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朱缨花愈伤组织的诱导



全 文 :朱缨花愈伤组织的诱导
龚玉莲 ,龚莉红 ,杜馥燕 ,陈洪章 ,王 威
(广东教育学院 生物系 ,广东 广州 510303)
  摘要:研究了不同外植体和不同生长调节剂对朱缨花愈伤组织诱导的影响.结果表明:不同外
植体的愈伤组织诱导能力为茎段>带节茎段>叶柄>叶片 ,茎段和带节茎段是愈伤组织诱导的最
佳外植体;诱导朱缨花茎段愈伤组织的最佳生长调节剂组合为 MS +NAA1mg/L 和 MS +
BA0.5mg/L+NAA1mg/L;诱导朱缨花带节茎段愈伤组织的最佳生长调节剂组合为 MS +
BA2mg/L +NAA1.5mg/ L.
关键词:朱缨花;愈伤组织;诱导;外植体;生长调节剂
中图分类号:Q 813.1+2 文献标识码:A 文章编号:1007-8754(2006)03-0075-03
收稿日期:2005-02-22
作者简介:龚玉莲(1974-),女 ,湖南常德人 , 广东教育学院生物系讲师 ,在职博士.
  朱缨花(Calliand ra haematocephala Hassk.)为含羞草科朱缨花属的常绿灌木或小乔木 ,又名美蕊花.
二回羽状复叶;头状花序 ,雄蕊深红色 ,数目众多 ,长而突露似红缨 ,花期长.原产于南美洲 ,我国广东 、福建 、
香港 、台湾等地有引种 ,现热带 、亚热带地区常有栽培[ 1] .朱缨花具有固氮能力 ,耐贫瘠 ,对不同土质的适应性
很强 ,在陡峭的山坡和贫瘠的土壤中都生长良好 ,对管理的要求不高 ,且生长速度很快 ,可作为荒山 、沙漠等
绿化的先锋植物 ,在改造热带森林砍伐区方面起了重要的作用 ,是绿化造林 、整治国土 、改善生态环境的重要
树种;因其花姿奇特美观 、花期长 ,具有较高的观赏价值 ,是值得推广的优良观叶 、观花植物;朱缨花的叶含有
大量蛋白质 ,可作饲料[ 2] ;此外 ,朱缨花还是紫胶虫的寄主树[ 3] .因此朱缨花组织培养的研究具有重大的理论
和实际意义.目前未见朱缨花组织培养的报道.本文首次研究了不同外植体 、不同生长调节剂对朱缨花愈伤
组织诱导的影响 ,为朱缨花的离体快繁 、种质保存 、开发利用等提供参考.
1 材料和方法
1.1 实验材料 朱缨花(Calliandra haematocephala Hassk.)取自广东教育学院校园
1.2 无菌材料的获得
取朱缨花的嫩茎 、叶片和叶柄 ,用自来水冲洗 1 h ,再转入超净工作台用 75%酒精浸泡约 15 s ,0.1%升
汞浸泡 10 ~ 12 min ,无菌水洗 5次.茎切成约 1 cm的小段 ,分为带节茎段和茎段(不带节);叶片切成约 1 cm2
大小;叶柄切成约1 cm的小段.
1.3 愈伤组织诱导
1.3.1 不同外植体愈伤组织诱导的比较 将茎段 、带节茎段 、叶片及叶柄分别接种于 MS+2 , 4-D1 mg/L
的培养基中.每种外植体接种 50瓶 ,每瓶 2 个外植体.20 d 后统计结果.愈伤组织诱导率=形成愈伤组织的
外植体数/接种的外植体数×100%.
1.3.2 不同生长调节剂对带节茎段 、茎段愈伤组织诱导的影响 将带节茎段 、茎段分别接种于附加不同浓
度 BA 、NAA的 MS培养基上.每个处理 10瓶 ,每瓶接种 2个外植体.20 d后统计结果[ 4] .
以上培养基均添加3%蔗糖 、0.8%琼脂 ,pH5.8 ~ 6.0.培养温度为25 ℃左右 ,光照强度 1200 Lx ,12 h/d.所
用试剂均为分析纯.
