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‘香水’白鹤芋组织培养快速繁殖的研究



全 文 :福建林学院学报  2000, 20 ( 3): 273~ 275
Journa l o f Fujian Co lleg e of For estry
  文章编号: 1001-389X ( 2000) 03-0273-03
`香水’ 白鹤芋组织培养快速繁殖的研究⒇
陈 碧 华
(福建省林业科学研究院 , 福建 福州 350012)
摘要: 以茎尖为外植体 , 通过 4种基本培养基和 12种激素浓度组合的对比试验 , 筛选出最佳诱
导增殖培养基为 MS+ 6-BA2. 0mg /L+ N AA0. 1 mg /L, 生根培养基为 1 /2M S+ IBA0. 5 mg /L
+ 活性炭 0. 5g /L, 移栽基质选择糠灰和椰壳糠 ( 3∶ 1) 混合 .
关键词: `香水’ 白鹤芋 ; 组织培养 ; 快速繁殖
中图分类号: S68    文献标识码: A
随着社会进步、 人民生活水平的提高 , 花卉业已得到迅速发展 . `香水’ 白鹤芋 ( Spathiphyllum
`X iangshui’ )系天南星科苞叶芋属 , 以其开花时能散发出类似于法国巴黎香水味而得名 , 既可观花 , 又
可观叶 , 因而倍受人们青睐 . 但这理想的室内观叶植物 , 在自然条件下却只能靠分株繁殖 , 速度慢 , 不
能满足消费者的需求 , 因此 , 研究 `香水’ 白鹤芋组织培养快速繁殖有着十分重要的意义 . 于 1997年引
进并研究组培技术 , 获得了成功 .
1 材料和方法
1. 1 试验材料
选取 `香水’ 白鹤芋小苗 , 流水冲洗后 , 剥掉中下部叶片 , 剪除根系 . 在超净工作台上用 75%乙醇
浸泡 30~ 60s, 再用 0. 1% HgCl2溶液消毒 8~ 10min, 无菌水冲洗 4~ 5次 . 剥取茎尖 0. 5~ 1. 0cm长 ,作
为外植体 , 接种于各种培养基上 [1~ 3 ] .
1. 2 试验方法
1. 2. 1 基本培养基的选择 采用 MS、 1 /2M S、 B5和 White作为基本培养基 . 在相同的培养条件下 , 每
组重复 3次 , 每次 50个 [ 4] .
1. 2. 2 培养条件 用食糖代替蔗糖 , 含量 30g /L , 6-BA2 mg /L (以下激素单位同 ) , N AA0. 1, pH5. 8.
培养温度 ( 26± 2)℃ , 采用自然散射光 , 光强 1 000~ 2 000lux , 光照时数 10~ 12h /d.
1. 2. 3 诱导增殖和生根培养基 诱导增殖培养基附加 6-BA0. 5、 1、 2、 4四个浓度水平、 NAA0. 1、 0. 5、
1三个浓度水平 . 每瓶 3个芽 , 每次处理 10瓶 , 重复 3次 [5 ] .
生根培养基附加 IBA0. 1、 0. 5、 1 3个浓度水平 . 添加 0g /L、 0. 5g /L、 1g /L三个浓度水平活性炭 .
2 结果与分析
2. 1 基本培养基
接种后经 50d培养 , 观察生长状
况 .采用 MS和 1 /2M S培养基 , 芽点
粗、色绿 ,但 M S萌发率高 ,丛芽最多 .
采用 B5和 White培养基 , 萌发率和生
长表现明显不如 MS和 1 /2M S. 通过
比较分析 , 选择 MS作基本培养基效果
最佳 (表 1) .
表 1  4种培养基对茎芽萌发与生长的比较
Table 1  Comparis on of shoot producing and grow th in four kinds of media
基 本培养基 顶芽/个 培养时间/d 萌发率/% 生长表现
M S 150 50 97. 3 芽点粗、色绿、丛芽多
1 /2M S 150 50 92. 0 芽点粗、色绿、丛芽少
B5 150 50 60. 6 芽点细小、色淡黄、丛芽无
White 150 50 21. 3 芽点细小、色淡黄、丛芽无
⒇ 作者简介: 陈碧华 ( 1967— ) , 男 , 福建龙海人 , 工程师 , 从事植物组织培养技术的研究和生产 .
收稿日期: 1999— 10— 18; 修回日期: 2000— 01— 24
DOI : 10. 13324 /j . cnki . jfcf . 2000. 03. 022
2. 2 试管苗增殖生长
  选取粗壮试管
茎芽 , 接种到诱导
培养基上 (表 2 ) .
