全 文 ：天 津 中 医 药 大 学 学 报
Journal of Tianjin University of Traditional Chinese Medicine
第 33卷 第 1期
2014年 2月
Vol．33 No．1
Feb．2014
DOI：10.11656/j.issn.1673-9043.2014.01.13
槐米中酚酸类化学成分的研究 *
刘丽丽，李晓霞，陈 玥，孙 瑾，刘二伟，张 祎
（天津市中药化学与分析重点实验室，天津 300193）
摘要：[目的]对国槐（Sophora japonica L.）米中的酚酸类成分进行研究，为进一步开发利用该植物资源提供依
据。[方法]采用正相硅胶、反相 ODS、Sephadex LH-20等柱色谱及高效液相色谱法等方法进行分离纯化，并通过理
化性质及光谱分析鉴定化合物的结构。[结果]从国槐米 70%的乙醇提取物中分离鉴定了 5个酚酸类化合物，分别
为 3，4－二羟基苯甲酸（1）、原儿茶酸甲酯（2）、没食子酸（3）、4-甲氧基－3，5－羟基苯甲酸（4）、枸橼苦素（5）。[结论] 2、
3、5为从槐属中首次分离得到的化合物。
关键词：槐米；酚酸类成分；结构鉴定
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1673-9043（2014）01-0039-03
*基金项目：国家自然基金项目（81202995）；国家科技重大专
项项目-重大新药创制（2011ZX09307-002-01）；新世纪优秀
人才支持计划资助项目（NCET-12-1069）。
作者简介：刘丽丽（1986-），女，硕士研究生，主要从事中药化
学研究。
通讯作者：张 祎，E-mail zhwwxzh@hotmail.com。
国槐（Sophora japonica L.）是豆目蝶形花科槐属
植物，别称槐树、槐蕊、豆槐、白槐、细叶槐、金药材、
护房树及家槐，在中国主产于河北、河南、江苏、广
东、广西等地。其干燥花蕾被称为国槐米，性微寒、味
苦，具有凉血、止血，清肝泻火等功效，用于便血、痔
血、血痢、崩漏、吐血、衄血、肝热目赤、头痛眩晕[1]。
主要含有黄酮类化合物。笔者在对其化学成分研究
的过程中，分离得到了 5个酚酸类单体化合物（1～
5），利用与文献类似的方法对结构进行了鉴定 [2-3]。
其中，2、3、5为从槐属中首次分离得到的化合物。
1 仪器与材料
安捷伦 6520 Q-TOF LC/MS；Bruker 500 MR 超
导核磁共振波谱仪（德国 Bruker公司）。柱层析硅胶
（200-300目）、薄层层析硅胶 H（青岛海洋化工厂），
薄层色谱硅胶预板、高效色谱用硅胶 GF254（天津
思利达科技有限公司），ODS（日本 Fuji SilisiaChemical
公司），Sephadex LH-20（瑞典 Ge Healthcare Bio-
Sciences AB公司），D101大孔吸附树脂（天津海光
化工有限公司），Cosmosil 5 C18-MS-II 分析柱及
制备柱（日本 Nacalai Tesque 公司）。旋转蒸发仪
（德国 IKA公司，IKA RV10、上海亚荣生化仪器厂，
RE52CS），高速离心机（美国 Beckman Coulter 有限
公司，ALLEGRA-64R）。
实验所用试剂（色谱纯或分析纯）均为天津康
科德科技有限公司产品。
所用药材国槐米于 2010 年 10 月购自安国市
场，由天津中医药大学中药标本馆李天祥副教授鉴
定为国槐（Sophora japonica L.）的干燥花蕾。植物标
本存放于天津中医药大学中医药研究中心。
2 提取分离
取干燥的槐米 8.0 kg，用 5、3、3倍量体积分数
70%的乙醇溶液加热回流提取 3次，每次分别为 2、
2、1.5 h，减压回收溶剂，得到浸膏 2.3 kg。取浸膏
670 g，用 EtOAc-H2O萃取，得到 EtOAc、EtOAc层沉
淀及 H2O 层萃取物分别为 78、197、385 g。取上述
EtOAc 萃取物（50 g）经硅胶柱层析 [CHCl3-MeOH
（100∶0 → 100∶2 → 100 ∶3 → 100 ∶5，V/V）→ CHCl3-
MeOH-H2O（10∶3∶1，V/V/V，下层）→ MeOH]，共得
7个组分（Fr. 1～7）。Fraction 5（7.0 g）经 ODS柱层析
[MeOH-H2O（30∶70→ 40∶60→ 50∶50→ 60∶40→ 70∶
30→ 80∶20→ 100∶0，V/V）]，得到 12个组分（Fr. 5-
1～12）。Fraction 5-2（152.1 mg）经制备高效液相色
谱法（PHPLC）分离制备，得到 3，4－二羟基苯甲
酸（1，104.1 mg）及 4-甲氧基－3，5－羟基苯甲酸（4，
5.0 mg）。Fraction 5-6经 Sephadex LH-20及硅胶柱
层析，得到枸橼苦素（5，7.9 mg）。Fraction 6（7.5 g）经
ODS柱层析[MeOH-H2O（10∶90→ 45∶55→ 50∶50→
60∶40→ 70∶30→ 80∶20→ 100∶0，V/V）]得到 12个组
分（Fr. 6-1～12）。Fraction 6-1（139.8 mg）经 PHPLC
[MeOH-H2O（12∶88，V/V）]分离制备，得到没食子酸
