ:用自来水将碱处理好的龙须菜充分洗涤,清洗干
净后,用pH试纸测pH值,洗至pH在7-8之间即可。
漂白:用吸量管量取一定体积含有效氯较高的NaClO试
剂于适当的容量瓶中定容, 配成有效氯一定的NaClO溶液,用
盐酸把NaClO溶液的pH调为约9,将洗至中性的龙须菜置于
漂白液中,漂白液用量约为龙须菜藻重的10倍,覆盖住龙须菜
为佳,漂白6min,为了漂白均匀,将龙须菜投入漂白液时,要迅
速搅拌约1分钟,然后静置到规定时间。
酸化:用吸量管量取一定体积的HCl试剂于适当的容量瓶
【作者简介】问莉莉(1986-),女,陕西渭南人,在读硕士研究生,研究方向:海洋生物资源利用化学。通讯作者:李思东(1960-),男,教授。
轻工科技
LIGHTINDUSTRYSCIENCEANDTECHNOLOGY
2012年10月
第10期(总第167期) 食品与生物
龙须菜琼胶碱提工艺研究
问莉莉 1,练浩宏 2,李思东 2
(1.广东海洋大学食品科技学院,广东 湛江 524088;2.广东海洋大学理学院,广东 湛江 524088)
【摘 要】 以龙须菜为原料,采用 L9(34)正交试验对江蓠琼胶的提取工艺进行了研究。研究从龙须菜提取琼胶过程中的碱
液浓度、碱处理温度、碱处理时间和漂白液浓度对琼胶出胶率、琼胶凝胶强度以及琼胶白度的影响,得出从龙须菜提取琼胶的最佳
工艺条件。研究结果表明,从龙须菜中提取琼胶的最佳工艺条件为:氢氧化钠溶液浓度为 4.0%,碱处理温度为 80℃,碱处理时间为
1.5h,次氯酸钠溶液浓度为 2.5%。此条件下的琼胶出胶率最高,为 20.8%,琼胶凝胶强度较高,为 961g/cm2,琼胶呈微黄。同时,资源
和能源消耗最低,琼胶质量较高。
【关键词】 龙须菜;琼胶;出胶率;凝胶强度
【中图分类号】TS254 【文献标识码】 A 【文章编号】 2095-3518(2012)10-10-04
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中定容, 配成一定浓度的HCl溶液,将漂白后的龙须菜置于
HCl溶液中,HCl溶液用量约为龙须菜藻重的10倍,覆盖住龙
须菜藻为佳,酸化5min,为了酸化均匀,将龙须菜投入盐酸溶
液时,要迅速搅拌约1分钟,然后静置到规定时间。
清洗Ⅱ:同清洗Ⅰ相似,用自来水将酸化后的龙须菜充分洗
涤,清洗干净后,用pH试纸测pH值,洗至pH在7.5左右即可
提胶:把已漂洗至中性的龙须菜藻体在沸水中提胶约
50min,用水量为龙须菜重的20倍,并观察出胶情祝,如果手触
之有粘稠感,或取出少量胶液放在玻璃皿上能迅速成凝胶,即可
趁热过滤,第一次用4层纱布过滤,滤渣再加水进行第二次提
胶,时间和用水量均减半,第二次用8层纱布过滤,将两次提取
的胶液混合,两次煮胶后,可以提高胶得率,自然冷却凝固。
冷冻脱水:将室温冷却后的琼胶放入冰箱急冻过夜,琼胶
即可完全冻结,但有时会出现解冻后的胶条并没有完全脱水,
成凝胶状,这是由于提胶时水量过多或者出胶率太低所至,此
时只需再放入冰箱急冻一晚即可,只有完全冻结,胶条才会充
分脱水收缩,分子排列紧密,在解冻脱水时用自来水把胶条泡
至清晰、发亮即可,此时泡沫和一些溶于水的杂质随流动水冲
走,从面达到脱水和提纯的目的。
干燥和测定:先将脱水后的湿胶条编上序号,然后置于通
风的窗户上干燥,待水分较少时,将胶条置于日光下干燥,由于
日光中的紫外线对胶条有漂白作用,所以干燥后的胶条较白,
密封保存,将琼胶放到50℃烘箱中干燥0.5~2小时,称重并记
录数据。然后测定强度和白度等指标。
1.2.2 琼胶性能测定
1.2.2.1出胶率的测定
琼胶出胶率的测定公式如下:
Y=(m1/m2)*100%
式中,Y为琼胶的出胶率,单位为1;m1为琼胶的干重,单
位为g;m2为江蓠的干重,单位为g。
1.2.2.2凝胶强度的测定
凝胶强度的测定采用文献[30]的方法进行。
1.2.2.3琼胶白度测定
据现代食品感官评价原理和技术,以颜色为评价指标,对
琼胶进行目测,以琼胶糖作为参照认为颜色为最好,按照颜色
白、较白、微黄、较黄和黄5个级别进行分级。
1.2.3 正交试验设计
影响出胶率、琼胶凝胶强度和白度的因素很多,如龙须菜