10d后可见基部有
芽点萌发 , 30d后
开始观察 .
采用 MS为基
本培养基 , 培养时
间 30d. 各种激素
浓 度 组 合 见 表
3. 3cm以上作生根
材料最佳 , 从表 3
可观察出 6-BA2、
NAA0. 1的组合茎
芽平均高达 3. 17cm ,
表 2  6-BA和 NAA对茎芽生长分化的影响
Table 2  The effect of 6-BA and NAA on sh oo t grow th and di f ferentiation
质量浓度 /mg· L- 1
6-BA N AA
转入芽
苗数 /个
转入芽苗
平均高 /cm
30d后芽
苗数 /个
30d增殖
倍数 /倍
30d芽苗
平均高 /cm
30d芽苗平均
高生长量 /cm
0. 5 0 90 0. 55 126 1. 40 0. 61 0. 06
0. 5 0. 1 90 0. 53 162 1. 80 5. 03 4. 50
0. 5 0. 5 90 0. 58 144 1. 60 5. 57 4. 90
1 0 90 0. 52 171 1. 90 0. 565 0. 045
1 0. 1 90 0. 50 216 2. 40 3. 40 2. 90
1 0. 5 90 0. 57 155 1. 72 4. 87 4. 30
2 0 90 0. 53 293 3. 26 0. 56 0. 03
2 0. 1 90 0. 54 378 4. 20 3. 17 2. 63
2 0. 5 90 0. 51 279 3. 10 5. 31 4. 80
4 0 90 0. 60 522 5. 80 0. 615 0. 015
4 0. 1 90 0. 52 621 6. 90 2. 39 1. 87
4 0. 5 90 0. 53 234 2. 60 3. 25 2. 72
符合要求 , 且增殖倍数最高 , 为 4. 2. 其次为 6-BA2、 NAA 0. 5, 增殖倍数为 3. 1. 从生产的工厂化育苗
角度来看 , 理所当然选择 6-BA2、 NAA 0. 1的组合 . 按理论推算 , 年繁殖系数达 4. 212 , 即 1a后 1个芽
可增殖达 3× 107个茎芽 , 数目巨大 [6~ 7 ] .
2. 3 试管苗的生根
将增殖培养 30d高 3cm以上的壮芽 ,通过无菌操作单株切下 ,接种于 1 /2M S基本培养基上培养 30d.
试验结果表明 , 附加 IBA0. 5为最佳激素浓度 , 添加活性炭有利于提高生根率 , 但 0. 5g /L与 1g /L无显
著差异 , 故 0. 5g /L为最佳浓度 .
2. 4 根芽同步培养法
从表 2可观察到 6-BA2、 NAA0. 5的组合增殖倍数为 3. 1, 芽苗平均高达 5. 31cm. 而且继代茎芽均
有长根 , 大多达 3条以上 , 因此 , 可将高 5cm以上的茎芽切下 , 保留根系 , 直接移植于基质中 , 试验均
获得成功 , 成活率达 90%以上 .
2. 5 试管苗的移栽和基质的选择
生根培养 30d的瓶苗 , 及
时洗苗移植 . 采用 4种移栽基
质做对比 (表 3) .
选择糠灰和椰壳糠 ( 3∶ 1)
混合作为无土栽培基质最佳 .
移栽时 ,可先将瓶盖打开炼苗 3
~ 4d,再洗苗、移植 . 将瓶苗倒
表 3 试管苗移栽基质的对比
Tab le 3  Comparison of materials for t ransplanting ti ssu e cul tu re seedlings
基   质 优    缺    点
砂壤土 生长良好 ;重 ,不利于运输 ;表面易干 ;起苗易伤根 ;成本低
糠灰 生长一般 ;轻 ,易于运输 ;表面易干 ,起苗不易伤根 ;成本低
糠灰+ 椰壳糠 生长良好 ;轻 ,易于运输 ;表面不易干 ;起苗不易伤根 ;成本低
椰壳糠 生长一般 ,轻 ,易于运输 ,浇水时湿重 ;基质易腐烂 ;成本高
扣于掌心 , 轻轻拨出小苗 , 洗净培养基 ,截除超过 4cm长的部分根系 . 移栽基质混合均匀后装入 60cm×
60cm× 20cm的泡沫箱内 . 考虑到经济效益 , 基质厚度 10~ 12cm为宜 . 用质量分数为 0. 1%高锰酸钾溶
液或 25%多菌灵、 70%代森锰锌可湿性粉剂 400~ 500倍溶液浇透消毒 . 每箱移植 100株 ( 10株× 10
株 ) , 移栽后浇透水 , 放入全自动玻璃温室内 , 覆盖薄膜保湿并遮荫 70% ~ 80% . 每 3d喷 1次多菌灵或
代森锰锌药液 , 每天打开薄膜通风 5min, 以防病害 . 经常喷雾 , 保持相对湿度 90%以上 . 7d后 , 揭开薄
膜 , 每日喷水 3~ 5次 . 每星期喷药防病 1次和用质量分数为 0. 1%~ 0. 2%复合肥液或用 1 /2M S大量元
素浇施 1次 . 若出现蛾类等幼虫危害 , 可喷洒 40%氧化乐果乳油 1 000~ 2 000倍或 20%杀灭菊酯
2 000~ 3 000倍 [8 ] .