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（3，7.3 mg）。Fraction 7（7.0 g）经 ODS柱层析[MeOH-
H2O（10∶90→ 45∶55→ 50∶50 → 60∶40 → 70∶30 →
80∶20→ 100∶0，V/V）]共得到 12个组分（Fr. 7-1～12）。
Fraction 7-3（1 318.7 mg）经 PHPLC制备，得到原儿
茶酸甲酯（2，7.3 mg）。
3 结构鉴定
从槐米中分离得到的化合物结构鉴定见图 1。
化合物 1：白色粉末。高分辨电喷雾四极杆飞行
时间质谱（Q-TOF-ESI-MS）给出其准分子离子峰
m/z 153.019 8 [M-H]-，确定其分子式为 C7H6O4（calcd
for C7H5O4，153.019 3）。1H-NMR（CD3OD，500 MHz）
δ：7.57（1H，br. s，H-2），6.91（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），
7.55（1H，br. d，ca. J=8 Hz，H-6）。13C-NMR（CD3OD，
125 MHz）δ：123.0（C-1），117.8（C-2），145.9（C-3），
151.5（C-4），115.9（C-5），124.2（C-6），170.6（C-7）。
上述 1H-NMR和 13C-NMR谱数据与文献[4]中报道
的 3，4-二羟基苯甲酸的数据基本一致，故鉴定化合
物 1为 3，4－二羟基苯甲酸。通过异核单量子关系
（HSQC）谱的测定，纠正了文献[4]中该化合物 C-2
位（δC 115.7）及 C-5位（δC 117.7）的化学位移值。
化合物 2：白色粉末。高分辨 Q-TOF-ESI-MS
给出其准分子离子峰 m/z 167.035 2 [M-H]-，确定其
分子式为 C8H8O4（calcd for C8H7O4，167.035 0）。1H-
NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.42（1H，br. s，H-2），6.80
（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），7.41（1H，br. d，ca. J=8 Hz，
H-6），3.83（3H，s，7-OCH3）。13C-NMR（CD3OD，125
MHz）δ：122.6（C-1），117.5（C-2），146.2（C-3），151.8
（C-4），115.9（C-5），123.7（C-6），168.9（C-7），52.3
（7-OCH3）。上述 1H-NMR和 13C-NMR谱数据与文
献[5]中报道的原儿茶酸甲酯的数据基本一致，故鉴
定化合物 2为原儿茶酸甲酯。通过 HSQC 谱的测
定，纠正了文献[5]中该化合物 C-2 位（δC 115.9）及
C-5位（δC 117.5）的化学位移值。
化合物 3：白色粉末。高分辨 Q-TOF-ESI-MS
给出其准子分离子峰 m/z 169.013 4 [M-H]-，确定其
分子式为 C7H6O5（calcd for C7H5O5，169.014 2）。1H-
NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.06（2H，s，H-2,6）。13C-
NMR（CD3OD，125 MHz）δ：122.2（C-1），110.4（C-
2,6），146.4（C-3,5），139.6（C-4），170.6（C-7）。上述
1H-NMR谱数据与文献[6]中报道的没食子酸的数
据基本一致，故鉴定化合物 3为没食子酸。
化合物 4：白色粉末。高分辨 Q-TOF-ESI-MS
给出其准分子离子峰 m/z 183.031 2 [M-H]-，确定其
分子式为 C8H8O5（calcd for C8H7O5，183.029 9）。1H-
NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.04（2H，s，H-2，6），3.85
（3H，s，4 -OCH3）。 13C -NMR （CD3OD，125 MHz）δ：
128.1（C -1），110.4（C -2，6），151.6（C -3，5），140.9
（C-4），170.5（C-7），60.8（4-OCH3）。通过与化合物 3
的 13C-NMR谱数据相对照，羧基碳的数据没有发生
明显的变化，提示该羧基没有甲酯化。同时，结合甲
氧基碳的化学位移值[δ 60.8，明显低于甲酯化甲氧
基碳的化学位移值（~53）]，推测甲氧基与 4位相连。
上述 1H-NMR和 13C-NMR谱数据与文献[7]中报道
的 4-甲氧基－3，5－羟基苯甲酸的数据基本一致，故
鉴定化合物 4为 4-甲氧基-3，5－羟基苯甲酸。
化合物 5：白色粉末。高分辨 Q-TOF-ESI-MS
给出其准分子离子峰 m/z 361.107 6 [M + Cl]-，确定
其分子式为 C16H22O7（calcd for C16H22O7Cl，361.106 0）。
1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：6.82（1H，br. s，H-2），