第 26卷 第 3期 广东 教 育 学 院 学 报 2006年 6月
Vol.26 N o.3 Journal of Guangdong Education Institute Jun.2006
2 结果和分析
2.1 不同外植体愈伤组织的诱导
接种后第一天外植体切口处均略发黑;第二天则开始转绿 ,外植体陆续可见膨大;第三天茎段的中部和
带节茎段的节部开始出现浅绿色愈伤组织;第四天叶柄中部开始出现浅绿色愈伤组织;第十二天叶片切口处
开始出现愈伤组织.
表 1 朱缨花不同外植体愈伤组织的诱导
外植体 愈伤组织诱导率(%) 愈伤组织数量 愈伤组织形态
茎段 98.3 ++++ 白色 、浅绿色 、黄色 ,很致密
带节茎段 54.4 +++ 白色 、浅绿色 、黄色 ,致密
叶片 2.0 + 无色 、透明 , 疏松
叶柄 95.9 +++ 白色 、浅绿色 , 疏松
  注:+极少;++较少;+++多;++++很多;+++++极多(下同).
  由表 1可见 ,叶片外植体愈伤组织的诱导速度慢 ,且诱导率低 、数量少 、质量低;叶柄愈伤组织的诱导速
度较快 、诱导率较高 ,但质量较差.相对而言 ,茎段的愈伤组织诱导率高 、诱导速度快 、质量较好 ,是朱缨花愈
伤组织诱导的最佳外植体.此外 ,带节茎段的愈伤组织诱导率虽然不高 ,但愈伤组织的数量 、质量均较好 ,因
此也可作为愈伤组织诱导的较好的外植体.
2.2 不同生长调节剂对茎段愈伤组织诱导的影响
表 2 不同生长调节剂对朱缨花茎段愈伤组织诱导的影响
生长调节剂(mg/ L)
BA NAA
愈伤组织
诱导率(%)
愈伤组织出现
时间(d)
愈伤组
织数量 愈伤组织形态
0 0 88 6 + 白色 、灰白色 , 致密
0.5 0 100 4 ++ 白色 、灰白色 、浅红色 ,致密
1 0 100 4 ++ 白色 、灰白色 , 致密
2 0 100 4 ++ 黄绿色 、灰白色 , 致密
0 1 100 4 +++++ 白色 、灰白色 、浅红色 ,致密
0.5 1 98 4 +++++ 白色 、灰白色 、浅红色 ,致密
1 1 100 5 ++++ 白色 、灰白色 、浅红色 ,致密
2 1 100 4 ++ 白色 、灰白色 、浅红色 ,致密
  由表 2可见 ,各处理对朱缨花茎段愈伤组织均有较高的诱导率 ,进一步表明茎段是愈伤组织诱导的最佳
外植体.考虑到愈伤组织的数量 ,诱导朱缨花茎段愈伤组织的最佳生长调节剂组合为 MS +NAA1 mg/L 和
MS+BA0.5 mg/ L+NAA1 mg/L.培养过程中愈伤组织未见分化.
2.3 不同生长调节剂对带节茎段愈伤组织诱导的影响
由表 3可见 ,NAA 单独处理时愈伤组织的诱导率随 NAA浓度增大而增大 ,以 2 mg/L 处理的诱导率最
高 ,达 100%.6-BA 单独处理时愈伤组织的诱导率先随浓度增大而增大 , 4 mg/L 处理的诱导率达 100%;
随着 6-BA 浓度的进一步增大(6 mg/L)愈伤组织的诱导率则下降.综合愈伤组织诱导率 、数量等因素 ,
NAA与 6-BA 混合处理的效果优于单独处理 ,诱导朱缨花带节茎段愈伤组织的最佳生长调节剂组合为
MS+BA2 mg/L +NAA1.5 mg/L.
培养过程中未见愈伤组织分化.
3 讨论
本文首次报道了朱缨花愈伤组织的诱导 ,就外植体的选择 、培养基中植物生长调节剂的使用等条件进行
了初步的优化 ,为进一步研究和利用朱缨花提供了参考.