移栽 30d后检查 , 小苗平均成活率达 98%以上 . 经 60d培育 , 苗高达 7~ 8cm, 叶片 3~ 5片 , 可成
为商品苗出售 .
274 福 建 林 学 院 学 报                 第 20卷
3 小结
以 `香水’ 白鹤芋的茎尖为外植体 , M S+ 6-BA2+ N AA0. 1为诱导增殖培养基 , 1 /2M S+ IBA0. 5+
活性炭 0. 5g /L为生根培养基 . 按理论推算 , 年繁殖系数为 4. 212 ,即 1个芽经增殖培养 1a后可达 3× 107
个 . 也可选择 M S+ 6-BA2+ N AA0. 5作为根芽同步培养基 ,将高达 3cm的单芽切下 ,保留根系 ,直接移
栽 . 根芽同步法培育出的小苗 , 因生长较密集 , 长势较弱 , 移栽成活率较低 , 但其省去生根阶段的成本
费用 , 成本相对较低 , 生产上可考虑采用此方法 . 糠灰和椰壳糠 ( 3∶ 1) 混合为移植基质 , 有利于起苗
和运输 . 根芽同步法能否用于其它植物的组织培养育苗 , 可作为今后探讨的方向 .
参 考 文 献:
[ 1] 沈惠娟 . 木本植物组织培养技术 [M ] . 北京: 中国农业科技出版社 , 1992. 33— 46.
[ 2] 陈正华 . 木本植物组织培养及其应用 [M ] . 北京: 高等教育出版社 , 1986. 307— 308.
[ 3] 王培伦 , 马伟青 . 马铃薯脱毒栽培技术 [M ] . 山东: 山东科学技术出版社 , 1998. 18— 34.
[ 4] 陈正光 . 园艺植物离体培养学 [M ] . 北京: 中国农业出版社 , 1996. 80— 86.
[ 5]潭文澄 . 观赏植物组织培养技术 [ M ] . 北京: 中国林业出版社 , 1991. 84— 141.
[ 6] 黄彪 , 连东江 , 刘雁 , 等 . 提高鲜花浸膏得率的实验研究 [ J] . 福建林学院学报 , 1998, 18 ( 2): 147— 150.
[ 7] 马燕 , 陈俊愉 . 蔷薇属若干花卉的染色体观察 [ J] . 福建林学院学报 , 1991, 11 ( 2): 215— 218.
[ 8] 陈碧华 . 神灯白掌组织培养快繁技术 [ J] . 林业科技通讯 , 1999, 348 ( 5): 28.
Studies on Tissue Culture and Rapid
Propagation of Spathiphyllum `X iangshui
CHEN Bi-hua
( Fu jian Academy of Fo res try, Fuzhou 350012, China)
Abstract: Based on the expe riment and ana ly sis o f 4 kinds of ba sic media and 12 combina tion of ho rmone concentra tion, MS
containing 2 mg / L o f 6-BA and 0. 1mg /L N AA w as optimized as the best medium fo r shoo t-tip cultur e and subculture, and
1 /2 M S containing 0. 5 mg /L o f IBA plus 0. 5g /L activ e ca rbon was optimized as the best medium fo r roo ting culture,
while using shoo t-tip as explant, The mate rial fo r t ransplanting was the combination of a sh o f rice husk and bran o f
coconut shell ( 3∶ 1) .
Key words: Spathiphy llum `X iangshui ; tissue culture; rapid propagation
(责任编校: 江 英 )
275第 3期             陈碧华: `香水’ 白鹤芋组织培养快速繁殖的研究