7.08（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.72（1H，br. d，ca. J=8
Hz，H-6），3.32（2H，m，H2-7），5.95（1H，m，H-8），
[5.02（1H，br. d，ca. J=11 Hz）、5.05（1H，br. d，ca. J=17
Hz），H2-9]，4.84（1H，d，J=7.5 Hz，H-1），3.48（1H，
dd，J=7.5、9.0 Hz，H-2），3.47（1H，dd，J=9.0、9.0 Hz，
H-3），3.39（1H，dd，J=9.0、9.0 Hz，H-4），3.38（1H，
m，H-5），[3.68（1H，dd，J=4.0、12.0 Hz），3.86（1H，br.
d，ca. J=12 Hz），H2-6]。13C-NMR（CD3OD，125 MHz）
δ：136.5（C-1），114.2（C-2），150.8（C-3），146.4（C-
4），118.3（C-5），122.1（C-6），40.8（C-7），139.0（C-
8），115.9（C-9），103.1（C-1），75.0（C-2），77.9（C-
3），71.4（C-4），78.2（C-5），62.6（C-6）。上述 1H-
NMR 和 13C-NMR 谱数据与文献[8]中报道的枸橼
苦素的数据基本一致，故鉴定化合物 5 为枸橼
苦素。
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图 1 从槐米中分离得到的化合物
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药材, 2012, 35(6): 913-917.
（收稿日期：2013-09-06）
Study on phenolic acids from Flos Sophorae
LIU Li-li, LI Xiao-xia, CHEN Yue, SUN Jin, LIU Er-wei, ZHANG Yi
（Key Laboratory of Traditional Chinese Medicinal Chemistry and Analytical Chemistry of Tianjin,
Tianjin 300193, China）
Abstract: [Objective] To investigate the phenoic acids of Flos Sophorae for further research and development.
[Methods] The chemical components were obtained by using chromatographies such as silica gel, ODS, Sephadex
LH-20 and HPLC, and identified by the chemical and physical methods, especially spectral analysis. [Results] Five
phenoic acids were obtained and identified as 3,4-dihydroxybenzoic acid (1), protocatechuic acid methyl ester (2),
gallic acid (3), 4-methoxy-3,5-dihydroxybenzoic acid (4), and citrusin C (5), respectively. [Conclusion] Compounds
2, 3, and 5 are obtained from sophora genus firstly.
Key words: Flos Sophorae; phenolic acid; structural elucidation
·启 事·
关于《天津中医药大学学报》变更为双月刊的通知
《天津中医药大学学报》创刊于 1982年，是由天津市教委主管、天津中医药大学主办的中医药学术性期刊，主编为张伯礼
院士。自 2014年由季刊变更为双月刊，双月 15日出版，每期 64页，标准刊号：ISSN 1673-9043，CN 12- 1349/R。
《天津中医药大学学报》始终坚持跟踪学科前沿，积极报道中医药领域的临床、教学、科研成果；坚持办刊方针，并努力探索
新技术条件下的编辑出版新模式。本刊多年来一直被美国《化学文摘》（CA）、俄罗斯《文摘杂志》（AJ）、波兰《哥白尼索引》（IC）等
国内外著名检索系统收录。本刊为天津市教委职称评审认定的核心期刊，天津市卫生局职称评审认定的专业期刊。
近年来，在上级主管与主办单位的大力支持下，在主编张伯礼院士的悉心指导下，本刊学术水平不断提高。2013年 9月 27日，在
中国科技论文统计结果新闻发布会上，《天津中医药大学学报》入选“中国科技核心期刊”（中国科技论文统计源期刊）。2012年
11月 16日，获得第四届全国中医药优秀期刊三等奖。2012年 12月 16日，《天津中医药大学学报》在第三届中国学术期刊评价
中被评为准核心期刊（B+），在全国中医与中药学科类 114种期刊中排名在第 41位。
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