品种、碱处理浓度、碱处理温度、碱处理时间、漂白液种类、漂白
液浓度、漂白时间、酸化液种类、酸化液浓度、酸化时间、提胶时
间、提胶温度等等。经全面考虑,最后确定NaOH溶液浓度、碱
处理温度、碱处理时间和NaClO溶液浓度为本试验的试验因
素,分别记作A、B、C和D,进行四因素正交试验,各因素均取
三个水平,各因素和水平如表1所示。
表 1 四因素三水平表
表 2 正交处理实验表
2 结果与分析
2.1 各因素对试验指标的影响
图3和图4均以各因素水平为横坐标,试验指标的平均值
为纵坐标,绘制的因素与指标趋势图。由因素与指标趋势图可
以更直观地看出试验指标随着因素水平的变化而变化的趋势。
因此,根据图3和图4分析各因素对试验指标的影响趋势。
碱浓度(%)碱处理温度(℃)碱处理时间(h)漂白液浓度(%)
图 3 出胶率极差分析
碱浓度(%) 碱处理温度(℃)碱处理时间(h)漂白液浓度(%)
图 4 凝胶强度极差分析
2.1.1 碱浓度对指标的影响
碱浓度对琼胶出胶率有较大的影响,随着碱浓度的增加,
琼胶出胶率反而逐渐下降,且下降的幅度逐渐减少,与
Freile-Pelegrin等的研究结果基本一致。碱浓度对琼胶凝胶强
度也有一定的影响,随着碱浓度的增加,琼胶凝胶强度逐渐上
升,在达到最大值后,琼胶凝胶强度逐渐下降。由于碱处理后大
部分硫酸基被除去,琼胶凝胶形成能力增加,同时半乳糖硫酸
酯转变成3,6-内醚-半乳糖,使得3,6-内醚-半乳糖的含
量同时增加,在琼胶凝胶形成双螺旋构型中氢键形成能力增
大,这两方面因素的影响使得江蓠琼胶凝胶强度随碱浓度增加
而上升。此外,高温碱处理还会产生一个相反的作用,就是促使
琼胶分子降解,其结果会降低琼胶的凝胶强度。影响琼胶分子
降解速度的主要因素之一就是碱的浓度。当碱的浓度达到一定
值后,碱浓度越大,琼胶分子降解速度越快,凝胶强度会随着碱
浓度增加而下降。
2.1.2 碱处理温度对指标的影响
碱处理温度对琼胶出胶率有一定的影响,随着碱处理温度
11
的增加,琼胶出胶率反而逐渐下降,之后趋于平稳且有下降趋
势,这是由于部分琼胶溶于碱液而造成胶质损失,且温度过高
时会使部分琼胶大分子断裂转变成小分子。碱处理温度对琼胶
凝胶强度的影响最大,随着碱处理温度的增加,琼胶凝胶强度
反而近乎直线下降,之后趋于平稳且有下降趋势,表明温度过
高会破坏部分琼胶大分子,促使琼胶分子降解,导致强度降低。
碱处理时间对指标的影响。碱处理时间对琼胶出胶率的影
响最大,随着碱处理时间的增加,琼胶出胶率反而近乎直线下
降,这是由于碱处理时间越长,溶于碱液的琼胶就越多,越多的
琼胶大分子断裂转变成小分子。碱处理时间对琼胶凝胶强度有
较大的影响,一开始趋于平稳且有上升趋势,之后近乎直线上
升,表明碱处理时间在一定范围内对琼胶凝胶强度影响不大,
之后强度大增是因为除去硫酸基和半乳糖硫酸酯转变成3,6-
内醚-半乳糖的反应时间充分。
2.1.3 漂白液浓度对指标的影响
漂白液浓度对琼胶出胶率有一定的影响,随着漂白液浓度
的增加,琼胶出胶率反而逐渐下降,下降到最小后再小幅上升,
这主要是由于含有效氯的漂白液在氧化漂白藻体色素的同时,
破坏了藻体致密的表层细胞和细胞壁,有利于胶质的溶出,但
是如果有效氯浓度过高时会氧化裂解琼胶分子,使胶液流失。
漂白液浓度对琼胶凝胶强度也有一定的影响,随着漂白液浓度
的增加,琼胶凝胶强度逐渐上升,上升到最大后急剧下降且有
下降趋势,这是由于有效氯浓度过高时氧化裂解了琼胶分子,
使琼胶凝胶强度降低。
2.2 最佳工艺条件的选取
2.2.1 单指标分析
表 3 实验结果
就琼胶白度而言,表3的正交试验结果表明:琼胶的白度
受漂白液浓度的影响较大,碱处理浓度、碱处理温度、碱处理时
间对琼胶白度的影响较小,漂白液浓度越高,琼胶白度就越白。
而且,含有效氯的漂白液在氧化漂白藻体色素的同时,破坏了
藻体致密的表层细胞和细胞壁,有利于胶质的溶出。但是如果
有效氯浓度过高时会氧化裂解琼胶分子,使胶液流失和凝胶强
度降低。虽然漂白液浓度不是影响琼胶出胶率和凝胶强度的最
主要因素,但还是要选择好合理的漂白方法,优化漂白工艺条
件,使琼胶所要求的白度达到所要求的范围内并尽量减少对琼
胶出胶率和琼胶凝胶强度的影响。
就琼胶出胶率而言,从表4可看出A、B、C和D的极差比