NAA处理对朱缨花茎段和带节茎段愈伤组织诱导率的影响未表现出浓度效应 ,进一步增大 NAA 的浓
度是否会提高或降低诱导率还需探讨.
76 广东教育学院学报 第 26卷 
朱缨花的繁殖方法主要是种子繁殖和扦插繁殖.种子繁殖历时长 ,处理过程繁琐;常规扦插繁殖的插条
生根困难 ,生根率低[ 5] .通过组织培养技术快速繁殖朱缨花显示出很大的应用前景.本研究中得到的愈伤组
织在培养过程中均未见分化 ,对此还有待进一步研究.
表 3 不同生长调节剂对朱缨花带节茎段愈伤组织诱导的影响
生长调节剂(mg/ L)
BA NAA
愈伤组织
诱导率(%)
愈伤组织
出现时间(d)
愈伤组
织数量 愈伤组织形态
0 0 55 7 + 白色 、黄色 、浅绿色
0 0.5 90 6 + 白色 、黄色 、浅绿色
0 1 80 6 +++ 白色 、浅绿色 、黄绿色
0 1.5 90 6 +++ 白色 、黄色 、浅绿色 、黄绿色
0 2 100 6 +++ 白色 、浅绿色 、红褐色
2 0 85 6 +++ 白色 、浅绿色
2 0.5 90 7 +++ 白色 、浅绿色 、黄绿色
2 1 90 6 ++++ 白色 、浅绿色 、黄色
2 1.5 94 6 ++++ 白色 、浅绿色 、黄绿色 、黄色 、黄褐色
2 2 80 6 +++ 白色 、浅绿色 、黄褐色
4 0 100 6 +++ 白色 、浅黄色 、浅绿色
4 0.5 90 6 +++ 白色 、浅绿色 、黄色
4 1 75 7 +++ 白色 、浅绿色 、黄色
4 1.5 85 6 ++ 浅绿色 、黄色
4 2 80 6 +++ 白色 、浅绿色 、黄褐色
6 0 80 6 +++ 白色 、浅绿色 、黄绿色 、黄色 、黄褐色
6 0.5 75 6 +++ 白色 、浅绿色 、黄色 、黄褐色
6 1 55 7 + 浅绿色 、黄绿色
6 1.5 75 6 + 浅绿色 、黄绿色 、黄色 、红褐色
6 2 70 6 + 浅绿色 、黄色 、黄褐色
参考文献:
[ 1] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第三十九卷)[ M] .北京:科学出版社 , 1988:38.
[ 2] 孟庆升.具有潜在经济价值的植物[ J] .天津农学院学报 ,1995 , 2(3):51-54.
[ 3] 黄曦 ,黄维南.国内固氮树木组织培养简况及建议[ J] .福建热作科技 ,1999 , 24(1):17-19.
[ 4] 潘瑞炽.植物组织培养(第二版)[ M] .广州:广东高等教育出版社 ,2000:61-65.
[ 5] 廖朝晖 ,谢章仁.空中压条法繁殖朱缨花[ J] .植物杂志 ,2002(1):15.
Calli Induction of Calliandra haematocephala Hassk.
GONG Yu-lian , GONG Li-hong , DU Fu-yan , CHEN Hong-zhang , WANG Wei
(Dept.of Biology , Guangdong Educat ion Insti tute , Guangzhou , G uangdong , 510303 , P.R.China)
Abstract:The ef fects o f explants and plant grow th regulato r on calli induction of Calliandra
haematocephala Hassk.were studied.The re sults show ed that stem w as the be st explant , and stem w ith
node w as nex t best.The best medium for calli induction of stem w as M S+NAA1 mg/L and M S+BA0.5
mg/L+NAA 1 mg/L.The best medium for calli induction of stem with node w as M S +BA2 mg/ L +
NAA1.5 mg/L .
Key words:Calliandra haematocephala Hassk.;callus;induction;explants;plant g row th regulator
77第 3期            龚玉莲 ,等:朱缨花愈伤组织的诱导