为2.7∶0.8∶3.2∶1.3,主要受到A和C的影响,其对实验指标
有很大的影响,C的影响最大,以C1最好,其次是A,以A1最
好,较为次要的因素是B和D,但不能忽略因素B和D对实验
指标的影响,且分别以B1、D1最好,即各因素对琼胶出胶率影
响的显著性水平由大到小次序为:碱处理时间(C)>碱液浓度
(A)>漂白液浓度(D)>碱处理温度(B)。最佳工艺条件为:
A1B1C1D1。因此,在碱液浓度为4%,碱处理温度800C,碱处
理时间1.5h,漂白液浓度为0.05%的条件下,出胶率最高,造成
的胶质损失最小。
表 4 出胶率极差分析
就琼胶凝胶强度而言,从表5可看出A、B、C和D的极差
比为82∶155∶100∶76,主要受到B的影响,其次是C,较为
次要的因素是A和D,但不能忽略因素A和D对实验指标的
影响即各因素对琼胶凝胶强度影响的显著性水平由大到小次
序为:碱处理温度(B)>碱处理时间(C)>碱液浓度(A)>漂白
液浓度(D)。由于琼胶凝胶强度越高,琼胶质量越好,因此A以
A2最好,B以B1最好,C以C3最好,D以D2最好,即最佳工
艺条件为:A2B1C3D2,即在碱液浓度为 6.0%,碱处理温度
800C,碱处理时间2.5h,漂白液浓度为 0.10%的条件下,琼胶
凝胶强度最高。
2.2.2 综合分析
综合平衡确定最优工艺条件。以上二指标单独分析出的优
化条件不都一致,必须根据因素的影响主次,综合考虑,确定最
佳工艺条件。
对于因素A,其对琼胶出胶率影响大小排第二位,此时取
A1;其对琼胶凝胶强度影响排第三位,此时取A2;初步判断取
A1。如取A1,琼胶出胶率比取A2增加了8.7%,而琼胶凝胶强
度比取A2减少了9.2%,考虑到资源和能源消耗和出胶率的因
素,A因素取A1。
对于因素B,其对琼胶出胶率影响大小排第四位,其对琼
胶凝胶强度影响排第一位,而且,因素B对琼胶出胶率和琼胶
凝胶强度的最优水平都是B1,故B因素取B1。
对于因素C,其对琼胶出胶率影响大小排第一位,此时取
C1;其对琼胶凝胶强度影响排第二位,此时取C3;初步判断取
C1。如取C1,琼胶出胶率比取C3增加了17.7%,而琼胶凝胶强
度比取C3减少了11.3%,考虑到资源和能源消耗和出胶率的
因素,C因素取C1。
对于因素D,其对琼胶出胶率影响大小排第三位,此时取
D1;其对琼胶凝胶强度影响排第四位,此时取D2;初步判断取
D1。如取D1,琼胶出胶率比取D2增加了7.2%,而琼胶凝胶强
度比取D2减少了3.1%,考虑到资源和能源消耗和出胶率的因
素,D因素取D1。
综合以上分析可知,优组合为 A1B1C1D1。组合
A1B1C1D1在正交实验表中出现,故无需验证。因此,最佳提取
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工艺条件为在NaOH溶液浓度为4.0%,碱处理温度80℃,碱
处理时间1.5h,NaClO溶液浓度为0.05%的条件下,出胶率最
高,为20.8%,凝胶强度较高,为961g/cm2,白度为微黄,但符合
标准。
表 5 凝胶强度极差分析
3 结论
(1)在四个因素中,碱处理时间对琼胶出胶率影响的显著
性水平最大,同时对琼胶凝胶强度影响的显著性水平也较大,
而碱处理时间对琼胶凝胶强度影响的显著性水平最大,对琼胶
出胶率的影响的显著性水平相对较小。因此提取工艺的好坏很
大程度上取决于能否控制好碱处理时间和碱处理温度。
(2)本研究按L9(34)进行正交试验,确认了工艺中的不同
工艺参数对试验指标的影响,通过琼胶出胶率、琼胶凝胶强度
和琼胶白度来确定的最佳工艺条件为:氢氧化钠溶液浓度为
4.0%,碱处理温度为 80℃,碱处理时间为1.5h,次氯酸钠溶液
浓度为2.5%。此时的琼胶出胶率最高,为20.8%,琼胶凝胶强
度较高,为961g/cm2,琼胶白度微黄,但符合标准。
(3)依据最佳工艺条件确定的工艺具有生产周期短,生产
成本低,产品质量较高,生产中环境污染小等优点,因为国内江
蓠提取琼胶的生产工艺相对欧美、日本等发达国家而言仍然较
落后,所以本研究为优化江蓠提取琼胶工艺提供了重要的科学
依据。
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